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中华创伤骨科杂志 2022年第3期24卷 272-276页

作者：舒杉庄乐彬王钢杨运平王胜楠廖华胡稷杰南方医科大学南方医院骨科-创伤骨科广州510515 南方医科大学基础医学院人体解剖学教研室、广东省组织构建与检测重点实验室广州510515

成年人股骨颈骨折的治疗仍然是目前创伤骨科医生面临的一项艰难挑战,不同治疗方案的治疗效果不同。治疗效果受多种因素影响,如年龄、性别、术前身体状况等,其中股骨颈骨折的分型方法对治疗方案选择及预后判断具有重要指导作用。目前临... 详细信息

成年人股骨颈骨折的治疗仍然是目前创伤骨科医生面临的一项艰难挑战,不同治疗方案的治疗效果不同。治疗效果受多种因素影响,如年龄、性别、术前身体状况等,其中股骨颈骨折的分型方法对治疗方案选择及预后判断具有重要指导作用。目前临床上经典的成年人股骨颈骨折分型方法主要有Garden分型、AO/OTA分型及Pauwels分型等。近年来,随着科技的进步,一些先进的技术应用于临床,如CT、MRI、数字减影血管造影等,从而出现了新的分型方法,但各自都存在不足,有待于完善。本文就成年人股骨颈骨折分型的研究进展及治疗原则作一综述。

关键词：股骨颈骨折成年人骨折分型 Garden分型 AO分型 Pauwels分型

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橙汁提取物生物制备银纳米颗粒及其生物相容性研究

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中国临床解剖学杂志 2020年第3期38卷 270-276页

作者：文凤宋晨熊伟荣王国保王孝娴邱小忠王乐禹南方医科大学基础医学院人体解剖学教研室广东省组织构建与检测重点实验室南方医科大学生物医学工程学院生物材料研究中心广州510515 南方医科大学南方医院肾内科广州510515

目的探索橙汁提取物生物制备银纳米颗粒产量最大化的条件;评价其银纳米颗粒的生物相容性。方法检测反应体系在不同pH、温度与反应时间等条件下银纳米颗粒产量变化,探索最佳反应条件;通过CCK-8试剂盒、扫描电镜和抑菌实验评价银纳米颗粒... 详细信息

目的探索橙汁提取物生物制备银纳米颗粒产量最大化的条件;评价其银纳米颗粒的生物相容性。方法检测反应体系在不同pH、温度与反应时间等条件下银纳米颗粒产量变化,探索最佳反应条件;通过CCK-8试剂盒、扫描电镜和抑菌实验评价银纳米颗粒的生物相容性及抗菌性。结果在pH=8.0、0℃、反应时间为4 h条件下银纳米颗粒产量最高。制备的银纳米颗粒呈球形或椭球形,平均粒径为15.54 nm,Zeta电位为-34.46,分散良好。浓度介于6.25~50μg/ml的银纳米颗粒对大鼠皮肤成纤维细胞和红细胞均无毒性作用。在12.5μg/ml及以上浓度银纳米颗粒对大肠杆菌具有抑制作用,100μg/ml及以下浓度银纳米颗粒对金黄色葡萄球菌未见明显抑制作用。结论在pH=8.0、0℃、反应时间为4 h条件下利用橙汁提取物制备银纳米颗粒产量最高,这种银纳米颗粒粒径小、分散均匀、不易团聚,具有良好的生物相容性和抗菌性。

关键词：橙汁提取物银纳米颗粒生物相容性抗菌性绿色化学工程

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运用外增压的腓动脉穿支螺旋桨皮瓣修复足踝软组织缺损

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中华显微外科杂志 2019年第2期42卷 141-145页

作者：郑健雄李杰卓灵剑任高宏张萍廖华胡稷杰南方医科大学南方医院创伤骨科广州510515 南方医科大学基础医学院人体解剖学教研室广东省组织构建与检测重点实验室广州510515

目的探讨运用外增压技术的腓动脉穿支皮瓣修复足踝软组织缺损的技术要点及临床效果。方法2010年1月至2018年2月,共采用外增压腓动脉穿支螺旋桨皮瓣修复足踝软组织缺损10例,病因:创伤7例,慢性伤口溃疡1例,跟骨手术切口愈合不良2例。缺损... 详细信息

目的探讨运用外增压技术的腓动脉穿支皮瓣修复足踝软组织缺损的技术要点及临床效果。方法2010年1月至2018年2月,共采用外增压腓动脉穿支螺旋桨皮瓣修复足踝软组织缺损10例,病因:创伤7例,慢性伤口溃疡1例,跟骨手术切口愈合不良2例。缺损部位:足跟5例,内、外踝部2例,足背及足底3例。皮瓣大小6.0cm×3.0cm^16.0cm×5.0cm。术后1、3、6个月来院复诊随访,术后3个月时按照美国矫形外科足踝协会(AOFAS)踝-后足评分系统进行功能评定。2016年11月至2017年5月,利用新鲜尸体标本对外增压腓动脉穿支皮瓣的解剖基础及手术操作要点进行研究总结。结果10例外增压腓动脉穿支皮瓣全部成活,其中2例术后皮瓣近端出现局部表皮坏死,经过1~2周换药后最终愈合,其余8例愈合良好。解剖研究显示,不同平面的外增压腓动脉穿支螺旋浆皮瓣的只有采用不同旋转方向旋转才能减少双蒂互相压迫,减少皮瓣远端坏死率。结论外增压腓动脉穿支螺旋桨皮瓣可增强皮瓣"大桨"动脉供血及静脉回流,有效减少皮瓣远端坏死率。

关键词：腓动脉穿支皮瓣螺旋桨皮瓣外增压足踝

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自体骨瓣移植在青壮年股骨颈骨折治疗中的应用进展

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中国临床解剖学杂志 2019年第6期37卷 729-731页

作者：庄乐彬廖华胡稷杰南方医科大学南方医院创伤骨科广州510515 南方医科大学基础医学院人体解剖学教研室广东省组织构建与检测重点实验室广州510515

股骨颈骨折中青壮年的年龄界限尚无明确定义,文献报道多以60岁以下作为青壮年,有学者认为应根据生理年龄判定年轻或老年,那些活动较多,功能要求髙,骨质量好,医疗问题少的人被认为“年轻”,而那些活动要求低的人(使用辅助设备走路)、慢... 详细信息

股骨颈骨折中青壮年的年龄界限尚无明确定义,文献报道多以60岁以下作为青壮年,有学者认为应根据生理年龄判定年轻或老年,那些活动较多,功能要求髙,骨质量好,医疗问题少的人被认为“年轻”,而那些活动要求低的人(使用辅助设备走路)、慢性病或骨质量差被认为是“老年人”。统计表明,青壮年股骨颈骨折仅占股骨颈骨折的3%(95/3147),然而,一旦发生骨折,常伴有骨折断端的粉碎,甚至是合并股骨干、股骨头或髏臼骨折,骨折类型多为GardenⅢ型.GardenⅣ型或者PauwelsⅡ型、PauwelsⅢ型。

关键词：青壮年股骨颈骨折骨不连骨瓣移植髂骨瓣股骨头坏死率股方肌骨瓣应用进展

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Lasp1蛋白和铁蛋白在重组人骨形态发生蛋白2介导的小鼠骨髓间充质干细胞成骨过程中的调控机制研究

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中华创伤骨科杂志 2018年第7期20卷 611-616页

作者：卓灵剑郑健雄李杰杨运平张萍廖华胡稷杰南方医科大学南方医院创伤骨科广州510515 南方医科大学基础医学院人体解剖学教研室广东省组织构建与检测重点实验室广州510515

目的体外研究验证小鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）中Laspl蛋白及铁蛋白在骨形态发生蛋白2（BMP2）介导成骨中的机制。方法从3-18个月龄的C57BL／6J小鼠体内分离、纯化出MSCs，并传代至第3代后，分为3组：实验组的高糖培养基内加入100μg／... 详细信息

目的体外研究验证小鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）中Laspl蛋白及铁蛋白在骨形态发生蛋白2（BMP2）介导成骨中的机制。方法从3-18个月龄的C57BL／6J小鼠体内分离、纯化出MSCs，并传代至第3代后，分为3组：实验组的高糖培养基内加入100μg／L的BMP2及成骨诱导液，阳性对照组加入单纯的成骨诱导液，空白对照组不做处理。3组分别诱导7、14、21d，并采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测4个成骨相关标记基因：Runt相关转录因子2、骨钙素、Osterix蛋白、骨桥素，以确认是否分化成骨。确认成骨后，采用蛋白印迹法检测成骨结果阳性组细胞中的Laspl蛋白及铁蛋白各自的表达浓度。以慢病毒转染基因沉默技术下调小鼠MSCs的Laspl蛋白的基因表达，并重新进行BMP2介导的诱导成骨过程，再进行上述成骨标志基因的RT-qPCR检测。结果RT-qPCR过程显示实验组和阳性对照组显示诱导成骨，且实验组诱导成骨效果更佳。蛋白印迹法检测结果显示仅实验组中的Laspl蛋白明显表达量下调而铁蛋白表达量明显上调。采用慢病毒转染基因沉默技术下调Laspl蛋白表达量后，成骨相关基因表达量明显上调。结论BMP2可以介导小鼠MSCs诱导成骨，且成骨诱导效果极佳。结合前期研究，我们可以确认Laspl蛋白及铁蛋白参与调控BMP2的信号通路，且Laspl蛋白对BMP2介导的诱导成骨呈抑制作用。

关键词：骨形态发生蛋白质类铁蛋白质类成骨细胞间质干细胞

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骨骼肌特异表达卵清蛋白(OVA)抗原转基因小鼠构建

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免疫学杂志 2017年第8期33卷 733-736页

作者：黄涛丁茂超史丹丹谷瑞彩肖将尉郭梦霞李俊桦廖华南方医科大学基础医学院解剖学教研室广东省组织构建与检测重点实验室广州510515 温州医科大学人体解剖学教研室 325035

目的利用PiggyBAC转座酶系统及受精卵注射法,将MCK3E-OVA-pA随机插入小鼠基因组,获得骨骼肌特异表达卵清蛋白(OVA)的转基因小鼠(Muscle-OVA Tg)。方法通过体外转录,获得PiggyBAC mRNA;将PiggyBAC mRNA和含有鸡全长OVA片段、骨骼肌肌酸... 详细信息

目的利用PiggyBAC转座酶系统及受精卵注射法,将MCK3E-OVA-pA随机插入小鼠基因组,获得骨骼肌特异表达卵清蛋白(OVA)的转基因小鼠(Muscle-OVA Tg)。方法通过体外转录,获得PiggyBAC mRNA;将PiggyBAC mRNA和含有鸡全长OVA片段、骨骼肌肌酸激酶启动子(MCK)、H-2K^b引导序列、H-2Db跨膜序列的质粒显微注射至C57BL/6J小鼠受精卵中,获得转基因阳性首建鼠。将Muscle-OVA Tg鼠与野生B6小鼠杂交建系。PCR鉴定小鼠基因型;Westernblot检测小鼠各组织中OVA蛋白表达以验证其组织特异性。结果PCR检测表明,Muscle-OVA Tg的肌组织表达OVA mRNA;Western blot进一步证实Muscle-OVA Tg小鼠骨骼肌组织特异的OVA蛋白表达,其他组织/器官,如心、脾、肺、肾组织OVA表达均呈阴性。结论利用PiggyBAC转座酶系统成功构建骨骼肌特异表达鸡OVA抗原的转基因小鼠,为相关的骨骼肌免疫反应研究提供了有价值的动物模型。

关键词：卵清蛋白 PiggyBAC 转基因骨骼肌

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不同应激条件下分化抑制因子Id2在成肌细胞C2C12中的表达与分布

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中国临床解剖学杂志 2017年第2期35卷 172-176页

作者：赖桂华胡晓芳张翔卢兴浩俞鹏余磊蚌埠医学院人体解剖学教研室安徽蚌埠233030 遵义医学院珠海校区人体解剖学教研室广东珠海519041 广州医科大学中华生物医学工程杂志编辑部广州511436 南方医科大学人体解剖学教研室广东省组织构建与检测重点实验室广州510515

目的观察在不同应激条件下成肌细胞C2C12中Id2的表达与细胞分布情况,并探讨其表达与分布变化的机制。方法体外培养C2C12细胞,分别采用不同浓度H2O2氧化应激诱导细胞增殖或凋亡,不同浓度的促炎症信号LPS诱导细胞增殖,以及2%马血清诱导细... 详细信息

目的观察在不同应激条件下成肌细胞C2C12中Id2的表达与细胞分布情况,并探讨其表达与分布变化的机制。方法体外培养C2C12细胞,分别采用不同浓度H2O2氧化应激诱导细胞增殖或凋亡,不同浓度的促炎症信号LPS诱导细胞增殖,以及2%马血清诱导细胞分化。利用RT-PCR比较不同应激条件下Id2 mRNA的表达,同时利用免疫荧光检测Id2蛋白的表达强度和细胞分布。结果25μmol/l和50μmol/l的H_2O_2诱导下,Id2 mRNA表达比对照组分别增高80.5%和55.5%,荧光显著增强,Id2呈现细胞核与细胞质均匀分布。100 ng/ml和500 ng/ml的LPS亦诱导Id2 mRNA表达,较对照组增高21.7%和40.2%,荧光增强,但此时Id2以细胞核分布为主,细胞质少量分布。在2%马血清诱导成肌细胞分化后,Id2 mRNA表达显著降低,荧光显著减弱,并以细胞质分布为主。结论不同应激条件下Id2在成肌细胞中呈现不同的表达和分布,与其对骨骼肌损伤后再生的调控作用密切相关,表明Id2是骨骼肌损伤后再生的重要调控分子。

关键词：成肌细胞 Id2 应激条件表达分布

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乙酰肝素酶、肝细胞生长因子和血管内皮生长因子在非小细胞肺癌组织中的表达及其相关性

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解剖学杂志 2016年第2期39卷 169-172,187页

作者：王锦阳黄文华李海滨曾宝真王亚陈佳丽何园尤长宣南方医科大学基础医学院人体解剖学教研室广东省组织构建与检测重点实验室广州510515 河北工程大学附属医院肿瘤科邯郸056002 南方医科大学南方医院肿瘤科广州510515

目的：研究乙酰肝素酶（HPA）、肝细胞生长因子（HGF）、血管内皮生长因子（ⅦGF）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其与临床特征之间的关系；并分析三者表达的相关性。方法：采用免疫组织化学检测45例非小细胞肺癌组织及10例正... 详细信息

目的：研究乙酰肝素酶（HPA）、肝细胞生长因子（HGF）、血管内皮生长因子（ⅦGF）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其与临床特征之间的关系；并分析三者表达的相关性。方法：采用免疫组织化学检测45例非小细胞肺癌组织及10例正常组织中HPA、HGF及VEGF的表达水平。结果：非小细胞肺癌组织中HPA、vEGF的表达与正常组织表达、TNM分期有关。HGF的表达与正常组织的表达有关。三者中任意两者间在非小细胞肺癌组织中的表达均呈正相关性。结论：HPA、HGF与VEGF参与了非小细胞肺癌的发生、发展、浸润与转移；在非小细胞肺癌的发展过程中，三者之间可能存在协同作用。

关键词：非小细胞肺癌乙酰肝素酶肝细胞生长因子血管内皮生长因子

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诱导型一氧化氮合酶对骨骼肌损伤再生的影响

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中国临床解剖学杂志 2015年第5期33卷 545-548页

作者：赖桂华余磊张翔蚌埠医学院人体解剖学教研室安徽蚌埠233030 南方医科大学人体解剖学教研室广东省组织构建与检测重点实验室广州510515 广州医科大学中华生物医学工程杂志编辑部广州511436

目的观察骨骼肌损伤再生中的细胞形态学变化和损伤后诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达水平;观察巨噬细胞上清液对iNOS表达水平和骨骼肌再生的影响。方法制备SD大鼠骨骼肌损伤模型,损伤3 d后获取骨骼肌,... 详细信息

目的观察骨骼肌损伤再生中的细胞形态学变化和损伤后诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达水平;观察巨噬细胞上清液对iNOS表达水平和骨骼肌再生的影响。方法制备SD大鼠骨骼肌损伤模型,损伤3 d后获取骨骼肌,进行HE染色、iNOS免疫组化分析;利用原代培养的巨噬细胞上清液处理小鼠C2C12成肌细胞株,RT-PCR技术探讨巨噬细胞和成肌细胞相互作用的分子机制。结果 HE染色可见,骨骼肌损伤处有新的血管产生并进入损伤的骨骼肌内;损伤部位iNOS表达强阳性,生发区iNOS表达呈阳性,正常与损伤细胞表达差异明显;巨噬细胞上清液处理小鼠C2C12成肌细胞株能够促进iNOS和成肌细胞因子Myo D的表达。结论骨骼肌损伤过程中,iNOS的表达增加能够促进骨骼肌的再生,加快骨骼肌的损伤修复。

关键词：骨骼肌损伤再生 iNOS 血管生成

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外源性分化抑制因子Id2在C_2C_(12)细胞中的表达

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广州医学院学报 2012年第4期40卷 1-4页

作者：赖桂华余磊张黎声欧阳钧邱小忠安徽省蚌埠医学院人体解剖学教研室安徽蚌埠233030 南方医科大学临床解剖学研究所广东省组织构建与检测重点实验室广东广州510515 上海中医药大学解剖学教研室上海201203

目的:构建大鼠Id2基因真核荧光表达载体,并观察外源性Id2基因C_2C_(12)细胞中的表达。方法:RT-PCR扩增出Id2全长cDNA,T4 DNA连接酶将载体pGEM-T和Id2 cDNA进行连接,构建克隆载体,经限制性内切酶EcoR I酶切pGEM-Id2克隆载体和pEGFP-C2真... 详细信息

目的:构建大鼠Id2基因真核荧光表达载体,并观察外源性Id2基因C_2C_(12)细胞中的表达。方法:RT-PCR扩增出Id2全长cDNA,T4 DNA连接酶将载体pGEM-T和Id2 cDNA进行连接,构建克隆载体,经限制性内切酶EcoR I酶切pGEM-Id2克隆载体和pEGFP-C2真核表达栽体,构建出重组真核表达载体pEGFP-C2-Id2,经酶切分析、PCR鉴定及DNA测序证实cDNA片段大小和序列的正确性;通过电穿孔转染法将外源性Id2基因导入C_2C_(12)成肌细胞中。分别于转染4、8、12、24、36、72 h后通过荧光倒置显微镜下观察细胞整体情况,并计算转染效率。结果:经酶切分析和序列测定证实pEGFP-C2-Id2含大小正确的正向Id2 cDNA片段,获得高转染率和高表达外源性Id2基因的C_2C_(12)细胞,转染8 h时,转染效率约为(10.5±2.8)%;转染12 h后,转染效率约为(20.9±3.1)%;转染24 h后,转染效率最高,约为(60.8±3.2)%。结论:成功构建了同时携带有G418筛选位点和Id2基因的真核表达载体;并获得高表达外源性Id2基因的C_2C_(12)细胞。

关键词： Id2基因 C2C12细胞转染真核表达载体大鼠

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