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第十二次全国动脉硬化性疾病学术会议

作者：赵岳林小龙何兴兰马小峰谭剑凯张凯张海危当恒姜志胜谭小进王佐南华大学心血管疾病研究所动脉硬化湖南省重点实验室湖南省衡阳市421001

目的探讨miR23 b-3p和miR125b-5p对HepG2细胞中载脂蛋白(a)[Apo(a)]表达的影响及其作用机制。方法以HepG2细胞为研究对象,Ets1 siRNA通过Lipo 2000转染HepG2细胞,Western blot检测细胞内Ets1及Apo(a)蛋白水平;通过Lipo 2000分别将miR23b-3p mimic和miR125b-5p mimic转染HepG2细胞,48 h后real-time PCR分别验证细胞内miR23b-3p和miR125b-5p水平,Western blot检测细胞Apo (a)蛋白水平、Ets1蛋白水平,RT-PCR检测Apo(a) mRNA水平、ELISA测定培养基中Apo(a)浓度,免疫细胞化学进一步分析细胞内Ets1水平;双荧光素酶报道基因分析miR23b-3p和miR125h-5p的作用靶点。结果 Ets1 siRNA明显降低细胞内Ets1及Apo(a)水平。与对照组相比,miR23b-3p和miR125b-5p可显著下调HepG2细胞内Ets1及Apo(a)水平;miR23 b-3p抑制剂和miR125b-5p抑制剂可显著上调HepG2细胞内Ets1及Apo(a)水平。靶基因验证实验证实了Ets1为miR23b-3p和miR125b-5p共有的靶基因。结论 miR23b-3p和miR125b-5p通过作用于靶基因Ets1下调HepG2细胞Apo(a)水平。

关键词：载脂蛋白(a) miR23b-3p miR125b-5p Ets1 靶基因

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高学历实验技术队伍建设的探讨

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基础医学教育 2013年第10期15卷 957-959页

作者：唐雅玲危当恒尹蔚兰刘慧婷王双南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室衡阳421001 南华大学生理学教研室

随着高学历人才不断充实到高校的实验技术岗位,实验技术队伍结构日趋合理,实验技术队伍整体素质已有明显改善,但各高校对高学历实验技术人员的管理没有与时俱进,并没有充分发挥人才资源的优势。从高学历人才这个独特视角,对目前高校实... 详细信息

随着高学历人才不断充实到高校的实验技术岗位,实验技术队伍结构日趋合理,实验技术队伍整体素质已有明显改善,但各高校对高学历实验技术人员的管理没有与时俱进,并没有充分发挥人才资源的优势。从高学历人才这个独特视角,对目前高校实验技术队伍存在的问题进行分析,建议在高校各职能部门和高学历实验技术人员自身两个层次上,进行更新观念、科学评价、完善机制、持续发展等多个方面改革,建设一支业务水平高、管理能力强的实验技术队伍,以满足人才培养和科学研究的需求。

关键词：实验教学队伍建设高学历人才科学评价

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齐墩果酸与动脉粥样硬化

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湘南学院学报（医学版） 2011年第3期13卷 71-74页

作者：李雪飞刘录山南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室湖南衡阳421001 湘南学院基础医学部湖南郴州423000

动脉粥样硬化所致的心、脑血管疾病是严重危害人类生命健康的疾病之一。动脉粥样硬化危险因素众多,发病机制复杂,造成动脉粥样硬化性疾病防治药物种类繁多,其中降脂类药物是目前临床上最常用且有效的治疗药物。齐墩果酸是一种天然来源... 详细信息

动脉粥样硬化所致的心、脑血管疾病是严重危害人类生命健康的疾病之一。动脉粥样硬化危险因素众多,发病机制复杂,造成动脉粥样硬化性疾病防治药物种类繁多,其中降脂类药物是目前临床上最常用且有效的治疗药物。齐墩果酸是一种天然来源的药物,属五环三萜类化合物,具有多种生物活性,其药理作用集中在护肝、降血糖血脂、抗高血压、清除自由基、消炎、抗癌和抗氧化等方面。本文结合动脉粥样硬化发病机制,就齐墩果酸抗动脉粥样硬化作用及机制作一综述。

关键词：动脉粥样硬化齐墩果酸脂质代谢氧化应激炎症

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HDL上调脐静脉内皮细胞COX-2表达依赖鞘鞍醇激酶2和1-磷酸鞘鞍醇受体途径

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中国动脉硬化杂志 2011年第3期 256-256页

作者：熊升林张青海刘行李媛彬周琴张智超易光辉南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室

目的研究HDL通过1-磷酸鞘鞍醇受体途径上调COX-2表达的细胞内信号机制。方法培养人脐静脉内皮细胞,HDL不同时间和浓度处理,qPCR和WB检测COX-2、CREB和Sphk2表达情况。人脐静脉内皮细胞转染SiRNASphk2后,qPCR和WB检测HDL对COX-2表达情况... 详细信息

目的研究HDL通过1-磷酸鞘鞍醇受体途径上调COX-2表达的细胞内信号机制。方法培养人脐静脉内皮细胞,HDL不同时间和浓度处理,qPCR和WB检测COX-2、CREB和Sphk2表达情况。人脐静脉内皮细胞转染SiRNASphk2后,qPCR和WB检测HDL对COX-2表达情况。人脐静脉内皮细胞用采用JTE(抑制S1P2)、PTX(抑制Gi/o)、SB203580(抑制p38MAPK)、Stau-rosporine(抑制PKC)及U0126(抑制ERK1/2)抑制剂处理后,qPCR和WB检测HDL对COX-2的表达情况。免疫共沉淀检测p-CREB和Sphk2结合情况,用激光共聚焦进行定位观察。结果 HDL呈时间和剂量上调COX-2、SphK2表达及CREB磷酸化,转染SphK2siRNA后COX-2表达水平下调;采用JTE(抑制S1P2),SB203580(抑制P38MAPK),Staurosporine(抑制PKC),U0126(抑制ERK1/2)抑制剂处理后,HDL对COX-2的上调作用明显抑制;免疫共沉淀和激光共聚焦显示p-CREB和SphK2结合。结论 HDL通过S1P2-G i/o-PKC(P38MAPK/ERK)-SphK2?p-CREB途径影响COX-2的表达。HDL激活内皮细胞核内鞘鞍醇激酶和使CREB磷酸化,从而上调COX-2的表达。

关键词：高密度脂蛋白鞘鞍醇激酶2 1-磷酸鞘氨醇环氧合酶2 免疫共沉淀

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PCSK9与细胞凋亡

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湘南学院学报（医学版） 2011年第4期13卷 71-73页

作者：方春敏李雪飞龚慧琴刘录山南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室湖南衡阳421001 湘南学院基础医学部湖南郴州423000

前蛋白转化酶枯草溶菌素转化酶9(proprotein convertase subtilisin/kexin 9,PCSK9)基因所编码的蛋白为神经凋亡调节转化酶-1(neural apoptosis-regulated convertase 1,NARC-1),PCSK9主要在肝脏表达,它的主要作用是降解细胞表面的低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor,LDLR),从而调节胆固醇代谢。另有研究表明,PCSK9还参与细胞的凋亡,影响神经系统的分化和发育,并与炎症过程及糖尿病有一定的相关性。神经细胞凋亡是神经退行性疾病的主要病理基础之一,研究PCSK9对细胞凋亡的作用及机制,对于防治神经退行性疾病等细胞凋亡所引起的疾病,具有十分重要的意义。本文对PCSK9与细胞凋亡之间的关系作一综述。

关键词：前蛋白转化酶枯草溶菌素转化酶9 细胞凋亡神经退行性疾病

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肝X受体激动剂T0901317对脂多糖诱导的THP-1巨噬细胞炎性因子释放的影响及其机制

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中国动脉硬化杂志 2013年第7期21卷 594-598页

作者：赵国军汤石林田国平欧阳新平吕运成何平平姚峰唐艳艳吴剑锋王甲林张敏唐朝克南华大学心血管疾病研究所生命科学研究中心动脉硬化湖南省重点实验室南华大学组织学与胚胎学教研室南华大学附属第一医院ICU 南华大学附属第二医院心内科南华大学护理学院湖南省衡阳市421001

目的观察肝X受体激动剂T0901317对脂多糖诱导的THP-1巨噬细胞炎症因子释放的影响,并探讨其机制。方法 160 nmol/L佛波酯孵育THP-1巨噬细胞24 h后分为四组:对照组、脂多糖组、T0901317组和脂多糖+T0901317组,酶联免疫吸附法检测培养液中... 详细信息

目的观察肝X受体激动剂T0901317对脂多糖诱导的THP-1巨噬细胞炎症因子释放的影响,并探讨其机制。方法 160 nmol/L佛波酯孵育THP-1巨噬细胞24 h后分为四组:对照组、脂多糖组、T0901317组和脂多糖+T0901317组,酶联免疫吸附法检测培养液中炎症因子含量。LipofectamineTM2000转染ATP结合盒转运子A1(ABCA1)siRNA,定量PCR检测细胞ABCA1、ABCG1和Toll样受体4(TLR4)的mRNA表达,Western blot检测AB-CA1、ABCG1、TLR4和核因子κB(NF-κB)p65的蛋白表达。结果 T0901317抑制脂多糖诱导的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素1β(IL-1β)释放,促进THP-1巨噬细胞ABCA1和ABCG1表达;转染ABCA1 siRNA后,ABCA1的蛋白表达明显下降,T0901317对炎症因子的抑制作用明显减弱;T0901317下调TLR4和核内NF-κB的表达。结论 T0901317抑制脂多糖诱导的炎症反应,可能与其促进膜转运体ABCA1表达,抑制膜受体TLR4和转录因子NF-κB的表达有关。

关键词：肝X受体 T0901317 ATP结合盒转运子A1 Toll样受体4 核因子κB 动脉粥样硬化

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FGF-2上调Survivin蛋白的表达拮抗心肌细胞凋亡

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中南医学科学杂志 2016年第4期44卷 379-383,389页

作者：李国华刘米华彭娟肖卫晋屈顺林唐之晗郭芳彭利军任重危当恒刘录山王佐姜志胜南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室湖南衡阳421001 南华大学附属南华医院检验科南华大学儿科学院湖南省儿童医院科教科

目的探讨成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)拮抗心肌细胞凋亡的作用机制。方法以H9c2大鼠心肌细胞作为实验对象,用无血清培养基同步化培养24小时,心肌细胞随机分为正常组(Control)、缺氧/复氧(H/R)组和H/R+FGF-2组。采用CCK-8比色法检测心肌... 详细信息

目的探讨成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)拮抗心肌细胞凋亡的作用机制。方法以H9c2大鼠心肌细胞作为实验对象,用无血清培养基同步化培养24小时,心肌细胞随机分为正常组(Control)、缺氧/复氧(H/R)组和H/R+FGF-2组。采用CCK-8比色法检测心肌细胞存活率,Hoechst染色和流式细胞术检测心肌细胞凋亡。采用Western blot检测生存素(Survivin)蛋白的表达。结果与正常组相比,H/R明显抑制心肌细胞活力,诱导心肌细胞凋亡(均P<0.01);与H/R组相比,FGF-2显著改善H/R心肌细胞活力,拮抗H/R心肌细胞凋亡,同时上调Survivin蛋白的表达(均P<0.05)。结论 FGF-2拮抗心肌细胞凋亡的作用与其上调Survivin蛋白表达有关。

关键词：成纤维细胞生长因子-2 细胞凋亡生存素

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硫化氢下调ox-LDL诱导巨噬细胞中Lp-PLA2的表达

硫化氢下调ox-LDL诱导巨噬细胞中Lp-PLA2的表达

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第十二次全国动脉硬化性疾病学术会议

作者：胡恒境姜志胜南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室湖南省衡阳市421001

目的脂蛋白相关性磷脂酶A2(Lp-PLA2)是一种炎症酶,在人类动脉粥样硬化斑块中有表达并受到氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)的调控,ox-LDL能上调Lp-PLA2的表达.我们研究硫化氢(H2S)能否在ox-LDL诱导巨噬细胞Lp-PLA2表达中产生抑制作用.方法 (1)... 详细信息

目的脂蛋白相关性磷脂酶A2(Lp-PLA2)是一种炎症酶,在人类动脉粥样硬化斑块中有表达并受到氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)的调控,ox-LDL能上调Lp-PLA2的表达.我们研究硫化氢(H2S)能否在ox-LDL诱导巨噬细胞Lp-PLA2表达中产生抑制作用.方法 (1) THP-1细胞分别经不同浓度(0、25、50、100、200 mg/L)、不同时间(0、6、12、24、48 h) ox-LDL孵育,选取最佳浓度和时间;(2)THP-1分别经不同浓度(25、50、100、200 μmol/L)、不同时间(6、12、24、48 h) NaHS联合ox-LDL(50 mg/L)共同孵育,选取最佳浓度和时间;(3)THP-1细胞分别用P38MAPK特异性抑制剂SB203580 (0.1 μmol/L),或硫氢化钠(100μmol/L)或CSE特异性抑制剂PPG(3 mmol/L)或对照组孵化2h后,给予ox-LDL(50 mg/L)共同孵育24h.结果 ox-LDL(50mg/L 24 h)能上调Lp-PLA2的表达,而硫氢化钠(H2S的外原性供体;100 μmol/L 24 h)则能抑制ox-LDL诱导的Lp-PLA2的表达,然而H2S的这一效果能被PPG(3 mmol/L)阻断,并促进ox-LDL诱导的Lp-PLA2的表达.此外,ox-LDL通过P38MAPK通路导致Lp-PLA2的表达,这个效果能被P38MAPK特异性抑制剂SB203580(0.1 μmol/L)和H2S阻断,被PPG所促进.结论硫化氢能通过抑制P38MAPK通路激活实现抑制ox-LDL诱导巨噬细胞的Lp-PLA2表达.

关键词：硫化氢 ox-LDL Lp-PLA2 P38MAPK 动脉粥样硬化

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葛花提取物通过激活PPARγ上调ABCA1的表达而抑制THP-1源性泡沫细胞形成

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中国动脉硬化杂志 2024年第5期32卷 395-401页

作者：朱容蓉陈梦娇赵真旺刘嘉怡吴剑锋王宇菲张敏南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室湖南省动脉硬化性疾病国际科技创新合作基地南华大学生物信息与医学大数据教研室湖南省衡阳市421001 湖北文明学院医学部基础医学院湖北省襄阳市441053 湖南医药学院公共卫生与检验医学院湖南省怀化市418000 南华大学附属第二医院心血管内科湖南省衡阳市421001

[目的]探寻葛花提取物(PFE)对巨噬细胞源性泡沫细胞脂质蓄积的影响。[方法]通过MTT法筛选PFE对THP-1源性泡沫细胞的作用浓度,采用油红O染色和胆固醇检测试剂盒检测细胞内脂质蓄积情况,采用胆固醇流出试剂盒检测细胞的胆固醇流出水平,使... 详细信息

[目的]探寻葛花提取物(PFE)对巨噬细胞源性泡沫细胞脂质蓄积的影响。[方法]通过MTT法筛选PFE对THP-1源性泡沫细胞的作用浓度,采用油红O染色和胆固醇检测试剂盒检测细胞内脂质蓄积情况,采用胆固醇流出试剂盒检测细胞的胆固醇流出水平,使用RT-qPCR和Western blot检测mRNA和蛋白表达。[结果]PFE显著降低THP-1源性泡沫细胞内的脂质蓄积。PFE不影响CD36、清道夫受体AⅠ(SR-AⅠ)、固醇调节元件结合蛋白2(SREBP2)及3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)的mRNA表达,但能上调ATP结合盒转运体A1(ABCA1)的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05),促进巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出(P<0.01)。PFE可以激活过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的活性(P<0.01)及上调其mRNA和蛋白表达水平(P<0.05)。与PFE对照组相比,加入GW9662处理后PPARγ和ABCA1的蛋白表达水平均下降(P<0.01),胆固醇流出水平降低(P<0.01)。[结论]PFE可显著改善THP-1源性泡沫细胞内的脂质蓄积,通过PPARγ上调ABCA1表达及其介导的胆固醇流出抑制泡沫细胞形成。

关键词：葛花提取物泡沫细胞 ATP结合盒转运体A1 过氧化物酶体增殖物激活受体γ

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关于冠状动脉粥样硬化氧化应激方面指标的研究进展

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中国医药导报 2010年第25期7卷 9-10页

作者：胡珂晏新民胡志雄邹勇南华大学附属第二医院南华大学医学院心血管疾病研究所&动脉硬化学湖南省重点实验室湖南衡阳421001

在冠状动脉硬化的形成机制中氧化损伤成为人们关注的重点,血管壁中各种细胞成分产生过多的活性氧(ROS)可启动动脉粥样硬化复杂的病理生理过程,本文将对冠状动脉粥样硬化氧化应激方面的指标如低密度脂蛋白、超氧物歧化酶、丙二醛、屏氧... 详细信息

在冠状动脉硬化的形成机制中氧化损伤成为人们关注的重点,血管壁中各种细胞成分产生过多的活性氧(ROS)可启动动脉粥样硬化复杂的病理生理过程,本文将对冠状动脉粥样硬化氧化应激方面的指标如低密度脂蛋白、超氧物歧化酶、丙二醛、屏氧酶血红素氧合酶(HO)的诱导型的研究作一综述。

关键词：冠状动脉粥样硬化氧化应激低密度脂蛋白超氧化物歧化酶丙二醛屏氧酶

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