检索结果-内蒙古大学图书馆

中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生 2025年第2期 026-030页

作者：易涛南华大学衡阳医学院·附属南华医院重症医学科湖南衡阳 421001

探究重症急性胰腺炎临床路径与个体化治疗的临床效果。方法选取2023年1月~2024年6月我院收治的62例重症胰腺炎患者,根据治疗方案进行分组研究,行个体化治疗的32例患者作为观察组,另30例行常规治疗的患者作为对照组,比较两组的预后情况... 详细信息

探究重症急性胰腺炎临床路径与个体化治疗的临床效果。方法选取2023年1月~2024年6月我院收治的62例重症胰腺炎患者,根据治疗方案进行分组研究,行个体化治疗的32例患者作为观察组,另30例行常规治疗的患者作为对照组,比较两组的预后情况。结果观察组死亡率0,低于对照组的6.67%,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组存活患者的胃肠功能恢复、腹痛及腹胀恢复、呼吸机撤离的时间均快于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗后的焦虑和抑郁评分均低于对照组差异有统计学意义(P<0.05)。观察组的治疗费用低于对照组差异有统计学意义(P<0.05)。结论对重症急性胰腺炎患者实施临床路径及个体化治疗,可有效降低患者的死亡率及治疗成本。

关键词：重症急性胰腺炎临床路径个体化治疗常规治疗预后

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中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂在脂多糖诱导的H9c2心肌细胞损伤中的作用及机制

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中国高原医学与生物学杂志 2025年

作者：张彩凤司立宁贺荣章白波波李培青赵延礼青海大学青海大学附属医院重症医学科南华大学衡阳医学院郴州第一人民医院转化医学研究所

目的本研究旨在探讨中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂（Neutrophil Elastase Inhibitor,NEI）在脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）诱导的H9c2心肌细胞损伤中的作用及机制。方法采用CCK-8法检测药物作用后的细胞活性；通过流式细胞术检测细... 详细信息

目的本研究旨在探讨中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂（Neutrophil Elastase Inhibitor,NEI）在脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）诱导的H9c2心肌细胞损伤中的作用及机制。方法采用CCK-8法检测药物作用后的细胞活性；通过流式细胞术检测细胞凋亡情况；利用荧光探针技术和荧光显微镜评估线粒体膜电位（Mitochondrial Membrane Potential，ΔΨm）和氧化应激情况；通过荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测相关基因和蛋白表达水平。结果 CCK-8结果显示，NEI显著逆转了LPS导致的H9c2细胞活力下降（P<0.05);Western Blot结果显示，NEI显著抑制了LPS诱导的H9c2细胞中的NE蛋白的表达（P<0.05）；流式细胞术结果显示，NEI显著降低了LPS诱导的细胞凋亡率（P<0.05）;DCFH-DA探针检测结果显示，NEI降低了LPS升高的活性氧（Reactive Oxygen Species,ROS）水平和增加的丙二醛（Malondialdehyde,MDA）含量（P<0.05)，同时显著恢复了LPS抑制的超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase,SOD）和谷胱甘肽（Glutathione,GSH）的活性（P<0.05）；ΔΨm的测定结果显示，NEI能够逆转LPS诱导的ΔΨm降低现象（P<0.05）;PCR分析结果显示，NEI促进了LPS处理后细胞内ATP的生成和线粒体DNA(Mitochondrial DNA,mtDNA)含量的增加（P<0.05）,NEI能上调LPS抑制的线粒体生物发生关键基因的mRNA表达水平（P<0.05）。结论NEI在LPS诱导的H9c2心肌细胞损伤中发挥了保护作用；可能机制为抑制氧化应激、减少细胞凋亡和改善线粒体功能。

关键词：中性粒细胞弹性蛋白酶脂多糖氧化应激线粒体生物凋亡

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新型支气管镜活检方式在肺癌诊断中的应用价值

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湖南文理学院学报(自然科学版) 2025年第1期37卷 72-78页

作者：肖珂瑶刘卫庭石芷男陈聪南华大学衡阳医学院附属邵阳医院呼吸与危重症医学科湖南衡阳421001

为了研究新型活检方法在肺癌诊断中的应用价值,选取影像学提示周围性肺癌且位于上叶前段、上叶后段和下叶基底段的直径约2~5 cm的患者各60例,按随机数字表法将各段患者分为2组,每组30例,分别用新型活检法(测距法)及普通活检法行支气管... 详细信息

为了研究新型活检方法在肺癌诊断中的应用价值,选取影像学提示周围性肺癌且位于上叶前段、上叶后段和下叶基底段的直径约2~5 cm的患者各60例,按随机数字表法将各段患者分为2组,每组30例,分别用新型活检法(测距法)及普通活检法行支气管镜下肺活检(TBLB);选取考虑中央型肺癌黏膜浸润型的患者120例,按随机数字表法将各段患者分为2组,每组60例,随机分组后分别用新型活检方法(固定旋转法)及普通活检方法行黏膜活检,并记录前4次活检所花费时长;所有患者均以细胞学、组织学病理诊断作为金标准,观察2种方法在肺恶性肿瘤诊断中的应用价值。实验结果表明:(1)各段中普通活检方法组与新型活检方法组患者的性别、年龄差异无统计学意义(P>0.05)。(2)普通活检方法组与新型活检方法组患者对上叶前段、下叶背段、后基底段病灶的诊断阳性率分别为30.0%vs 56.6%、26.6%vs 53.3%、33.3%vs 50.0%,上述三段2种方法的阳性率差异有统计学意义(P<0.05);普通活检方法组与新型活检方法组对中央型肺癌黏膜浸润型患者的诊断阳性率分别为65.0%和70.0%,2种方法诊断阳性率差异无统计学意义(P>0.05);普通活检方法与新型活检方法组患者对患者活检的时长分别为(79.71±9.29)s、(48.67±6.72)s,2种方法对中央型占位的活检时长差异有统计学意义(P<0.05)。(3)普通活检法与新型活检法的中央型及周围型占位患者均未出现气胸,但半数患者会出现少量咯血,且2组患者中咯血量大于100 mL的发生率差异无统计学意义(P>0.05)。新型活检方法可提高部分周围型肺癌的诊断阳性率,缩短中央型肺癌黏膜活检时长。

关键词：支气管镜活检出血安全性

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miR-149-5p靶向FGF21对大鼠心肌细胞的缺氧/复氧损伤的促进作用

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解放军医学杂志 2023年第3期48卷 275-282页

作者：蒋先训张凯张鹰南华大学衡阳医学院附属第二医院重症医学科湖南衡阳421000

目的探究miR-149-5p与成纤维细胞生长因子21(FGF21)的靶向关系,及其对大鼠心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的影响。方法将10只C56BL/6J雄性小鼠构建缺血再灌注(I/R)模型,qRT-PCR法检测I/R小鼠心脏组织中miR-149-5p表达水平的变化。将培养... 详细信息

目的探究miR-149-5p与成纤维细胞生长因子21(FGF21)的靶向关系,及其对大鼠心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的影响。方法将10只C56BL/6J雄性小鼠构建缺血再灌注(I/R)模型,qRT-PCR法检测I/R小鼠心脏组织中miR-149-5p表达水平的变化。将培养至生长对数期的H9c2大鼠心肌细胞分为对照组、H/R组、H/R+miR-149-5pinhibitor组、H/R+miR-149-5p NC组、H/R+miR-149-5p mimics组、H/R+miR-149-5p mimics+FGF21组,并诱导H/R模型及转染处理。ELISA法检测H9c2细胞中乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)的活性;MTT法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;qRT-PCR检测细胞中miR-149-5p的表达水平;Western blotting检测Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、FGF21蛋白的表达水平;双荧光素酶测定miR-149-5p与FGF21的靶向关系。结果与假手术组比较,I/R小鼠心脏组织中miR-149-5p表达水平明显升高(P<0.05)。与对照组比较,H/R组H9c2细胞凋亡率、LDH和CK活性及Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),细胞活力及FGF21、Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与H/R组和H/R+miR-149-5p NC组比较,H/R+miR-149-5pinhibitor组细胞凋亡率、LDH和CK活性及Bax、cleavedcaspase-3蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),细胞活力及FGF21、Bcl-2蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与H/R组比较,H/R+miR-149-5pmimics组细胞凋亡率、LDH和CK活性及Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),细胞活力及FGF21、Bcl-2蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。与H/R+miR-149-5p mimics组比较,H/R+miR-149-5p mimics+FGF21组细胞凋亡率及LDH和CK活性均明显降低(P<0.05),细胞活力明显升高(P<0.05)。双荧光素酶检测结果显示miR-149-5p与FGF21基因有靶向调控关系。结论 miR-149-5p在I/R小鼠心肌组织中明显上调,可负向调控FGF21水平,导致H/R处理的大鼠心肌细胞活力下降、凋亡增加。

关键词： miR-149-5p 缺血再灌注成纤维细胞生长因子21 细胞凋亡

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硫酸多黏菌素B治疗耐碳青霉烯类革兰阴性菌脓毒症的临床疗效分析

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中国感染与化疗杂志 2023年第3期23卷 281-286页

作者：肖媚李琼凌花曹楣汾王静宇戴新贵南华大学衡阳医学院附属郴州医院重症医学科湖南郴州423000

目的探讨硫酸多黏菌素B治疗耐碳青霉烯类革兰阴性菌(CR-GNB)脓毒症患者的临床疗效及安全性。方法回顾性分析2018年10月—2022年1月郴州医院收治的93例以硫酸多黏菌素B为基础的联合抗感染方案治疗CR-GNB脓毒症患者的临床资料。收集患者... 详细信息

目的探讨硫酸多黏菌素B治疗耐碳青霉烯类革兰阴性菌(CR-GNB)脓毒症患者的临床疗效及安全性。方法回顾性分析2018年10月—2022年1月郴州医院收治的93例以硫酸多黏菌素B为基础的联合抗感染方案治疗CR-GNB脓毒症患者的临床资料。收集患者临床特征、细菌培养及药敏结果、抗菌药物种类及疗程、感染指标、临床疗效、不良反应、住院病死率等。结果93例CR-GNB脓毒症患者中,感染部位以肺部为主(占65.6%);病原菌以鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯菌为主(分别占58.3%和25.2%)。经硫酸多黏菌素B联合治疗后,有效率为79.6%(74/93),患者细菌清除率为68.8%(64/93),28 d全因死亡率为36.6%(34/93),90 d全因死亡率为52.7%(49/93)。多黏菌素B使用时间越长,治疗有效率和细菌清除率越高,3~5 d、6~10 d、11~15 d、>15 d组治疗有效率分别为62.1%(18/29)、84.4%(38/45)、93.3%(14/15)、100%(4/4),χ^(2)=7.415,P=0.045;细菌清除率分别为48.3%(14/29)、80.0%(36/45)、73.3%(11/15)、75.0%(3/4),χ^(2)=8.205,P=0.035。不同剂量的比较,治疗有效率(χ^(2)=3.578,P=0.292)及细菌清除率(χ^(2)=0.332,P=1.000)差异无统计学意义。多黏菌素B用药后疾病严重程度评分(APACHEⅡ评分和SOFA评分)、白细胞计数、血小板计数、尿素氮各时间点差异具有统计学意义(P<0.05)。结论以硫酸多黏菌素B为基础的联合用药方案是CR-GNB脓毒症患者的有效选择。

关键词：多黏菌素B 脓毒症耐碳青霉烯类革兰阴性菌临床疗效

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辛伐他汀对大鼠肺纤维化及其内皮间质变过程的影响

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中国应用生理学杂志 2021年第5期37卷 454-459页

作者：涂容芳何振华谭小武陈哲曾赛丽刘莎贾远航李雪花南华大学衡阳医学院附属第二医院呼吸与危重症医学科湖南衡阳421001

目的:观察辛伐他汀对大鼠肺纤维化及其内皮间质变(EnMT)过程中VE-钙粘素(VE-cad)、波形蛋白(VIM)、α-平滑肌蛋白(α-SMA)表达的影响。方法:健康雄性SD大鼠60只,随机分为对照组(A组)、造模组(B组)、辛伐他汀5 mg治疗组(C组)、辛伐他汀10... 详细信息

目的:观察辛伐他汀对大鼠肺纤维化及其内皮间质变(EnMT)过程中VE-钙粘素(VE-cad)、波形蛋白(VIM)、α-平滑肌蛋白(α-SMA)表达的影响。方法:健康雄性SD大鼠60只,随机分为对照组(A组)、造模组(B组)、辛伐他汀5 mg治疗组(C组)、辛伐他汀10 mg治疗组(D组),每组各15只。博来霉素(BLM)按5 mg/kg剂量一次性气管内灌注复制博莱霉素致大鼠肺纤维化模型,从造模第1日起C、D组每天分别胃内灌注辛伐他汀混悬液5 mg/(kg·d)及辛伐他汀混悬液10 mg/(kg·d),A组和B组每天胃内灌注等体积生理盐水10 ml/(kg·d)。于造模第7、14和28日随机处死各组大鼠5只。Masson染色观察大鼠肺组织形态变化;碱性水解法检测肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量;免疫组化法测定各组大鼠肺组织血管新生微血管密度(MVD);免疫组化和逆转录-聚合酶链反应法测定各组肺组织中VE-Cad、VIM及α-SMA蛋白和mRNA的表达水平。结果:①与A组相比,B、C、D组各时间点肺组织HYP和MVD水平、VIM、α-SMA的mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P均<0.05),且以28 d达最高;而相应时间点VE-Cad的mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P均<0.05),且以28 d达最低。②与B组相比,C、D组HYP和MVD水平、VIM、α-SMA的mRNA和蛋白表达水平均有降低(P均<0.05),以D组28 d下降最明显;而相应时间点VE-Cad的mRNA和蛋白表达水平均有升高(P均<0.05),以D组28 d升高最明显。结论:辛伐他汀可减轻大鼠肺纤维化,其机制可能与增强VE-cad表达,降低VIM及α-SMA表达,减少EnMT发生有关。

关键词：肺纤维化内皮间质转化辛伐他汀大鼠

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薯蓣皂苷元对心肌缺血再灌注损伤大鼠细胞凋亡的影响及相关机制的分析

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中国循环杂志 2022年第5期37卷 526-532页

作者：蒋先训张凯张鹰南华大学衡阳医学院附属第二医院重症医学科湖南省衡阳市421000

目的:探究薯蓣皂苷元对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠细胞凋亡的影响,并初步分析其对NOD样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)信号通路的作用。方法:采用左冠状动脉前降支结扎法建立MIRI大鼠模型,将造模成功的7... 详细信息

目的:探究薯蓣皂苷元对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠细胞凋亡的影响,并初步分析其对NOD样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)信号通路的作用。方法:采用左冠状动脉前降支结扎法建立MIRI大鼠模型,将造模成功的72只大鼠,按照随机数字表法分成MIRI组、薯蓣皂苷元低剂量组(50 mg/kg)、薯蓣皂苷元中剂量组(75 mg/kg)和薯蓣皂苷元高剂量组(100 mg/kg),每组18只;另取18只大鼠为假手术组。造模完成后,给予相应药物灌胃,每日1次。末次给药后,记录每组大鼠在不同时间段的心脏血液动力学参数;三苯基四氮唑(TTC)法检测大鼠心肌梗死面积;苏木素-伊红染色检测各组心肌组织病理学变化;TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况;ELISA法检测大鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;免疫蛋白印迹法检测大鼠心肌组织中NLRP3、Caspase-1、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、IL-1β蛋白表达水平。结果:与假手术组相比,MIRI组大鼠心肌梗死面积更大,心肌细胞凋亡率、左心室舒张末期压力(LVEDP)、血清IL-6、IL-1β、TNF-α含量及心肌组织中NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-1β蛋白表达水平均显著升高(P均<0.05),左心室收缩压(LVSP)、左心室射血分数(LVEF)、短轴缩短率(FS)及最大收缩/舒张期压力变化速率(±dp/dtmax)均显著降低(P均<0.05);与MIRI组相比,薯蓣皂苷元不同剂量干预组大鼠心肌梗死面积较小,细胞凋亡率、LVEDP、血清IL-6、IL-1β、TNF-α含量及心肌组织中NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-1β蛋白表达水平均显著降低(P均<0.05),LVSP、LVEF、FS及±dp/dtmax均显著升高(P均<0.05)。结论:薯蓣皂苷元可改善MIRI大鼠的心功能,减少炎症反应和细胞凋亡,可能与抑制NLRP3/caspase-1信号通路有关。

关键词：薯蓣皂苷元心肌缺血/再灌注损伤 NOD样受体蛋白3炎性小体细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1

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新型能量代谢预测公式与IC法测定老年重症病人能量代谢的一致性研究

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肠外与肠内营养 2023年第4期30卷 234-238,243页

作者：翟溶凡言彩红南华大学衡阳医学院附属第二医院重症医学科湖南衡阳421001

目的:验证间接测热法(IC)与新型预测公式测定老年重症病人静息能量代谢值的一致性,为这种新型基于APACHE II评分的能量代谢预测公式应用于临床提供依据。方法:观察对象为南华大学衡阳医学院附属第二医院重症医学科2020年1月至2020年7月... 详细信息

目的:验证间接测热法(IC)与新型预测公式测定老年重症病人静息能量代谢值的一致性,为这种新型基于APACHE II评分的能量代谢预测公式应用于临床提供依据。方法:观察对象为南华大学衡阳医学院附属第二医院重症医学科2020年1月至2020年7月期间诊治的102名老年重症病人。笔者前期研究的新型预测公式REE=(1.003+APACHE II×0.016)×HB,其经由一元回归对同APACHE II评分有关的HB法应激系数进行拟合所得。使用IC法测量病人入ICU后第1、3、5、7天的全天静息能量代谢值,将入ICU后第1天IC法测量值作为“金标准”与新型预测公式计算值进行对比,两种测量方式用Bland-Altman法进行一致性评价;将28 d预后、是否发生院内感染作为结局预测指标,两种方法的预测价值采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)检验其是否存在差异。结果:IC法测定的入ICU后第1、3、5、7天的全天静息能量代谢值[(1 781.5±261.2) kcal/d、(1 728.8±260.8) kcal/d、(1 824.5±265.6) kcal/d、(1 749.1±267.4) kcal/d,F=2.459,P=0.062],差异无统计学意义,提示病人入ICU后1周内能量代谢值无较大波动。将IC法测量值与新型预测公式计算值进行比较[(1 781.5±261.2) kcal/d vs (1 801.1±218.5) kcal/d],差异无统计学意义(P> 0.05);Bland-Altman分析显示,两种方法一致性较好;ROC曲线分析结果显示两种方法对28天预后及院感的预测价值基本一致(P> 0.05)差异无统计学意义。结论:间接测热法(IC)与新型预测公式测定的静息能量代谢值一致性较高,可以使用该方法预测老年重症病人静息能量代谢的目标值。

关键词：老年重症能量代谢 IC法预测公式

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TPX2基因沉默对膀胱癌耐药细胞株T24/DDP顺铂化疗敏感性的增强作用及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2024年第2期50卷 346-354页

作者：张鹰蒋先训万朝辉南华大学衡阳医学院附属第二医院重症医学科湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院附属第二医院急诊科湖南衡阳421001

目的:探讨爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白(TPX2)基因沉默对膀胱癌耐药细胞株T24/顺铂(DDP)的化疗敏感性的影响,并阐明其作用机制。方法:采用DDP浓度梯度刺激法建立DDP耐药细胞株T24/DDP,将细胞分为T24细胞组和T24/DDP细胞组。MTT法检测各组... 详细信息

目的:探讨爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白(TPX2)基因沉默对膀胱癌耐药细胞株T24/顺铂(DDP)的化疗敏感性的影响,并阐明其作用机制。方法:采用DDP浓度梯度刺激法建立DDP耐药细胞株T24/DDP,将细胞分为T24细胞组和T24/DDP细胞组。MTT法检测各组细胞增殖活性,并根据半数抑制浓度(IC50)值计算耐药指数(RI);实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法和Westernblotting法检测细胞中TPX2mRNA及蛋白表达水平。通过小干扰RNA(siRNA)沉默T24/DDP细胞中TPX2基因表达,再将细胞分为空白对照组、阴性对照干扰(si-NC)组、TPX2沉默(si-TPX2)组、si-NC+DDP(2 mg·L^(-1) DDP)组和si-TPX2+DDP(2 mg·L^(-1) DDP)组。RT-qPCR法和Western blotting法检测转染后细胞中TPX2 mRNA及蛋白表达水平,MTT法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测各组凋亡细胞率和细胞周期G2/M期百分率,Transwell小室实验检测各组迁移细胞数和侵袭细胞数,Western blotting法检测各组细胞中Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白β-catenin、P-糖蛋白(P-gp)、锌指蛋白转录因子1(Snail1)和Survivin蛋白表达水平。结果:成功建立膀胱癌DDP耐药细胞株T24/DDP,RI值为8.76。与T24细胞组比较,T24/DDP细胞组中TPX2 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与空白对照组和si-NC组比较,si-TPX2组T24/DDP细胞中TPX2mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),且DDP的IC50值明显降低(P<0.01)。与si-NC组比较,si-TPX2组T24/DDP细胞凋亡率和细胞周期G2/M期百分率明显升高(P<0.01),迁移细胞数和侵袭细胞数明显降低(P<0.01),T24/DDP细胞中β-catenin、P-gp、Snail1和Survivin蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与si-NC+DDP组比较,si-TPX2+DDP组T24/DDP细胞凋亡率和细胞周期G2/M期百分率明显升高(P<0.01),迁移细胞数和侵袭细胞数明显降低(P<0.01),T24/DDP细胞中β-catenin、P-gp、Snail1和Survivin蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:TPX2基因沉默通过抑制Wnt/β-catenin信号通路增强膀胱癌耐药细胞株T24/DDP对DDP的化疗敏感性。

关键词：爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白膀胱肿瘤顺铂化疗敏感性 Wnt/β-catenin信号通路

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NDRG1过表达对去势抵抗性前列腺癌耐药细胞株C4-2/ENZA耐药性的影响及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2024年第3期50卷 708-717页

作者：张鹰万朝辉蒋先训南华大学衡阳医学院附属第二医院重症医学科湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院附属第二医院急诊科湖南衡阳421001

目的:探讨N-myc下游调节基因1(NDRG1)对去势抵抗性前列腺癌(CRPC)恩杂鲁胺(ENZA)耐药的影响,并阐明其作用机制。方法:体外培养人CRPC C4-2细胞和ENZA耐药株C4-2/ENZA细胞,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测C4-2/ENZA细胞及其亲本C4-2... 详细信息

目的:探讨N-myc下游调节基因1(NDRG1)对去势抵抗性前列腺癌(CRPC)恩杂鲁胺(ENZA)耐药的影响,并阐明其作用机制。方法:体外培养人CRPC C4-2细胞和ENZA耐药株C4-2/ENZA细胞,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测C4-2/ENZA细胞及其亲本C4-2细胞中NDRG1 mRNA表达水平,Western blotting法检测C4-2/ENZA细胞及其亲本C4-2细胞中NDRG1、雄激素受体(AR)和前列腺特异性抗原(PSA)蛋白表达水平,以验证细胞转染效率。将C4-2/ENZA细胞分为空白组(正常培养不进行处理)、阴性对照慢病毒(Lv-NC)组(转染Lv-NC)、Lv-NDRG1组(转染Lv-NDRG1)、Lv-NC+ENZA组(转染Lv-NC后加入ENZA处理)、Lv-NDRG1+ENZA组(转染Lv-NDRG1后加入ENZA处理)、Lv-NDRG1+表皮生长因子(EGF)组(转染Lv-NDRG1后加入EGF处理)和Lv-NDRG1+EGF+ENZA组(转染Lv-NDRG1后加入EGF和ENZA处理)。采用噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞半数抑制浓度(IC_(50))、耐药指数(RI)和细胞增殖活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,RT-qPCR法检测各组细胞中NDRG1 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中NDRG1、AR、第213位丝氨酸磷酸化雄激素受体(p-ARSer^(213))、第81位丝氨酸磷酸化雄激素受体(p-ARSer^(81))和PSA蛋白表达水平。结果:与C4-2细胞比较,C4-2/ENZA细胞中NDRG1 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.01),AR和PSA蛋白表达水平明显升高(P<0.01),提示ENZA耐药株C4-2/ENZA中NDRG1低表达;与Lv-NC组比较,LvNDRG1组细胞中NDRG1 mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.01),提示成功构建NDRG1基因过表达C4-2/ENZA耐药细胞株。MTT法,与C4-2细胞比较,C4-2/ENZA细胞IC_(50)明显升高(P<0.01),RI为17.78;与Lv-NC组比较,Lv-NDRG1组C4-2/ENZA细胞IC_(50)明显降低(P<0.01)。EGF处理24 h,与Lv-NC组比较,Lv-NC+EGF组C4-2/ENZA细胞IC_(50)明显升高(P<0.01);与Lv-NDRG1组比较,Lv-NDRG1+EGF组C4-2/ENZA细胞IC_(50)明显升高(P<0.01)。与ENZA处理前比较,不同浓度ENZA处理24 h,C4-2和C4-2/ENZA细胞增殖活性均逐渐降低(F=223.80,P<0.01;F=81.46,P<0.01)。ENZA处理24 h,与Lv-NC组比较,Lv-NDRG1组C4-2/ENZA细胞增殖活性明显降低(P<0.01)。EGF处理24 h,与Lv-NC组比较,Lv-NC+EGF组C4-2/ENZA细胞增殖活性明显升高(P<0.01),Lv-NDRG1+EGF组C4-2/ENZA细胞增殖活性明显降低(P<0.01)。选择10.000μmol·L^(-1) ENZA和干预24 h作为后续检测浓度及时间点。流式细胞术,ENZA处理24 h,与Lv-NC组比较,Lv-NDRG1组细胞凋亡率明显升高(P<0.01);与Lv-NC+ENZA组比较,Lv-NDRG1+ENZA组细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。EGF处理24h,与Lv-NDRG1组比较,Lv-NDRG1+EGF组细胞凋亡率明显降低(P<0.01),Lv-NDRG1+ENZA组细胞凋亡率明显升高(P<0.01);与Lv-NDRG1+ENZA组比较,Lv-NDRG1+EGF+ENZA组细胞凋亡率明显降低(P<0.01)。Western blotting法,ENZA处理24 h,与Lv-NC组比较,Lv-NDRG1组细胞中AR和PSA蛋白表达水平及p-ARSer^(213)/AR和p-ARSer^(81)/AR比值均明显降低(P<0.05或P<0.01)。EGF处理24 h,与Lv-NC组比较,Lv-NC+EGF组细胞中AR和PSA蛋白表达水平及p-ARSer^(213)/AR和p-ARSer^(81)/AR比值均明显升高(P<0.05或P<0.01);与Lv-NDRG1组比较,Lv-NDRG1+EGF组细胞中AR和PSA蛋白表达水平及p-ARSer^(213)/AR和p-ARSer^(81)/AR比值均明显升高(P<0.01)。结论:NDRG1过表达可降低CRPC对ENZA的耐药性,其作用机制可能与抑制AR信号转导有关。

关键词：去势抵抗性前列腺癌 N-myc下游调节基因1 恩杂鲁胺耐药性雄激素受体

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