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二烯丙基二硫增强DJ-1过表达人胃癌SGC7901细胞对5-FU的敏感性

中国药理学通报 2024年第1期40卷 99-105页

作者：寻艺夏红李志敏刘芳苏琦苏波南华大学衡阳医学院肿瘤研究所湖南省高校肿瘤细胞与分子病理学重点实验室湖南省胃癌防治研究中心南华大学附属第一医院肿瘤科南华大学衡阳医学院药学院药物药理研究所湖南衡阳421001

目的探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide, DADS)是否增强DJ-1(protein/nucleic acid deglycase,蛋白/核酸去糖化酶)过表达人胃癌SGC7901细胞对5-FU(5-fluorouracil, 5-氟尿嘧啶)的敏感性。方法实验分为Control组、DADS组、VCR(Vincristine,长春新碱)组、VCR+DADS组、DJ-1组、DJ-1+DADS组;MTT检测DADS对5-FU抑制细胞增殖的影响;流式细胞术检测DADS对细胞凋亡的影响;qRT-PCR、Western blot、免疫荧光检测DADS对耐药相关基因表达的影响。结果 DADS增强5-FU对VCR耐药细胞和DJ-1过表达细胞增殖的抑制作用;DADS诱导VCR耐药细胞凋亡;DADS下调DJ-1表达、诱导DJ-1过表达细胞凋亡;过表达DJ-1上调P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)、Bcl-2、XIAP(X连锁凋亡抑制蛋白),下调caspase-3表达;DADS降低DJ-1过表达细胞和VCR耐药细胞P-gp、Bcl-2、XIAP,升高caspase-3表达。结论 DADS能增强DJ-1过表达细胞对5-FU的敏感性,与其拮抗DJ-1介导的P-gp、Bcl-2、XIAP上调、caspase-3下调有关。

关键词：二烯丙基二硫 DJ-1 P-糖蛋白胃癌细胞耐药 5-氟尿嘧啶

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肠道微生物菌群成像标记策略及其应用的研究进展

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有机化学 2022年第5期42卷 1375-1386页

作者：李娜谭啸峰杨晴来南华大学衡阳医学院基础医学院肿瘤研究所湖南省肿瘤细胞与分子病理学重点实验室分子影像探针实验室湖南衡阳421001

哺乳动物肠道中的微生物菌群在维持宿主生理状态和病理改变中起着非常重要的作用,因此肠道微生物菌群的检测对宿主健康有着重要意义.传统的染色标记方法存在着特异性差、与活菌不相容、受其他影响因素多等问题,因此限制了对肠道微生物... 详细信息

哺乳动物肠道中的微生物菌群在维持宿主生理状态和病理改变中起着非常重要的作用,因此肠道微生物菌群的检测对宿主健康有着重要意义.传统的染色标记方法存在着特异性差、与活菌不相容、受其他影响因素多等问题,因此限制了对肠道微生物形态以及功能方面的深入研究.在众多的成像技术中,荧光成像技术可以显示肠道中共生菌、致病菌以及机会性致病菌的位置,还可以提供有关细菌活力、代谢交换以及宿主和微生物之间的免疫相互作用等信息,且荧光成像检测技术具有无创、对组织损伤小、特异性高、灵敏度高等优点,所以在肠道微生物检测中得到了广泛的应用.荧光成像技术在肠道微生物菌群成像研究方面发挥着重要作用,而性能优越的荧光标记探针是肠道微生物菌群荧光成像的关键因素.本篇综述主要总结了针对不同的肠道菌群而设计的标记策略,主要包括荧光探针和同位素探针,分别就代谢标记、非代谢标记以及代谢产物的特异性标记等方法进行了总结讨论,最后对该研究方向的发展前景进行了展望.

关键词：肠道微生物成像荧光探针生物正交反应肽聚糖标记 D-型氨基酸代谢标记

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C1GALT1基因在胃癌组织中的表达及其对胃癌BGC-823细胞生物学行为的影响

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临床与实验病理学杂志 2024年第6期40卷 603-608页

作者：乔沐川李俊儒罗玲夏童陈艳华胡梦龙谢海龙南华大学衡阳医学院肿瘤研究所/湖南省肿瘤细胞分子病理学重点实验室衡阳421009 南华大学附属第二医院肿瘤内科衡阳421009

目的探讨C1GALT1在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞BGC-823生物学行为的影响。方法采用生物信息学、qRT-PCR和Western blot法分析C1GALT1 mRNA和蛋白在胃癌组织和正常胃黏膜组织、胃癌细胞和正常胃黏膜细胞中的表达,以C1GALT1 cDNA序列... 详细信息

目的探讨C1GALT1在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞BGC-823生物学行为的影响。方法采用生物信息学、qRT-PCR和Western blot法分析C1GALT1 mRNA和蛋白在胃癌组织和正常胃黏膜组织、胃癌细胞和正常胃黏膜细胞中的表达,以C1GALT1 cDNA序列为靶点设计siRNA瞬时转染BGC-823细胞,采用Transwell实验检测C1GALT1-siRNA对胃癌BGC-823细胞迁移和侵袭能力的影响。运用Western blot法检测BGC-823细胞在转染C1GALT1-siRNA后上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白的表达。结果C1GALT1在胃癌组织和细胞(BGC-823、SGC-7901、MGC-803)中呈高表达(P<0.05);干扰BGC-823细胞中C1GALT1表达后,BGC-823细胞迁移和侵袭能力均下降(P<0.05),上皮细胞标志物E-cadherin和Claudin-1蛋白表达水平均升高,间充质细胞标志物vimentin和Slug蛋白表达水平均下降(P<0.05)。结论C1GALT1在胃癌组织和细胞中高表达,C1GALT1基因沉默后能抑制胃癌细胞BGC-823的迁移和侵袭能力,其机制可能与EMT相关。

关键词：胃肿瘤 C1GALT1 侵袭迁移上皮-间充质转化

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慢性束缚应激对小鼠海马星形胶质细胞表型转换及抑郁样行为的影响

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解剖学报 2023年第1期54卷 42-49页

作者：时萌萌张圆李菁罗湘林张渊徐杨钟小林曹文宇南华大学衡阳医学院应用解剖学与生殖医学研究所湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院肿瘤研究所肿瘤细胞和分子病理学湖南省重点实验室湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院生理学教研室和神经科学研究所湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院第一附属医院临床医学研究所湖南衡阳421001

目的探讨慢性束缚应激(CRS)对小鼠海马星形胶质细胞表型转换及抑郁样行为的影响。方法48只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(control)、模型组(CRS)、氟西汀(FLX)药物干预组(CRS+FLX),每组各16只。慢性束缚应激3周建立抑郁小鼠模型,应激的... 详细信息

目的探讨慢性束缚应激(CRS)对小鼠海马星形胶质细胞表型转换及抑郁样行为的影响。方法48只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(control)、模型组(CRS)、氟西汀(FLX)药物干预组(CRS+FLX),每组各16只。慢性束缚应激3周建立抑郁小鼠模型,应激的第8天至第21天,CRS+FLX组于应激前30 min腹腔注射FLX(10 mg/kg),control组及CRS组注射等体积生理盐水。采用旷场实验以及糖水偏好实验检测各组小鼠行为变化;采用免疫组织化学法和Western blotting检测星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达;Real-time PCR检测海马A1和A2型星形胶质细胞标记物的表达。结果与control组相比,CRS组小鼠表现出明显的抑郁样行为,包括糖水偏好百分比显著降低(P<0.0001),体重明显较低(P<0.05),旷场实验在中央区域活动的距离明显降低(P<0.0001),FLX干预可逆转CRS所诱导的抑郁样行为表现(P<0.05);与control组相比,CRS组小鼠海马星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达明显上调(P<0.05),而FLX可下调小鼠海马GFAP的表达(P<0.05);与control组相比,CRS组小鼠海马区A1表型标记物[(H2D1、鸟苷酸结合蛋白2(GBP2)、Fk-506结合蛋白(FKBP5)、Amigo2)]mRNA表达水平上调(P<0.05),A2表型标志物mRNA水平无明显改变(P>0.05);FLX干预后可显著降低A1表型标志物mRNA表达水平(P<0.05),对A2表型标志物mRNA表达水平无显著影响(P>0.05);与control组相比,CRS组小鼠海马A1型标记物(C3、Fkbp5、GBP2)蛋白表达水平上调(P<0.05),A2型标记物CD14蛋白表达无明显改变(P=0.8361),FLX干预后可显著下调A1型标记物的蛋白水平(P<0.05),而对CD14的蛋白表达无明显影响(P=0.5881)。结论慢性束缚应激模型中小鼠的抑郁样行为可能与星形胶质细胞的表型改变相关,且主要是A1型标记物在星形胶质细胞的高表达。

关键词：慢性束缚应激抑郁症星形胶质细胞海马氟西汀实时定量聚合酶链反应小鼠

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二烯丙基二硫通过miR-7下调XIAP抑制人胃癌SGC7901细胞增殖与迁移侵袭

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中国药理学通报 2022年第8期38卷 1164-1169页

作者：刘芳李志敏曹振华何慧苏琦苏波南华大学衡阳医学院肿瘤研究所、湖南省高校肿瘤细胞与分子病理学重点实验室湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院应用解剖与生殖医学研究所湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院药物药理研究所湖南衡阳421001

目的探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)是否通过miR-7下调X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP),抑制胃癌SGC7901细胞增殖、迁移和侵袭。方法构建XIAP过表达SGC7901细胞株;qRT-PCR、Western blot检测DADS对过表达细胞XIAP表达的影响;CCK-8和平板克隆形成实验分析DADS对XIAP过表达细胞增殖的影响;划痕和Transwell实验分析DADS对XIAP过表达细胞迁移和侵袭的影响;qRT-PCR检测DADS对miR-7表达的影响;双荧光素酶报告实验、qRT-PCR和Western blot验证miR-7对XIAP靶向负调控作用。结果XIAP过表达增强SGC7901细胞增殖、迁移和侵袭能力;DADS下调XIAP、抑制XIAP过表达细胞增殖、迁移和侵袭;DADS上调miR-7表达;miR-7靶向调控XIAP 3′UTR,过表达miR-7降低XIAP表达,而敲低miR-7则上调XIAP表达。结论DADS通过miR-7下调XIAP抑制SGC7901细胞增殖、迁移和侵袭。

关键词：二烯丙基二硫 X连锁凋亡抑制蛋白 miR-7 胃癌增殖迁移侵袭

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链脲佐菌素对糖尿病小鼠生精功能和睾丸m6A甲基化酶表达的影响

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中国临床解剖学杂志 2023年第2期41卷 182-186页

作者：孟星圻邓靖彭莉轩张圆林祎周小兵曹文宇李素云南华大学衡阳医学院应用解剖学与生殖医学研究所湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院肿瘤研究所肿瘤细胞和分子病理学湖南省重点实验室湖南衡阳421001

目的探讨链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)对糖尿病小鼠生精功能和睾丸m6A甲基化酶表达的影响。方法20只8周龄雄性ICR小鼠,随机分为溶媒对照组和模型组,腹腔注射STZ诱导糖尿病动物模型。注射后第2、4、6、8周检测血糖及体重;第8周采用精... 详细信息

目的探讨链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)对糖尿病小鼠生精功能和睾丸m6A甲基化酶表达的影响。方法20只8周龄雄性ICR小鼠,随机分为溶媒对照组和模型组,腹腔注射STZ诱导糖尿病动物模型。注射后第2、4、6、8周检测血糖及体重;第8周采用精子计数法检测小鼠精子数量,HE染色检测精子存活率及睾丸形态,称量睾丸、附睾的重量;Real-time PCR和Western blotting检测各组小鼠睾丸中m6A甲基化酶mRNA及蛋白表达。结果与对照组相比,模型组小鼠空腹血糖显著增高,体重降低(P<0.01);睾丸及附睾重量显著下降(P<0.01)、精子数量显著下降(P<0.05);睾丸形态结构破坏,生精小管萎缩,管腔直径变小,各级生精细胞排列紊乱,管腔内精子数量减少;睾丸m6A甲基化酶METTL3、FTO、YTHDF3 mRNA表达降低(P<0.05);METTL3、FTO蛋白质表达显著降低(P<0.05)。结论STZ诱导的糖尿病小鼠出现生精障碍,其生精障碍可能与睾丸内m6A甲基化酶METTL3以及FTO的表达异常有关。

关键词： m6A甲基化链脲佐菌素糖尿病生精功能障碍

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沉默RORα通过活化Wnt/β-catenin通路靶基因促进人胃癌细胞增殖

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中国老年学杂志 2023年第6期43卷 1408-1413页

作者：裴大兵张翼臻刘芳苏坚夏红苏琦南华大学衡阳医学院肿瘤研究所、湖南省肿瘤细胞与分子病理学重点实验室、湖南省胃癌研究中心湖南衡阳421001 井冈山大学附属医院普外科南华大学衡阳医学院附属第二医院病理科

目的探讨人胃癌细胞中维甲酸相关孤核受体(ROR)α与Wnt/β-连环素(catenin)通路的相互作用。方法噻唑蓝(MTT)实验验证沉默RORα对胃癌细胞系MGC803的增殖作用;实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹与免疫共沉淀检测敲低RORα对Wnt... 详细信息

目的探讨人胃癌细胞中维甲酸相关孤核受体(ROR)α与Wnt/β-连环素(catenin)通路的相互作用。方法噻唑蓝(MTT)实验验证沉默RORα对胃癌细胞系MGC803的增殖作用;实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹与免疫共沉淀检测敲低RORα对Wnt/β-catenin通路相关分子与靶基因表达;荧光素酶报告检测c-Myc基因启动子活性。结果敲低RORα可显著促进胃癌细胞增殖(P<0.05)。当RORα被敲低时可显著上调Wnt1 mRNA和蛋白表达(P<0.05);但对β-catenin无明显影响(P>0.05)。免疫共沉淀提示敲低RORα可显著降低RORα与β-catenin的结合效率(P<0.05)。RORα敲低后,核内β-catenin与转录因子(TCF)-4表达水平明显升高(P<0.05)。Wnt通路下游基因Axin、c-Myc、c-Jun和基质金属蛋白酶(MMP)-9的mRNA和蛋白水平显著上调(P<0.05)。荧光素酶报告提示,敲低RORα可显著增强c-Myc启动子活性(P<0.05)。结论敲低RORα可活化Wnt/β-catenin信号通路从而促进胃癌细胞增殖。

关键词：维甲酸相关孤核受体(ROR)α 沉默人胃癌MGC803细胞增殖 Wnt/β-catenin通路靶基因

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m6A修饰在神经系统疾病中的作用

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中南大学学报（医学版） 2022年第1期47卷 109-115页

作者：张圆张巳时萌萌李梦琳曾佳玉何洁南华大学衡阳医学院肿瘤研究所肿瘤细胞和分子病理学湖南省重点实验室湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院应用解剖与生殖研究所湖南衡阳421001 南华大学附属第一医院内分泌科湖南衡阳421001 海南医学院病理学教研室海口571199

N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)甲基化修饰是真核生物mRNA最常见的表观遗传修饰之一,在相关酶的催化调控下,m6A通过介导RNA转录、剪接、翻译、衰变等参与机体的生理和病理生理过程。以往主要关注m6A在肿瘤,如血液系统肿瘤、宫颈... 详细信息

N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)甲基化修饰是真核生物mRNA最常见的表观遗传修饰之一,在相关酶的催化调控下,m6A通过介导RNA转录、剪接、翻译、衰变等参与机体的生理和病理生理过程。以往主要关注m6A在肿瘤,如血液系统肿瘤、宫颈癌、乳腺癌等中的调控作用,近年来发现m6A富集于与神经发生、细胞周期、神经元分化等相关的mRNA中,其在神经系统中的调控作用逐渐被重视。m6A修饰水平及相关酶蛋白表达水平发生改变会引起神经系统功能紊乱,参与神经系统疾病的发生与转归。m6A修饰及其相关酶在重度抑郁症、帕金森病、阿尔茨海默症、脆性X综合征、肌萎缩侧索硬化、创伤性脑损伤及神经系统肿瘤等众多神经系统疾病的发展进程中扮演关键角色。

关键词： N6-甲基腺苷神经退行性疾病重度抑郁症

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社会隔离对小鼠认知功能及海马星形胶质细胞表型转换的影响

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中华行为医学与脑科学杂志 2022年第6期31卷 481-489页

作者：时萌萌许晓帆张圆霍雅洁徐杨曹文宇南华大学衡阳医学院应用解剖与生殖医学研究所衡阳421001 南华大学衡阳医学院肿瘤研究所肿瘤细胞和分子病理学湖南省重点实验室衡阳421001 南华大学衡阳医学院生理学教研室和神经科学研究所衡阳421001

目的探讨社会隔离(social isolation,SI)对小鼠认知行为及海马星形胶质细胞表型转换的影响。方法20只3~4周龄雄性C57BL/6小鼠根据随机数字表法分为正常群居组(group house,GH组)和社会隔离组(SI组),SI组小鼠单笼饲养8周建立社会隔离模型... 详细信息

目的探讨社会隔离(social isolation,SI)对小鼠认知行为及海马星形胶质细胞表型转换的影响。方法20只3~4周龄雄性C57BL/6小鼠根据随机数字表法分为正常群居组(group house,GH组)和社会隔离组(SI组),SI组小鼠单笼饲养8周建立社会隔离模型,GH组小鼠5只/笼正常饲养。采用新旧事物识别实验和新旧位置识别实验检测小鼠认知功能;采用免疫组织化法、RT-PCR和Western blot分别检测小鼠海马星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的表达变化;Sholl Analysis定量分析星形胶质细胞形态变化;RT-PCR和Western blot法检测海马A1和A2型星形胶质细胞标志物蛋白酶体亚单位β-8(proteasome subunit beta 8,PSMB8)以及钙结合蛋白S100家族的成员(a member of the S100 family of Ca^(2+)-binding proteins,S100A10)的表达。采用GraphPad Prism 6.0软件进行统计分析,两组间比较采用t检验。结果认知功能结果显示,SI组小鼠新事物识别指数[(-5.54±3.30)%,(33.42±7.14)%;t=4.680,P=0.001]和新位置识别指数[(-7.96±4.81)%,(23.55±8.20)%;t=3.670,P=0.008]均低于GH组。免疫组化结果显示,SI组小鼠海马GFAP阳性细胞数明显低于GH组[(369.90±42.97)个,(544.90±57.64)个;t=2.480,P=0.023]。Sholl分析结果显示,SI组小鼠海马星形胶质细胞突起回缩,突起分支与同心圆交点数目减少,在距离星形胶质细胞胞体6、8、10、12、14、16μm处,两组间比较均差异有统计学意义(均P<0.05)。Western blot结果显示,SI组GFAP蛋白的表达低于GH组[(0.85±0.05),(1.03±0.06);t=2.527,P=0.028];PCR结果显示,SI组GFAP mRNA表达低于GH组[(0.83±0.05),(1.00±0.03);t=2.970,P=0.018];SI组小鼠海马区A1表型标志物PSMB8 mRNA表达[(1.58±0.17),(1.00±0.06);t=2.931,P=0.011]和A2表型标志物S100A10 mRNA表达[(1.52±0.14),(1.00±0.07);t=3.121,P=0.007]均高于GH组。SI组营养因子IGF-1 mRNA表达低于GH组[(0.73±0.07),(1.00±0.08);t=2.327,P<0.05],而SI组LCN2 mRNA、IL-1βmRNA、TNF-αmRNA表达均高于GH组[(1.12±0.03),(1.00±0.03),t=2.575,P<0.05;(1.76±0.19),(1.00±0.07),t=3.460,P<0.01;(2.18±0.42),(1.00±0.07),t=2.427,P<0.05]。结论社会隔离诱导的小鼠认知障碍可能与海马星形胶质细胞表型转换有关。

关键词：社会隔离认知功能障碍星形胶质细胞海马小鼠

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Erastin在肿瘤细胞铁死亡中的研究进展

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中南医学科学杂志 2023年第3期51卷 453-455页

作者：赵雅姿史港晴谭晖苏琦南华大学衡阳医学院肿瘤研究所湖南省肿瘤细胞与分子病理学重点实验室湖南衡阳421001

铁死亡是铁依赖的脂质过氧化物和活性氧不断累积而最终导致细胞程序性死亡方式。Erastin是近年筛选出的一种小分子化合物,是铁死亡常用的诱导剂,在抗肿瘤方面具有极大潜力。Erastin具有抑制胱氨酸/谷氨酸转运蛋白、P53以及电压依赖性阴... 详细信息

铁死亡是铁依赖的脂质过氧化物和活性氧不断累积而最终导致细胞程序性死亡方式。Erastin是近年筛选出的一种小分子化合物,是铁死亡常用的诱导剂,在抗肿瘤方面具有极大潜力。Erastin具有抑制胱氨酸/谷氨酸转运蛋白、P53以及电压依赖性阴离子通道等作用,能够提高肿瘤细胞对各种化疗药物以及放射治疗的敏感性。本文综述Erastin在肿瘤细胞铁死亡中的作用及机制,希望为肿瘤的治疗提供新思路。

关键词： erastin 铁死亡肿瘤治疗靶点

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