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南方医科大学学报 2009年第5期29卷 986-989页

作者：王见璋陈清申洪南方医科大学病理学教研室广东广州510515 南方医科大学流行病学教研室广东广州510515

目的通过检测复发性口腔溃疡患者(ROU)常见口腔菌群的变化,探讨口腔菌群改变与复发性口腔溃疡间的关系。方法分别收集处于溃疡期(溃疡组)与愈合期(愈合组)的复发性口腔溃疡患者及健康成人(对照组)的唾液,用细菌16SrRNA荧光定量PCR法对... 详细信息

目的通过检测复发性口腔溃疡患者(ROU)常见口腔菌群的变化,探讨口腔菌群改变与复发性口腔溃疡间的关系。方法分别收集处于溃疡期(溃疡组)与愈合期(愈合组)的复发性口腔溃疡患者及健康成人(对照组)的唾液,用细菌16SrRNA荧光定量PCR法对唾液中常见的3种口腔菌群(链球菌、韦荣氏菌、奈瑟氏菌)进行定量检测及统计分析。结果溃疡组链球菌及韦荣氏菌含量的对数值分别为7.30±0.89copies/ml和8.29±0.77copies/ml,均显著低于对照组(8.15±0.55copies/ml和8.93±0.76copies/ml,P<0.01),溃疡组与愈合组间的差异无统计学意义;愈合组链球菌含量的对数值为7.51±0.81copies/ml,显著低于对照组(8.15±0.55copies/ml,P<0.01),而两组间韦荣氏菌含量的对数值差异无统计学意义;奈瑟氏菌含量的对数值在3组之间的差异均无统计学意义。结论复发性口腔溃疡患者唾液中链球菌及韦荣氏菌的含量较非口腔溃疡者降低,提示复发性口腔溃疡的发生与口腔中链球菌及韦荣氏菌的减少性菌群变化有关。

关键词：复发性口腔溃疡荧光定量PCR 链球菌韦荣氏菌奈瑟氏菌

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大肠癌组织paxillin mRNA表达及其临床病理意义

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中国现代医学杂志 2008年第20期18卷 2931-2934页

作者：杨红军丁彦青周军南方医科大学病理学教研室广东广州510515

目的检测桩蛋白(paxillin) mRNA在大肠癌及癌旁正常组织中的表达,并探讨其在大肠癌发生发展中的临床病理意义。方法采用荧光定量逆转录PCR(FQ-RT-PCR)检测41例大肠癌及癌旁正常组织中paxillin mRNA的表达。结果paxilin mRNA在大肠癌组... 详细信息

目的检测桩蛋白(paxillin) mRNA在大肠癌及癌旁正常组织中的表达,并探讨其在大肠癌发生发展中的临床病理意义。方法采用荧光定量逆转录PCR(FQ-RT-PCR)检测41例大肠癌及癌旁正常组织中paxillin mRNA的表达。结果paxilin mRNA在大肠癌组织中表达较高,而在癌旁正常组织中表达较低(P=0.000);有淋巴结转移者较无转移者paxillin mRNA表达高(P=0.000);癌组织浸润程度越深paxillin mRNA表达越高(P=0.007)。结论paxillin与大肠癌的浸润转移有关,可作为大肠癌发生、发展的预测指标之一。

关键词：大肠癌桩蛋白荧光定量PCR

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人鼻咽癌细胞株CNE2对NK细胞KIR/NKG2D受体的免疫编辑作用及其对NK细胞杀伤功能的影响

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南方医科大学学报 2007年第3期27卷 247-249页

作者：郭坤元梅家转姚开泰南方医科大学基础医学院病理学教研室广东广州510515 南方医科大学珠江医院血液科广东广州510282

目的探讨NK细胞与表达NKG2D配体的人鼻咽癌细胞株CNE2混合培养后4、24、48h时KIR、NKG2D的变化及其对NK细胞杀伤CNE2细胞活性的影响。方法PCR-SSP法检测CNE2细胞HLA-A、B、Cw表型、NK细胞KIR表型(选择3例健康者为试验对象),流式细胞仪... 详细信息

目的探讨NK细胞与表达NKG2D配体的人鼻咽癌细胞株CNE2混合培养后4、24、48h时KIR、NKG2D的变化及其对NK细胞杀伤CNE2细胞活性的影响。方法PCR-SSP法检测CNE2细胞HLA-A、B、Cw表型、NK细胞KIR表型(选择3例健康者为试验对象),流式细胞仪检测对照组(新鲜分离的NK细胞)KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1、NKG2D的表达情况。IL2组(IL2培养的NK细胞)、CNE2组(CNE2、IL2、NK细胞混合培养)培养后4、24、48h时KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1、NKG2D的表达情况,LDH释放法测定IL2组及CNE2组培养24h后的NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性。结果CNE2细胞表面HLA-A、B、Cw表型为A2,24;B18,35;Cw4,7。3例健康者均表达KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1。CNE2组4、24、48h时KIR2DL1、KIR2DL3表达较对照组、IL2组明显升高(P<0.01),NKG2D表达较对照组、IL2组明显降低(P<0.01),KIR3DL1表达与对照组、IL2组相比无明显变化(P>0.05)。IL2组4、24、48h时KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1及NKG2D表达与对照组相比无明显变化(P>0.05)。IL2组、CNE2组培养24h后的NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性在效靶比10∶1时分别为(26.96±1.47)%和(2.74±1.64)%,两者相比差异有统计学意义(P<0.01);效靶比20∶1时分别为(35.74±3.59)%和(4.57±2.41)%,两者相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论NK细胞与NKG2D配体阳性的肿瘤细胞持续性接触,下调NK细胞表面NKG2D表达,上调NK细胞表面与HLAI类分子相结合的KIR表达,导致NK细胞对靶细胞杀伤活性减低。本研究阐明了编辑后的NK细胞杀伤活性减低的分子基础,同时提示阻断HLAI类分子与KIR的结合或者增强NK细胞表面NKG2D的表达将有利于提高NK细胞杀伤肿瘤细胞的活性。

关键词：鼻咽肿瘤自然杀伤细胞 NKG2D 杀伤细胞免疫球蛋白样受体免疫编辑

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组织形态学方法观察汗腺取材部位的改进

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中药药理与临床 2005年第5期21卷 63-64页

作者：刘国清李祖国余林中罗佳波南方医科大学中医系中药新药研究实验室广州510515 南方医科大学中医系病理学教研室广州510515 南方医科大学中医系中医系药理药化教研室广州510515

目的:探讨麻黄汤对大鼠腋窝部和足趾部皮肤汗腺的分泌效果。方法:两只大鼠分别灌胃麻黄汤及同体积的生理盐水,麻黄汤剂量为42g生药/kg,给药后30m in处死大鼠,分别切取腋窝部和足趾部皮肤,按常规制作光镜切片。结果:麻黄汤能促进腋窝部... 详细信息

目的:探讨麻黄汤对大鼠腋窝部和足趾部皮肤汗腺的分泌效果。方法:两只大鼠分别灌胃麻黄汤及同体积的生理盐水,麻黄汤剂量为42g生药/kg,给药后30m in处死大鼠,分别切取腋窝部和足趾部皮肤,按常规制作光镜切片。结果:麻黄汤能促进腋窝部和足趾部皮肤汗腺的分泌,腋窝部皮肤汗腺空泡发生率较足趾部皮肤高。结论:取材腋窝部皮肤较足趾部皮肤观察汗腺分泌效果更理想。

关键词：组织形态学发汗汗腺腋窝足趾空泡麻黄汤

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鼻咽癌发展过程中细胞超微结构的体视学研究

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实用医学杂志 2010年第15期26卷 2697-2700页

作者：申玉梅申洪南方医科大学病理学教研室广州市510515

目的:探讨鼻咽癌发生发展过程中形态学特点及其变化规律。方法:应用体视学技术,在超微结构水平对人鼻咽部正常假复层纤毛柱状上皮、疑似鼻咽癌最后病理为上皮增生或慢性炎症以及鼻咽癌细胞株(5-8F和CNE-1)的细胞和细胞核的形态进行了定... 详细信息

目的:探讨鼻咽癌发生发展过程中形态学特点及其变化规律。方法:应用体视学技术,在超微结构水平对人鼻咽部正常假复层纤毛柱状上皮、疑似鼻咽癌最后病理为上皮增生或慢性炎症以及鼻咽癌细胞株(5-8F和CNE-1)的细胞和细胞核的形态进行了定量测试,用于定量分析的体视学参数包括细胞核的周长(Cn)、面积(An)、体积(Vn)、体积密度(Vv)、数密度(Nv)、表面积密度(Sv)、细胞的周长(Cc)、面积(Ac)共8个参数。结果:8个参数按正常鼻咽上皮→慢性炎症上皮或增生上皮→鼻咽癌细胞株的顺序逐渐增大,且数据在统计学上具有显著性差异。结论:本研究提示鼻咽癌病理发展存在一个由正常上皮→异性增生→癌的逐步增进的过程,这一改变具有病理学意义。

关键词：鼻咽肿瘤超微结构体视学参数

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地高辛标记斑马鱼cd99l2基因RNA探针的制备

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南方医科大学学报 2010年第5期30卷 969-972页

作者：温宗华张艳吴自勍周新华韩西群张文清赵彤南方医科大学南方医院病理科广东广州510515 南方医科大学广东省分子肿瘤病理学重点实验室广东广州510515 南方医科大学细胞生物学教研室广东广州510515

目的制备用于斑马鱼胚胎早期cd99l2基因时空表达检测的地高辛标记RNA探针。方法设计引物,构建cd99l2/pGM-T重组质粒,用SacII和SalI分别进行酶切得到线性化DNA片段,以Sp6RNA聚合酶和T7RNA聚合酶转录合成地反义和正义地高辛标记的RNA探针... 详细信息

目的制备用于斑马鱼胚胎早期cd99l2基因时空表达检测的地高辛标记RNA探针。方法设计引物,构建cd99l2/pGM-T重组质粒,用SacII和SalI分别进行酶切得到线性化DNA片段,以Sp6RNA聚合酶和T7RNA聚合酶转录合成地反义和正义地高辛标记的RNA探针,用整体原位杂交法检测斑马鱼胚胎早期cd99l2基因的表达。结果成功构建了cd99l2/pGM-T重组质粒,体外转录获得反义和正义RNA探针,反义探针杂交检测证实cd99l2基因在斑马鱼胚胎早期发育过程中中枢神经系统呈现高表达,正义探针未检测到表达信号。结论本研究制备的反义cd99l2RNA探针,兼顾了特异性和敏感性,能有效检测斑马鱼胚胎早期cd99l2基因的定位表达,而正义探针可以作为阴性对照,为进一步探究cd99l2基因在斑马鱼发育过程中的作用机制奠定了基础。

关键词：斑马鱼原位杂交探针 cd99l2

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散发性乳腺癌组织中BRCA1选择性调节黄体酮受体A的表达

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中华医学杂志 2010年第20期90卷 1399-1402页

作者：王辛赵彤赵嘉佳熊静波南方医科大学基础医学院病理学系广州510515 南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室

目的观察散发性乳腺癌组织中BRCA1、黄体酮受体A（progesterone receptor A,PRA）和黄体酮受体B（progesterone receptor B,PRB）的表达,并分析散发性乳腺癌BRCA1对PRA和PRB表达的影响.方法选择南方医科大学附属南方医院病理科乳腺腺... 详细信息

目的观察散发性乳腺癌组织中BRCA1、黄体酮受体A（progesterone receptor A,PRA）和黄体酮受体B（progesterone receptor B,PRB）的表达,并分析散发性乳腺癌BRCA1对PRA和PRB表达的影响.方法选择南方医科大学附属南方医院病理科乳腺腺病和散发性浸润性乳腺导管癌病例蜡块包埋组织各68例,应用免疫组织化学法检测散发性浸润性乳腺导管癌组织BRCA1、PRA和PRB蛋白及乳腺腺病组织BRCA1蛋白的表达,用Wilcoxon两样本检验比较浸润性导管癌和乳腺腺病BRCA1表达的高低,用x2检验分析浸润性导管癌BRCA1对PRA和PRB表达的影响.结果（1）浸润性导管癌组织BRCA1蛋白阳性表达率为60.3%（41/68）,低于乳腺腺病BRCA1蛋白阳性表达率85.3%（58/68）,两者之间差异有统计学意义（P〈0.01）;（2）浸润性导管癌组织中,BRCA1表达阴性标本PRA的阳性率为81.5%（22/27）,高于BRCA1表达阳性标本PRA的阳性率53.7%（22/47）,差异有统计学意义（P〈0.05）,提示BRCA1可影响PRA的表达.浸润性导管癌组织中PRB的表达率在BRCA1表达阳性标本与表达阴性标本之间差异无统计学意义（P〉0.05）,提示BRCA1不影响PRB的表达.结论在散发性乳腺癌组织中,BRCA1表达阴性选择性地与PRA的高表达相关联,但与PRB表达率不相关联,提示BRCA1在散发性乳腺癌组织中选择性地调节PRA的表达.

关键词：乳腺肿瘤 BRCA1基因黄体酮受体

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TXNIP基因与肿瘤发生及转移

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中国生物化学与分子生物学报 2012年第3期28卷 222-226页

作者：李立夫梁莉南方医科大学第一临床医学院广州510515 南方医科大学病理学教研室广州510515

硫氧还蛋白结合蛋白(thioredoxin-interacting protein,TXNIP)在细胞增殖、凋亡、分化的过程以及肿瘤、应激性疾病的发生中具有重要功能.作为一个氧还反应的调节子,TXNIP能与硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)相结合,下调Trx的表达,而Trx则在... 详细信息

硫氧还蛋白结合蛋白(thioredoxin-interacting protein,TXNIP)在细胞增殖、凋亡、分化的过程以及肿瘤、应激性疾病的发生中具有重要功能.作为一个氧还反应的调节子,TXNIP能与硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)相结合,下调Trx的表达,而Trx则在DNA的损伤及细胞凋亡机制中有着关键的作用.本文阐述了TXNIP基因的特征及其蛋白的生物学功能,并简要总结TXNIP在人类肿瘤中低表达的研究成果.TXNIP基因是一个新的抑癌基因,它在人类乳腺癌、肝癌、肺癌等癌组织细胞中均表达下降,并且与肿瘤的转移相关.TXNIP的缺失可以促使肿瘤细胞的增殖和抑制细胞凋亡的进程.而在抗肿瘤机制中,TXNIP可通过参与细胞周期阻滞、低氧调节、影响NK细胞(naturalkiller cell,NK cell)发育等过程介导肿瘤的发生发展.

关键词：硫氧还蛋白结合蛋白(TXNIP) 硫氧还蛋白(Trx) 肿瘤转移

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青年大肠癌微卫星不稳定检测在筛查HNPCC中的应用

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广东医学 2007年第2期28卷 219-221页

作者：杨磊丁彦青李国新余江王瑜周军杨红军张进华南方医科大学病理学教研室广州510515 南方医科大学南方医院普外科广州510515

目的检测青年(年龄≤40岁)大肠癌中微卫星不稳定发生率,探讨其在遗传性非息肉病性大肠癌(HNPCC)筛查中的作用。方法选取73例中国南方青年大肠癌患者,运用显微切割技术准确获取结直肠癌组织和对应的正常肠黏膜组织,对5个微卫星位点进行... 详细信息

目的检测青年(年龄≤40岁)大肠癌中微卫星不稳定发生率,探讨其在遗传性非息肉病性大肠癌(HNPCC)筛查中的作用。方法选取73例中国南方青年大肠癌患者,运用显微切割技术准确获取结直肠癌组织和对应的正常肠黏膜组织,对5个微卫星位点进行不稳定性检测。结果41(56.16%)例为微卫星高度不稳定,21(28.77%)例为微卫星低度不稳定,11(15.07%)例为微卫星稳定,微卫星高度不稳定发生率随着患者年龄的降低而迅速增加。结论青年大肠癌微卫星不稳定分析能预测DNA错配修复基因变异发生情况,从而有效地进行HNPCC患者及家系的初步筛查。

关键词：结肠直肠肿瘤遗传性非息肉性青年发病微卫星分析

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肿瘤相关未知功能基因MGC39325的克隆及生物信息学分析

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世界华人消化杂志 2005年第9期13卷 1059-1064页

作者：李学农李亚玲刘国炳丁彦青南方医科大学病理学教研室广东省广州市510515 南方医科大学南方医院妇产科广东省广州市510515

目的:克隆与肿瘤恶性演进相关但未知功能的新基因MGC39325,构建其真核表达载体,并应用生物信息学初步探讨其功能.方法:应用RT-PCR技术从LoVo细胞中扩增MGC39325基因全长ORF,选用pGEM-T载体进行TA克隆,再将其亚克隆到真核表达载体pcDNA3.... 详细信息

目的:克隆与肿瘤恶性演进相关但未知功能的新基因MGC39325,构建其真核表达载体,并应用生物信息学初步探讨其功能.方法:应用RT-PCR技术从LoVo细胞中扩增MGC39325基因全长ORF,选用pGEM-T载体进行TA克隆,再将其亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)的启动子和终止子之间,通过PCR、限制性酶切分析及测序进行鉴定.应用生物信息学初步分析其染色体定位、蛋白序列、结构域及功能.结果:从LoVo细胞中扩增出1158bp的cDNA,成功进行TA克隆并进一步亚克隆至pcDNA3.1(+)真核表达载体,测序证实为人MGC39325基因.生物信息学分析显示此基因定位于8q12.1,含有2个外显子(1113bp),DNA序列含有表皮样生长因子位点标记(3-14,12-23)、整合素beta链半胱氨酸富集区位点标记(183-196)、铁氧化还原蛋白铁硫结合区位点标记(389-397,1027-1038)、第Ⅷ因子结构域位点标记(105-157,548-591)、羧基端胱氨酸结位点标记(744-782)等,编码由370个氨基酸组成蛋白质,Mr40727.9,pI值为9.45,疏水性平均值为-0.668,含3个低复杂性区域结构,氨基酸序列含有豆蔻酰化位点(19-24,130-135)、cAMP和cGMP4&赖性蛋白激酶(38-41,46-49,204-207)、酪蛋白激酶(49-52,158-161)、酪氨酸激酶(53-61)、蛋白激酶C磷酸化位点(97-99,140-142,208-210)、N-糖基化位点(97-99)等结构域,提示这一新的蛋白质可能在细胞生长、黏附及细胞信号转导方面具有重要功能.结论:成功地克隆了人MGC39325基因全长ORF,构建了其pcDNA3.1(+)真核表达栽体,为进一步研究其功能及其肿瘤中的作用创造了条件.

关键词：生物信息学分析 pcDNA3.1(+) 功能基因肿瘤相关 pcDNA3.1(+) 真核表达载体表皮样生长因子依赖性蛋白激酶 Lovo细胞 LoVo细胞细胞信号转导 TA克隆 PCR技术染色体定位限制性酶切 DNA序列氨基酸组成氨基酸序列酪氨酸激酶

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