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南方医科大学学报 2013年第6期33卷 923-925,933页

作者：于倩杨磊丁彦青赵震刘会平南方医科大学南方医院病理科南方医科大学基础医学院病理学系//广东省分子肿瘤病理学重点实验室广东广州510515

目的检测六株结肠癌细胞中Dickkopf-1(DKK1)的表达并探讨其意义。方法在6株结肠癌细胞(SW480、SW620、HT29、LS174T、LOVO、HCT116)分别应用qPCR方法检测DKK1的mRNA表达水平。用Western blot方法和细胞免疫组化方法检测DKK1的蛋白表达... 详细信息

目的检测六株结肠癌细胞中Dickkopf-1(DKK1)的表达并探讨其意义。方法在6株结肠癌细胞(SW480、SW620、HT29、LS174T、LOVO、HCT116)分别应用qPCR方法检测DKK1的mRNA表达水平。用Western blot方法和细胞免疫组化方法检测DKK1的蛋白表达情况。结果荧光定量分析显示,DKK1在HT29、HCT116中的表达高于其他四株细胞(P<0.05);Western blot显示,DKK1在HCT116、HT29中的表达同样高于其他四株细胞;细胞免疫组化染色显示,DKK1在六株结肠癌细胞株中呈阳性表达。结论 DKK1在6株人结肠癌细胞系中的表达具有差异性。

关键词：人结肠癌细胞株 Dickkopf-1 时实定量PCR Western blotting 细胞免疫组织化学

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肝细胞癌中GPC3和Notch1表达的关系

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南方医科大学学报 2013年第4期33卷 590-592,597页

作者：彭璠莉吴自勍李学农南方医科大学南方医院病理科//广东省分子肿瘤病理学重点实验室广东广州510515 南方医科大学基础医学院病理系//广东省分子肿瘤病理学重点实验室广东广州510515

目的通过观察肝细胞癌组织中磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)与Notch1的表达情况,探讨两者在肝细胞癌中表达的相互关系。方法应用免疫组化方法、计算机图像分析等技术检测30例肝细胞癌组织中GPC3和Notch1的表达情况,并用SPSS软件系统进行统... 详细信息

目的通过观察肝细胞癌组织中磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)与Notch1的表达情况,探讨两者在肝细胞癌中表达的相互关系。方法应用免疫组化方法、计算机图像分析等技术检测30例肝细胞癌组织中GPC3和Notch1的表达情况,并用SPSS软件系统进行统计学分析。结果肝细胞癌组织分化程度越高,GPC3表达越低;分化程度越低,GPC3表达越高,差异有显著性(P<0.05)或高度显著性(P<0.01)。肝细胞癌组织分化程度越高,Notch1表达越高;分化程度越低,Notch1表达越低,差异有显著性(P<0.05)或高度显著性(P<0.01)。GPC3与Notch1的表达呈高度显著性负相关(rp=-0.607,P=0.000;r=-0.692,P=0.000)。结论在肝细胞癌中,GPC3与Notch1的表达呈现负相关性,提示两者间可能存在相互调节的机制,共同影响肝细胞癌的发生发展。

关键词：癌,肝细胞磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 Notch1 免疫组化

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肝细胞膜表面相关抗原与非小细胞肺癌临床病理特征和预后的关系

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中华病理学杂志 2012年第3期41卷 151-155页

作者：徐小艳郅程李玉梅齐文娟梅娟娟严智敏申洪南方医科大学附属南方医院病理科基础医学院病理学系及广东省分子肿瘤病理学重点实验室广州510515

目的探讨肝细胞膜表面相关抗原（HAb18G）表达与非小细胞肺癌的侵袭、转移及预后的关系。方法用免疫组织化学sP法检On,0144例非小细胞肺癌组织、19例肺良性病变和41例正常肺组织中HAb18G蛋白的表达，用图像分析软件对HAb18G蛋白表达的... 详细信息

目的探讨肝细胞膜表面相关抗原（HAb18G）表达与非小细胞肺癌的侵袭、转移及预后的关系。方法用免疫组织化学sP法检On,0144例非小细胞肺癌组织、19例肺良性病变和41例正常肺组织中HAb18G蛋白的表达，用图像分析软件对HAb18G蛋白表达的阳性单位（PU）进行定量测试。结果HAb18G在非小细胞肺癌组织中的表达主要定位于肺癌细胞膜或胞质，其在肺良性病变及正常肺组织中几乎不表达。在非小细胞肺癌患者中，25例低表达（17．4％），119例高表达（82．6％）；59例膜表达为主（41．0％），81例胞质表达为主（56．3％），4例无阳性着色（2．8％）。HAb18G蛋白表达的PU值在非小细胞肺癌组织中显著高于非肺癌肺组织（P=0．000）；高分化肺鳞癌和腺癌低于中至低分化肺鳞癌和腺癌（P=0．001）；HAb18G蛋白在TNMI期、Ⅱ～Ⅲ期、Ⅳ期中依次升高（P=0．000），非小细胞肺癌伴淋巴结转移的原发灶高于无转移的原发灶（P=0．045）；蛋白Pu值在最大直径〉5cm的非小细胞肺癌组织中的表达大于最大直径≤5em的肺癌组织（P：0．000），男性患者高于女性患者（P=0．046），与非小细胞肺癌患者年龄、吸烟史、大体类型及原发灶和相应转移灶的情况均无关（P〉0．05）。HAb18G低表达患者的5年生存率大于HAb18G高表达患者（P=0．006）；单因素分析结果表明HAb18G高表达的非小细胞肺癌患者预后差（P=0．007）；Cox分析结果显示HAb18G表达是非小细胞肺癌患者的独立预后因素（P=0．032，相对危险度为3．962）。结论HAb18G蛋白在肺癌组织中的表达与非小细胞肺癌的发生发展、浸润转移和预后密切相关．可作为预测浸润转移和估计预后的一个参考指标。

关键词：肺肿瘤癌非小细胞肺抗原 cd147

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多配体聚糖结合蛋白在大肠癌组织中的表达及其对预后的影响

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南方医科大学学报 2015年第7期35卷 1003-1007页

作者：刘会平杨磊丁彦青赵震于倩南方医科大学南方医院病理科广东广州510515 南方医科大学基础医学院病理学系//广东省分子肿瘤病理学重点实验室广东广州510515

目的通过对109例结肠癌患者中多配体聚糖结合蛋白(SDCBP)表达的分析,探讨其临床意义及对患者预后的影响。方法免疫组织化学法检测109例有10年随访资料,诊断为原发性结直肠癌患者中SDCBP的表达,分析其表达与结直肠癌患者各临床因素之间... 详细信息

目的通过对109例结肠癌患者中多配体聚糖结合蛋白(SDCBP)表达的分析,探讨其临床意义及对患者预后的影响。方法免疫组织化学法检测109例有10年随访资料,诊断为原发性结直肠癌患者中SDCBP的表达,分析其表达与结直肠癌患者各临床因素之间的关系,生存分析采用Kaplan-Meier和Cox回归分析法。结果 SDCBP的表达对结直肠肠癌患者的淋巴结转移、TNM分期及术后的生存期均有显著影响(P=0.001)、(P=0.033)、(P=0.004),但与患者的年龄,性别,肿瘤浸润深度,组织分化以及病理类型没有关系。Kaplan-Meier法检验,结果显示,109例结直肠癌患者中SDCBP高低表达组患者术后平均生存期及7年累计生存率分别为:52.300±6.508(月)、86.184±5.358(月);38.6±6.4(%)、61.5±6.7(%),整体水平及各组间水平的差异经Log-rank法分析均有统计学意义(χ2=10.585,P=0.001);Cox回归分析法发现:SDCBP的高表达和发生淋巴结转移是患者死亡的主要影响因素(B=0.605,P=0.034;B=0.677,P=0.013)。结论 SDCBP可作为提示大肠癌淋巴结转移、TNM分期及预后的一项指标。

关键词：免疫组织化学大肠癌预后

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DLL3通过调节MAPK通路促进前列腺癌进展

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中国病理生理杂志 2023年第12期39卷 2165-2175页

作者：李雨璇于莉娜张韦洋齐婧汝赵卓扬华兴暨南大学基础医学与公共卫生学院病理学系广东广州510632 暨南大学附属广州市红十字会医院病理科广东广州510220 南方医科大学基础医学院病理学系广东广州510515 南方医院病理科广东广州510515 广东省分子肿瘤病理学重点实验室广东广州510515

目的:探讨Delta样配体3(Delta-like ligand 3,DLL3)对前列腺癌进展的影响,并阐明其潜在的分子机制。方法:构建DLL3基因的过表达质粒和干扰质粒,通过功能实验评估DLL3对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。采用裸鼠成瘤实验检测DLL... 详细信息

目的:探讨Delta样配体3(Delta-like ligand 3,DLL3)对前列腺癌进展的影响,并阐明其潜在的分子机制。方法:构建DLL3基因的过表达质粒和干扰质粒,通过功能实验评估DLL3对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。采用裸鼠成瘤实验检测DLL3在体内对前列腺癌细胞PC-3增殖的影响。RNA测序检测过表达DLL3产生的差异基因并对其进行富集分析。Western blot检测DLL3对上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路相关蛋白的影响。结果:与空载体组和空白对照组相比,DLL3过表达显著增强前列腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT过程(P<0.05);而干扰DLL3表达则产生相反的效果(P<0.05)。此外,在裸鼠异种移植瘤模型中,DLL3上调可促进肿瘤生长(P<0.05)。进一步研究表明,DLL3上调导致MAPK信号通路中相关蛋白水平升高。有趣的是,MAPK抑制剂能够抑制由DLL3过表达引起的前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.05)。结论:DLL3通过调节MAPK通路促进前列腺癌的增殖、迁移和侵袭。

关键词：前列腺癌 Delta样配体3 上皮-间充质转化 MAPK通路

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人大肠癌细胞PRL-3基因启动子Snail结合位点的初步研究

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南方医科大学学报 2007年第4期27卷 401-405页

作者：杨发达李建明周军柳玉红丁彦青南方医科大学南方医院病理科南方医科大学基础医学院病理学教研室广东省分子肿瘤病理重点实验室教育部广东省共建人类重大疾病转录组学和蛋白组学重点实验室广东广州510515

目的确定转录因子Snail可与PRL-3基因启动子区结合。方法应用生物信息学方法获得PRL-3基因启动子区域,并对其潜在的Snail结合位点进行预测,进一步应用Snail抗体染色质免疫共沉淀技术结合PCR技术检测PRL-3基因启动子序列,以确定转录因子S... 详细信息

目的确定转录因子Snail可与PRL-3基因启动子区结合。方法应用生物信息学方法获得PRL-3基因启动子区域,并对其潜在的Snail结合位点进行预测,进一步应用Snail抗体染色质免疫共沉淀技术结合PCR技术检测PRL-3基因启动子序列,以确定转录因子Snail可与PRL-3基因启动子结合。结果应用TRED在线分析系统确定PRL-3基因的启动子区域位于PRL-3基因上游-700bp至299bp之间,在该启动子区域存在多个转录因子如Snail、n-MYC、ARNT、E74A、NF-kappaB、NRF-2及AML-1等的结合位点;在启动子区域的-500bp至-451bp之间存在Snail结合的核心寡核苷酸序列CACCTG,在其他多个区域存在多个类似这一核心序列的DNA序列;应用染色质免疫沉淀技术结合PCR扩增的方法对人大肠癌细胞株SW480细胞进行分析,发现Snail可与人大肠癌细胞株SW480PRL-3基因的启动子区域的DNA片断结合。结论转录因子Snail可与人大肠癌细胞SW480PRL-3基因启动子结合,参与PRL-3基因的调控。

关键词：染色质免疫沉淀技术 Snail 启动子,PRL-3

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PRL-3基因RNA干扰慢病毒载体的构建及在SW480细胞中的表达

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南方医科大学学报 2008年第4期28卷 509-512页

作者：柳玉红李建明周军丁彦青南方医科大学南方医院病理科南方医科大学基础医学院病理学教研室广东省分子肿瘤病理重点实验室教育部广东省共建人类重大疾病转录组学和蛋白组学重点实验室广东广州510515

目的构建PRL-3基因慢病毒干扰载体及建立PRL-3基因稳定干扰的结直肠癌细胞亚系,为PRL-3基因功能研究奠定基础。方法设计PRL-3基因特异性RNAi靶序列,与pENTRTM/U6线性载体定向连接,构建pENTRTM/U6真核入门表达载体。通过与pENTRTM/U6 ent... 详细信息

目的构建PRL-3基因慢病毒干扰载体及建立PRL-3基因稳定干扰的结直肠癌细胞亚系,为PRL-3基因功能研究奠定基础。方法设计PRL-3基因特异性RNAi靶序列,与pENTRTM/U6线性载体定向连接,构建pENTRTM/U6真核入门表达载体。通过与pENTRTM/U6 entry clone与pLenti6/BLOCK-iTTM-DEST载体进行重组,获得pLenti6/BLOCK-iTTM-DEST真核表达慢病毒干扰载体。利用包装细胞293FT获得重组的慢病毒,感染大肠癌细胞株SW480细胞,杀稻瘟菌素筛选获得稳定干扰PRL-3基因的细胞亚系。结果成功构建PRL-3pLenti6/BLOCK-iTTM-DEST真核表达慢病毒干扰载体并获得相应的慢病毒,病毒悬液的滴度为6×105U/L。RT-PCR、Western blotting结果表明,克隆1PRL-3 mRNA及蛋白显著降低。结论成功构建人PRL-3基因特异性的慢病毒干扰载体,获得PRL-3基因稳定干扰的大肠癌细胞亚系。

关键词： RNA干扰慢病毒 PRL-3 结直肠癌

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PRL-3基因的克隆及其原核表达载体的构建表达

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南方医科大学学报 2007年第5期27卷 641-643页

作者：周军李建明柳玉红丁彦青南方医科大学南方医院病理科/南方医科大学基础医学院病理学教研室/教育部广东省共建人类重大疾病转录组学和蛋白组学重点实验室/广东省分子肿瘤病理重点实验室广东广州510515

目的克隆人PRL-3基因并构建其原核表达载体。方法设计PRL-3特异性引物,提取人大肠癌细胞系SW480总RNA,用RT-PCR方法获取人PRL-3cDNA。经T-A克隆,通过双酶切鉴定及测序确认后,构建人PRL-3基因的原核表达载体pGEX-4T-1-PRL-3。结果成功扩... 详细信息

目的克隆人PRL-3基因并构建其原核表达载体。方法设计PRL-3特异性引物,提取人大肠癌细胞系SW480总RNA,用RT-PCR方法获取人PRL-3cDNA。经T-A克隆,通过双酶切鉴定及测序确认后,构建人PRL-3基因的原核表达载体pGEX-4T-1-PRL-3。结果成功扩增出人PRL-3全长cDNA,并构建pGEX-4T-1-PRL-3原核表达载体,测序结果表明PRL-3全长cDNA与GenBank中PRL-3序列完全一致,SDS-PAGE胶分析表明,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达了重组蛋白。结论获得人PRL-3基因全长cDNA并构建其原核表达载体,使其在大肠杆菌中获得了高效表达,为深入研究PRL-3基因在大肠癌发生发展中的作用奠定了基础。

关键词：大肠癌 PRL-3 基因克隆原核表达

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锌指转录因子Snail在结直肠癌中的表达及其意义

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南方医科大学学报 2008年第2期28卷 162-165页

作者：高维哲李建明杨发达周军丁彦青南方医科大学南方医院病理科/南方医科大学基础医学院病理学教研室/广东省分子肿瘤病理重点实验室/教育部广东省共建人类重大疾病转录组学和蛋白组学重点实验室广东广州510515

目的确定锌指转录因子Snail与结直肠癌发生发展及演进的相关性。方法应用免疫细胞化学及免疫荧光细胞化学方法分析Snail在结直肠癌细胞株SW480与SW620内的表达情况,同时以结直肠癌组织68例及对应癌旁组织68例、腺瘤组织33例、淋巴结转移... 详细信息

目的确定锌指转录因子Snail与结直肠癌发生发展及演进的相关性。方法应用免疫细胞化学及免疫荧光细胞化学方法分析Snail在结直肠癌细胞株SW480与SW620内的表达情况,同时以结直肠癌组织68例及对应癌旁组织68例、腺瘤组织33例、淋巴结转移癌35例为研究对象,运用免疫组织化学方法分析Snail在这些组织中的表达情况。结果Snail在结直肠癌细胞株SW620、SW480中的表达较强,Snail定位在结直肠癌细胞株SW620、SW480的细胞核里;Snail在正常结直肠粘膜、腺瘤、癌及淋巴结转移癌组织中的表达明显不同(χ2=92.852,P=0.000);两两比较发现,腺瘤Snail表达比正常结直肠黏膜组织强(P<0.01),淋巴结转移灶中癌组织Snail表达比原发结直肠癌组织强(P<0.01),而原发结直肠癌组织Snail表达比腺瘤组织强(P<0.01)。结论锌指转录因子Snail与结直肠癌发生、演进及转移相关。

关键词：锌指转录因子 Snail 结直肠肿瘤腺瘤淋巴结转移

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非小细胞肺癌组织中PTEN和HAb18G的表达及相关关系研究

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实用医学杂志 2012年第5期28卷 701-704页

作者：徐小艳郅程陈清申洪南方医科大学南方医院病理科南方医科大学基础医学院病理学系及广东省分子肿瘤病理学重点实验室广州市510515 南方医科大学流行病学系广州市510515

目的:定量分析PTEN和HAb18G在非小细胞肺癌组织中的表达特点,并探讨其相互关系。方法:应用免疫组化SP法检测肺癌、肺良性病变和正常肺组织中PTEN和HAb18G蛋白的表达,用ImageProPlus图像分析软件对PTEN和HAb18G蛋白的阳性单位(PU)进行定... 详细信息

目的:定量分析PTEN和HAb18G在非小细胞肺癌组织中的表达特点,并探讨其相互关系。方法:应用免疫组化SP法检测肺癌、肺良性病变和正常肺组织中PTEN和HAb18G蛋白的表达,用ImageProPlus图像分析软件对PTEN和HAb18G蛋白的阳性单位(PU)进行定量测试。结果:PTEN蛋白在肺癌组织中的表达明显低于肺良性病变和正常肺组织(P<0.05),与肺癌分化、淋巴结转移及pTNM分期均无关(P>0.05),周围性大于中央型(P<0.05)。HAb18G蛋白在肺癌组织中的表达明显高于肺良性病变和正常肺组织(P<0.05),与肺癌分化、淋巴结转移及pTNM分期均有关(P<0.05)。不同类型的肺组织中PTEN和HAb18G蛋白表达之间呈负相关(r=-0.312,P=0.002)。结论:PTEN的低表达或缺失,可能与HAb18G的异常激活有一定关系,从而对肺癌的发生、发展起重要作用。

关键词：癌,非小细胞肺 PTEN HAb18G MMPs VEGF 定量分析相关性

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