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动物医学进展 2019年第7期40卷 39-42页

作者：张晟林晓琳和法莲彭珊申红芬南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515 南方医科大学基础医学院肿瘤研究所广东广州510515 中山大学中山医学院广东广州510080

旨在研究活化转录因子4(ATF4)基因敲除对小鼠眼睛发育的影响。将小鼠分为野生型(WT)组和ATF4敲除(KO)组,采用器官大体观察和组织病理学分析,明确ATF4基因敲除后对小鼠眼睛发育的影响。结果发现,WT小鼠眼球大小及组织结构正常。而ATF4^-/... 详细信息

旨在研究活化转录因子4(ATF4)基因敲除对小鼠眼睛发育的影响。将小鼠分为野生型(WT)组和ATF4敲除(KO)组,采用器官大体观察和组织病理学分析,明确ATF4基因敲除后对小鼠眼睛发育的影响。结果发现,WT小鼠眼球大小及组织结构正常。而ATF4^-/-小鼠眼球体积缩小;脉络膜和视网膜层层次结构基本存在,各个层次结构紊乱;神经节细胞层细胞数基本正常,约2层细胞,但细胞排列不整齐;内丛状层结构疏松,厚度增加;外核层细胞层次增加,超过10层,同时结构松散、形成裂隙和囊样结构;内核层细胞层次减少、约6层~8层细胞,细胞排列轻度紊乱。整个视网膜在局部形成乳头状突起;脉络膜基本正常,但没有乳头状的睫状突形成。眼球内玻璃体缺失,由水肿的纤维结缔组织构成,中央可见多个小血管。总之,ATF4^-/-小鼠展示了小眼表型,同时ATF4^-/-小鼠眼睛结构异常。

关键词：活化转录因子4 基因敲除小鼠晶状体小眼症

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新型pH响应性噻虫嗪纳米脂质体的制备及其杀虫活性

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农药学学报 2020年第6期22卷 1054-1060页

作者：杨君张正崔忠凯杨青大连理工大学生物工程学院辽宁大连116024 南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广州510515 中国农业科学院植物保护研究所北京100193 中国农业科学院(深圳)农业基因组研究所广东深圳518120

为提高农药利用率,减少环境风险,提高农药靶向性,利用胆固醇和硬脂胺通过自组装形成的非磷脂类纳米脂质体作为农药载体,构建了具有缓控释特性的噻虫嗪纳米脂质体。电镜和粒度分析结果表明,该纳米制剂呈现出良好的分散性和稳定性,载药后... 详细信息

为提高农药利用率,减少环境风险,提高农药靶向性,利用胆固醇和硬脂胺通过自组装形成的非磷脂类纳米脂质体作为农药载体,构建了具有缓控释特性的噻虫嗪纳米脂质体。电镜和粒度分析结果表明,该纳米制剂呈现出良好的分散性和稳定性,载药后的纳米粒径为173.7 nm±1.6 nm,载药量为8.97%,带有正电荷的脂质体与噻虫嗪间存在静电相互作用。体外释放试验结果表明,相对于原药组8 h内完全释放,噻虫嗪纳米脂质体8 h累计释放率为62%,实现了噻虫嗪的缓释效果。制备的噻虫嗪纳米脂质体具有碱性pH敏感性,其中当pH值为10.0时噻虫嗪的释放速率显著提高,有助于噻虫嗪在鳞翅目昆虫独特的碱性pH中肠环境中进行响应性释放和积累。以亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis为模式昆虫的杀虫活性试验结果表明,有效成分为0.6 mg/mL的噻虫嗪纳米脂质体较原药组的杀虫活性更佳,作用1 d后原药组仅部分影响其生命活动,而纳米脂质体组存活率已降至60%以下,表现出纳米脂质体载体提高了噻虫嗪对玉米螟的杀虫活性。以非磷脂类脂质体作为农药载体,为农药活性成分的定向可控递送和缓控释提供了新的理论依据与技术途径,不仅可高效提高农药利用率,同时具备经济和环境友好等优势,具有广阔的应用前景。

关键词： pH响应性噻虫嗪非磷脂类脂质体纳米农药亚洲玉米螟杀虫活性

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腺苷酸激酶AK1在小鼠皮肤创面愈合中的作用

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母婴世界 2020年第25期 1-2页

作者：胡晓张汉彬广州市红十字会医院暨南大学医学院附属广州红十字会医院烧伤整形科广东广州 510220 南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州 510515

目的:探讨腺苷酸激酶AK1在小鼠皮肤创面愈合中的作用.方法:Ak1基因敲除的ES细胞购自于苏大-剑桥基因组中心,通过ES胚胎注射,产生嵌合鼠.回交后再自交产生最终的纯合敲除鼠(Ak1-/-,KO鼠),同窝出生的野生型小鼠作为对照鼠(Ak1+/+,WT鼠).取... 详细信息

目的:探讨腺苷酸激酶AK1在小鼠皮肤创面愈合中的作用.方法:Ak1基因敲除的ES细胞购自于苏大-剑桥基因组中心,通过ES胚胎注射,产生嵌合鼠.回交后再自交产生最终的纯合敲除鼠(Ak1-/-,KO鼠),同窝出生的野生型小鼠作为对照鼠(Ak1+/+,WT鼠).取8周龄雄鼠,麻醉后于背部脊椎两侧各剪一个直径约4 mm的皮肤创面,分析创面愈合速度.并于d7和d14每组各处死一半小鼠,收集创面皮肤标本.分析细胞增殖、凋亡,炎症因子水平,以及AMP、ADP、ATP水平及比值.结果:KO组与WT组的创面愈合速度基本相当,细胞增殖和凋亡均无显著差异,α-SMA的表达模式无显著改变,炎症水平基本相当,ATP/ADP、ADP/AMP的比值也接近.结论:Ak1基因缺失没有改变小鼠皮肤创面愈合的速度,AK1不是生理条件下小鼠皮肤创面愈合所必需的.

关键词：腺苷酸激酶1 基因敲除创面愈合腺苷酸

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三种植物多酚类物质对糖尿病小鼠皮肤创面愈合效果的对比研究

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母婴世界 2020年第26期 12-14页

目的:对比三种植物多酚类物质对糖尿病小鼠皮肤创面愈合的效果.方法:50只8周龄的野生型B6雄鼠,10只为对照组,40只腹腔注射链脲佐菌素构建Ⅱ型糖尿病模型.模型鼠均分为四组,分别灌胃茶多酚、染料木素、槲皮素或生理盐水,连续7d.随后于背... 详细信息

目的:对比三种植物多酚类物质对糖尿病小鼠皮肤创面愈合的效果.方法:50只8周龄的野生型B6雄鼠,10只为对照组,40只腹腔注射链脲佐菌素构建Ⅱ型糖尿病模型.模型鼠均分为四组,分别灌胃茶多酚、染料木素、槲皮素或生理盐水,连续7d.随后于背部脊椎两侧各剪去直径约4mm的皮肤,再灌胃14d.监测创面愈合速度;于d7和d14每组各处死5只小鼠,收集创面皮肤标本.分别检测细胞增殖和凋亡,炎症因子水平和氧化应激状态.结果:糖尿病组创面愈合明显延缓;茶多酚和染料木素处理后3d即明显促进创面愈合;茶多酚和染料木素促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,明显抑制炎症水平,显著缓解氧化应激;但槲皮素作用均很弱.结论:茶多酚和染料木素能促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,促进糖尿病皮肤创面愈合.二者可能通过抑制炎症反应和氧化应激发挥作用.

关键词：糖尿病创面愈合氧化应激植物多酚

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白藜芦醇促进糖尿病小鼠皮肤创面愈合的实验研究

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母婴世界 2020年第24期 2-3页

目的:评价白藜芦醇促进糖尿病小鼠皮肤创面愈合的效果.方法:取18只8周龄的野生型B6雄鼠,6只为正常对照组,12只单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ,150 mg/kg)诱导Ⅱ型糖尿病模型.糖尿病鼠均分为两组,分别灌胃生理盐水和白藜芦醇[100 mg/(kg... 详细信息

目的:评价白藜芦醇促进糖尿病小鼠皮肤创面愈合的效果.方法:取18只8周龄的野生型B6雄鼠,6只为正常对照组,12只单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ,150 mg/kg)诱导Ⅱ型糖尿病模型.糖尿病鼠均分为两组,分别灌胃生理盐水和白藜芦醇[100 mg/(kg·d)],连续7d.所有小鼠于背部脊椎两侧各造一个皮肤创面.白藜芦醇和糖尿病组各分别再连续灌胃白藜芦醇和生理盐水14d,监测创面愈合速度;于伤后7和14d各处死3只小鼠,收集创面皮肤标本.Ki-67和TUNEL荧光染色分别检测细胞增殖和凋亡;qPCR检测炎症因子水平,通过还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)的比值,分析氧化应激状态.结果:糖尿病模型组的创面愈合明显延缓;白藜芦醇组自7d始创面愈合明显加快.白藜芦醇组的细胞增殖显著增加,细胞凋亡显著降低,促炎因子mRNA水平显著下降,GSH/GSSG的比值显著上升.结论:白藜芦醇能显著促进糖尿病皮肤创面愈合.缓解糖尿病条件下的炎症反应和氧化应激,可能是白藜芦醇发挥作用的机制.

关键词：白藜芦醇糖尿病创面愈合氧化应激

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中国人血红蛋白病突变数据集和临床辅助决策管理系统

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遗传 2019年第8期41卷 746-753页

作者：张倩倩张立唐耀华李厦戎徐晓鹏祁鸣徐湘民南方医科大学基础医学院医学遗传学教研室广州510800 迪安医学检验中心杭州310012 聚道科技北京100000 浙江大学医学院细胞生物学与医学遗传学系杭州310000 浙江大学医学院附属邵逸夫医院妇产科杭州310000

个体基因组信息得益于大数据的积累,其应用不再局限于科学研究,正在经历逐步走向日常医疗实践的过程中。对疾病关联基因组信息的系统整理、归档及合理应用配置是未来精准医学的重要基础。血红蛋白病在我国南方发病率高,其分子病理学基... 详细信息

个体基因组信息得益于大数据的积累,其应用不再局限于科学研究,正在经历逐步走向日常医疗实践的过程中。对疾病关联基因组信息的系统整理、归档及合理应用配置是未来精准医学的重要基础。血红蛋白病在我国南方发病率高,其分子病理学基础有明显的种族特异性。为助力我国南方血红蛋白病的临床诊断和遗传筛查的应用,本项目团队建立了中国人群血红蛋白病变异谱及表型谱 LOVD 基因变异数据管理系统,并通过设计全面整合和高效分析的在线辅助精确诊断及风险评估系统,展示了基于云端标准化的特定血红蛋白病变异注释库和诊断知识库辅助医生快速做出综合、全面的诊断和遗传咨询的操作。通过数据整合和人工智能技术的结合提高疾病临床决策效率的方法和经验,可为其他疾病的临床和预防应用起示范作用。

关键词： LOVD 血红蛋白病变异谱临床辅助决策

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在肾脏高效导入miR-483-5p的方法

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南方医科大学学报 2018年第2期38卷 141-147页

作者：夏颖周雪娟古文清赵岩岩肖潇白晓春刘俊李明南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515 广州军区广州总医院泌尿外科广东广州510010

目的研究在肾脏高效导入目的基因miR-483-5p的方法。方法肾皮质注射miR-483-5p慢病毒:取35只C57BL/6J小鼠,随机分为空白对照组、慢病毒低剂量组(每侧肾皮质注射5μL慢病毒)和慢病毒高剂量组(每侧肾皮质注射20μL慢病毒),注射后7 d和21 ... 详细信息

目的研究在肾脏高效导入目的基因miR-483-5p的方法。方法肾皮质注射miR-483-5p慢病毒:取35只C57BL/6J小鼠,随机分为空白对照组、慢病毒低剂量组(每侧肾皮质注射5μL慢病毒)和慢病毒高剂量组(每侧肾皮质注射20μL慢病毒),注射后7 d和21 d处死取材;构建可诱导全身过表达miR-483-5p的转基因小鼠;利用cre-loxp系统构建肾小管特异过表达miR-483-5p的转基因小鼠。3种模型小鼠利用全自动生化分析仪检测血清中尿素氮(BUN)水平判断肾功能,组织切片HE染色观察肾脏组织结构,TUNEL法检测肾脏细胞凋亡。Real-time q PCR检测miR-483-5p在肾脏的表达。结果 3种过表达miR-483-5p小鼠肾功能均正常,肾脏组织结构无明显变化,肾脏细胞无凋亡。肾皮质注射20μL LV3-miR-483-5p后21 d表达最高(1.2±0.43 vs8.6±1.09,P<0.001)。可诱导全身过表达miR-483-5p的转基因动物在肾脏表达效率较低(0.9±0.09 vs 1.7±0.19,P<0.05),Creloxp转基因小鼠可实现在肾脏特异性表达,且效率较高(1.6±1.13 vs 12.36±3.89,P<0.05)。结论首次构建肾小管特异过表达miR-483-5p的转基因小鼠模型,实现在肾小管特异高效表达,且不影响肾脏结构及功能,可以作为研究miR-483-5p在肾脏中的作用及其机制的良好模型;C57BL/6J小鼠每侧肾皮质注射20μL LV3-miR-483-5p后21 d过表达miR-483-5p效率较高,不影响肾功能,对肾组织无损伤,且模型构建时间较短,为miR-483-5p在肾脏中的作用及其机制研究提供良好的实验模型。

关键词：慢病毒肾组织转基因技术 miR-483-5p

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雌二醇显著上调骨质疏松大鼠成骨细胞内抗氧化酶的表达

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南方医科大学学报 2018年第4期38卷 402-408页

作者：周雪娟夏颖赵岩岩古文清肖潇白晓春刘俊李明南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515 广州军区广州总医院泌尿外科广东广州510010

目的探讨雌二醇对成骨细胞内抗氧化酶表达的影响及在绝经后骨质疏松中的作用。方法构建去卵巢骨质疏松大鼠模型,随机分为SHAM组(假手术组),OVX组(去卵巢手术组),OVX+E2组(雌二醇+去卵巢手术组),3月后检测以下常规指标鉴定骨质疏松模型... 详细信息

目的探讨雌二醇对成骨细胞内抗氧化酶表达的影响及在绝经后骨质疏松中的作用。方法构建去卵巢骨质疏松大鼠模型,随机分为SHAM组(假手术组),OVX组(去卵巢手术组),OVX+E2组(雌二醇+去卵巢手术组),3月后检测以下常规指标鉴定骨质疏松模型是否成功:体质量、血清Ca2+、P、碱性磷酸酶(ALP)、酸性磷酯酶(ACP)以及骨密度。同时检测血清活性氧(H2O2)及抗氧化酶γ-GCS、GSH-px和GSH-ST水平;PCR和Western blot检测雌二醇对成骨样细胞MC3T3-E1、MG63和原代成骨细胞(OB)内关键的抗氧化酶γ-GCS mRNA和蛋白表达的影响;mRNA芯片检测雌二醇对成骨细胞前体MC3T3-E1内84种抗氧化酶表达的影响;利用PCR验证筛选出的有变化的抗氧化酶;利用CCK8检测雌二醇和抗氧化剂NAC对MC3T3-E1细胞增殖的影响。结果去卵巢手术组大鼠体质量增加,血清P、ALP、ACP升高,骨密度显著下降,表明造模成功。同时血清活性氧(H2O2)水平显著增加,而抗氧化酶γ-GCS水平显著下降。造模的同时给予雌二醇预防性治疗,可逆转骨质疏松表型,同时抑制血清活性氧水平,并提高抗氧化酶γ-GCS水平;雌二醇上调MC3T3-E1、MG63及OB中关键的抗氧化酶γ-GCS mRNA和蛋白水平;mRNA芯片筛查到雌激素上调MC3T3-E1细胞内6种抗氧化酶(Gpx6、Gstk1、Nos2、Prdx2、Ngb和Ccs)表达;PCR检测发现雌二醇均上调成骨样细胞MC3T3-E1、MG63及OB内Ccs和Ngb mRNA水平;雌二醇和抗氧化剂NAC促进成骨细胞MC3T3-E1增殖。结论雌二醇显著上调成骨样细胞内抗氧化酶γ-Gcs、Ccs和Ngb的表达。绝经后骨质疏松与体内活性氧增高,抗氧化水平下降密切相关。雌激素缺乏可能通过增加成骨细胞内活性氧水平,降低抗氧化酶水平,启动氧化应激级联反应,进而抑制成骨细胞增殖,加重骨质疏松的进程。

关键词：雌二醇抗氧化酶骨质疏松

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miR-519d过表达促使宫颈癌SiHa细胞基因表达谱发生改变

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南方医科大学学报 2018年第7期38卷 794-799页

作者：曾烨刘洁陈志超郑思荣张汉荣周珏宇南方医科大学南方医院口腔科广东广州510515 南方医科大学南方医院妇产科广东广州510515 南方医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室广东广州510515

目的分析miR-519d转染前后人宫颈癌SiHa细胞基因表达谱的变化。方法向人宫颈癌SiHa细胞中转染模拟物上调细胞内miR-519d的表达,采用人全基因组表达谱芯片筛选其对细胞基因表达谱的影响,结合生物信息学软件进行靶基因预测,确定miR-519d... 详细信息

目的分析miR-519d转染前后人宫颈癌SiHa细胞基因表达谱的变化。方法向人宫颈癌SiHa细胞中转染模拟物上调细胞内miR-519d的表达,采用人全基因组表达谱芯片筛选其对细胞基因表达谱的影响,结合生物信息学软件进行靶基因预测,确定miR-519d的候选靶基因,采用qRT-PCR进行验证。结果 miR-519d表达上调后,共筛选到差异表达基因5172个,其中上调基因2476个,下调基因2796个。结合生物信息学软件进行靶基因预测,共确定164个miR-519d的候选靶基因。随后,对上述基因进行KEGG信号通路分析,采用STRING和pSTIING在线数据库构建候选基因编码蛋白的互作网络、预测转录相关和物理相关关系,发现了一些重要的节点分子。最后,采用qRT-PCR结果对部分关键基因进行了验证,与芯片结果基本一致。结论miR-519d过表达促使人宫颈癌SiHa细胞的基因表达谱发生了显著地改变,结合生物信息学软件获得了164个候选靶基因,为系统、全面地阐明miR-519d在宫颈癌中的作用及其分子机制提供了重要的实验依据。

关键词：微小RNA 基因芯片宫颈癌差异表达基因

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非小细胞肺癌的EGFR-TKI治疗

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国际肿瘤学杂志 2019年第2期46卷 105-108页

作者：龙利丽梁艳玲张兴梅石玉生南方医科大学第一临床医学院广州510515 南方医科大学基础医学院神经生物学教研室广州510515 南方医科大学南方医院放疗科广州510515

表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)是治疗晚期非小细胞肺癌的关键,但后期可产生各种耐药突变。第一、二代EGFR-TKI可显著延长EGFR活化突变型肿瘤患者生存期,第三代EGFR-TKI能有效抑制T790M突变型肿瘤的进展,第四代EGFR-TKI对... 详细信息

表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)是治疗晚期非小细胞肺癌的关键,但后期可产生各种耐药突变。第一、二代EGFR-TKI可显著延长EGFR活化突变型肿瘤患者生存期,第三代EGFR-TKI能有效抑制T790M突变型肿瘤的进展,第四代EGFR-TKI对L858R、T790M突变型和L858R、T790M、C797S突变型肿瘤均有抑制效果。利用循环肿瘤DNA、外泌体RNA能够有效检测EGFR突变类型,可根据突变类型选择EGFR-TKI治疗或联合化疗。

关键词：癌,非小细胞肺受体,表皮生长因子分子靶向治疗表皮生长因子受体酪氨酸酶抑制剂耐药性

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