检索结果-内蒙古大学图书馆

激光生物学报 2016年第5期25卷 451-455页

作者：尹涵予廖志强尹蔚兰湖南省衡阳市第八中学湖南衡阳421008 南华大学医学院临床医学系湖南衡阳421001 南华大学医学院生理学教研室/神经生物学研究所湖南衡阳421001

目的:硫化氢是一种重要的气体信号分子,作为一种神经调质在神经系统中起重要作用。胱硫醚-β-合成酶(CBS)是脑内硫化氢合成的主要酶。构建针对大鼠CBS基因的shRNA干扰载体,稳定转染PC12细胞,观察该载体对PC12细胞CBS基因的沉默效应。方... 详细信息

目的:硫化氢是一种重要的气体信号分子,作为一种神经调质在神经系统中起重要作用。胱硫醚-β-合成酶(CBS)是脑内硫化氢合成的主要酶。构建针对大鼠CBS基因的shRNA干扰载体,稳定转染PC12细胞,观察该载体对PC12细胞CBS基因的沉默效应。方法:构建三条针对大鼠CBS基因的shRNA,经前期实验筛序一条最有效靶点与载体GV248(h U6-MCS-Ubiquitin-EGFP-IRES-puromycin)连接,经转化及PCR阳性克隆筛选及测序鉴定。将LV-CBS-ShRNA慢病毒载体连同包装载体经脂质体2 000共转染到293T细胞,慢病毒包装后用荧光法进行滴度测定。将包装好的慢病毒转染到PC12细胞,用嘌呤霉素进行筛选,得到稳定转染LV-CBS ShRNA的PC12细胞。实时荧光定量PCR检测CBSmRNA的表达,Western-blot检测CBS蛋白的表达。结果:PCR扩增和测序结果证明,成功构建大鼠LV-CBS ShRNA慢病毒载体,经包装产生的慢病毒滴度为1×109TU/m L。与转染阴性对照慢病毒(LV-NC-ShRNA)的细胞比较,LV-CBS ShRNA慢病毒转染可使PC12的CBSmRNA和CBS蛋白表达分别下降51.2%和48%。成功构建CBS基因ShRNA干扰的PC12细胞株,为后续研究CBS在神经系统中的作用奠定基础。

关键词： RNA干扰 PC12 胱硫醚-β-合成酶转染慢病毒

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CBS过表达慢病毒载体构建及稳定转染PC12细胞系的建立

CBS过表达慢病毒载体构建及稳定转染PC12细胞系的建立

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湖南省生理科学会2015年度学术年会暨第十届理事会换届选举大会

作者：尹蔚兰廖志强阳柏成姜骆永文芳王芳邬力祥中南大学基础医学院生理学系南华大学生理学教研室/神经生物学研究所南华大学生理学教研室/神经生物学研究所中南大学基础医学院生理学系

目的硫化氢被认为是第三种气体信号分子,在神经系统中扮演重要的角色。脑内合成硫化氢的主要酶为胱硫醚-β-合成酶(CBS),因此研究CBS与神经系统疾病的关系具有重要意义。利用基因重组技术,构建CBS基因过表达载体,转染PC12细胞,建立CBS... 详细信息

目的硫化氢被认为是第三种气体信号分子,在神经系统中扮演重要的角色。脑内合成硫化氢的主要酶为胱硫醚-β-合成酶(CBS),因此研究CBS与神经系统疾病的关系具有重要意义。利用基因重组技术,构建CBS基因过表达载体,转染PC12细胞,建立CBS过表达的PC12细胞株并进行鉴定。方法根据Gene bank提供的CBS cDNA序列设计引物,PCR扩增CBS基因并将其慢病毒过表达载体GV341,将已构建的慢病毒载体对293T细胞进行转染,收集病毒上清,感染正常PC12细胞,用嘌呤霉素进行筛选,得到稳定转染CBS的PC12细胞。通过基因测序,实时荧光定量PCR、western-blot等对细胞株进行鉴定。结果测序鉴定重组慢病毒过表达载体CBS基因序列与genebank提供的CBS序列一致;荧光定量PCR和western-blot检测显示,与空载体组相比,转染GV341-CBS慢病毒表达载体组的PC12细胞,CBS的表达在mRNA和蛋白两个水平均增高,成功建立了PC12-CBS细胞系。结论成功构建CBS过表达的PC12细胞株,为研究CBS与神经系统疾病的关系提供了稳定的细胞株。

关键词：胱硫醚-β-合成酶慢病毒转染过表达 PC12细胞

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嗅球注射甲苯对小鼠嗅觉辨识记忆和嗅球5-羟色胺能神经元的影响

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中国药理学与毒理学杂志 2008年第2期22卷 140-144页

作者：刘巧琼赵乐章任振华李光武安徽医科大学生理学教研室安徽合肥230032 安徽医科大学神经生物学研究所安徽合肥230032

目的观察嗅球注射甲苯对嗅觉功能、嗅球形态及嗅球神经生化的影响。方法甲苯1.0和3.0μL分别注入小鼠的嗅球,术后d3,5,7和14进行嗅觉辨识行为测试;术后d14免疫组织化学检测嗅球细胞5-羟色胺(5-HT)含量和5-HT能神经元数量;HE染色,显微镜... 详细信息

目的观察嗅球注射甲苯对嗅觉功能、嗅球形态及嗅球神经生化的影响。方法甲苯1.0和3.0μL分别注入小鼠的嗅球,术后d3,5,7和14进行嗅觉辨识行为测试;术后d14免疫组织化学检测嗅球细胞5-羟色胺(5-HT)含量和5-HT能神经元数量;HE染色,显微镜下进行嗅球形态学观察。结果嗅球注射甲苯引起小鼠嗅觉记忆明显减弱甚至缺失,大剂量时难以逆转;嗅球内5-HT免疫反应阳性细胞减少;显微镜下见嗅球明显病理改变。结论甲苯对嗅觉功能产生抑制作用,嗅球细胞变性及嗅球5-HT明显减少是其原因之一。

关键词：甲苯嗅球嗅觉障碍神经元 5-羟色胺

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丁香酚通过嗅觉通路改善昆明鼠学习记忆的机制

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中国康复医学杂志 2007年第6期22卷 487-489,508,I0001页

作者：杨天鹏唐敏刘巧琼李光武安徽医科大学神经生物学研究所合肥230032 安徽医科大学生理学教研室合肥230032

目的:探讨丁香酚吸入引起昆明鼠学习记忆的行为学改变及其机制。方法:建立小鼠嗅球摘除模型,分组对小鼠进行水迷宫实验、嗅觉辨识记忆实验及免疫组化,观察各组小鼠海马、皮质等脑区的尼氏染色,以及ChAT、GABA、Glu等神经递质变化。结果... 详细信息

目的:探讨丁香酚吸入引起昆明鼠学习记忆的行为学改变及其机制。方法:建立小鼠嗅球摘除模型,分组对小鼠进行水迷宫实验、嗅觉辨识记忆实验及免疫组化,观察各组小鼠海马、皮质等脑区的尼氏染色,以及ChAT、GABA、Glu等神经递质变化。结果:丁香酚吸入组的小鼠水迷宫实验、嗅觉辨识记忆实验结果明显优于其他组,免疫组化实验结果示丁香酚吸入小鼠的皮质、海马的ChAT、Glu等神经递质有明显增加,而GABA无明显改变。结论:丁香酚能通过嗅觉通路改善小鼠的学习记忆,其机制可能与嗅觉通路中多种神经递质的改变有关。

关键词：丁香酚嗅觉通路神经递质学习记忆

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吗啡抑制福氏佐剂致炎大鼠触诱发痛的机制

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中国应用生理学杂志 2004年第2期20卷 170-171页

作者：李韶孙长凯赵志奇大连医科大学生理学教研室复旦大学神经生物学研究所上海200433

目的 :观察吗啡对炎性大鼠触诱发痛的作用并进一步探讨其机制。方法 :应用电生理技术记录后二头半腱 (PBST)肌肌电及胫神经A、C类纤维单位放电。结果 :静脉注射吗啡 ( 1mg/kg)能明显抑制大鼠炎症侧PBST肌伤害性屈肌反射 ,此作用可被纳洛... 详细信息

目的 :观察吗啡对炎性大鼠触诱发痛的作用并进一步探讨其机制。方法 :应用电生理技术记录后二头半腱 (PBST)肌肌电及胫神经A、C类纤维单位放电。结果 :静脉注射吗啡 ( 1mg/kg)能明显抑制大鼠炎症侧PBST肌伤害性屈肌反射 ,此作用可被纳洛酮 ( 1mg/kg)阻断 ;相同剂量的吗啡对来自炎症脚趾的胫神经A类纤维自发放电无影响 ,但却可明显抑制相同侧C类纤维的自发放电。结论 :吗啡抑制炎性大鼠触诱发痛 ,此作用是通过中枢神经系统而非通过外周神经系统实现。

关键词：吗啡炎症痛感觉神经元传入纤维大鼠机制

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氯沙坦和培哚普利逆转高血压大鼠心血管重构的比较

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中国药理学通报 2004年第10期20卷 1107-1111页

作者：秦旭平龙光徐立朋朱炳阳胡弼李元建廖端芳南华大学药物药理研究所血管生物学研究中心湖南衡阳421001 南华大学生理学教研室湖南衡阳421001 中南大学药学院药理学教研室湖南长沙410078

目的　比较氯沙坦和培哚普利逆转肾血管性高血压大鼠心血管重构作用及其机制 ,为临床用药提供实验依据。方法　以经典两肾一夹肾血管性高血压大鼠为研究模型。采用鼠尾测压法测定大鼠血压的变化 ;反射免疫分析法测定大鼠血浆血管紧张素... 详细信息

目的　比较氯沙坦和培哚普利逆转肾血管性高血压大鼠心血管重构作用及其机制 ,为临床用药提供实验依据。方法　以经典两肾一夹肾血管性高血压大鼠为研究模型。采用鼠尾测压法测定大鼠血压的变化 ;反射免疫分析法测定大鼠血浆血管紧张素Ⅱ含量和肾素活性 ;称量法计算各组大鼠心脏与体重的比值 ;高清晰度数码照相扫描分析技术测定各组大鼠主动脉、肠系膜动脉血管管壁厚度、管壁厚度和管腔内径比值、管壁面积和管腔面积比值来估计两类药物对心血管重构的影响。结果　高血压大鼠心脏与体重的比值、主动脉、肠系膜动脉血管管壁厚度和管腔内径比值、管壁面积和管腔面积比值与正常大鼠相比明显增大 (P <0 0 1) ,给予氯沙坦 (2 0mg·kg-1)或培哚普利 (3mg·kg-1)治疗后 ,上述各项指标基本接近正常水平 ,与非用药组相比具有显著差异 (P<0 0 1)。结论　氯沙坦和培哚普利均能明显降低高血压大鼠血压 ;长期应用较低剂量氯沙坦和培哚普利均能有效逆转高血压大鼠病理性心血管重构 ,两药存在等效性。

关键词：氯沙坦培哚普利肾血管性高血压心血管重构大鼠

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信息分子作用机制的多样性

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交通医学 1997年第2期11卷 133-138页

作者：陈宜张蒋春雷第二军医大学生理学教研室南通医学院神经生物学教研室神经科学研究所上海200433

细胞间的信息交往由信息(signalling)分子完成,信息分子一般以内分泌、旁分泌、自分泌、突触分泌的方式自一个细胞释放,然后作用于另一个细胞或同一细胞本身.大多数脂溶性分子可自由通过细胞膜,作用于细胞核内的受体分子(N),如甾体激素... 详细信息

细胞间的信息交往由信息(signalling)分子完成,信息分子一般以内分泌、旁分泌、自分泌、突触分泌的方式自一个细胞释放,然后作用于另一个细胞或同一细胞本身.大多数脂溶性分子可自由通过细胞膜,作用于细胞核内的受体分子(N),如甾体激素、甲状腺激素、1,25(OH)_2VitD_3等.另一类是水溶性信息分子,它们作用于细胞膜表面的受体,引起一系列质膜的、细胞内的变化.细胞膜表面的受体又可分为三类:离子通道型(M_I),G—蛋白关联受体(M_G),酶关联受体(M_E).

关键词：信息分子糖皮质激素细胞膜细胞因子甾体激素

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