检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药理学通报 2020年第2期36卷 198-203页

作者：胡聪吴颛李亚林朱高路曹朝晖胡小波南华大学衡阳医学院生物化学与分子生物学教研室湖南衡阳421001

目的探讨维生素D(vitamin D,VitD)对过氧化氢(hydrogen peroxide,H 2O 2)诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞凋亡的保护作用及机制。方法VitD预处理后,用H 2O 2处理MIN6细胞,分别运用CCK-8法、Hoechst 33258荧光染色法、流式细胞术检测MIN6... 详细信息

目的探讨维生素D(vitamin D,VitD)对过氧化氢(hydrogen peroxide,H 2O 2)诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞凋亡的保护作用及机制。方法VitD预处理后,用H 2O 2处理MIN6细胞,分别运用CCK-8法、Hoechst 33258荧光染色法、流式细胞术检测MIN6细胞增殖、形态及凋亡百分率。Western blot检测增殖与凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Caspase-3以及Cleaved caspase-3的表达。结果H 2O 2呈时间和剂量依赖性抑制MIN6细胞增殖,诱导细胞凋亡,降低Bcl-2表达、增加Bax及Cleaved caspase-3表达,Bcl-2/Bax比值降低,Cleaved caspase-3/caspase-3比值增加;当用VitD预处理后,Bcl-2表达增加,Bax、Cleaved caspase-3表达降低,Bcl-2/Bax比值增加,Cleaved caspase-3/caspase-3比值降低,MIN6细胞活力增加。结论VitD预处理后,通过增加抗凋亡Bcl-2表达,降低促凋亡Bax和Cleaved caspase-3表达,减少由H 2O 2诱导的小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞凋亡。

关键词：维生素D 过氧化氢细胞增殖细胞形态细胞凋亡 MIN6细胞

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钾离子通道蛋白Shaker对果蝇心脏衰老的保护作用

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遗传 2021年第1期43卷 94-99页

作者：刘学文吴红梅白瑛曾群曹泽民吴秀山唐旻南华大学衡阳医学院生物化学与分子生物学教研室衡阳421001 湖南师范大学心脏发育研究中心发育生物学与蛋白质组学教育部重点实验室长沙410081

钾离子通道在心肌细胞动作电位复极过程中起着重要作用。钾离子通道蛋白种类繁多,已知钾离子通道蛋白KCNQ和HERG/eag参与心脏动作电位的形成,调节心脏收缩节律。钾离子通道蛋白Shaker是果蝇(Drosophila)体内发现的第一个电压门控钾离子... 详细信息

钾离子通道在心肌细胞动作电位复极过程中起着重要作用。钾离子通道蛋白种类繁多,已知钾离子通道蛋白KCNQ和HERG/eag参与心脏动作电位的形成,调节心脏收缩节律。钾离子通道蛋白Shaker是果蝇(Drosophila)体内发现的第一个电压门控钾离子通道,维持神经元和肌肉细胞的电兴奋性,但是目前其在成人心脏功能中的作用仍不清楚。本研究以果蝇为模型,高频电刺激模拟心脏应激状态,观察钾离子通道蛋白shaker基因突变体的心衰发生率。同时,利用心脏特异性启动子hand4.2Gal4特异性敲低钾离子通道蛋白Shaker的表达;果蝇成体心脏生理学功能分析系统分析了1、3、5周龄特异性敲低钾离子通道蛋白Shaker的心脏表型。结果表明,shaker基因突变将严重影响果蝇心脏抗应激能力,表现在高频电刺激后的心力衰竭发生率显著性升高;心脏特异性敲低shaker基因导致5周龄果蝇心律失常发生率显著性增加;心脏特异性敲低HDAC3将显著降低果蝇寿命。综上所述,本研究推测钾离子通道蛋白Shaker在衰老过程中维护果蝇正常的心脏功能。

关键词：钾离子通道心律失常 Shaker 心脏衰老果蝇

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UAS-Mlp84B-GFP转基因果蝇制备及其表达分析

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生命科学研究 2022年第3期26卷 200-207页

作者：姜婷婷张佳伟刘小玲聂宏运唐旻佘美华曾群南华大学衡阳医学院附属南华医院检验科中国湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院生物化学与分子生物学教研室生态健康与人类重要疾病防控湖南省高校重点实验室中国湖南衡阳421001

黑腹果蝇作为经典遗传学和分子遗传学模式生物,已经成为研究基因调控器官发育以及各种疾病发生的一个强有力的模型。为了探究Mlp84B在果蝇体内的表达定位及互作蛋白质,首先将含启动子元件的果蝇Mlp84B基因组融合GFP序列克隆至pUAST表达... 详细信息

黑腹果蝇作为经典遗传学和分子遗传学模式生物,已经成为研究基因调控器官发育以及各种疾病发生的一个强有力的模型。为了探究Mlp84B在果蝇体内的表达定位及互作蛋白质,首先将含启动子元件的果蝇Mlp84B基因组融合GFP序列克隆至pUAST表达载体中,利用胚胎显微注射技术将构建好的重组质粒注射到果蝇早期受精卵;其次通过杂交获得红眼果蝇,经单果蝇建系、平衡子定位后获得稳定遗传的转基因果蝇;最后通过在果蝇体内检测到GFP的表达,同时经qRT-PCR检测到Mlp84B的表达水平上升,证实转基因果蝇构建成功。GFP定位结果显示,内源Mlp84B在果蝇肌肉系统表达,并且Mlp84B与Act57B在果蝇体内相互作用。实验结果表明,文中构建的UAS-Mlp84B-GFP转基因果蝇可以作为肌肉的标记品系,这为探究肌肉系统形成和稳态奠定了基础。

关键词：黑腹果蝇重组质粒绿色荧光蛋白(GFP) 转基因果蝇肌肉系统

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混合式教学在临床寄生虫学检验实验教学中的应用

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基础医学教育 2021年第3期23卷 170-172页

作者：申海艳姜志胜曾国唐双阳梁瑜罗应南华大学衡阳医学院病原学实验中心衡阳421001 南华大学衡阳医学院南华大学衡阳医学院生物化学与分子生物学教研室

为了培养高素质医学检验人才,文章将混合式教学模式引入临床寄生虫学检验实验教学,通过以课堂为主体,融合网络教学资源、虚拟仿真实验、标本陈列室及校外实践基地,结合线上线下多种学习方式的优势,培养学生自主学习能力,提高学生解决实... 详细信息

为了培养高素质医学检验人才,文章将混合式教学模式引入临床寄生虫学检验实验教学,通过以课堂为主体,融合网络教学资源、虚拟仿真实验、标本陈列室及校外实践基地,结合线上线下多种学习方式的优势,培养学生自主学习能力,提高学生解决实际问题的能力。

关键词：临床寄生虫学检验实验教学混合式教学

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RING-E3泛素连接酶调控低密度脂蛋白受体的研究进展

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中国动脉硬化杂志 2025年第5期33卷 440-446页

作者：刘芳园张彩平龙石银南华大学衡阳医学院生物化学与分子生物学教研室

动脉粥样硬化性心血管疾病的发生发展与血浆低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)水平的异常升高密切相关。低密度脂蛋白受体(LDLR)通过介导LDLC的内吞清除，在维持胆固醇稳态中发挥核心作用，而细胞膜表面LDLR丰度与LDLR的表达水平和再循环密切相... 详细信息

动脉粥样硬化性心血管疾病的发生发展与血浆低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)水平的异常升高密切相关。低密度脂蛋白受体(LDLR)通过介导LDLC的内吞清除，在维持胆固醇稳态中发挥核心作用，而细胞膜表面LDLR丰度与LDLR的表达水平和再循环密切相关。近年的研究发现，RING-E3泛素连接酶可通过双重机制调控LDLR水平：一方面直接泛素化修饰LDLR,促进其经内体-溶酶体途径降解；另一方面通过激活肝X受体(LXR)通路或抑制固醇调节元件结合蛋白(SREBP)核转位，减少LDLR的合成。这两种机制共同导致细胞膜LDLR丰度降低，削弱胆固醇代谢平衡并加剧LDLC蓄积。因此，靶向抑制RING-E3泛素连接酶活性可能成为调控LDLR表达、降低血浆LDLC水平及防治心血管疾病的新策略。该文综述了RING-E3泛素连接酶调控LDLR的作用机制及其相关研究进展。

关键词： RING-E3泛素连接酶低密度脂蛋白受体低密度脂蛋白胆固醇泛素化动脉粥样硬化

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姜黄素通过调节PCSK9促进肝细胞摄取血浆LDL-C

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中国药理学通报 2020年第10期36卷 1415-1421页

作者：王楚瑶蒋素素向德彪杨慧仙邵倞琦李博洁袁育林贺卫和张敏龙石银田英张彩平廖端芳南华大学衡阳医学院生物化学与分子生物学教研室湖南衡阳421001 湖南中医药大学药学院药理学教研室湖南长沙410208 南华大学衡阳医学院心血管疾病研究所湖南衡阳421001

目的明确姜黄素调节PCSK9促进肝细胞摄取LDL的作用。方法利用实验室现有的慢病毒感染HepG2和LO2两种细胞,分别构建过表达PCSK9(RNAi-PCSK9)和干扰PCSK9(OE-PCSK9)细胞模型,通过倒置荧光显微镜检测慢病毒转染效率;Western blot检测蛋白表... 详细信息

目的明确姜黄素调节PCSK9促进肝细胞摄取LDL的作用。方法利用实验室现有的慢病毒感染HepG2和LO2两种细胞,分别构建过表达PCSK9(RNAi-PCSK9)和干扰PCSK9(OE-PCSK9)细胞模型,通过倒置荧光显微镜检测慢病毒转染效率;Western blot检测蛋白表达;油红O染色分析姜黄素对细胞中脂质摄取情况;酶法检测细胞内胆固醇含量。结果镜下观察细胞内可见清晰绿色荧光。Western blot结果显示干扰PCSK9组降低PCSK9表达,升高LDLR表达;过表达PCSK9组增加PCSK9表达,降低LDLR表达。油红O结果显示姜黄素/瑞舒伐他汀处理24 h后RNAi/OEPCSK9组细胞内脂质含量均增加。胆固醇含量测定姜黄素/瑞舒伐他汀处理24 h后RNAi-PCSK9组总胆固醇(total cholesterol,TC)/游离胆固醇(free cholesterol,FC)含量升高,OEPCSK9组TC/FC含量均下降。结论姜黄素特异性降低PCSK9表达继而促进肝细胞摄取LDL-C。

关键词：姜黄素血脂异常前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶Kexin-9型低密度脂蛋白胆固醇胆固醇慢病毒转染

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假单胞菌外毒素免疫原性的改善策略

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微生物学免疫学进展 2020年第5期48卷 82-86页

作者：朱高路胡小波曹朝晖南华大学衡阳医学院生物化学与分子生物学教研室湖南衡阳421001

重组免疫毒素(recombinant immunotoxin,RIT)是靶向杀伤肿瘤细胞的药物,由抗体与毒素分子连接而成的融合蛋白。其特异性抗体和靶细胞表面的抗原结合,介导毒素分子进入细胞起到杀伤细胞的作用。多种细菌和植物毒素已被用于制备免疫毒素... 详细信息

重组免疫毒素(recombinant immunotoxin,RIT)是靶向杀伤肿瘤细胞的药物,由抗体与毒素分子连接而成的融合蛋白。其特异性抗体和靶细胞表面的抗原结合,介导毒素分子进入细胞起到杀伤细胞的作用。多种细菌和植物毒素已被用于制备免疫毒素。假单胞菌外毒素(pseudomonas exotoxin,PE)是构建免疫毒素的优选分子,被证明具有极高的细胞毒性。由于PE分子的免疫原性强、穿透能力差等原因,使其疗效低于预期。近年来利用各种方法降低RIT的免疫原性,去掉B细胞表位和T细胞表位,成为研究重点。现就PE的结构、功能以及免疫原性的降低等作一概述。

关键词：假单胞菌外毒素重组免疫毒素 B细胞表位 T细胞表位免疫原性

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驱动蛋白16B在姜黄素影响HepG2细胞脂质摄取中的作用

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中国动脉硬化杂志 2021年第11期29卷 949-954页

作者：张彩平袁育林李博洁蒋素素王楚瑶邵倞琦袁凌志赵倩龙石银南华大学衡阳医学院生物化学与分子生物学教研室湖南省衡阳市421001 岳阳市一人民医院检验中心湖南省岳阳市414000

目的观察姜黄素对人肝癌细胞HepG2脂质摄取的影响是否与驱动蛋白16B(KIF16B)有关,探索姜黄素的降脂机制。方法(1)将体外培养的HepG2细胞分为对照组(姜黄素浓度为0)和20、30、40μmol/L姜黄素处理组,CCK8法检测细胞活性,以确定合适的姜... 详细信息

目的观察姜黄素对人肝癌细胞HepG2脂质摄取的影响是否与驱动蛋白16B(KIF16B)有关,探索姜黄素的降脂机制。方法(1)将体外培养的HepG2细胞分为对照组(姜黄素浓度为0)和20、30、40μmol/L姜黄素处理组,CCK8法检测细胞活性,以确定合适的姜黄素药物作用浓度。(2)将体外培养的HepG2细胞分为空白对照组、阴性对照组、瑞舒伐他汀(阳性药物)组和姜黄素组。胆固醇检测试剂盒检测HepG2细胞内胆固醇含量;荧光显微镜观察细胞对DiI标记的低密度脂蛋白(DiI-LDL)的摄取情况;Western blot检测细胞内KIF16B和低密度脂蛋白受体(LDLR)的蛋白表达;激光共聚焦显微镜观察细胞内KIF16B与LDLR荧光共定位情况。结果25μmol/L姜黄素不影响HepG2细胞生长。与阴性对照组相比,姜黄素组HepG2细胞内总胆固醇和游离胆固醇水平明显增高,细胞摄取DiI-LDL明显增加,细胞内KIF16B、LDLR蛋白表达显著升高,细胞内KIF16B和LDLR蛋白的荧光共定位显著增加(P<0.05)。结论姜黄素作用于HepG2细胞导致的LDL脂质摄取、LDLR表达增加与KIF16B和LDLR的相互作用有关。

关键词：驱动蛋白16B 姜黄素 HepG2细胞低密度脂蛋白胆固醇低密度脂蛋白受体

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在我校生物技术专业实施研讨课的探索与心得

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山东化工 2020年第16期49卷 167-168页

作者：苏泽红何芳丽李俐娟练高建衡阳医学院生物化学与分子生物学教研室南华大学湖南衡阳421001 南华大学医学研究中心湖南衡阳421001

通过课堂教学改革来培养创新型生物技术专业人才至关重要,本课题组结合国内其他高校研究和教学现状,在生物技术专业实施《分子生物学》研讨课,本文从研讨课的课前准备、课堂讨论、课后总结和考核方式等四个方面介绍实施情况和心得,并从... 详细信息

通过课堂教学改革来培养创新型生物技术专业人才至关重要,本课题组结合国内其他高校研究和教学现状,在生物技术专业实施《分子生物学》研讨课,本文从研讨课的课前准备、课堂讨论、课后总结和考核方式等四个方面介绍实施情况和心得,并从学生总结反馈的信息得出,相较于传统教学模式,研讨课更能激发学生的学习兴趣,提高学生自主学习的能力,教学效果良好。

关键词：研讨课分子生物学生物技术自主学习

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KIF16B可能参与LDLR在体外培养的肝细胞膜上的分布

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中国动脉硬化杂志 2021年第9期29卷 742-750页

作者：邵倞琦蒋素素赵倩袁育林袁凌志龙石银尹卫东张彩平廖端芳南华大学衡阳医学院生物化学与分子生物学教研室湖南省衡阳市421001 湖南中医药大学湘产大宗药材品质评价湖南省重点实验室湖南省长沙市410208

目的探究驱动蛋白超家族成员16B(KIF16B)在低密度脂蛋白受体诱导降解蛋白(IDOL)调节肝细胞摄取低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)中的作用。方法干扰/过表达IDOL(RNAi/OE-IDOL)的慢病毒感染HepG2和LO2细胞,通过倒置荧光显微镜来观测病毒感染效果... 详细信息

目的探究驱动蛋白超家族成员16B(KIF16B)在低密度脂蛋白受体诱导降解蛋白(IDOL)调节肝细胞摄取低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)中的作用。方法干扰/过表达IDOL(RNAi/OE-IDOL)的慢病毒感染HepG2和LO2细胞,通过倒置荧光显微镜来观测病毒感染效果;油红O染色观察细胞内脂质蓄积水平;DiI荧光染料标记的LDL(DiI-LDL)摄取实验检测肝细胞对LDLC的摄取能力,流式细胞术检测肝细胞表面低密度脂蛋白受体(LDLR)丰度;Western blot检测IDOL、KIF16B及LDLR蛋白的表达变化,并免疫共沉淀进一步检测蛋白之间的相互作用。结果两种感染慢病毒的肝细胞内均显示绿色荧光,提示RNAi/OE-IDOL的慢病毒已感染HepG2和LO2细胞;与无慢病毒感染的Control组比较,OE-IDOL组的细胞内脂质含量显著减少(P<0.05),LDLC的摄取显著减弱(P<0.05),且肝细胞表面LDLR丰度显著降低(P<0.01);RNAi-IDOL组的细胞内脂滴含量显著增加(P<0.01),LDLC摄取增强,且肝细胞表面LDLR丰度显著增高(P<0.01);与慢病毒载体的Control组比较,RNAi-IDOL组LDLR蛋白和KIF16B蛋白的表达升高(P<0.01),且KIF16B与LDLR的相互作用增强;OE-IDOL组LDLR蛋白和KIF16B蛋白的表达降低(P<0.05),LDLR与KIF16B相互作用随之减弱。结论IDOL调节的肝细胞摄取LDLC的过程可能与KIF16B跟LDLR之间存在相互作用有关。

关键词：驱动蛋白驱动蛋白16B 低密度脂蛋白受体 LDLR诱导降解蛋白动脉粥样硬化

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