检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2023年第10期18卷 1226-1230页

作者：李舒怡陈超群南华大学衡阳医学院病原生物学研究所医学免疫学教研室湖南衡阳421001

衣原体(Chlamydiae)感染可引起人和动物的多种疾病。长期以来,衣原体固有的细胞内周期和使用抗生素作为可选择标记的限制阻碍了对该病原体进行基因操作分子工具的发展。然而,最近各类遗传操作工具的发展使我们对改变衣原体基因组的能力... 详细信息

衣原体(Chlamydiae)感染可引起人和动物的多种疾病。长期以来,衣原体固有的细胞内周期和使用抗生素作为可选择标记的限制阻碍了对该病原体进行基因操作分子工具的发展。然而,最近各类遗传操作工具的发展使我们对改变衣原体基因组的能力有了显著提高,这将加速阐明这种顽固性病原体的生物学和发病机制。本综述中阐述了衣原体遗传操作的挑战和可行性分析,以及其相关分子遗传工具的进展。

关键词：衣原体遗传操作分子遗传工具综述

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沙眼衣原体多表位疫苗的构建及其抗感染保护作用

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中南医学科学杂志 2023年第2期51卷 183-187页

作者：刘辉萍李舒怡陈合意陈超群南华大学衡阳医学院病原生物学研究所、医学免疫学教研室湖南衡阳421001

目的构建沙眼衣原体(Ct)多形态膜蛋白D(PmpD)与衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)多表位疫苗,并通过动物实验评价其抗感染保护作用。方法利用生物信息学分析PmpD和CPAF的二级结构、抗原性、T细胞表位和B细胞表位;构建基于PmpD和CPAF多表... 详细信息

目的构建沙眼衣原体(Ct)多形态膜蛋白D(PmpD)与衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)多表位疫苗,并通过动物实验评价其抗感染保护作用。方法利用生物信息学分析PmpD和CPAF的二级结构、抗原性、T细胞表位和B细胞表位;构建基于PmpD和CPAF多表位的重组蛋白RPC、原核表达、纯化RPC蛋白。免疫雌性BABL/c小鼠,ELISA检测小鼠血清IgG、IgG2a/IgG1及脾细胞上清细胞因子水平,CCK-8检测脾细胞增殖;Cm攻毒后,检测生殖道Cm载量以评估多表位融合疫苗RPC的抗感染保护作用。结果成功构建多表位融合蛋白RPC。与PBS组相比,RPC组IgG抗体水平、IgG2a/IgG1比值、脾细胞刺激指数、γ干扰素、白细胞介素-2水平均明显升高(P<0.05);攻毒后RPC组可加快清除小鼠生殖道衣原体。结论基于PmpD与CPAF的多表位融合蛋白RPC免疫小鼠,能诱导细胞免疫和体液免疫应答,有效降低衣原体载量,具有一定的抗感染保护作用。

关键词：沙眼衣原体生物信息学多表位疫苗抗感染保护

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抗生素对小鼠肺等多器官鼠衣原体感染及肠道细菌的影响

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中华结核和呼吸杂志 2025年第5期48卷 448-455页

作者：马璟玥朱翠明田畦张天援刘全忠钟光明刘原君天津医科大学总医院皮肤性病科天津性传播疾病研究所天津300052 南华大学衡阳医学院病原生物学研究所衡阳421001 湖南省妇幼保健院妇产科长沙410028 上海交通大学医学院上海市病毒研究院上海200025 美国德州大学圣安东尼奥健康医学中心微生物免疫教研室德克萨斯州TX78229

目的初步探索抗生素对小鼠肺等多器官鼠衣原体感染的变化、免疫反应及肠道细菌的影响。方法将C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为抗生素组和对照组,对照组给予饮用水,抗生素组给予灌胃2次并饮用含万古霉素和庆大霉素水溶液2周。两组小鼠... 详细信息

目的初步探索抗生素对小鼠肺等多器官鼠衣原体感染的变化、免疫反应及肠道细菌的影响。方法将C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为抗生素组和对照组,对照组给予饮用水,抗生素组给予灌胃2次并饮用含万古霉素和庆大霉素水溶液2周。两组小鼠均鼻内感染鼠衣原体,并持续监测其体重变化。在感染后的第10天,对小鼠实施安乐死,随后检测多个器官中的鼠衣原体载量,并对肺组织进行免疫荧光染色及病理损伤评分。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中鼠衣原体特异性IgG及其分型,流式细胞术分析脾脏细胞因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ、IL-5、IL-13水平。留取小鼠粪便样本qPCR检测肠道细菌组成。应用SPSS26.0软件进行数据统计,组间比较采用方差分析。结果鼻内感染鼠衣原体后两组小鼠体重从第2天开始下降,对照组下降迅速并于第6天开始恢复,抗生素组下降稍慢并于第8天开始恢复。抗生素组小鼠肺、心、肝、脾、肾中鼠衣原体载量高于对照组(均P<0.05),而下消化道(空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠)鼠衣原体载量低于对照组(均P<0.01)。肺组织免疫荧光染色抗生素组鼠衣原体数为(8.94±4.13)IFU/低倍镜视野,高于对照组的(3.73±1.49)IFU/低倍镜视野(F=7.06,P<0.05);炎症细胞浸润且病理损伤评分为(3.12±0.59)分,也高于对照组的(1.80±0.69)分(F=10.47,P<0.05)。抗生素组血清鼠衣原体特异性IgG抗体水平低于对照组(F=5.95,P<0.05),脾脏CD4^(+)和CD8^(+)T细胞的细胞因子TNF-α水平高于对照组(均P<0.05),而IL-13水平低于对照组(均P<0.05)。抗生素处理后小鼠肠道细菌中拟杆菌比例显著降低(F=97.57,P<0.01),而厚壁菌比例升高(F=154.51,P<0.01)。鼠衣原体感染后对照组拟杆菌、α-变形菌和产气荚膜梭菌比例降低(均P<0.05),阿克曼菌比例升高(F=9.58,P<0.01);抗生素组拟杆菌和厚壁菌比例降低(F=4.85,P<0.05;F=25.35,P<0.01),疣微菌和阿克曼菌比例升高(F=11.44、F=15.46,P<0.01)。结论抗生素导致小鼠肺等实质脏器鼠衣原体感染和肺组织病理损伤加重,血清IgG减少、脾脏TNF-α增加和IL-13减少,并引发肠道细菌组成变化。

关键词：抗生素肺炎鼠衣原体免疫反应肠道细菌

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肺炎嗜衣原体Cpn0797蛋白的生物信息学分析及其单克隆抗体制备鉴定

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中国人兽共患病学报 2012年第2期28卷 103-107页

作者：陈超群吴移谋任林刘良专南华大学医学院微生物学与免疫学教研室病原生物学研究所衡阳421001 南华大学附属第一医院衡阳421001

目的生物信息学分析肺炎嗜衣原体Cpn0797蛋白的结构,制备特异性的抗Cpn0797蛋白的单克隆抗体。方法用ProtParam、SignalP、NPS@、和PSORT等软件对Cpn0797蛋白的理化参数、信号肽、二级结构、蛋白亚细胞定位进行分析;原核表达纯化GST-Cpn... 详细信息

目的生物信息学分析肺炎嗜衣原体Cpn0797蛋白的结构,制备特异性的抗Cpn0797蛋白的单克隆抗体。方法用ProtParam、SignalP、NPS@、和PSORT等软件对Cpn0797蛋白的理化参数、信号肽、二级结构、蛋白亚细胞定位进行分析;原核表达纯化GST-Cpn0797融合蛋白,以其为免疫原免疫BALB/c小鼠,杂交瘤技术制备单克隆抗体,采用间接免疫荧光法鉴定单克隆抗体的亚类和特异性。结果生物信息学分析表明Cpn0797蛋白二级结构以无规则卷曲为主;成功地建立了能稳定分泌抗Cpn0797蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,单克隆抗体能特异性的识别Cpn0797内源性蛋白。结论成功制备特异性的Cpn0797单克隆抗体,为进一步探究Cpn0797蛋白的生物学功能提供实验基础。

关键词：肺炎嗜衣原体 Cpn0797 生物信息学单克隆抗体

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沙眼衣原体CT058蛋白在感染细胞中的定位分析

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微生物学通报 2011年第12期38卷 1863-1868页

作者：陈超群吴移谋任林李忠玉南华大学医学院微生物学与免疫学教研室/病原生物学研究所湖南衡阳421001 南华大学附属第一医院检验科湖南衡阳421001

分析沙眼衣原体CT058蛋白在感染细胞中的定位。克隆表达CT058蛋白;纯化的CT058融合蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体;间接免疫荧光法对CT058蛋白在沙眼衣原体感染细胞中的定位进行分析;Western blot检测CT058蛋白在原体和网状体中的表达情况... 详细信息

分析沙眼衣原体CT058蛋白在感染细胞中的定位。克隆表达CT058蛋白;纯化的CT058融合蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体;间接免疫荧光法对CT058蛋白在沙眼衣原体感染细胞中的定位进行分析;Western blot检测CT058蛋白在原体和网状体中的表达情况。间接免疫荧光染色实验显示CT058蛋白位于包涵体内;鼠抗GST-CT058抗体与GST-CT058融合蛋白吸附后特异性染色消失,而与GST-CT232融合蛋白吸附后仍然可见GST-CT058抗体的包涵体染色特征;Western blot证实CT058蛋白在纯化的原体和网状体上均有表达。CT058蛋白定位于沙眼衣原体感染细胞的包涵体内。

关键词：沙眼衣原体 CT058 亚细胞定位

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日本血吸虫童虫细胞与非细胞型免疫原在小鼠免疫部位滞留的动态观察

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中国病原生物学杂志 2010年第1期5卷 29-31,I0006页

作者：曾铁兵喻容刘碧源蔡力汀杨胜辉方会龙曾庆仁南华大学医学院病原生物学研究所湖南衡阳421001 长沙市中心医院检验科中南大学基础医学院细胞与分子实验中心湘南学院微生物与免疫学教研室

目的观察日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)童虫细胞型免疫原和童虫细胞碎片免疫原免疫小鼠后在免疫部位滞留的动态变化。方法昆明鼠实验组A和B经大腿肌肉分别注射107日本血吸虫原代童虫细胞(pJCs)和相当剂量的童虫细胞碎片(JCFs),... 详细信息

目的观察日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)童虫细胞型免疫原和童虫细胞碎片免疫原免疫小鼠后在免疫部位滞留的动态变化。方法昆明鼠实验组A和B经大腿肌肉分别注射107日本血吸虫原代童虫细胞(pJCs)和相当剂量的童虫细胞碎片(JCFs),对照组C注射PBS。分别在注射后1、3、6、9和12 d,各组随机处理4或2只小鼠,从注射部位定量获取肌肉组织,用Western blot法和免疫组化法观察、比较两种类型抗原滞留的动态变化;用组织病理学方法观察发生的炎症反应。结果Western blot显示,A组在注射后各时间点均检测到分子质量单位为75 ku的特异性抗原条带,B组在注射后第6 d该条带即消失,C组未检出该条带。免疫组化检测结果与Western blot相符。组织病理学检查结果显示,A组在免疫后第12 d仍可见肌细胞间隙内大量炎性细胞浸润,B组在免疫后第12 d炎性细胞基本消失,C组未见炎性反应。结论血吸虫童虫细胞型免疫原较童虫细胞碎片免疫原在免疫部位可滞留更长时间,引起更持久的炎性反应,这可能是其诱生高保护性抗血吸虫病免疫的重要机制之一。

关键词：血吸虫日本童虫细胞型抗原抗原消失动态

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日本血吸虫童虫细胞与免疫调节剂联用诱导小鼠免疫保护性效果观察

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中国现代医药杂志 2010年第5期12卷 12-14页

作者：曾铁兵喻容刘碧源蔡力汀杨胜辉方会龙曾庆仁南华大学医学院病原生物学研究所湖南衡阳421001 湖南省长沙市中心医院检验科南华大学公共卫生学院中南大学基础医学院细胞与分子实验中心湘南学院微生物与免疫学教研室

目的观察单用日本血吸虫(SJ)童虫细胞(SC)和联用免疫调节剂诱生小鼠免疫保护性的效果。方法制备感染后第18dSC;实验昆明小鼠分为8组:A组(PBS)、B组(SC)、C组(IL-2)、D组(IL-2+SC)、E组(IFN-γ)、F组(IFN-γ+SC)、G组(香菇多糖)、H组(香... 详细信息

目的观察单用日本血吸虫(SJ)童虫细胞(SC)和联用免疫调节剂诱生小鼠免疫保护性的效果。方法制备感染后第18dSC;实验昆明小鼠分为8组:A组(PBS)、B组(SC)、C组(IL-2)、D组(IL-2+SC)、E组(IFN-γ)、F组(IFN-γ+SC)、G组(香菇多糖)、H组(香菇多糖+SC)。腹股沟皮下间隔2w免疫1次,共3次。于末次免疫第4w攻击感染,第35d后剖杀小鼠计数虫荷及每克肝卵数(LEPG),计算减虫率和LEPG减少率。ELISA测定第2、3次免疫后及攻击前小鼠血清中特异性抗童虫可溶性抗原(SWSA)的抗体。结果保护性效果显示:与A组比较,B、C、D、E、F、G和H组的减虫率分别为43.3%、13.5%、36.1%、32.7%、46.2%、18.3%和33.7%,LEPG减少率分别为59.8%、26.6%、52.1%、47.7%、57.7%、34.0%和53.7%。各免疫调节剂与SC联合免疫组与单用SC组比较,特异性抗体水平差异无统计学意义。结论SC能诱生小鼠较明显的免疫保护性,单用IFN-γ也有一定的减虫和减卵效果,但免疫增强剂均未能显著提高SC诱生的免疫保护性效果和体液免疫应答水平。

关键词：日本血吸虫童虫细胞免疫调节剂保护性效果

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双嗜性逆转录病毒感染日本血吸虫细胞的生物学理论与可行性探讨

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中国病原生物学杂志 2009年第10期4卷 744-753,776,F0003页

作者：杨胜辉秦志强曾庆仁曾铁兵刘彦刘碧源蔡力汀喻容张顺科兰玲梅中南大学湘雅医学院寄生虫学系湖南长沙410013 湖南中医药大学病原生物学与免疫学教研室湖南长沙410208 南华大学病原生物学研究所湖南衡阳421001

目的探讨用双嗜性逆转录病毒载体将外源基因导入日本血吸虫(Sj)细胞的生物学理论与实验依据。方法用生物信息学方法对双嗜性逆转录病毒rRam-1受体同源性分布、结构与功能作系统的分析与比较;利用携带外源E77.43基因的双嗜性逆转录病毒感... 详细信息

目的探讨用双嗜性逆转录病毒载体将外源基因导入日本血吸虫(Sj)细胞的生物学理论与实验依据。方法用生物信息学方法对双嗜性逆转录病毒rRam-1受体同源性分布、结构与功能作系统的分析与比较;利用携带外源E77.43基因的双嗜性逆转录病毒感染Sj童虫培养细胞,经PCR和RT-PCR检测感染细胞目的基因(E77.43)的整合与表达。结果根据生物信息学分析结果推断,Sj细胞膜上存在的SjCHGC09605和SjCHGC05362两种蛋白为非分泌性跨膜蛋白,可能具有细胞膜离子转运通道或受体蛋白的功能及双嗜性逆转录病毒感染的膜受体样作用,可能参与病毒对细胞的吸附和穿入过程;利用携带外源E77.43基因的双嗜性逆转录病毒感染Sj童虫培养细胞后,用PCR及RT-PCR检测到目的基因整合与表达,扩增的目的片段大小为330 bp,与理论值相符。结论用载有E77.43基因的双嗜性逆转录病毒感染Sj童虫细胞获得成功,推测SjCHGC09605和SjCHGC05362两种与rRam-1受体同源的蛋白可能是Sj感染过程中起作用的分子。研究结果为下一步用双嗜性逆转录病毒载体转导永生化基因到Sj细胞提供了生物学理论与实验依据。

关键词：双嗜性逆转录病毒受体同源蛋白血吸虫,日本培养细胞基因整合与表达

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