检索结果-内蒙古大学图书馆

p70/p85核糖体蛋白S6激酶1重组真核表达载体的构建及其在人乳腺癌MCF-7细胞内功能的初步鉴定

中国肿瘤生物治疗杂志 2014年第4期21卷 459-463页

作者：赵莉侯敬申白晓春贾春宏广州医科大学药学院广州蛇毒研究所广东广州510182 南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515 广州医科大学附属第二医院急诊外科广东广州510260

目的:构建p70核糖体蛋白S6激酶1(p70 ribosomal protein S6 kinase 1,p70 S6K1)及p85 S6K1基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)-flag-p70 S6K1和pcDNA3.1(-)-flag-p85 S6K1,并鉴定其在人乳腺癌MCF-7细胞内的表达及功能。方法:以pRK7-HA-S6K1为模板,采用PCR扩增出目的基因片段p70 S6K1、p85 S6K1,克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-)-flag构建重组表达载体pcDNA3.1(-)-flag-p70 S6K1和pcDNA3.1(-)-flag-p85 S6K1,采用PCR、双酶切和DNA测序鉴定。将重组载体转染MCF-7细胞,24 h后采用Western blotting方法检测细胞内p70 S6K1、p85 S6K1蛋白的表达;同时向转染细胞内加入1 mmol/L H2O2处理36 h,观察p70 S6K1、p85 S6K1蛋白对H2O2诱导的细胞死亡的影响。结果:成功扩增得到p70 S6K1、p85 S6K1基因片段并构建重组真核表达载体pcDNA3.1(-)-flag-p70 S6K1和pcDNA3.1(-)-flag-p85 S6K1,重组载体经PCR、双酶切鉴定均出现p70 S6K1和p85S6K1预期条带,DNA测序结果显示其全长基因阅读框完整、正确。重组载体在MCF-7细胞中高效表达flag-p70 S6K1和flag-p85S6K1,且p85 S6K1能增强H2O2诱导的细胞死亡。结论:成功构建重组真核表达载体pcDNA3.1(-)-flag-p70 S6K1和pcDNA3.1(-)-flag-p85 S6K1,均能在MCF-7细胞中高效表达,且p85 S6K1能够增强H2O2诱导的细胞死亡。

关键词：核糖体蛋白S6激酶1 基因重组载体构建真核表达细胞死亡乳腺癌 MCF-7细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

高脂饮食诱导的2型糖尿病模型小鼠的生化及病理分析

引用

南方医科大学学报 2014年第8期34卷 1115-1120页

作者：曾位森黄源坚邵聪文梁宝焕魏铖许万福苏亚茹南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515 佛山市第二人民医院普外科广东佛山528000 深圳市人民医院消化内科广东深圳518020

目的分析高脂饮食结合小剂量链脲佐菌素（STZ）注射方法制备的2型糖尿病（T2DM）模型小鼠的生化及病理改变。方法将C57BL/6J实验小鼠随机分成3组：正常饮食组（NC组）,高脂饮食组（HC组）和高脂饮食加STZ组（HC＋STZ组）。HC＋STZ组高... 详细信息

目的分析高脂饮食结合小剂量链脲佐菌素（STZ）注射方法制备的2型糖尿病（T2DM）模型小鼠的生化及病理改变。方法将C57BL/6J实验小鼠随机分成3组：正常饮食组（NC组）,高脂饮食组（HC组）和高脂饮食加STZ组（HC＋STZ组）。HC＋STZ组高脂高糖饲料饲养1个月后,按40 mg/kg剂量腹腔注射STZ,24 h后再注射1次;HC组高脂高糖饲养,NC组一直用普通饲料饲养,两组注射等量的柠檬酸缓冲液作为对照。注射STZ后每周测定空腹血糖,持续4周;1个月后进行口服葡萄糖试验（OGTT）;然后处死小鼠,对血浆进行相关的生化检测,免疫组化检测胰岛形态结构,病理分析肝脏,肾脏的结构形态情况。结果（1）注射STZ 1周后,有75%的小鼠空腹血糖超过阈值（13.89 mmol/L）;2周后除1只小鼠死亡外,其余小鼠空腹血糖均超过阈值,造模成功率为91.3%;HC组空腹血糖比NC组略有升高,但尚在正常值范围内;（2）高脂饮食的HC＋STZ组和HC组小鼠体质量均显著高于NC组（P〈0.01）,STZ注射后体质量增加不明显;（3）OGTT结果显示,HC＋STZ组口服葡萄糖后0.5~2 h的血糖都显著高于NC组和HC组（P〈0.01）;HC组0.5~2 h的血糖也高于NC组,但只有1.5 h血糖有显著差异;HC＋STZ组AUC（曲线下面积）显著高于NC组或HC组（P〈0.01）;HC组AUC略高于NC组（P〈0.05）;（4）生化检测显示,HC＋STZ组血浆中的肌酐（CR）含量显著高于NC组（P〈0.01）和HC组（P〈0.05）;（5）胰岛的免疫组化染色显示,HC组胰岛结构完整,细胞排列规整,胰岛素的分泌较NC组减少;HC＋STZ组胰岛萎缩,细胞排列紊乱,可见许多空泡状和纤维化结构,胰岛素的分泌明显减少。病理检测显示肝脏有轻度的脂肪肝,肾脏的形态结构未见明显改变。结论高脂饮食结合低剂量STZ多次注射制备的T2DM模型小鼠与人类T2DM有非常相似的病理结构和生化改变,伴有脂肪肝等并发症。

关键词： 2型糖尿病链脲佐菌素动物模型病理分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

曲古菌素A抑制乳腺肿瘤干细胞的自我更新

引用

南方医科大学学报 2013年第10期33卷 1421-1426页

作者：彭黎李福喜邵文凤熊静波南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515

目的研究组蛋白乙酰化酶抑制剂曲古菌素A对乳腺肿瘤干细胞自我更新的影响;初步研究其抑制乳腺肿瘤干细胞自我更新的机制。方法悬浮培养乳腺癌细胞系MDA-MB-468、MDA-MB-231、MCF-7和SKBR3,用不同浓度曲古菌素A处理悬浮培养乳腺癌细胞7 d... 详细信息

目的研究组蛋白乙酰化酶抑制剂曲古菌素A对乳腺肿瘤干细胞自我更新的影响;初步研究其抑制乳腺肿瘤干细胞自我更新的机制。方法悬浮培养乳腺癌细胞系MDA-MB-468、MDA-MB-231、MCF-7和SKBR3,用不同浓度曲古菌素A处理悬浮培养乳腺癌细胞7 d,用0.1%DMSO作对照;用次级细胞球形成率和乳腺癌细胞初级细胞球细胞中肿瘤干细胞即CD44+/CD24-细胞群的百分比评价曲古菌素A对乳腺癌干细胞自我更新的影响;乳腺癌细胞初级细胞球细胞中CD44+/CD24-细胞群的百分比用流式细胞仪检测,凋亡细胞百分比用Annexin-V法在流式细胞仪检测,Nanog、Sox2和Oct4 mRNA的表达用定量PCR法检测。结果 100 nmol/L和500 nmol/L曲古菌素A均能部分抑制4个乳腺癌细胞系中肿瘤干细胞的自我更新,但10 nmol/L不行;500 nmol/L曲古菌素A诱导乳腺癌细胞初级细胞球细胞凋亡;曲古菌素A能下调乳腺癌细胞初级细胞球细胞Nanog和Sox2mRNA的表达。结论曲古菌素A能部分抑制乳腺癌干细胞的自我更新,其机制与其能下调乳腺癌初级细胞球细胞Nanog和Sox2表达相关联,提示临床可用低浓度组蛋白乙酰化酶抑制剂和其他抗癌药物联用以便获得较好的乳腺肿瘤干细胞自我更新抑制效果,胚胎干细胞核心转录因子Nanog和Sox2可能作为肿瘤治疗的新靶标。

关键词：肿瘤干细胞乳腺癌组蛋白乙酰化酶抑制 Nanog

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

TGF-β1诱导的肿瘤细胞CSRNP1/AXUD1基因的表达及转录调节机制

引用

南方医科大学学报 2013年第8期33卷 1122-1126页

作者：邓凡李松玉许万福邹志鹏柯志勇曾方银南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515 南方医科大学南方医院检验科广东广州510515

目的探讨TGF-β1诱导的肿瘤细胞中CSRNP1/AXUD1基因的表达及其调控机制。方法分别用不同浓度的TGF-β1或相同浓度下不同处理时间处理指数生长期的人肺腺癌细胞A549和人前列腺癌细胞PC-3,荧光定量RT-PCR检测TGF-β1对两种肿瘤细胞中半胱... 详细信息

目的探讨TGF-β1诱导的肿瘤细胞中CSRNP1/AXUD1基因的表达及其调控机制。方法分别用不同浓度的TGF-β1或相同浓度下不同处理时间处理指数生长期的人肺腺癌细胞A549和人前列腺癌细胞PC-3,荧光定量RT-PCR检测TGF-β1对两种肿瘤细胞中半胱氨酸-丝氨酸蛋白(cystein-serine-rich nuclear protein,CSRNP1)基因表达的剂量和时间依赖性效应;培养的A549细胞血清饥饿后,分别在有无TGF-β1(20 ng/ml)和环己亚胺(30μg/ml)作用下处理24 h,检测TGF-β1诱导的CSRNP1基因的表达是否需要新蛋白的合成;最后,分别将SMAD3表达质粒flag-SMAD3和显性失活突变体表达质粒(flag-SMAD3-mu转染A549细胞中,并以空质粒pcDNA3.1作为对照。血清饥饿后,进行有无TGF-β1(20 ng/ml)处理24 h,Western blot确定外源性SMAD3的过表达,荧光定量RT-PCR检测SMAD3的过表达对TGF-β1诱导的CSRNP1基因表达的影响。结果 TGF-β1以浓度和时间依赖的方式诱导肿瘤细胞中CSRNP1基因的表达,并需要新的蛋白合成。SMAD3的过表达增加TGF-β1诱导的CSRNP1的表达,而显性失活的SMAD3突变体(SMAD3-mu)的过表达则显著降低TGF-β1诱导的CSRNP1的表达。结论肿瘤细胞中TGF-β1可能通过激活SMAD3及其下游信号通路而诱导CSRNP1基因的表达。

关键词： TGF-β1 SMAD3 CSRNP1 基因表达肿瘤细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

p53基因第72位密码子多态性与剖宫产术后病理性瘢痕的相关性

引用

中华整形外科杂志 2013年第3期29卷 206-210页

作者：廖农鲁峰赵伟曾位森李映桃王少晶高建华广州医学院第三附属医院整形美容科 510150 南方医科大学南方医院整形外科广州510515 南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广州医学院第三附属医院妇产科

目的研究p53基因第72位密码子（codon72）多态性与剖宫产术后病理性瘢痕发生的关系。方法对广州医学院第三附属医院产科行剖宫产术的303例女性，于术后3—5d抽取外周静脉血2ml，用荧光分子信标PCR法检测其血液标本的p53基因codon72多态... 详细信息

目的研究p53基因第72位密码子（codon72）多态性与剖宫产术后病理性瘢痕发生的关系。方法对广州医学院第三附属医院产科行剖宫产术的303例女性，于术后3—5d抽取外周静脉血2ml，用荧光分子信标PCR法检测其血液标本的p53基因codon72多态性。分别于术后第3、6、12个月对所有病例进行电话随访，其中有19例随访至18个月，观察其病理性瘢痕发生情况，以及其与p53基因codon72多态性位点基因型的关系。用SPSS13．0软件进行统计学分析。结果303例产妇中发生病理性瘢痕增生30例，273例为正常愈合。2组产妇p53基因codon723种基因型（C／C、C／G和G／G）频率总体上有显著差异；病理性瘢痕增生组产妇C／C基因型频率为46．7％（14／30），高于正常组的17．6％（48／273），差异有统计学意义（P〈0．01）；在病理性瘢痕增生产妇中，C／C基因型频率显著高于C／G型（33．3％，10／30）和G／G型（20．0％，6／30），差异均有统计学意义（P〈0．01）；在病理性瘢痕增生产妇中，c等位基因频率为63．3％，也显著高于G等位基因频率（36．7％，P〈0．01），OR值为2．30。结论p53基因codon72C等位基因与剖宫产术后病理性瘢痕的发生有一定的关联性。

关键词： p53基因多态性剖宫产术瘢痕荧光分子信标PCR

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

蛋白激酶D1在烟曲霉介导的NF-κB信号通路激活及转录活性中的作用

引用

南方医科大学学报 2013年第3期33卷 351-355页

作者：牛晓璐许万福李松玉柯志勇曾方银罗深秋邓凡南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515 南方医科大学骨科研究所广东广州510515 南方医科大学南方医院检验科广东广州510515

目的研究蛋白激酶D1(PKD1)在烟曲霉介导的NF-κB信号通路激活及转录活性中的作用,为进一步探讨PKD1在烟曲霉感染引起的肺曲霉病中的作用及其机制奠定基础。方法首先将GFP、GFP-PKD1表达质粒分别转染人肺腺癌细胞A549和HEK293细胞中,分... 详细信息

目的研究蛋白激酶D1(PKD1)在烟曲霉介导的NF-κB信号通路激活及转录活性中的作用,为进一步探讨PKD1在烟曲霉感染引起的肺曲霉病中的作用及其机制奠定基础。方法首先将GFP、GFP-PKD1表达质粒分别转染人肺腺癌细胞A549和HEK293细胞中,分别将灭活的烟曲霉分生孢子(1×105CFU/ml)于不同时间处理上述两组细胞,Western blotting证实PKD1的过表达,并检测PKD1的磷酸化活性;其次在A549细胞中分别转染GFP-PKD1、siRNA-PKD1并以灭活的烟曲霉分生孢子处理细胞30 min,分别检测下游NF-κB通路相关信号分子的磷酸化活性;最后,将NF-κB-luc荧光素酶报告基因及内参照报告质粒海肾荧光素酶(pRL-SV40)共转染入表达GFP、GFP-PKD1的A549细胞中,两组细胞在有无烟曲霉分生孢子的作用下处理24 h,收集细胞裂解液,进行双色荧光素酶活性检测。结果 Western blotting证实PKD1的过表达时间依赖性地增强烟曲霉刺激的A549细胞和HEK293细胞中PKD1的磷酸化活性及NF-κB通路中IКB和p65(pS276)的磷酸化活性,反之,敲低PKD1的表达则抑制烟曲霉介导的NF-κB通路中IКB和p65(pS276)的磷酸化活性。过表达PKD1明显增加NF-κB-luc荧光素酶的转录激活活性。结论 PKD1可能在烟曲霉刺激的NF-κB通路的激活及转录活性中起重要作用。

关键词：蛋白激酶D1 烟曲霉分生孢子 NF-κB 转录激活磷酸化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

白藜芦醇对过表达EGFR的Ⅲ型突变体的胶质瘤细胞的生长抑制作用

引用

神经解剖学杂志 2013年第4期29卷 351-354页

作者：石玉生林水苗邓晓刚陈龙华张兴梅南方医科大学南方医院放疗科广州510515 南方医科大学基础医学院神经生物学教研室广州510515

目的:探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对过表达EGFR的Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的U87人脑胶质瘤细胞(U87-EGFRvⅢ)的生长抑制作用。方法:将不同浓度的Res作用于U87-EGFRvⅢ或U87细胞,用MTT法检测Res对细胞的生长抑制作用,流式细胞仪检测细胞... 详细信息

目的:探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对过表达EGFR的Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的U87人脑胶质瘤细胞(U87-EGFRvⅢ)的生长抑制作用。方法:将不同浓度的Res作用于U87-EGFRvⅢ或U87细胞,用MTT法检测Res对细胞的生长抑制作用,流式细胞仪检测细胞凋亡作用,免疫印迹法检测Res作用后细胞内EGFRvⅢ的表达情况。结果:经不同浓度Res处理后的U87-EGFRvⅢ细胞和U87细胞均显示抑制细胞生长的作用(P<0.05);流式细胞仪显示不同浓度Res对U87-EGFRvⅢ有促凋亡作用,显著高于对照组(P<0.05),100μmol/L和200μmol/L Res的48 h的细胞凋亡率分别为20.1%±0.8%、46.9%±1.2%;免疫印迹法显示Res作用后U87-EGFRvⅢ细胞内的EGFRvⅢ的表达量显著下降。结论:Res可诱导U87-EGFRvⅢ细胞凋亡、抑制其细胞增殖,并可使细胞内的EGFRvⅢ表达下降。

关键词：白藜芦醇胶质瘤表皮生长因子受体的Ⅲ型突变体凋亡

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

c-Met siRNA对U87-EGFRvⅢ胶质瘤细胞凋亡和增殖的影响

引用

实用医学杂志 2013年第6期29卷 854-856页

作者：石玉生谭燕伍锡栋张兴梅南方医科大学南方医院放疗科广州市510515 南方医科大学基础医学院神经生物学教研室广州市510515

目的:合成针对c-Met的小干扰RNA(siRNA),研究其对U87-EGFRvⅢ(表皮生长因子受体Ⅲ型突变体)胶质瘤细胞凋亡和增殖的影响。方法:用脂质体转染合成的c-Met siRNA入U87-EGFRvⅢ细胞,未转染组为对照组,荧光实时定量PCR和Western blotting分... 详细信息

目的:合成针对c-Met的小干扰RNA(siRNA),研究其对U87-EGFRvⅢ(表皮生长因子受体Ⅲ型突变体)胶质瘤细胞凋亡和增殖的影响。方法:用脂质体转染合成的c-Met siRNA入U87-EGFRvⅢ细胞,未转染组为对照组,荧光实时定量PCR和Western blotting分别检测c-Met基因和蛋白的表达,MTT和Annexin V-FITC/PI法检测细胞增殖和凋亡情况。结果:c-Met siRNA明显抑制c-Met表达(P<0.05);明显增加细胞凋亡率(P<0.05)。同时,c-Met siRNA单独或协同EGFRvⅢsiRNA可抑制胶质瘤细胞增殖(P<0.05)。结论:c-Met siRNA可抑制U87-EGFRvⅢ胶质瘤细胞增殖、诱导其凋亡,为研究c-Met基因在胶质瘤中的作用及其靶向联合治疗提供了理论基础。

关键词： siRNA c—Met 表皮生长因子受体 Ⅲ型突变体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

加强基础医学专业研究生教学能力培养的探索

引用

基础医学教育 2013年第8期15卷 802-804页

作者：林骏杨翠兰罗深秋南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广州510515

探索在基础医学专业研究生培养中,如何加强研究生教学能力的培养,其具体实施过程包括安排研究生参加本科生实验教学、本科生实习带教、组织中期考核的理论课试讲及定期学术汇报。加强教学能力培养是提高研究生整体素质,增加就业竞争力... 详细信息

探索在基础医学专业研究生培养中,如何加强研究生教学能力的培养,其具体实施过程包括安排研究生参加本科生实验教学、本科生实习带教、组织中期考核的理论课试讲及定期学术汇报。加强教学能力培养是提高研究生整体素质,增加就业竞争力的有效途径。

关键词：基础医学研究生教育教学能力

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

针对U87-EGFRvⅢ细胞的适配子对胶质瘤荷瘤鼠的抑瘤作用

引用

华南国防医学杂志 2013年第6期27卷 372-375页

作者：伍锡栋谭燕梁惠玉张兴梅石玉生南方医科大学基础医学院神经生物学教研室广东广州510515 南方医科大学南方医院放疗科

目的观察应用细胞-配体指数富集的系统进化技术(cell systematic evolution of ligands by exponential enrichment,Cell-SELEX)筛选出的针对稳定过表达表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(epidermal growth factor receptor vari-antⅢ,EGFRvⅢ)的U87-EGFRvⅢ细胞的适配子在荷瘤裸鼠动物模型中的抑瘤作用。方法选用4～6周的雄性裸鼠28只随机分为4组,分别为空白对照组、转染试剂对照组、DNA原库GN对照组、适配子U2治疗组,每组7只。皮下种植U87-EGFRvⅢ细胞悬浮液建立荷瘤裸鼠动物模型,通过in vivojet-PEI TM转染试剂的作用将筛选得到的适配子U2和原库GN分别进行瘤内注射。给药结束1周后,对肿瘤的重量和体积大小进行统计学分析。结果在形体上U2治疗组肿瘤大小明显小于其他组,试剂组与原库GN组均没有明显的差异,统计学分析U2治疗组与其它组的肿瘤重量和体积均有差异(P<0.05)。结论筛选得到的适配子对通过皮下种植U87-EGFRvⅢ细胞悬浮液建立荷瘤裸鼠动物模型中的肿瘤生长有一定的抑制作用,为适配子在荷瘤裸鼠动物模型中的应用提供了一定的技术理论基础。

关键词：表皮生长因子受体Ⅲ型突变体适配子胶质瘤抑瘤作用

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：