检索结果-内蒙古大学图书馆

生理学报 1999年第4期51卷 445-448页

作者：顾靖李学君孙凤艳上海医科大学基础医学院神经生物学教研室

为研究褪黑素对低氧引起大鼠大脑皮层脑片氨基酸释放变化的影响，利用反相高效液相色谱结合荧光检测法，测定了孵育液中氨基酸类神经递质的含量。低氧条件为通入９１－６％Ｎ２和８－４％Ｏ２的混合气体。低氧３０ｍｉｎ时， ... 详细信息

为研究褪黑素对低氧引起大鼠大脑皮层脑片氨基酸释放变化的影响，利用反相高效液相色谱结合荧光检测法，测定了孵育液中氨基酸类神经递质的含量。低氧条件为通入９１－６％Ｎ２和８－４％Ｏ２的混合气体。低氧３０ｍｉｎ时，大鼠大脑皮层脑片孵育液中，氨基酸类神经递质天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、牛磺酸和γ氨基丁酸的含量显著增加，其含量分别是正常氧组的２４０－４％，３３４－３％，２００－６％，２１０－４％，１６８－６％和２６３－９％，与正常氧组比较Ｐ＜０－０１。予以褪黑素可以显著降低兴奋性氨基酸的释放，其中天冬氨酸和谷氨酸的含量分别是低氧组的５５－１％和５７－０％。结果表明，褪黑素具有降低低氧所致的脑片释放兴奋性氨基酸的作用。

关键词：褪黑素低氧脑片兴奋性氨基酸

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细胞酶联反应法(cell-ELA)测定特异结合U87-EGFRvⅢ细胞的适配子的亲和力

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生物工程学报 2013年第5期29卷 664-671页

作者：谭燕梁惠玉伍锡栋高宇博张兴梅南方医科大学基础医学院神经生物学教研室广东广州510515 南方医科大学第一临床医学院广东广州510515

通过细胞-指数级富集的配基系统进化(Cell based systematic evolution of ligands by exponentialenrichment,cell-SELEX)方法从随机文库中筛选得到与稳定过表达人表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(Epidermal growth factor receptor variantⅢ,EGFRvⅢ)的胶质瘤细胞U87细胞株(U87-EGFRvⅢ)特异结合的DNA适配子。以U87-EGFRvⅢ细胞作为检测对象,筛选到的适配子A15作为检测分子,建立一种细胞酶联反应(Cell enzyme-linked assay,cell-ELA)方法测定适配子的亲和力,并用EGFR抗体作为对照来比较此种DNA适配子的亲和力。结果显示,所测定的DNA适配子A15的解离平衡常数(Equilibrium dissociation constants,Kd)小于100 nmol/L,对U87-EGFRvⅢ细胞的结合能力与抗体相似。Cell-ELA法可较方便地用于cell-SELEX中适配子亲和力的测定。

关键词：细胞酶联反应法细胞-指数级富集的配基系统进化 DNA适配子解离平衡常数

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嗜酸乳杆菌GGDEF和EAL结构域相关蛋白的表达、纯化及活性分析

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南方医科大学学报 2017年第5期37卷 633-639页

作者：何嘉辉孙洁丽闫文娟王方南方医科大学南方医院口腔科广东广州510515 南方医科大学基础医学院神经生物学教研室广东广州510515

目的鉴定嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)中含GGDEF和EAL结构域相关蛋白的功能。为进一步研究环二鸟苷酸(c-di-GMP)在该菌株中的调控机制奠定基础。方法从嗜酸乳杆菌ATCC4356基因组中PCR扩增出NH13_07045-GGDEF、NH13_07050和NH13_07055这3个基因片段,分别构建其重组表达质粒。经鉴定后,转入大肠杆菌表达宿主中,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白,经直链淀粉树脂纯化后进行体外酶活性实验,再通过高效液相色谱检测反应产物。结果通过PCR扩增的目的基因片段经重组质粒双酶切后其大小与预期相符,测序结果与Gen Bank中嗜酸乳杆菌ATCC4356基因序列一致,表明重组质粒构建成功。SDS-PAGE和Western Blot检测表达的重组蛋白相对分子质量分别约为59000(含GGDEF结构域)、67000(含EAL结构域)和72000(含EAL结构域),与预期大小吻合。经树脂亲和柱纯化及浓缩获得目的蛋白。高效液相色谱分析结果显示,NH13_07045-GGDEF的表达产物体外无明显双鸟苷酸环化酶(DGC)活性,NH13_07050的表达产物体外具有磷酸二酯酶(PDE)活性,而NH13_07055的表达产物在体外无明显PDE活性。结论在本研究的3种基因中,NH13_07050的表达产物在体外具有磷酸二酯酶(PDE)的活性。为研究环二鸟苷酸在嗜酸乳杆菌中的调控机制提供了实验依据。

关键词：嗜酸乳杆菌环二鸟苷酸 GGDEF结构域 EAL结构域酶活性检测高效液相色谱

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甲氧氯普胺镇内脏痛的中枢多巴胺机制

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中国药理学通报 1993年第6期9卷 435-437页

作者：蔡佰元黄显奋王根年莫浣英上海医科大学基础医学院神经生物学教研室 200032

在家兔内脏痛模型上观察了甲氧氯普胺(MCP)的镇痛作用。结果:MCP 8mg·kg^(-1)iv有明显的镇内脏痛作用.该作用可被多巴胺(DA)受体激动剂阿扑吗啡.D_1受体激动剂SKF38393.D_2受体激动剂LY171555 icv所拮抗。应用高效液相色谱—电化... 详细信息

在家兔内脏痛模型上观察了甲氧氯普胺(MCP)的镇痛作用。结果:MCP 8mg·kg^(-1)iv有明显的镇内脏痛作用.该作用可被多巴胺(DA)受体激动剂阿扑吗啡.D_1受体激动剂SKF38393.D_2受体激动剂LY171555 icv所拮抗。应用高效液相色谱—电化学检测法也观察到MCP8 mg·kg^(-1)iv20 min后.脑脊液中DA的代谢产物3-甲氧基-4-羟基苯乙酸明显升高。表明MCP的镇内脏痛作用与阻断脑内DA受体有关.D_1、D_2受体的激活均不利于MCP镇痛。

关键词：内脏痛镇痛甲氧氯普胺 DA受体

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K_(ATP)通道对缺氧海马CA1区神经元损伤保护作用的机制

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中国应用生理学杂志 2007年第3期23卷 257-261页

作者：黄潋滟李文军李勃兴邹飞南方医科大学公共卫生与热带医学学院南方医科大学基础医学院神经生物学教研室广东广州510515

目的:探讨KATP通道在缺氧中对海马CA1区神经元的保护作用机制。方法:比较对照组、单纯缺氧组、KATP通道激动剂+缺氧组、KATP通道阻断剂+缺氧组中神经元p53 mRNA的表达、DNA断裂、以及神经元存活情况。结果:将神经元暴露在氧浓度为0%的... 详细信息

目的:探讨KATP通道在缺氧中对海马CA1区神经元的保护作用机制。方法:比较对照组、单纯缺氧组、KATP通道激动剂+缺氧组、KATP通道阻断剂+缺氧组中神经元p53 mRNA的表达、DNA断裂、以及神经元存活情况。结果:将神经元暴露在氧浓度为0%的缺氧环境中12h,KATP通道的激动剂二氮嗪(diazoxide,100μmol/L)显著降低p53 mRNA的表达量及细胞的凋亡数量。KATP通道的阻断剂甲糖宁(tolbutamide,100μmol/L)使p53mR-NA表达量显著增加,细胞的凋亡数量也随之显著增加。p53的特异性阻断剂曲古抑菌素(trichostatin,TSA)可以逆转甲糖宁(tolbutamide,100μmol/L)的作用。结论:KATP通道可以通过下调p53 mRNA的表达水平,对缺氧中的海马CA1区神经元起到保护作用。

关键词： ATP敏感钾通道重度缺氧神经元 p53

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通过抑制β-淀粉样前体蛋白裂解酶1影响淀粉样前体蛋白通路的相关研究进展

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中华神经科杂志 2013年第12期46卷 856-857页

作者：梁惠玉张兴梅南方医科大学基础医学院神经生物学教研室广州510515

阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）是常见的中枢神经系统退行性疾病，以进行性认知和执行功能障碍为主要临床特征，是导致痴呆的主要原因。迄今，淀粉样蛋白（Aβ）沉积假说仍是AD发病的中心环节。β-淀粉样前体蛋白裂解酶1（BA... 详细信息

阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）是常见的中枢神经系统退行性疾病，以进行性认知和执行功能障碍为主要临床特征，是导致痴呆的主要原因。迄今，淀粉样蛋白（Aβ）沉积假说仍是AD发病的中心环节。β-淀粉样前体蛋白裂解酶1（BACE1）是Aβ产生的限速酶。我们综述近年BACE1抑制剂在AD治疗的基础与临床研究方面取得的进展，为更好地开发AD临床药物提供参考。

关键词：淀粉样前体蛋白蛋白裂解酶 β-淀粉样中枢神经系统退行性疾病通路阿尔茨海默病执行功能障碍淀粉样蛋白

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突触内NMDAR通道电流在培养神经元发育中的变化

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中山大学学报（医学科学版） 2007年第3期28卷 246-249页

作者：田映红胡德辉李树基陈明高天明南方医科大学基础医学院神经生物学教研室广东广州510515

【目的】观察培养大鼠海马神经元突触内NMDA受体(NMDAR)通道电流在发育中的变化。【方法】取新生1dSD大鼠海马制成细胞悬液,接种在培养板上进行培养。培养到1周和2周时,采用膜片钳全细胞模式记录神经元突触内自发的微小兴奋性突触后电流... 详细信息

【目的】观察培养大鼠海马神经元突触内NMDA受体(NMDAR)通道电流在发育中的变化。【方法】取新生1dSD大鼠海马制成细胞悬液,接种在培养板上进行培养。培养到1周和2周时,采用膜片钳全细胞模式记录神经元突触内自发的微小兴奋性突触后电流(mEPSC)。【结果】培养2周海马神经元突触内NMDA受体介导的mEPSC(mEPSCNMDA)幅度比培养1周神经元小,对NR2B的特异拮抗剂ifenprodil的敏感性降低。Ifenprodil对培养1周神经元mEPSCNMDA的抑制作用达到(80.47±6.12)%,却只抑制(12.27±2.02)%培养2周神经元的mEPSCNMDA。【结论】培养海马神经元突触内NMDA受体通道电流有发育变化,提示培养1周神经元突触内NMDA受体NR2亚单位主要为NR2B;而神经元培养到2周时,突触内NR2B亚单位逐渐被NR2A取代。

关键词：海马神经元 N-甲基-D-天冬氨酸受体膜片钳记录突触 mEPSC

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曲古菌素A抑制乳腺肿瘤干细胞的自我更新

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南方医科大学学报 2013年第10期33卷 1421-1426页

作者：彭黎李福喜邵文凤熊静波南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515

目的研究组蛋白乙酰化酶抑制剂曲古菌素A对乳腺肿瘤干细胞自我更新的影响;初步研究其抑制乳腺肿瘤干细胞自我更新的机制。方法悬浮培养乳腺癌细胞系MDA-MB-468、MDA-MB-231、MCF-7和SKBR3,用不同浓度曲古菌素A处理悬浮培养乳腺癌细胞7 d... 详细信息

目的研究组蛋白乙酰化酶抑制剂曲古菌素A对乳腺肿瘤干细胞自我更新的影响;初步研究其抑制乳腺肿瘤干细胞自我更新的机制。方法悬浮培养乳腺癌细胞系MDA-MB-468、MDA-MB-231、MCF-7和SKBR3,用不同浓度曲古菌素A处理悬浮培养乳腺癌细胞7 d,用0.1%DMSO作对照;用次级细胞球形成率和乳腺癌细胞初级细胞球细胞中肿瘤干细胞即CD44+/CD24-细胞群的百分比评价曲古菌素A对乳腺癌干细胞自我更新的影响;乳腺癌细胞初级细胞球细胞中CD44+/CD24-细胞群的百分比用流式细胞仪检测,凋亡细胞百分比用Annexin-V法在流式细胞仪检测,Nanog、Sox2和Oct4 mRNA的表达用定量PCR法检测。结果 100 nmol/L和500 nmol/L曲古菌素A均能部分抑制4个乳腺癌细胞系中肿瘤干细胞的自我更新,但10 nmol/L不行;500 nmol/L曲古菌素A诱导乳腺癌细胞初级细胞球细胞凋亡;曲古菌素A能下调乳腺癌细胞初级细胞球细胞Nanog和Sox2mRNA的表达。结论曲古菌素A能部分抑制乳腺癌干细胞的自我更新,其机制与其能下调乳腺癌初级细胞球细胞Nanog和Sox2表达相关联,提示临床可用低浓度组蛋白乙酰化酶抑制剂和其他抗癌药物联用以便获得较好的乳腺肿瘤干细胞自我更新抑制效果,胚胎干细胞核心转录因子Nanog和Sox2可能作为肿瘤治疗的新靶标。

关键词：肿瘤干细胞乳腺癌组蛋白乙酰化酶抑制 Nanog

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hERG钾通道介导马钱子碱和士的宁对癌细胞的增殖抑制作用

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中国临床解剖学杂志 2023年第6期41卷 684-691页

作者：曾纤周颖殷雅楠谢婷李树基袁春华南方医科大学基础医学院神经生物学教研室广州510515

目的探讨马钱子碱和士的宁通过阻断hERG通道发挥抗肿瘤作用。方法采用脂质体转染及选择性培养基构建hERG转染CHO细胞和载体转染CHO细胞的稳定细胞株;CCK-8检测共培养24、48、72 h后马钱子碱及其结构类似物对癌细胞增殖的影响,以及共培养... 详细信息

目的探讨马钱子碱和士的宁通过阻断hERG通道发挥抗肿瘤作用。方法采用脂质体转染及选择性培养基构建hERG转染CHO细胞和载体转染CHO细胞的稳定细胞株;CCK-8检测共培养24、48、72 h后马钱子碱及其结构类似物对癌细胞增殖的影响,以及共培养48 h后马钱子碱及其结构类似物对hERG-CHO细胞增殖的影响,以载体转染CHO细胞作为对照;流式细胞术检测马HT29、A549细胞周期;免疫印迹法检测HT29、PC9、A549细胞中hERG蛋白表达。结果马钱子碱和士的宁呈时间和浓度依赖性抑制HT29、PC9、A549细胞增殖,这种抗增殖作用与癌细胞中hERG蛋白表达正相关;而马钱子碱和士的宁的氮氧化物仅在高浓度对hERG通道有较弱的阻断活性,对肿瘤细胞也仅在高浓度表现出较弱的增殖抑制作用。马钱子碱对稳定表达hERG的CHO细胞的增殖抑制作用显著高于载体转染的CHO细胞。马钱子碱和士的宁将HT29细胞周期阻滞于G0/G1期,对A549细胞周期没有明显影响。马钱子碱不影响癌细胞的hERG蛋白表达。结论马钱子碱和士的宁对癌细胞的增殖抑制作用可能与hERG通道阻断相关,该研究将为hERG通道阻断剂在肿瘤治疗方面的应用提供重要的指导和依据。

关键词：马钱子抗肿瘤 hERG表达 hERG阻滞

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核酸适配子结合无机纳米材料在肿瘤研究中的应用

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生物技术通报 2017年第11期33卷 48-53页

作者：彭立张兴梅南方医科大学基础医学院神经生物学教研室广州510515

在倡导精准医疗的今日,在基本掌握与肿瘤发生密切相关的靶点的机理后,如何实现肿瘤靶向治疗,尽量消减由治疗带来的不良反应显得尤为关键。核酸适配子是能与靶标以高亲和力、高特异性结合的寡核苷酸;无机纳米材料是纳米材料作为医学领域... 详细信息

在倡导精准医疗的今日,在基本掌握与肿瘤发生密切相关的靶点的机理后,如何实现肿瘤靶向治疗,尽量消减由治疗带来的不良反应显得尤为关键。核酸适配子是能与靶标以高亲和力、高特异性结合的寡核苷酸;无机纳米材料是纳米材料作为医学领域诊疗制剂中重要的组成部分;利用核酸适配子与靶标结合的特性将其与无机纳米材料结合后,可将靶向结合、生物成像及药物递送等特点集于一体,综合应用于肿瘤研究,同时有力于促进核酸纳米技术的发展。综述了近年不同无机纳米材料结合核酸适配子在肿瘤研究领域中的研究进展,以及对无机纳米材料在医学应用的安全性思考,以期早日实现新型靶向肿瘤治疗策略的开发。

关键词：核酸适配子纳米材料肿瘤

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