检索结果-内蒙古大学图书馆

解放军医学杂志 2019年第6期44卷 459-465页

作者：芦婷婷胡颖芸张提秦君芳南开大学医学院免疫学教研室

目的探讨应激对小鼠乳腺癌生长转移的作用及机制。方法 6~8周龄BALB/c小鼠接种4T1细胞制备乳腺癌移植瘤模型,分为对照组、慢性应激组、Iso[异丙肾上腺素,10mg/(kg.d)]组、慢性应激+DMSO(二甲基亚砜)组和慢性应激+Rapa[雷帕霉素,15mg/(k... 详细信息

目的探讨应激对小鼠乳腺癌生长转移的作用及机制。方法 6~8周龄BALB/c小鼠接种4T1细胞制备乳腺癌移植瘤模型,分为对照组、慢性应激组、Iso[异丙肾上腺素,10mg/(kg.d)]组、慢性应激+DMSO(二甲基亚砜)组和慢性应激+Rapa[雷帕霉素,15mg/(kg.d)]组。记录癌组织体积变化,并于造模第21天处死小鼠,检测瘤内Beclin1、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)和p62表达变化;同时进行肺墨汁染色,计数小鼠肺内转移结节。采用去甲肾上腺素(NE)处理4T1细胞,观察自噬相关分子Beclin1、LC3-Ⅱ、p62mRNA和蛋白表达的变化。结果与对照组[(1359.7±173.9)mm^3]相比,应激刺激[(2119.7±130.0)mm^3]和Iso注射[(1947.0±102.8)mm^3]可促进乳腺瘤体的生长(P<0.05),同时,肺内转移结节数也呈现同样的变化趋势[慢性应激组(10.3±1.1)个,Iso组(8.8±0.5)个vs.对照组(4.3±0.3)个,P<0.05];慢性应激组瘤内Beclin1、LC3-Ⅱ表达减少,而自噬的抑制性分子标志物p62表达增加(P<0.05);自噬诱导剂Rapa可逆转应激的促瘤效果[(2275.477±187.397)mm^3vs.(1360.097±213.938)mm^3,P<0.05]。与生理盐水组相比,NE处理后4T1细胞内Beclin1表达减少约60%(100%vs.39.8%±2.0%,P<0.05),绿色荧光蛋白(GFP)-LC3的点状聚集也明显减少(P<0.05)。生物信息学分析显示高表达Beclin1的乳腺癌患者生存预后更好,高表达p62者则正相反(P<0.001)。结论应激通过抑制细胞自噬促进乳腺癌的生长和转移。

关键词：应激乳腺癌自噬去甲肾上腺素

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线粒体信号肽引导葡萄糖调节蛋白75-增强型绿色荧光蛋白(GRP75-EGFP)融合蛋白定位于线粒体

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细胞与分子免疫学杂志 2016年第10期32卷 1311-1316页

作者：陈航牛秀然高嫒嫒张思河南开大学医学院生物化学教研室天津300071

目的构建葡萄糖调节蛋白75(GRP75)不同结构域、不同形式突变体与线粒体信号肽重组蛋白并鉴定其亚细胞定位。方法通过重叠延伸PCR,将线粒体靶向信号肽序列分别与GRP75不同结构域基因拼接。利用定点突变PCR分别扩增实现62和65位氨基酸突... 详细信息

目的构建葡萄糖调节蛋白75(GRP75)不同结构域、不同形式突变体与线粒体信号肽重组蛋白并鉴定其亚细胞定位。方法通过重叠延伸PCR,将线粒体靶向信号肽序列分别与GRP75不同结构域基因拼接。利用定点突变PCR分别扩增实现62和65位氨基酸突变的磷酸化失活型、磷酸化激活型突变体、482位氨基酸突变的底物结合缺陷型突变体及三位点同时突变重组体。将上述重组基因克隆入p EGFPC1真核表达质粒,酶切和测序验证后分别用脂质体转染He La细胞,Western blot法检测重组蛋白表达水平,激光共聚焦显微镜观察比较重组蛋白亚细胞定位情况。结果成功构建了线粒体信号肽融合或缺失的GRP75结构域、磷酸化失活和激活突变体、底物结合缺陷突变体真核表达质粒。各重组质粒的片段插入、位点突变、信号肽融合情况均符合设计目的,在He La细胞表达后产物的相对分子质量大小均符合预期。EGFP蛋白C端插入信号肽能引导下游融合的GRP75全长蛋白、结构域片段、突变体蛋白表达定位于He La细胞线粒体中,而缺失信号肽的对应重组蛋白则主要分布于胞质和局部核周。结论构建了一系列GRP75重组真核表达质粒,EGFP融合信号肽能引导重组蛋白在线粒体中表达定位。

关键词：葡萄糖调节蛋白75(GRP75) 线粒体靶向信号肽重叠延伸PCR 亚细胞定位

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RGS1对RAW264.7细胞共刺激分子和细胞因子表达的调节

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细胞与分子免疫学杂志 2008年第8期24卷 757-759,763页

作者：刘昱焦国慧曾斌陈思张圆杨荣存南开大学医学院免疫学教研室天津300071

目的:研究RGS1基因对细胞表面分子表达以及细胞因子分泌的影响。方法:通过克隆RGS1基因、转染RAW264.7细胞、建立稳定转染的细胞系,利用流式细胞术检测,基因芯片分析初步探讨RGS1基因的功能。结果:RGS1基因能够抑制NF-κB转录因子活性;R... 详细信息

目的:研究RGS1基因对细胞表面分子表达以及细胞因子分泌的影响。方法:通过克隆RGS1基因、转染RAW264.7细胞、建立稳定转染的细胞系,利用流式细胞术检测,基因芯片分析初步探讨RGS1基因的功能。结果:RGS1基因能够抑制NF-κB转录因子活性;RGS1基因明显增加RAW264.7细胞表面CD86分子的表达,降低CD80表达;在不同Toll样受体配体刺激后,CD40、CD80和PD1水平低于对照组。同时,RGS1基因使IL-6、IL-15的表达明显升高,IL-10、IL-1的表达明显降低。结论:RGS1基因可调节免疫相关细胞表面分子和细胞因子的分泌,影响Toll样受体信号通路,表明RGS1可能在免疫调节方面起重要作用。

关键词：免疫调节 RGS1基因免疫相关细胞

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Prosaposin基因对TLR3信号途径的调节

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免疫学杂志 2009年第1期25卷 6-11页

作者：俞银燕杨曙光曾斌焦国慧张圆杨荣存南开大学医学院免疫学教研室

目的研究prosaposin基因对转录活性因子和免疫细胞表面分子表达的影响,分析该基因在各种Toll-like re-ceptor不同途径中的作用,初步探讨prosaposin基因在免疫系统中的功能。方法克隆prosaposin基因并建立prosaposin基因稳定转染的细胞系... 详细信息

目的研究prosaposin基因对转录活性因子和免疫细胞表面分子表达的影响,分析该基因在各种Toll-like re-ceptor不同途径中的作用,初步探讨prosaposin基因在免疫系统中的功能。方法克隆prosaposin基因并建立prosaposin基因稳定转染的细胞系,通过检测报告基因化学发光和用不同Toll-like receptor配体刺激后比较细胞表面分子的表达水平的方法来探讨不同途径中该基因发挥的作用。结果在TLR3配体PolyI:C刺激条件下,prosaposin基因能够明显促进对NF-κB以及AP-1的活性,而且明显抑制细胞表面分子B7H1和PD1的表达。结论prosaposin基因能够影响TLR3信号途径作用于免疫细胞,调节免疫相关细胞分子,可能在免疫系统方面起作用。

关键词： prosaposin基因 TLR3 免疫相关细胞

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冠状病毒概述及诊疗研究进展

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中华微生物学和免疫学杂志 2020年第6期40卷 418-428页

作者：胡小妍任豆豆齐春霞路玲玲魏民南开大学医学院病原生物学教研室天津300071

新型冠状病毒(2019-nCoV)已在全球迅速蔓延,对全球公共卫生系统造成重大威胁。这已经是在短短20年间高致病性冠状病毒在人群中的第3次大规模传播。自冠状病毒大流行以来,科研人员迅速对其展开研究,但目前为止仍无针对冠状病毒的特效药... 详细信息

新型冠状病毒(2019-nCoV)已在全球迅速蔓延,对全球公共卫生系统造成重大威胁。这已经是在短短20年间高致病性冠状病毒在人群中的第3次大规模传播。自冠状病毒大流行以来,科研人员迅速对其展开研究,但目前为止仍无针对冠状病毒的特效药物和有效疫苗,仍需对冠状病毒进行更加深入系统的研究。本综述中,我们对冠状病毒的结构、生命周期及发病机制进行了详细的介绍,对新型冠状病毒肺炎的检测手段、治疗方法和疫苗研究进展进行了回顾总结,以期对今后的研究提供参考。

关键词：新型冠状病毒结构生命周期致病机制诊断手段治疗方法

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不同Toll样受体介导的树突状细胞因子表达

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免疫学杂志 2009年第5期25卷 519-523页

作者：杨曙光焦国慧俞银燕杨荣存南开大学医学院免疫学教研室

目的研究树突状细胞在不同Toll样受体(TLR)配体刺激下的早期反应。方法将鼠骨髓细胞诱导分化得到DC,利用TLR配体刺激,采用芯片分析方法研究其免疫相关基因在9h的表达;采用细胞因子分析系统,检测了12、48h细胞培养上清中细胞因子、趋化... 详细信息

目的研究树突状细胞在不同Toll样受体(TLR)配体刺激下的早期反应。方法将鼠骨髓细胞诱导分化得到DC,利用TLR配体刺激,采用芯片分析方法研究其免疫相关基因在9h的表达;采用细胞因子分析系统,检测了12、48h细胞培养上清中细胞因子、趋化因子的产生。结果在给予LPS、PolyI:C、R848、CpG和anti-CD40刺激9h后,IL-1、IL-2rg、IL-13、CCL2、CCL4和CCL7的基因表达明显升高,CCL3、CCL5和CXCL9、CXCL10、CXCL11的表达增加最为显著(P<0.01);而IL-10(PolyI:C除外),CCL-6的表达降低(P<0.05)。培养12h后,IL-1、IL-6、IL-10、IL-12(p40)、IL-12(p70)、TNFa、G-CSF、GM-CSF、KC和MIP-1a(CCL3)产生在5种TLR配体刺激下均显著增加(P<0.01);培养48h后,IL-1、IL-10、IL-12(p40)、IL-12(p70)、TNFa、IFN-γ、G-CSF和MIP-1a(CCL3)产生也同样显著增加(P<0.01)。相对于其它TLR配体,CpG刺激时MIP-1a(CCL3)的产生增加更明显,与基因芯片结果相似。结论本研究揭示了不同TLR配体刺激对DC细胞因子和趋化因子表达量的调节,为TLR配体对DC分化和功能的作用机理提供了更多证据。

关键词：树突细胞 Toll样受体细胞因子

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人RGS1基因克隆表达及其功能分析

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免疫学杂志 2009年第1期25卷 27-30页

作者：刘昱焦国慧张灼寒曾斌陈思张圆杨荣存南开大学医学院免疫学教研室

目的克隆并构建人RGS1表达载体,转染U937细胞和树突细胞,进行功能分析。方法通过RT-PCR方法克隆人RGS1基因,将其连接到pcDNA 3.1/V5表达载体。然后以连接的质粒为基础通过报告基因化学发光及ELISA方法对人RGS1基因的进行初步分析。结果... 详细信息

目的克隆并构建人RGS1表达载体,转染U937细胞和树突细胞,进行功能分析。方法通过RT-PCR方法克隆人RGS1基因,将其连接到pcDNA 3.1/V5表达载体。然后以连接的质粒为基础通过报告基因化学发光及ELISA方法对人RGS1基因的进行初步分析。结果经扩增及序列测定表明pcDNA-RGS1质粒构建成功,在U937细胞和树突细胞中可以表达。RGS1对U937细胞转录因子NFκ-B的活性有明显的抑制作用,同时明显上调树突细胞细胞因子IL-6的表达。结论在pcDNA-RGS1质粒成功构建基础上,证明了人RGS1基因具有免疫调节功能,为进一步研究其免疫应答中的调节作用奠定了基础。

关键词：免疫调节 RGS1基因树突细胞

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Th17细胞的分化调节

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中国免疫学杂志 2009年第1期25卷 89-94页

作者：焦国慧杨荣存南开大学医学院免疫学教研室天津300071

CD4^+T细胞根据其产生的细胞因子的不同分为不同的亚群,包括Th1、Th2、调节T细胞和Th17细胞。Th17细胞能够通过产生一系列细胞因子以及与其他免疫细胞的相互作用,发挥免疫调节效应,在与免疫相关疾病的发生、发展和转归中起着决定性作用... 详细信息

CD4^+T细胞根据其产生的细胞因子的不同分为不同的亚群,包括Th1、Th2、调节T细胞和Th17细胞。Th17细胞能够通过产生一系列细胞因子以及与其他免疫细胞的相互作用,发挥免疫调节效应,在与免疫相关疾病的发生、发展和转归中起着决定性作用。[第一段]

关键词：细胞因子分化调节 CD4^+T细胞免疫调节效应免疫相关疾病调节T细胞相互作用免疫细胞

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APOE对鼠RAW264.7细胞系内TLR信号通路的调节

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基础医学与临床 2008年第10期28卷 1015-1020页

作者：杨曙光彭茜俞银燕曾彬焦国慧张圆杨荣存南开大学医学院免疫学教研室天津300071

目的分析载脂蛋白E基因(APOE)对RAW264.7细胞内的TLR信号通路的调节作用。方法克隆鼠APOE基因并建立表达APOE的RAW264.7稳定细胞系,使用各种Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)配体进行刺激,用报告基因化学发光检测转录因子活性,流式... 详细信息

目的分析载脂蛋白E基因(APOE)对RAW264.7细胞内的TLR信号通路的调节作用。方法克隆鼠APOE基因并建立表达APOE的RAW264.7稳定细胞系,使用各种Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)配体进行刺激,用报告基因化学发光检测转录因子活性,流式细胞仪检测细胞表面免疫分子。结果在LPS刺激下,APOE基因抑制NF-κB的活性(P<0.05),但对AP-1活性有促进作用(P<0.05);在PolyI:C刺激下,APOE促进NF-κB和AP-1两者的活性(P<0.05)。在PGN刺激时,APOE明显上调B7-H1的表达,但对CD86、PD-1、CD11c及Gr-1的表达有抑制作用。结论APOE基因可以调节TLR信号通路中NF-κB的活性,也可调节多个具有免疫调节功能的表面分子的表达,这样APOE可能具有免疫调节功能。

关键词： APOE TLR 免疫调节转录因子

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肺正常组织与癌变组织的表面增强拉曼光谱

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光谱学与光谱分析 2007年第10期27卷 2045-2048页

作者：刘燕楠邹祖全刘燕青徐晓轩俞钢张存洲南开大学物理科学学院光子学中心南开大学物理科学学院生物物理系武警医学院病理学教研室天津300162

采用共焦显微拉曼光谱进行肺正常组织与癌变组织的表面增强拉曼光谱测试,拉曼位移测试范围为300～1700cm-1。根据得到的肺正常和癌变组织的表面增强拉曼光谱,对比分析了两者的特点与差异。选取蛋白质主链构象中构象不灵敏的CH2弯曲振动... 详细信息

采用共焦显微拉曼光谱进行肺正常组织与癌变组织的表面增强拉曼光谱测试,拉曼位移测试范围为300～1700cm-1。根据得到的肺正常和癌变组织的表面增强拉曼光谱,对比分析了两者的特点与差异。选取蛋白质主链构象中构象不灵敏的CH2弯曲振动在1454cm-1的谱线为内标,发现相比肺正常组织,癌变组织蛋白质主链中酰胺Ⅲ和酰胺Ⅰ谱带的有序构象明显减少,对α螺旋和无规则卷曲的损伤比较严重,β回折几乎消失,而骨架C—N,C—C伸缩振动却出现了与前2个谱带截然相反的状况,有序构象显著增加,蛋白质侧链构象变化与主链相比则相对复杂;DNA的骨架磷酸基团、脱氧核糖、磷酸-脱氧核糖和碱基的含量总体呈增加趋势;RNA的情况与DNA类似;磷脂的链内纵向有序性参数明显下降。

关键词：表面增强拉曼光谱肺正常组织肺癌变组织

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