目的观察胃癌相关蛋白质POSTN在胃黏膜癌变过程中的表达与意义,为胃癌的早期诊断、病理分型与评估预后提供有价值的实验依据。方法收集正常胃黏膜、癌旁及胃癌组织标本8例,采用Western blotting检测POSTN蛋白在上述组织中的表达;其次利用免疫组化染色观察POSTN蛋白在正常胃黏膜、癌旁及胃癌组织中的表达,并分析其在胃黏膜癌变过程中表达的意义。结果 Western blotting结果显示,胃癌组织中POSTN蛋白表达明显高于正常胃黏膜和癌旁组织(P<0.01),同时癌旁组织中的表达高于正常胃黏膜组织(P<0.01)。免疫组化结果显示,正常胃黏膜、癌旁和胃癌组织中POSTN蛋白表达的阳性率分别为14.71%、46.15%和77.48%,而胃高、中和低分化腺癌中表达的阳性率分别为60%、70.6%和81.4%。POSTN蛋白表达与胃癌组织的分化程度相关,即组织分化降低,其表达增强(P<0.01)。结论胃癌组织中POSTN蛋白表达高于正常胃黏膜和癌旁组织,癌旁组织中的表达高于正常胃黏膜组织,该蛋白表达与胃癌组织的发生和分化程度有关。
目的 :探讨微RNA-374b-5p(micro RNA-374b-5p,miR-374b-5p)及其靶基因反转录富含半胱氨酸蛋白(reversion-inducing-cysteine-rich protein with Kazal motifs,RECK)在胃癌发生和发展中的作用。方法 :采用人胃癌MGC-803细胞建立BABL/c裸...
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目的 :探讨微RNA-374b-5p(micro RNA-374b-5p,miR-374b-5p)及其靶基因反转录富含半胱氨酸蛋白(reversion-inducing-cysteine-rich protein with Kazal motifs,RECK)在胃癌发生和发展中的作用。方法 :采用人胃癌MGC-803细胞建立BABL/c裸鼠移植瘤模型,当移植瘤体积达到60 mm3左右时,将小鼠随机分为3组(每组5只),即空白对照组、阴性对照组[体内转染无意义微RNA序列(miR-374b-5p negative control inhibitor)]和miR-374b-5p抑制组(体内转染miR-374b-5p inhibitor),并观察各组移植瘤的生长情况。在接种MGC-803细胞后第35天时(最后一次治疗3 d后)处死各组小鼠,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察移植瘤标本的病理学特征;实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)检测移植瘤组织中miR-374b-5p的表达水平;荧光素酶活性检测验证miR-374b-5p是否靶向作用于RECK基因;分别采用RFQPCR和免疫组织化学法检测移植瘤中RECK mRNA和蛋白的表达情况。结果 :miR-374b-5p抑制组移植瘤体积在转染miR-374b-5p inhibitor 9 d后(即接种细胞的第23天后),开始明显小于空白对照组和阴性对照组(P<0.05),而空白对照组和阴性对照组小鼠的移植瘤体积差异无统计学意义。病理学检测结果提示,miR-374b-5p抑制组移植瘤的恶性程度较空白对照组和阴性对照组明显下降。miR-374b-5p抑制组移植瘤中miR-374b-5p的表达水平均较空白对照组和阴性对照组明显下调(P<0.05)。荧光素酶报告载体系统证实,RECK是miR-374b-5p直接调控的靶基因;miR-374b-5p抑制组移植瘤中RECK m RNA及蛋白的表达水平均显著高于空白对照组和阴性对照组(P均<0.05)。结论 :miR-374b-5p可能通过RECK通路在胃癌的发生和发展中扮演着癌基因的角色。
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