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南方医科大学学报 2012年第7期32卷 1059-1063页

作者：陈蕾曾位森郑航南方医科大学南方医院肿瘤科广东广州510515 南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515

目的在双歧杆菌中表达重组人颗粒酶B-血管内皮生长因子结合肽(GrB-VRB)融合蛋白并研究其对血管内皮生长因子受体I(IKDR)阳性细胞的作用。方法采用电穿孔法将重组表达载体转入双歧杆菌,以ELISA和免疫印迹鉴定表达产物,以细胞增殖试验和TU... 详细信息

目的在双歧杆菌中表达重组人颗粒酶B-血管内皮生长因子结合肽(GrB-VRB)融合蛋白并研究其对血管内皮生长因子受体I(IKDR)阳性细胞的作用。方法采用电穿孔法将重组表达载体转入双歧杆菌,以ELISA和免疫印迹鉴定表达产物,以细胞增殖试验和TUNEL法分析其对KDR阳性细胞的影响。结果工程化化双歧杆菌培养物的上清和菌体中均有重组产物,重组人GrB-VRB能有效抑制KDR阳性如人脐静脉血管内皮细胞株HUVEC、小鼠结肠癌细胞株CT-26细胞增殖、细胞死亡,这种死亡的机制是细胞凋亡;但对KDR阴性细胞则无这些作用。结论工程化双歧杆菌能分泌性表达重组GrB-VRB融合蛋白,其在VRB的靶向作用下,GrB可有效地诱导KDR阳性细胞凋亡。

关键词：颗粒酶B 血管内皮生长因子受体结合肽双歧杆菌细胞凋亡

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TGF-β1诱导的肿瘤细胞CSRNP1/AXUD1基因的表达及转录调节机制

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南方医科大学学报 2013年第8期33卷 1122-1126页

作者：邓凡李松玉许万福邹志鹏柯志勇曾方银南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515 南方医科大学南方医院检验科广东广州510515

目的探讨TGF-β1诱导的肿瘤细胞中CSRNP1/AXUD1基因的表达及其调控机制。方法分别用不同浓度的TGF-β1或相同浓度下不同处理时间处理指数生长期的人肺腺癌细胞A549和人前列腺癌细胞PC-3,荧光定量RT-PCR检测TGF-β1对两种肿瘤细胞中半胱... 详细信息

目的探讨TGF-β1诱导的肿瘤细胞中CSRNP1/AXUD1基因的表达及其调控机制。方法分别用不同浓度的TGF-β1或相同浓度下不同处理时间处理指数生长期的人肺腺癌细胞A549和人前列腺癌细胞PC-3,荧光定量RT-PCR检测TGF-β1对两种肿瘤细胞中半胱氨酸-丝氨酸蛋白(cystein-serine-rich nuclear protein,CSRNP1)基因表达的剂量和时间依赖性效应;培养的A549细胞血清饥饿后,分别在有无TGF-β1(20 ng/ml)和环己亚胺(30μg/ml)作用下处理24 h,检测TGF-β1诱导的CSRNP1基因的表达是否需要新蛋白的合成;最后,分别将SMAD3表达质粒flag-SMAD3和显性失活突变体表达质粒(flag-SMAD3-mu转染A549细胞中,并以空质粒pcDNA3.1作为对照。血清饥饿后,进行有无TGF-β1(20 ng/ml)处理24 h,Western blot确定外源性SMAD3的过表达,荧光定量RT-PCR检测SMAD3的过表达对TGF-β1诱导的CSRNP1基因表达的影响。结果 TGF-β1以浓度和时间依赖的方式诱导肿瘤细胞中CSRNP1基因的表达,并需要新的蛋白合成。SMAD3的过表达增加TGF-β1诱导的CSRNP1的表达,而显性失活的SMAD3突变体(SMAD3-mu)的过表达则显著降低TGF-β1诱导的CSRNP1的表达。结论肿瘤细胞中TGF-β1可能通过激活SMAD3及其下游信号通路而诱导CSRNP1基因的表达。

关键词： TGF-β1 SMAD3 CSRNP1 基因表达肿瘤细胞

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甲氧氯普胺镇内脏痛的中枢多巴胺机制

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中国药理学通报 1993年第6期9卷 435-437页

作者：蔡佰元黄显奋王根年莫浣英上海医科大学基础医学院神经生物学教研室 200032

在家兔内脏痛模型上观察了甲氧氯普胺(MCP)的镇痛作用。结果:MCP 8mg·kg^(-1)iv有明显的镇内脏痛作用.该作用可被多巴胺(DA)受体激动剂阿扑吗啡.D_1受体激动剂SKF38393.D_2受体激动剂LY171555 icv所拮抗。应用高效液相色谱—电化... 详细信息

在家兔内脏痛模型上观察了甲氧氯普胺(MCP)的镇痛作用。结果:MCP 8mg·kg^(-1)iv有明显的镇内脏痛作用.该作用可被多巴胺(DA)受体激动剂阿扑吗啡.D_1受体激动剂SKF38393.D_2受体激动剂LY171555 icv所拮抗。应用高效液相色谱—电化学检测法也观察到MCP8 mg·kg^(-1)iv20 min后.脑脊液中DA的代谢产物3-甲氧基-4-羟基苯乙酸明显升高。表明MCP的镇内脏痛作用与阻断脑内DA受体有关.D_1、D_2受体的激活均不利于MCP镇痛。

关键词：内脏痛镇痛甲氧氯普胺 DA受体

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hERG钾通道介导马钱子碱和士的宁对癌细胞的增殖抑制作用

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中国临床解剖学杂志 2023年第6期41卷 684-691页

作者：曾纤周颖殷雅楠谢婷李树基袁春华南方医科大学基础医学院神经生物学教研室广州510515

目的探讨马钱子碱和士的宁通过阻断hERG通道发挥抗肿瘤作用。方法采用脂质体转染及选择性培养基构建hERG转染CHO细胞和载体转染CHO细胞的稳定细胞株;CCK-8检测共培养24、48、72 h后马钱子碱及其结构类似物对癌细胞增殖的影响,以及共培养... 详细信息

目的探讨马钱子碱和士的宁通过阻断hERG通道发挥抗肿瘤作用。方法采用脂质体转染及选择性培养基构建hERG转染CHO细胞和载体转染CHO细胞的稳定细胞株;CCK-8检测共培养24、48、72 h后马钱子碱及其结构类似物对癌细胞增殖的影响,以及共培养48 h后马钱子碱及其结构类似物对hERG-CHO细胞增殖的影响,以载体转染CHO细胞作为对照;流式细胞术检测马HT29、A549细胞周期;免疫印迹法检测HT29、PC9、A549细胞中hERG蛋白表达。结果马钱子碱和士的宁呈时间和浓度依赖性抑制HT29、PC9、A549细胞增殖,这种抗增殖作用与癌细胞中hERG蛋白表达正相关;而马钱子碱和士的宁的氮氧化物仅在高浓度对hERG通道有较弱的阻断活性,对肿瘤细胞也仅在高浓度表现出较弱的增殖抑制作用。马钱子碱对稳定表达hERG的CHO细胞的增殖抑制作用显著高于载体转染的CHO细胞。马钱子碱和士的宁将HT29细胞周期阻滞于G0/G1期,对A549细胞周期没有明显影响。马钱子碱不影响癌细胞的hERG蛋白表达。结论马钱子碱和士的宁对癌细胞的增殖抑制作用可能与hERG通道阻断相关,该研究将为hERG通道阻断剂在肿瘤治疗方面的应用提供重要的指导和依据。

关键词：马钱子抗肿瘤 hERG表达 hERG阻滞

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核酸适配子结合无机纳米材料在肿瘤研究中的应用

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生物技术通报 2017年第11期33卷 48-53页

作者：彭立张兴梅南方医科大学基础医学院神经生物学教研室广州510515

在倡导精准医疗的今日,在基本掌握与肿瘤发生密切相关的靶点的机理后,如何实现肿瘤靶向治疗,尽量消减由治疗带来的不良反应显得尤为关键。核酸适配子是能与靶标以高亲和力、高特异性结合的寡核苷酸;无机纳米材料是纳米材料作为医学领域... 详细信息

在倡导精准医疗的今日,在基本掌握与肿瘤发生密切相关的靶点的机理后,如何实现肿瘤靶向治疗,尽量消减由治疗带来的不良反应显得尤为关键。核酸适配子是能与靶标以高亲和力、高特异性结合的寡核苷酸;无机纳米材料是纳米材料作为医学领域诊疗制剂中重要的组成部分;利用核酸适配子与靶标结合的特性将其与无机纳米材料结合后,可将靶向结合、生物成像及药物递送等特点集于一体,综合应用于肿瘤研究,同时有力于促进核酸纳米技术的发展。综述了近年不同无机纳米材料结合核酸适配子在肿瘤研究领域中的研究进展,以及对无机纳米材料在医学应用的安全性思考,以期早日实现新型靶向肿瘤治疗策略的开发。

关键词：核酸适配子纳米材料肿瘤

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聚合物基仿生医用胶黏剂的开发与应用

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功能高分子学报 2021年第2期34卷 93-113页

作者：吴可可赵益涛吴敏李越胡志奇卢智慧郭金山南方医科大学基础医学院组织胚胎学教研室广州510515 南方医科大学南方医院整形美容外科广州510515

生物医用胶黏剂有望代替手术缝合线用于伤口闭合,可广泛用于皮肤、内脏、心血管、骨和牙齿等软/硬组织伤口的再生修复,市场前景广阔;然而,在湿态下如何使其对生物组织产生强力黏附一直是科学界面临的难题。为解决这一难题,研究者模拟自... 详细信息

生物医用胶黏剂有望代替手术缝合线用于伤口闭合,可广泛用于皮肤、内脏、心血管、骨和牙齿等软/硬组织伤口的再生修复,市场前景广阔;然而,在湿态下如何使其对生物组织产生强力黏附一直是科学界面临的难题。为解决这一难题,研究者模拟自然界中各种动、植物的黏附策略,开发了一系列仿生医用胶黏剂。本文总结了各种聚合物基仿生医用胶黏剂的开发及其在手术伤口黏合、日常伤口护理、慢性伤口再生修复、骨折黏合固定等软/硬组织再生修复以及局部药物递送和原位治疗等领域中的应用,并展望了医用胶黏剂的未来发展方向,包括其在医疗美容领域的应用前景。

关键词：生物医用胶黏剂仿生黏附组织再生修复医疗美容

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不同浓度一氧化氮供体对培养海马神经元存活率影响的相关研究

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中国临床康复 2006年第8期10卷 70-72页

作者：陈明孙红宇李晓文高天明南方医科大学基础医学院神经生物学教研室广东省广州市510515 南方医科大学基础医学院生理学教研室广东省广州市510515

目的:观察不同浓度一氧化氮供体硝普钠对培养海马神经元存活率的影响以及不同类型钾通道阻断剂对硝普钠诱导的神经元死亡的保护作用。方法:实验于2004-11/2005-04在南方医科大学基础医学院神经生物学教研室实验室进行。①取新生两天以... 详细信息

目的:观察不同浓度一氧化氮供体硝普钠对培养海马神经元存活率的影响以及不同类型钾通道阻断剂对硝普钠诱导的神经元死亡的保护作用。方法:实验于2004-11/2005-04在南方医科大学基础医学院神经生物学教研室实验室进行。①取新生两天以内SD大鼠海马组织做神经元分散细胞原代培养,培养第8天时,分别以不同浓度硝普钠(0.01mmol/L,0.1mmol/L,0.5mmol/L,1mmol/L)处理18h,采用MTT法观察硝普钠对神经元存活率的影响。②硝普钠(0.1mmol/L)处理前10min培养液内预先分别给予钾通道阻断剂四乙铵1mmol/L、4-氨基砒碇1mmol/L、Iberiotoxin(IBTX)100nmol/L或paxilline100μmol/L,18h后测定神经元存活率。结果:①低浓度硝普钠(0.01mmol/L)对培养海马神经元存活无影响(P>0.05),增大硝普钠浓度至0.1mmol/L,0.5mmol/L或1mmol/L可引起神经元存活率浓度依赖性地降低(P<0.001)。②硝普钠(0.1mmol/L)处理前10min给予不同类型钾通道阻断剂,广谱钾通道阻断剂1mmol/L四乙铵或A型钾通道阻断剂1mmol/L4-氨基砒碇均不能降低硝普钠诱导的神经元死亡(P>0.05);两种不同的特异性大电导钙激活钾通道阻断剂100nmol/LIBTX或10μmol/Lpaxilline均可完全保护硝普钠诱导的神经元死亡(P<0.001)。结论:一氧化氮供体硝普钠剂量依赖性地诱导培养新生大鼠海马神经元死亡,大电导钙激活钾通道阻断剂对一氧化氮诱导的神经元死亡具有完全保护作用,提示阻断大电导钙激活钾通道可能作为临床治疗缺血性脑损伤的新靶点。

关键词：神经元一氧化氮钾通道,钙激活钾通道阻断剂细胞培养浓度供体存活率

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miR-519d过表达促使宫颈癌SiHa细胞基因表达谱发生改变

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南方医科大学学报 2018年第7期38卷 794-799页

作者：曾烨刘洁陈志超郑思荣张汉荣周珏宇南方医科大学南方医院口腔科广东广州510515 南方医科大学南方医院妇产科广东广州510515 南方医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室广东广州510515

目的分析miR-519d转染前后人宫颈癌SiHa细胞基因表达谱的变化。方法向人宫颈癌SiHa细胞中转染模拟物上调细胞内miR-519d的表达,采用人全基因组表达谱芯片筛选其对细胞基因表达谱的影响,结合生物信息学软件进行靶基因预测,确定miR-519d... 详细信息

目的分析miR-519d转染前后人宫颈癌SiHa细胞基因表达谱的变化。方法向人宫颈癌SiHa细胞中转染模拟物上调细胞内miR-519d的表达,采用人全基因组表达谱芯片筛选其对细胞基因表达谱的影响,结合生物信息学软件进行靶基因预测,确定miR-519d的候选靶基因,采用qRT-PCR进行验证。结果 miR-519d表达上调后,共筛选到差异表达基因5172个,其中上调基因2476个,下调基因2796个。结合生物信息学软件进行靶基因预测,共确定164个miR-519d的候选靶基因。随后,对上述基因进行KEGG信号通路分析,采用STRING和pSTIING在线数据库构建候选基因编码蛋白的互作网络、预测转录相关和物理相关关系,发现了一些重要的节点分子。最后,采用qRT-PCR结果对部分关键基因进行了验证,与芯片结果基本一致。结论miR-519d过表达促使人宫颈癌SiHa细胞的基因表达谱发生了显著地改变,结合生物信息学软件获得了164个候选靶基因,为系统、全面地阐明miR-519d在宫颈癌中的作用及其分子机制提供了重要的实验依据。

关键词：微小RNA 基因芯片宫颈癌差异表达基因

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人类与小鼠同源lncRNA基因及其表观遗传调控靶基因分析

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南方医科大学学报 2018年第6期38卷 731-735页

作者：蒋洋洋朱浩张海南方医科大学网络中心广东广州510515 南方医科大学基础医学院生物信息学教研室广东广州510515

目的分析人类与小鼠lnc RNA中的同源与种系特异性lnc RNA,揭示人类与小鼠表观遗传调控的种系差异。方法根据同源lnc RNA序列搜索和人类/小鼠全基因组双序列比对确定GENCODE项目首期报道的13562个人类lnc RNA和10481个小鼠lnc RNA中的同... 详细信息

目的分析人类与小鼠lnc RNA中的同源与种系特异性lnc RNA,揭示人类与小鼠表观遗传调控的种系差异。方法根据同源lnc RNA序列搜索和人类/小鼠全基因组双序列比对确定GENCODE项目首期报道的13562个人类lnc RNA和10481个小鼠lnc RNA中的同源lnc RNA基因,用lnc RNA/DNA结合分析软件Long Target预测lnc RNA的DNA结合位点和表观遗传调控靶基因,根据Gene Ontology数据库分析靶基因的功能。结果仅158对人类和小鼠lnc RNA被识别为同源lnc RNA,这些同源lnc RNA在人类与小鼠基因组有种系特异性的DNA结合位点和靶基因,Gene Ontology分析提示这些同源lnc RNA对靶基因的种系特异性调控可能对人类和小鼠的表型差异有重要影响。结论仅极少数人类和小鼠lnc RNA是同源的,这些同源lnc RNA有种系特异性的表观遗传调控靶基因,lnc RNA和表观遗传调控的种系特异性对人类和小鼠的差异(包括疾病模型的差异)有重要影响。

关键词：长链非编码RNA 直系同源基因表观遗传调控人类小鼠

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LongMan:一个哺乳类直系同源长链非编码RNA数据库

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南方医科大学学报 2016年第4期36卷 552-556页

作者：杨小雪张海贺莎林杰朱浩南方医科大学基础医学院生物信息学教研室广东广州510515 南方医科大学网络中心广东广州510515

目的计算并预测13 562个GENCODE项目首期鉴定的人类长链非编码RNA在16个哺乳动物的直系同源基因,并建立数据库Long Man,为长链非编码RNA研究提供重要数据。方法使用RNAfold预测13 562个人类长链非编码RNA每个外显子的结构;使用Infernal... 详细信息

目的计算并预测13 562个GENCODE项目首期鉴定的人类长链非编码RNA在16个哺乳动物的直系同源基因,并建立数据库Long Man,为长链非编码RNA研究提供重要数据。方法使用RNAfold预测13 562个人类长链非编码RNA每个外显子的结构;使用Infernal对每个外显子进行基因组搜索,分析其在16个哺乳动物可能的同源外显子;分析每个人类长链非编码RNA是否有同源基因;分析同源长链非编码RNA中的转座子和剪切信号;构造数据库的搜索引擎和输出界面;实现数据库维护更新机制。结果 Long Man目前收录133 646个直系同源长链非编码RNA;提供序列、比对、转座子和种系特异性插缺(indel)等信息;提供多条件组合查询;提供显示与下载功能。结论 Long Man是首个大规模多种系同源长链非编码RNA数据库,对长链非编码RNA比较与功能研究具有重要价值。

关键词：数据库长链非编码RNA 同源基因

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