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限制性内切酶酶切后去磷酸化联合蓝白斑筛选检测KRAS基因第12位稀有突变

中南医学科学杂志 2024年第1期52卷 26-30页

作者：周翠兰陈婕许云思付乙人彭翠英南华大学衡阳医学院基础医学院应用解剖学与生殖医学研究所湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院生态健康与人类重要疾病防控湖南省高校重点实验室湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院生物毒理与生态修复衡阳市重点实验室湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院有色金属矿区耕地重金属污染生态阻抗技术研究所衡阳市重点实验室湖南衡阳421001

目的研究限制性内切酶酶切后去磷酸化联合蓝白斑筛选检测KRAS基因第12位密码子稀有突变的可行性。方法将采用限制性内切酶酶切后去磷酸化联合蓝白斑筛选检测方法作为实验组,限制性内切酶酶切联合蓝白斑筛选检测方法作为对照组。对照组将... 详细信息

目的研究限制性内切酶酶切后去磷酸化联合蓝白斑筛选检测KRAS基因第12位密码子稀有突变的可行性。方法将采用限制性内切酶酶切后去磷酸化联合蓝白斑筛选检测方法作为实验组,限制性内切酶酶切联合蓝白斑筛选检测方法作为对照组。对照组将KRAS基因第12位密码子突变型(MUT)/野生型(WT)(MUT/WT 12)质粒按0∶1、1∶300、1∶1000、1∶3000的比例混合,限制性内切酶酶切PCR产物,酶切后产物进行蓝白斑筛选。实验组将MUT/WT 12质粒按0∶1、1∶3000、1∶10000、1∶30000的比例混合,在对照组方法的基础上酶切产物去磷酸化后再蓝白斑筛选。比较两组蓝白斑克隆数。限制性内切酶酶切鉴定实验组MUT/WT 12为1∶30000的阳性克隆,一代测序阳性克隆验证插入片段的序列。采用限制性内切酶酶切后去磷酸化联合蓝白斑筛选验证26例肺癌病例游离DNA的KRAS基因第12位稀有突变。结果对照组1∶3000的培养皿上白色克隆17个,蓝色克隆2329个,白色/蓝色克隆为1/137;而实验组1∶30000的培养皿上白色克隆23个,蓝色克隆394个,白色/蓝色克隆为1/17,1∶30000实验组白色/蓝色克隆比例明显高于1∶3000对照组。实验组1∶30000培养血上5个阳性克隆酶切鉴定出3个阳性,其插入片段为KRAS第12位突变片段。限制性内切酶酶切后去磷酸化联合蓝白斑筛选26例肺癌病例可检测出2例为KRAS基因第12位密码子突变。结论采用限制性内切酶酶切后去磷酸化联合蓝白斑筛选可检测出1∶30000 KRAS基因稀有突变。

关键词：限制性内切酶酶切KRAS基因蓝白斑技术去磷酸化稀有突变

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病区封闭式管理模式对社区医院感染管理控制效果的影响

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中国卫生产业 2024年第2期21卷 43-46页

作者：刘志扬侯沁谢忠成陈诺李靓南华大学公共卫生学院湖南衡阳421000 南华大学心研所湖南衡阳421000 南华大学应用解剖与生殖医学研究所湖南衡阳421000 龙岗区第五人民医院禾花社区健康服务中心广东深圳518111 南华大学衡阳医学院湖南衡阳421000

目的分析病区封闭式管理模式对社区医院感染管理控制效果的影响。方法选取2022年6月—2023年6月龙岗区第五人民医院禾花社区健康服务中心50名医务人员作为研究对象,2022年6—12月行病区半开放式管理,为对照组,2023年1—6月行病区封闭式... 详细信息

目的分析病区封闭式管理模式对社区医院感染管理控制效果的影响。方法选取2022年6月—2023年6月龙岗区第五人民医院禾花社区健康服务中心50名医务人员作为研究对象,2022年6—12月行病区半开放式管理,为对照组,2023年1—6月行病区封闭式管理模式,为观察组,对比不同管理模式下病区环境物体(门把手、座椅、地面、仪器)表面清洁合格率、医师对感染管理满意度、医务人员工作能力(手卫生消毒、环境处理、防护管理)评分。结果观察组病区环境物体表面清洁合格率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组医师对感染管理满意度高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组医务人员工作能力评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在社区医院管理中采取病区封闭式管理模式可有效提高社区医院感染管理控制效果,提升医务人员的专业能力,有助于降低医院感染发生率,保证了病区环境与表面物体的清洁合格率,较常规管理模式更能提高医师对感染管理的满意度。

关键词：病区封闭式管理社区医院医院感染管理

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海马小胶质细胞在小鼠慢性炎性痛所致负性情绪中的形态变化

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解剖学报 2021年第3期52卷 352-357页

作者：李威刘志文曾佳玉曾学晴袁婧钟小林万炜南华大学衡阳医学院应用解剖学与生殖医学研究所湖南衡阳421001 南华大学附属第二医院麻醉科湖南衡阳421001 南华大学附属第一医院内分泌疾病与代谢研究所湖南衡阳421001 海南医学院热带脑科学研究与转化重点实验室海口571199

目的探讨完全弗氏佐剂(CFA)所致慢性炎性痛小鼠模型情绪及海马小胶质细胞形态的改变。方法32只ICR雄性小鼠随机分成生理盐水对照组(NS)和完全弗氏佐剂组(CFA)。右后爪足底注射CFA建立小鼠慢性炎性痛模型。采用Von Frey纤维针测量小鼠右... 详细信息

目的探讨完全弗氏佐剂(CFA)所致慢性炎性痛小鼠模型情绪及海马小胶质细胞形态的改变。方法32只ICR雄性小鼠随机分成生理盐水对照组(NS)和完全弗氏佐剂组(CFA)。右后爪足底注射CFA建立小鼠慢性炎性痛模型。采用Von Frey纤维针测量小鼠右足底注射CFA后机械痛阈的变化;采用旷场实验检测小鼠活动度和焦虑样行为;采用糖水偏好和被迫游泳实验检测小鼠抑郁样行为;采用免疫组织化学法检测小鼠海马小胶质细胞标记物离子钙接头蛋白抗原(IBA-1)的表达;采用Sholl分析方法分析海马齿状回区小胶质细胞形态变化。结果小鼠痛阈评分结果显示,与NS组相比,CFA组小鼠机械痛阈明显下降(P<0.05)。行为学结果显示,与NS组相比,CFA组小鼠旷场中央格停留时间减少(P<0.01),糖水偏好百分比下降(P<0.01),被迫游泳实验不动时间增加(P<0.001)。免疫组织化学结果显示,与NS组相比,CFA组小鼠海马齿状回区小胶质细胞数目明显增多(P<0.001)。Sholl分析结果显示,与NS组相比,CFA组小鼠海马齿状回区小胶质细胞交点数目减少(P<0.05)。结论在CFA诱导的慢性炎性痛模型中,小鼠的负性情绪可能与海马小胶质细胞形态改变有关。

关键词：完全弗氏佐剂海马小胶质细胞慢性炎性痛负性情绪免疫组织化学小鼠

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DADS抑制XIAP介导的人胃癌HGC27细胞增殖、迁移和侵袭

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中南医学科学杂志 2022年第3期50卷 323-326页

作者：刘芳李志敏曹振华何慧苏琦苏波南华大学衡阳医学院肿瘤研究所湖南省衡阳市421001 南华大学衡阳医学院基础医学院应用解剖与生殖医学研究所湖南省衡阳市421001 南华大学衡阳医学院药学院药物药理研究所湖南省衡阳市421001

目的研究二烯丙基二硫(DADS)对X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)过表达胃癌HGC27细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法建立XIAP过表达HGC27细胞株;实验设置为Vector组、Vector+DADS组、XIAP组和XIAP+DADS组;DADS处理细胞后,Western blotting... 详细信息

目的研究二烯丙基二硫(DADS)对X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)过表达胃癌HGC27细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法建立XIAP过表达HGC27细胞株;实验设置为Vector组、Vector+DADS组、XIAP组和XIAP+DADS组;DADS处理细胞后,Western blotting检测各组XIAP;MTT和平板克隆实验分析各组细胞的增殖能力;Transwell实验检测各组细胞的迁移、侵袭能力。结果 XIAP过表达细胞增殖率和克隆形成率增高,迁移和侵袭的细胞数增加;DADS处理XIAP过表达细胞后,XIAP表达降低的同时,细胞增殖率和克隆形成率下降,迁移和侵袭的细胞数减少。结论过表达XIAP促进HGC27细胞增殖和迁移侵袭;DADS下调XIAP,抑制HGC27细胞增殖、迁移和侵袭。

关键词：二烯丙基二硫 X连锁凋亡抑制蛋白增殖迁移侵袭 HGC27细胞

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Adiporedoxin对TNF-α诱导血管内皮细胞Integrinα4和Integrinβ1表达的影响

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中南医学科学杂志 2022年第2期50卷 167-170页

作者：苏波杨咏梅刘政海何慧苏琦南华大学衡阳医学院药学院药物药理研究所湖南省衡阳市421001 南华大学衡阳医学院基础医学院应用解剖与生殖医学研究所湖南省衡阳市421001 南华大学衡阳医学院肿瘤研究所湖南省衡阳市421001

目的研究脂过氧化物酶(adiporedoxin,Adrx)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导血管内皮细胞整合素α4(Integrinα4)和整合素β1(Integrinβ1)表达的影响。方法过表达实验分为空载体组、空载体+TNF-α组、Adrx+TNF-α组;si-RNA干扰实验分为si... 详细信息

目的研究脂过氧化物酶(adiporedoxin,Adrx)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导血管内皮细胞整合素α4(Integrinα4)和整合素β1(Integrinβ1)表达的影响。方法过表达实验分为空载体组、空载体+TNF-α组、Adrx+TNF-α组;si-RNA干扰实验分为si-Control组、TNF-α组、si-Adrx+TNF-α组。将Adrx质粒和si-Adrx分别转染HUVEC细胞后,用TNF-α处理细胞,Real-time PCR和Western blotting分别检测Integrinα4和Integrinβ1 mRNA和蛋白水平。结果TNF-α上调Integrinα4、Integrinβ1表达;与单用TNF-α处理组比较,Adrx+TNF-α组细胞Integrinα4和Integrinβ1 mRNA和蛋白水平均显著降低;而用si-RNA下调Adrx表达后,TNF-α诱导的Integrinα4和Integrinβ1 mRNA和蛋白水平均明显升高。结论Adrx负调控TNF-α诱导的HUVEC细胞Integrinα4和Integrinβ1表达。

关键词：脂过氧化物酶肿瘤坏死因子-α 整合素α4 整合素β1 血管内皮细胞

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MCC950下调即早基因的表达缓解甲醛所致小鼠炎性痛

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解剖学报 2021年第6期52卷 870-874页

作者：李威赵可心周鑫谢志艳曾学晴袁婧钟小林万炜杨惠曹文宇南华大学衡阳医学院应用解剖学与生殖医学研究所湖南衡阳421001 南华大学附属第一医院内分泌研究所湖南衡阳421001 南华大学附属第一医院病理科湖南衡阳421001

目的探讨MCC950对甲醛模型小鼠疼痛的影响及可能机制。方法 72只ICR雄性小鼠随机分为生理盐水对照组(NS组),甲醛模型组(F组)、不同浓度梯度MCC950干预组(6.25 mg/kg MCC950+F、12.5 mg/kg MCC950+F、25 mg/kg MCC950+F、50 mg/kg MCC950... 详细信息

目的探讨MCC950对甲醛模型小鼠疼痛的影响及可能机制。方法 72只ICR雄性小鼠随机分为生理盐水对照组(NS组),甲醛模型组(F组)、不同浓度梯度MCC950干预组(6.25 mg/kg MCC950+F、12.5 mg/kg MCC950+F、25 mg/kg MCC950+F、50 mg/kg MCC950+F)。以小鼠累计舔咬足时间评价自发痛行为;采用Real-time PCR方法检测小鼠脊髓即早基因,包括c-Fos、Arc、早期生长反应因子-1(Egr-1) mRNA的表达变化;采用免疫组织化学法检测脊髓背角内c-Fos的表达。结果自发痛评分显示,与NS组相比,F组小鼠出现典型双相痛;与F组相比,12.5 mg/kg、25 mg/kg及50 mg/kg MCC950预处理均可显著缓解甲醛所致小鼠疼痛。Real-time PCR结果显示,与NS组相比,F组小鼠脊髓早期基因(c-Fos、Arc、Egr-1)的mRNA表达均上调,50 mg/kg MCC950预处理后,上述指标的mRNA表达均显著下调。免疫组织化学结果显示,与NS组相比,F组小鼠脊髓背角c-Fos表达明显增加,而用50 mg/kg MCC950预处理后,小鼠脊髓背角c-Fos表达下降。结论 MCC950可有效缓解甲醛所致小鼠炎性痛,其机制可能与下调脊髓即早基因(c-Fos、Arc、Egr-1)的表达有关。

关键词： MCC950 甲醛炎性痛脊髓即早基因实时定量聚合酶链反应小鼠

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间歇性热量限制对辐射所致认知障碍的保护作用

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中华放射医学与防护杂志 2022年第5期42卷 335-342页

作者：吴琼袁蕾余敏刘政海王贞杨惠李彩艾小红何洁万炜海南省热带脑科学研究与转化重点实验室海口571199 湖南省郴州市第一人民医院药剂科郴州423001 南华大学衡阳医学院应用解剖与生殖医学研究所衡阳421001 湖南环境生物职业技术学院医学院衡阳421001 江西省赣州市人民医院病理科赣州341099 南华大学附属第一医院肿瘤放疗科衡阳421001 海南医学院病理学教研室海口571199

目的探讨间歇性热量限制对辐射所致小鼠认知功能障碍的作用及可能机制。方法将36只7周龄c57BL/6J雄性小鼠按随机数表法分为假辐射+随意饮食组(sham-irradiation and ad libitum,Sham-AL)、辐射+随意饮食组(irradiation and ad libitum,I... 详细信息

目的探讨间歇性热量限制对辐射所致小鼠认知功能障碍的作用及可能机制。方法将36只7周龄c57BL/6J雄性小鼠按随机数表法分为假辐射+随意饮食组(sham-irradiation and ad libitum,Sham-AL)、辐射+随意饮食组(irradiation and ad libitum,IR-AL)、辐射+间歇性热量限制组(irradiation and intermittent fasting,IR-IF),每组12只。采用新旧事物识别实验检测各组小鼠认知功能;Western blot分别检测小鼠海马自噬相关基因5(ATG5)、微管相关蛋白1轻链3-II(LC3II)、自噬接头蛋白P62、线粒体阴离子通道蛋白1(VDAC1)、白介素1(IL-1β)、突触囊泡膜蛋白(SYP)、突触蛋白1(SYN-1)、突触后致密物-95(PSD95);免疫荧光法确定VDAC1在小鼠海马中定位。结果与Sham-AL组新事物识别指数(30.02±9.05)相比,IR-AL组小鼠新事物识别指数(-22.45±16.76)下降,两组比较差异有统计学意义(t=3.03,P<0.05)。与Sham-AL组相比,IR-AL组自噬标记蛋白ATG5和LC3II表达下降,抗自噬蛋白P62表达升高,VDAC1蛋白表达下降,IL-1β蛋白表达上升,SYP、SYN-1、PSD95蛋白表达降低(t=2.49、2.19、2.40、3.47、2.87、2.25、2.17、2.31,P<0.05)。与IR-AL组新事物识别指数(-22.45±16.76)相比,IR-IF组小鼠新事物识别指数(21.22±5.62)上升,两组比较差异有统计学意义(t=2.70,P<0.05)。与IR-AL组相比,IR-IF组自噬标记蛋白ATG5和LC3II表达上升,抗自噬蛋白P62表达降低,VDAC1蛋白表达升高,IL-1β蛋白表达下降,SYP、SYN-1、PSD95蛋白表达升高(t=2.88、2.71、3.18、3.18、3.11、3.30、3.35、2.53,P<0.05)。免疫荧光显示,VDAC1与离子钙接头蛋白分子1(IBA-1,小胶质细胞标记物)和神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP,星形胶质细胞标记物)共表达,但与神经元核抗原蛋白(NEUN,神经元标记物)不共表达。结论间歇性热量限制可改善小鼠放射性认知功能障碍,其机制可能与上调海马区VDAC1蛋白表达、诱导自噬发生,最终抑制炎症因子释放和保护神经元突触可塑性有关.

关键词：电离辐射间歇性热量限制认知障碍自噬线粒体阴离子通道蛋白1

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酰胺质子转移成像技术在阻塞性睡眠呼吸暂停中的应用

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临床放射学杂志 2024年第4期43卷 505-509页

作者：张亚茹张晓东陈焱君王逸潇陈俊琦田鑫陈胜华黄文华南华大学应用解剖与生殖医学研究所衡阳医学院南方医科大学第三附属医院放射科南方医科大学第三附属医院康复科南方医科大学第三附属医院耳鼻咽喉科南方医科大学基础医学院人体解剖学国家重点学科广东省医学生物力学重点实验室广东省医学3D打印应用转化工程技术研究中心

目的探讨酰胺质子转移(APT)磁共振成像在诊断阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)患者的可行性。方法前瞻性搜集患有OSA的患者13例和性别、年龄匹配的正常对照组20名,对两组分别进行临床资料分析、临床心理学量表评估,对各感兴趣脑区进行常规磁... 详细信息

目的探讨酰胺质子转移(APT)磁共振成像在诊断阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)患者的可行性。方法前瞻性搜集患有OSA的患者13例和性别、年龄匹配的正常对照组20名,对两组分别进行临床资料分析、临床心理学量表评估,对各感兴趣脑区进行常规磁共振成像及酰胺质子转移成像,计算每个感兴趣区3.5 ppm处酰胺质子不对称磁化转移率(MTRasym),比较不同脑区两组间MTRasym(3.5 ppm)的差异,分析各个脑区的MTRasym(3.5 ppm)与爱普沃思嗜睡程度评价表(ESS)评分的相关性。结果与对照组相比,OSA组患者的双侧海马、左侧尾状核和左侧颞叶白质的MTRasym(3.5 ppm)升高,差异有统计学意义(P均<0.05),余脑区的MTRasym(3.5 ppm)在2组间差异无统计学意义(P均>0.05),左侧豆状核、左侧海马的MTRasym(3.5 ppm)与ESS评分呈正相关(r=0.863,P=0.007;r=0.707,P=0.037)。结论利用APT磁共振成像发现OSA患者双侧海马、左侧尾状核和左侧颞叶白质的MTRasym(3.5 ppm)升高,左侧豆状核、左侧海马的MTRasym(3.5 ppm)与ESS评分具有相关性,提示APT磁共振成像技术可能成为OSA患者早期代谢改变提供诊断依据。

关键词：阻塞性呼吸睡眠暂停磁共振成像酰胺质子转移

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高校学生实验工作倦怠感现状调查

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大学（研究与管理） 2021年第5期 124-127页

作者：李素云孟星圻王晋元南华大学衡阳医学院应用解剖与生殖医学研究所湖南衡阳421000

为了解高校学生在高校实验室完成实验工作时的实验工作倦怠感现状,为帮助高校学生顺利完成实验工作提供参考,本文通过便利抽样方法,对259人进行问卷调查。调查发现,高校学生的实验工作倦怠感为轻度倦怠。多元线性分析表明:性别、年龄、... 详细信息

为了解高校学生在高校实验室完成实验工作时的实验工作倦怠感现状,为帮助高校学生顺利完成实验工作提供参考,本文通过便利抽样方法,对259人进行问卷调查。调查发现,高校学生的实验工作倦怠感为轻度倦怠。多元线性分析表明:性别、年龄、专业、是否独立担任实验负责人、有无医院实习经验是影响高校学生实验工作倦怠感的主要因素(P<0.05)。高校学生对实验室的实验工作有一定的倦怠感,在实验工作中情绪尚佳,去人格化较轻,成就缺失较严重。

关键词：高校学生工作倦怠感现状调查

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三维重建技术在穿支血管解剖中的应用

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解剖学杂志 2021年第6期44卷 530-533页

作者：张继方谭建国陈晓琳连飘飘张康佳张柏城周小兵南华大学衡阳医学院应用解剖学与生殖医学研究所衡阳421001

供养人体皮肤的每一条穿支血管均有一个明确的分布范围,即穿支皮瓣的解剖学供区,也称之为穿支体区[1]。每一条穿支体区借助周边的穿支血管吻合互相连接[2],紧邻解剖学供区的被称之为动力学供区,若再继续向远邻的供区延伸则称之为潜力供... 详细信息

供养人体皮肤的每一条穿支血管均有一个明确的分布范围,即穿支皮瓣的解剖学供区,也称之为穿支体区[1]。每一条穿支体区借助周边的穿支血管吻合互相连接[2],紧邻解剖学供区的被称之为动力学供区,若再继续向远邻的供区延伸则称之为潜力供区[3]。因此,如欲切取“跨区穿支皮瓣”则必须了解其周边连接血管的特性[4]。对尸体标本或活体进行CT血管造影后,应用“后处理软件”可清晰显示全身各部位穿支血管的解剖学细节。

关键词： CT血管造影穿支血管尸体标本三维重建技术供区穿支皮瓣解剖学人体皮肤

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