目的观察大蒜有效成分二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对胃癌干样细胞(gastric cancer stem like cells,GCSLCs)增殖能力及干细胞相关分子Shh和Gli1表达的影响,初步探讨其抑制胃癌干样细胞增殖的作用机制。方法采用MTT实验、软琼...
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目的观察大蒜有效成分二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对胃癌干样细胞(gastric cancer stem like cells,GCSLCs)增殖能力及干细胞相关分子Shh和Gli1表达的影响,初步探讨其抑制胃癌干样细胞增殖的作用机制。方法采用MTT实验、软琼脂集落形成等方法检测DADS对GCSLCs增殖的影响;采用RT-PCR、Western blot实验观察DADS对GCSLCs中Shh、Gli1在m RNA和蛋白表达水平的作用。结果 MTT实验发现,30mg/L DADS处理48h后GCSLCs组OD值(0.530±0.319)和MGC 803组OD值(0.352±0.027)显著低于未处理GCSLCs组(0.826±0.032)和未处理MGC 803组(0.565±0.023),P<0.05;软琼脂集落形成实验表明,30mg/L DADS处理后GCSLCs组形成的集落小于未处理组,且集落形成数目(15±1.5)也比未处理组(35.5±2.5)少(P<0.05),30mg/LDADS处理MGC 803组形成的集落小于未处理组,且集落形成数目(6.5±0.5)明显少于未处理组(14.5±0.5),P<0.05;RT-PCR实验结果显示,与未处理组比较,30mg/L DADS处理GCSLCs和MGC 803细胞48h后,Shh和Gli1 m RNA的表达水平均显著下调(P<0.05);Western blot结果同样发现,30mg/L DADS处理48h可明显抑制GCSLCs和MGC 803细胞中Shh和Gli1蛋白的表达(P<0.05)。结论 DADS可抑制GCSLCs细胞增殖能力,其作用机制可能与下调Shh和Gli1的表达有关。
目的观察胃癌相关蛋白质POSTN在胃黏膜癌变过程中的表达与意义,为胃癌的早期诊断、病理分型与评估预后提供有价值的实验依据。方法收集正常胃黏膜、癌旁及胃癌组织标本8例,采用Western blotting检测POSTN蛋白在上述组织中的表达;其次利用免疫组化染色观察POSTN蛋白在正常胃黏膜、癌旁及胃癌组织中的表达,并分析其在胃黏膜癌变过程中表达的意义。结果 Western blotting结果显示,胃癌组织中POSTN蛋白表达明显高于正常胃黏膜和癌旁组织(P<0.01),同时癌旁组织中的表达高于正常胃黏膜组织(P<0.01)。免疫组化结果显示,正常胃黏膜、癌旁和胃癌组织中POSTN蛋白表达的阳性率分别为14.71%、46.15%和77.48%,而胃高、中和低分化腺癌中表达的阳性率分别为60%、70.6%和81.4%。POSTN蛋白表达与胃癌组织的分化程度相关,即组织分化降低,其表达增强(P<0.01)。结论胃癌组织中POSTN蛋白表达高于正常胃黏膜和癌旁组织,癌旁组织中的表达高于正常胃黏膜组织,该蛋白表达与胃癌组织的发生和分化程度有关。
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