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中国病理生理学会第十届全国代表大会

作者：李小红杨沁李荣庆王佐姜志胜危当恒南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室湖南衡阳421001

目的:动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)进程中血管细胞自噬的改变及低剪切应力对血管内皮细胞自噬的影响.方法:高脂饮食喂饲ApoE -/-小鼠,分别于0、4、8和12周处死.HE和油红O染色法观察As 病变;免疫组织化学法和Western blot检测Becli...

目的:动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)进程中血管细胞自噬的改变及低剪切应力对血管内皮细胞自噬的影响.方法:高脂饮食喂饲ApoE -/-小鼠,分别于0、4、8和12周处死.HE和油红O染色法观察As 病变;免疫组织化学法和Western blot检测Beclin 1、LC3和p62蛋白表达;将HUVECs 置于体外灌流系统,分别以低剪切应力(5 dyn/cm2)和正常剪切应力(15 dyn/cm2)处理1 h,Western blot检测观察剪切应力对血管内皮细胞自噬及自噬流的影响.结果:随着As 病变进程的发展Beclin 1、LC3和p62含量显著增加.与正常剪切应力组相比,低剪切应力组Beclin 1和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的蛋白表达降低;p62表达增加;巴伐洛霉素孵育2h后,低剪切应力组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ无明显变化,而正常剪切应力组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ明显增大.结论: As进程中血管细胞自噬障碍,低剪切应力抑制血管内皮细胞自噬.

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TET2参与ox-LDL对人脐静脉内皮细胞CSE/H2S体系的调控作用

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中国病理生理杂志 2015年第10期 1809-1809页

作者：彭娟唐志晗任重刘录山危当恒姜志胜南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室

目的:观察DNA甲基化修饰酶TET2对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中CSE/H2S体系的影响。方法:用不同浓度(0、25、50、75、100 mg/L)ox-LDL处理HUVEC不同时间(0、12、24、48 h),RT-PCR和Western blot检测细胞TET2和CSE表达变化,改良亚甲基蓝分... 详细信息

目的:观察DNA甲基化修饰酶TET2对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中CSE/H2S体系的影响。方法:用不同浓度(0、25、50、75、100 mg/L)ox-LDL处理HUVEC不同时间(0、12、24、48 h),RT-PCR和Western blot检测细胞TET2和CSE表达变化,改良亚甲基蓝分光光度法检测培养液中H2S含量;用TET2过表达和TET2干扰质粒分别转染HUVEC,再用75 mg/L ox-LDL处

关键词：人脐静脉内皮细胞 HUVEC CSE/H2S TET2 ox-LDL

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PCSK9在oxLDL介导PC12细胞凋亡中的作用及机制研究

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中国病理生理杂志 2015年第10期 1819-1819页

作者：吴琪彭娟任重赵雪珊何妮娅高亚唐志晗姜志胜刘录山南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室

目的:观察PCSK9在ox LDL诱导PC12凋亡中的作用及机制。方法:用ox LDL单独处理或PCSK9 siRNA转染后处理PC12细胞,Hoechst 33258染色和流式细胞术检测细胞凋亡,RT-PCR、Western blot分别检测PCSK9、BACE1、caspase-3、caspase-9、Bcl-2和... 详细信息

关键词：细胞凋亡 siRNA oxLDL BACE PCSK9

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PCSK9介导脂质对海马神经元凋亡的影响及机制研究

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中国病理生理杂志 2015年第10期 1862-1862页

作者：唐志晗吴琪彭娟任重赵雪珊何妮娅高亚姜志胜刘录山南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室

目的:探讨PCSK9在高脂血症apoE-/-小鼠海马神经元凋亡中的作用及机制。方法:18只6周龄apoE-/-小鼠,分为正常和高脂饮食组。喂养12周后取出海马进行冰冻切片,用HE染色、油红O染色、Hoechst 33258染色、免疫组化染色和改良Bielschowsky染... 详细信息

目的:探讨PCSK9在高脂血症apoE-/-小鼠海马神经元凋亡中的作用及机制。方法:18只6周龄apoE-/-小鼠,分为正常和高脂饮食组。喂养12周后取出海马进行冰冻切片,用HE染色、油红O染色、Hoechst 33258染色、免疫组化染色和改良Bielschowsky染色观察海马改变。结果:与正常饮食组相比,高脂饮食组apoE-/-小鼠海马锥体细胞排列稀疏紊乱,细胞间隙

关键词：神经元凋亡小鼠小家鼠边缘系统海马 PCSK9

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动脉粥样硬化病变进程中血管细胞自噬的改变及低剪切应力对血管内皮细胞自噬的影响

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中国病理生理杂志 2015年第10期 1800-1800页

作者：李小红杨沁李荣庆王佐姜志胜危当恒南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室

目的:动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)进程中血管细胞自噬的改变及低剪切应力对血管内皮细胞自噬的影响。方法:高脂饮食喂饲Apo E-/-小鼠,分别于0、4、8和12周处死。HE和油红O染色法观察As病变;免疫组织化学法和Western blot检测Becli... 详细信息

目的:动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)进程中血管细胞自噬的改变及低剪切应力对血管内皮细胞自噬的影响。方法:高脂饮食喂饲Apo E-/-小鼠,分别于0、4、8和12周处死。HE和油红O染色法观察As病变;免疫组织化学法和Western blot检测Beclin 1、LC3和p62蛋白表达;将HUVECs置于体外灌流系统,分别以低剪切应力(5 dyn/cm2)和正常剪切应力(15 dyn/

关键词：细胞自噬血管内皮剪切应力剪应力动脉粥样硬化动脉硬化病变进程

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FGF-2通过PI3K-PKB/Akt-GSK-3β信号通路抑制缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡

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中国病理生理杂志 2015年第10期 1797-1797页

作者：李国华姜志胜南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室

目的:探讨成纤维细胞生长因子2(FGF-2)抗缺氧(H/R)/复氧诱导心肌细胞凋亡的新机制。方法:对各实验组分别检测心肌细胞活力与凋亡,p-Akt、p-GSK-3β、Bcl-2、Bax、caspase-3前体(32 kD)和活性体(17 kD)蛋白表达变化。结果:与control相比,... 详细信息

目的:探讨成纤维细胞生长因子2(FGF-2)抗缺氧(H/R)/复氧诱导心肌细胞凋亡的新机制。方法:对各实验组分别检测心肌细胞活力与凋亡,p-Akt、p-GSK-3β、Bcl-2、Bax、caspase-3前体(32 kD)和活性体(17 kD)蛋白表达变化。结果:与control相比,H/R能明显抑制心肌细胞活力,诱导心肌细胞凋亡,下调p-Akt、p-GSK-3β、Bcl-2和caspase-3前体蛋白表达,上调Bax和

关键词： FGF-2 心肌细胞凋亡 Akt 信号通路 GSK PKB

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硫化氢在低剪切应力导致内皮细胞自噬障碍中的作用

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中国病理生理杂志 2015年第10期 1814-1814页

作者：唐蕙唐志晗任重彭娟危当恒任晓晴肖卫晋刘录山姜志胜南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室

目的:探讨硫化氢在低剪切应力诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)自噬障碍中的作用。方法:HUVECs经培养传代分为3组:对照组、低剪切应力组(5 dyn/cm2)和正常剪切应力组(15 dyn/cm2)。在平板流动腔上对内皮细胞进行剪切应力处理,Western blo... 详细信息

目的:探讨硫化氢在低剪切应力诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)自噬障碍中的作用。方法:HUVECs经培养传代分为3组:对照组、低剪切应力组(5 dyn/cm2)和正常剪切应力组(15 dyn/cm2)。在平板流动腔上对内皮细胞进行剪切应力处理,Western blot检测CSE蛋白水平,RT-PCR检测CSE的mRNA含量,荧光显微镜MDC染色观察自噬表泡,免疫荧光检测LC3

关键词：硫化氢人脐静脉内皮细胞应力诱导硫化物剪切应力剪应力自噬障碍

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硫化氢通过PTEN/Akt/FoxO3a通路抑制oxLDL诱导的HUVECs凋亡

硫化氢通过PTEN/Akt/FoxO3a通路抑制oxLDL诱导的HUVECs凋亡

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中国病理生理学会第十届全国代表大会

作者：任重唐蕙彭娟肖卫晋任晓晴王佐刘录山屈顺林姜志胜南华大学心血管疾病研究所湖南衡阳421001 南华大学动脉硬化学湖南省重点实验室湖南衡阳421001

目的:探讨PTEN-Akt-FoxO3a信号通路在H2S抑制oxLDL 诱导的HUVECs 凋亡中的作用.方法: HUVECs分为4组:①对照组;② NaHS组;③ oxLDL组;④NaHS +oxLDL组.Hoechst 33258染色和AO/EB染色检测细胞凋亡,Western blot检测细胞PTEN、p-PTEN、Akt、p-Akt、FoxO3a、p-FoxO3a和Bim蛋白的表达.结果:NaHS +oxLDL组较oxLDL组细胞凋亡明显减少.与oxLDL组相比,NaHS +oxLDL组显著增加细胞PTEN、Akt和FoxO3a蛋白的磷酸化,减少Bim蛋白表达(P＜0.05);FoxO3a核转位显著减少(P＜0.05).结论: 硫化氢可抑制oxLDL 诱导的HUVECs 凋亡,其机制与激活PTEN/Akt/FoxO3a信号通路有关.

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miR-23b-3p对肝核因子4的靶基因及效用分析

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湘南学院学报（医学版） 2015年第1期17卷 1-4页

作者：童海雷建军莫学靓赵岳张凯冯祺论房嘉俊曾钧发杨璐吴灿何佐曦王佐南华大学附属附属第一医院功能科南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室湖南衡阳421001

目的探索miR-23b-3p是否以肝核因子4作为靶基因并下调apo(a)表达,为降高脂蛋白(a)血症提供新的思路。方法用Targetscan在线工具对miR-23b-3p与调控LPA基因的转录因子肝核因子4(HNF4)进行靶基因分析;在JM109细胞中使用荧光素酶报告系统对... 详细信息

目的探索miR-23b-3p是否以肝核因子4作为靶基因并下调apo(a)表达,为降高脂蛋白(a)血症提供新的思路。方法用Targetscan在线工具对miR-23b-3p与调控LPA基因的转录因子肝核因子4(HNF4)进行靶基因分析;在JM109细胞中使用荧光素酶报告系统对miR-23b-3p与调控筛选调控LPA基因的转录因子HNF4进行靶基因进行验证实验;用RT-PCR检测Hep G2细胞apo(a)mRNA表达水平。结果 Targetscan生物信息学分析工具表明HNF4G可作为miR-23b-3p的靶基因,荧光素酶报告系统转染miR-23b-3p处理组细胞裂解后荧光强度显著低于对照组,miR-23b-3p的抑制剂可抑制其作用,验证了HNF4G可作为miR-23b-3p的靶基因。转染miR-23b-3p可抑制Hep G2细胞apo(a)mRNA的表达。结论 miR-23b-3p以HNF4为其靶基因,并下调Hep G2细胞apo(a)的表达。

关键词：载脂蛋白(a) 靶基因 miR-23b-3p 肝核因子4

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GW501516通过TGFβ-Smad3信号途径促进人脐静脉内皮细胞PAI-1的表达

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生物化学与生物物理进展 2014年第7期41卷 674-681页

作者：莫中成李霞张大棣朱明燕张青海曾颖伍荣鲁艳菊陈意易光辉南华大学医学院心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室衡阳421001

为探讨过氧化物酶体增殖物激活型受体δ(peroxisome proliferator-activated receptor-δ,PPARδ)激动剂GW501516对人脐静脉内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)表达的影响及机制,采用siRNA、TGFβ-Smad3信号通路阻滞剂等处理细胞,经... 详细信息

为探讨过氧化物酶体增殖物激活型受体δ(peroxisome proliferator-activated receptor-δ,PPARδ)激动剂GW501516对人脐静脉内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)表达的影响及机制,采用siRNA、TGFβ-Smad3信号通路阻滞剂等处理细胞,经实时定量PCR、Western blot方法分别检测细胞中PAI-1及磷酸化Smad3蛋白的表达.结果显示,与对照组比较,GW501516可诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中PAI-1表达,且此效应呈浓度和时间依赖性(P<0.05);siRNA沉默PPARδ的表达后,可阻抑GW501516对HUVEC细胞PAI-1表达的促进作用;TGFβ-Smad3信号通路抑制剂SB-431542与SIS3均可降低HUVEC细胞pSmad3蛋白的表达,而细胞PAI-1表达也随之降低.结果提示,GW501516可促进HUVEC细胞PAI-1的表达,其机制可能与TGFβ-Smad3信号通路有关.

关键词： GW501516 纤溶酶原激活物抑制剂1 过氧化物酶体增殖物激活型受体δ 转化生长因子β Smad3

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