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中国毒理学会第十次全国毒理学大会

作者：林菲王婷张超南方医科大学基础医学院生化教研室

目的本文旨在讨论circT04B8.5对线虫放射损伤的促进作用及其分子机制。材料和方法对线虫进行200Gy电离辐射,结合放射损伤相关数据库,对差异表达的候选基因进行验证,筛选出上调最明显的F19B10.4。利用CRISPR/Cas9技术构建F19B10.4敲除株... 详细信息

目的本文旨在讨论circT04B8.5对线虫放射损伤的促进作用及其分子机制。材料和方法对线虫进行200Gy电离辐射,结合放射损伤相关数据库,对差异表达的候选基因进行验证,筛选出上调最明显的F19B10.4。利用CRISPR/Cas9技术构建F19B10.4敲除株线虫M263、M264、M265,经qPCR对F19B10.4水平验证后获得放射损伤线虫模型M265。对M265线虫进行circRNA分析,对辐照后候选circRNA的表达量进行检测,结合KEGG信号通路分析结果,筛选出上调最明显的circT04B8.5,并进行成环验证。分别给予不同辐射剂量(0 Gy、50 Gy、100 Gy、200 Gy),qPCR分别检测M265、野生型线虫中circT04B8.5的表达情况,探究circT04B8.5的表达情况与F19B10.4、电离辐射的关系。构建circT04B8.5iM265线虫,给予不同的辐射剂量后,检测其48小时的生存率并确定最佳辐射剂量100 Gy;检测接受100Gy辐射的circT04B8.5沉默线虫株的8天生存率,观察circT04B8.5对放射后线虫生存率的影响。利用H2DCFDA荧光探针检测辐照后circT04B8.5沉默线虫株体内的ROS水平,探究circT04B8.5对辐照后线虫体内ROS水平的影响。分别给予M265线虫及野生型线虫200 Gy的电离辐射,利用qPCR分别检测与氧化应激相关基因SOD2、SKN1、HSF1、DAF-16、LGG-1的表达情况;分别给予M265线虫、野生型线虫0Gy、50 Gy、100 Gy、200 Gy的电离辐射,qPCR检测SOD2的表达情况,初步探究circT04B8.5放射增敏作用的分子机制。结果通过辐射后线虫RNA水平及放射损伤相关数据库的分析,结合qPCR检测结果,筛选出辐射后上调最明显基因——F19B10.4。构建F19B10.4敲除线虫模型,qPCR结果表明F19B10.4在M265线虫中下调最明显,因此选择M265线虫为放射损伤线虫模型。circRNA转录组测序及KEGG信号通路分析结果显示,circT04B8.5在M265辐照后上调最明显,且主要与信号转导、细胞生长等通路相关。qPCR结果及线虫48 h生存率、8天生存率结果显示,circT04B8.5在M265线虫中表达上调且高剂量辐射对其表达上调具有明显作用,且能降低线虫在高剂量辐射下的生长能力。ROS水平检测结果以及qPCR分析结果表明,circT04B8.5能促进辐照后线虫体内ROS水平,且很可能通过下调SOD2促进ROS的积累。结论circT04B8.5可能通过下调体内SOD2的表达水平,增加ROS的积累,从而发挥对线虫在电离辐照下的生存能力的抑制作用,增加其放射敏感性。

关键词：生存率放射损伤野生型氧化应激 CircT04B8.5 放射性损伤促进作用

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Hsa＿circ＿0005232在放射性心肌细胞损伤中抑制细胞凋亡作用研究

Hsa＿circ＿0005232在放射性心肌细胞损伤中抑制细胞凋亡作用研究

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中国毒理学会第十次全国毒理学大会

作者：王婷林菲张超南方医科大学基础医学院生化教研室

目的本文旨在讨论在放射性心肌细胞损伤中hsairc005232对心肌细胞凋亡的抑制作用。材料和方法 20Gy定点辐照小鼠心脏以制备放射性心脏损伤的小鼠模型,将处理组与正常组的小鼠心脏组织进行circRNA转录组测序,筛选出40个差异表达的circRNA... 详细信息

目的本文旨在讨论在放射性心肌细胞损伤中hsairc005232对心肌细胞凋亡的抑制作用。材料和方法 20Gy定点辐照小鼠心脏以制备放射性心脏损伤的小鼠模型,将处理组与正常组的小鼠心脏组织进行circRNA转录组测序,筛选出40个差异表达的circRNA,找到下调最明显的mmuirc000823,并进行qPCR成环验证及人源序列比对,在AC16细胞中筛选最佳辐照剂量。mmuirc000823的人类同源序列是hsairc005232,分别构建hsairc005232的过表达质粒和沉默质粒,包装慢病毒后感染AC16细胞,筛选稳转细胞株。利用4Gy最佳剂量X射线照射各种稳转株细胞,将辐照前后的稳转株细胞进行CCK8实验、TUNEL实验、caspase酶活性检测实验及Annexin V-APC/PI细胞凋亡实验。采用生信分析预测hsairc005232可与miR33ap相结合,miR33ap又可与近60个mRNA的3′UTR区结合,采用FISH、qPCR验证。找到靶点PIK3C2A-3′UTR后,利用双荧光素酶实验验证结合。采用WB实验观察PIK3C2A蛋白对PI3K/AKT/mTOR信号通路关键蛋白及其磷酸化蛋白的影响。在体内实验部分,制备放射性心脏损伤的小鼠模型（方法同上）,检测小鼠心脏功能,分别在辐照后4w、8w、12w、16w摘取心脏,并提取RNA、总蛋白,制备冰冻切片。采用qPCR、WB、HE、masson、IHC等实验观察辐照前后mmuirc000823表达差异、PIK3C2A蛋白及PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白表达情况,以及辐照对心肌细胞纤维化的影响。结果在放射性心脏损伤的小鼠模型中,心脏组织的mmuirc000823是下调表达最明显的circRNA,mmuirc000823与人体心脏组织高度富集的hsairc005232序列同源性达到88%,4Gy辐照细胞后hsairc005232呈显著下调表达。细胞凋亡功能实验表明,辐照后过表达hsairc005232可抑制细胞凋亡,反之亦然。FISH实验结果显示hsairc005232可以与miR33ap相结合,双荧光素酶报告实验证实miR33ap也可与PIK3C2A-3′UTR结合。PIK3C2A蛋白表达下调可导致PI3K/AKT/mTOR信号通路磷酸化蛋白降低,反之亦然。小鼠体内实验证实,辐照后小鼠心脏组织mmuirc000823表达下调,小鼠心脏功能指标下降,PIK3C2A蛋白表达下调,同时PI3K/AKT/mTOR信号通路关键蛋白及其磷酸化蛋白降低,心肌纤维化增加。结论 hsairc005232可作为miR33ap海绵影响PIK3C2A蛋白及PI3K/AKT/mTOR信号通路,在心肌细胞放射性损伤中发挥着关键作用,通过明显抑制心肌细胞凋亡,充当保护心肌细胞的重要分子。X射线照射后,过表达hsairc005232可减少辐照引起的心肌细胞凋亡。

关键词：细胞凋亡心脏组织放射性心脏损伤信号通路心肌细胞损伤 Hsa 凋亡作用放射性抑制细胞

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环状RNA在免疫相关疾病中的作用

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南方医科大学学报 2022年第2期42卷 163-170页

作者：詹炜杰严涛高嘉文宋旻恺王婷林菲周海榆李栎张超南方医科大学第二临床医学院广东广州510282 广东省人民医院(广东省医学科学院) 胸外科广东广州510080 南方医科大学南方医院关节与骨病外科广东广州510515 南方医科大学南方医院脊柱骨科广东广州510515 南方医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室广东省单细胞技术与应用重点实验室广东广州510515 海南医学院基础医学与生命科学学院海南海口571199

环状RNA(circRNAs)是一种无3’聚腺苷化[poly-(A)]尾或5’帽的共价闭合环结构非编码RNA(ncRNA),是一个崭新的研究领域。环状RNA最早于20世纪70年代在RNA病毒中被发现,但由于传统的多聚腺苷酸转录组分析的局限性,最初发现的circRNAs数量... 详细信息

环状RNA(circRNAs)是一种无3’聚腺苷化[poly-(A)]尾或5’帽的共价闭合环结构非编码RNA(ncRNA),是一个崭新的研究领域。环状RNA最早于20世纪70年代在RNA病毒中被发现,但由于传统的多聚腺苷酸转录组分析的局限性,最初发现的circRNAs数量很少。由于特定的生化和计算方法的发展,近年来的研究表明,大量circRNAs在真核转录组中自然而广泛地存在。研究发现circRNAs在多种生理和病理过程中发挥重要作用,如充当miRNA海绵、与RNA结合蛋白(RBP)结合、作为转录调控因子,甚至作为翻译模板。研究者认为circRNAs可能是与各种疾病的诊断、疗效和预后相关的潜在生物标志物,由于其稳定性和组织及发育阶段的特异性,可能成为有效的治疗靶点。本综述重点讨论circRNAs的特性及其免疫功能并揭示其在免疫相关疾病中的作用。

关键词：环状RNA 自身免疫疾病免疫学基因学生物标志物

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医学影像人工智能医疗器械临床试验统计学设计要点专家共识

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中国卫生统计 2024年第3期41卷 474-480页

作者：郭秀花李卫夏结来贺佳王杨罗艳侠徐涛阎小妍陶丽新赵延延尚美霞刘之光首都医科大学公共卫生学院临床流行病学北京市重点实验室100069 国家心血管病中心医学统计部空军军医大学卫生统计教研室海军军医大学卫生统计学教研室北京协和医学院基础学院北京大学第一医院首都医科大学附属北京安贞医院药物临床试验机构

围绕医学影像的人工智能医疗器械,介绍其临床试验的统计学设计要点,主要涉及临床试验设计类型确定、对照设置、比较类型选择、主要结局指标确定、样本量估计方法、随机化策略、盲法实施、缺失值处理及敏感性分析等内容。本共识旨在为从... 详细信息

围绕医学影像的人工智能医疗器械,介绍其临床试验的统计学设计要点,主要涉及临床试验设计类型确定、对照设置、比较类型选择、主要结局指标确定、样本量估计方法、随机化策略、盲法实施、缺失值处理及敏感性分析等内容。本共识旨在为从事该类医疗器械临床试验的相关人员提供统计学设计参考,以保证临床试验结果的科学性、可靠性及规范性。

关键词：医学影像医疗器械临床试验统计学设计专家共识

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膜片钳电生理技术的教学改革与探讨

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科教导刊（电子版） 2024年第1期 74-76页

作者：梁妃学冀旭颖南方医科大学生物医学工程学院数学物理系教研室广东广州 510515 南方医科大学基础医学院生理学教研室广东广州 510515

膜片钳电生理技术作为一种高级的实验技术,在医学研究生的培养中具有重要的作用,该技术的掌握不仅有利于开展高水平的科学研究,也使学生在学术和就业市场具有一定竞争优势.文章从研究生导师的角度出发,强调了膜片钳电生理技术在研究生... 详细信息

膜片钳电生理技术作为一种高级的实验技术,在医学研究生的培养中具有重要的作用,该技术的掌握不仅有利于开展高水平的科学研究,也使学生在学术和就业市场具有一定竞争优势.文章从研究生导师的角度出发,强调了膜片钳电生理技术在研究生培养中的重要性和实际应用前景,以及进一步改进和创新的必要性.探讨了传统膜片钳电生理技术教学存在的弊端,以及教学改革中采取的具体措施,包括实践操作和数据分析能力的培养等.文章为强化基础医学院研究生的科研能力提供实践经验,为推动教学改革和提高学生学习效果提供了有益的思考.

关键词：膜片钳电生理技术教学改革实验教学研究生科研能力

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Lisfranc损伤足底入路的解剖学研究及初步疗效分析

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中华创伤骨科杂志 2022年第4期24卷 316-322页

作者：颜浩瀚林羲疆卫愉轩郭浩孙念张志强李严兵曾参军南方医科大学第三附属医院足踝外科广东省骨科研究院广东省骨科医院广州510630 南方医科大学基础医学院人体解剖学教研室广东省医用生物力学重点实验室广州510515

目的探讨采用单一足底入路或联合足背入路治疗足背软组织条件差、跖侧撕脱性骨折或多柱复杂的Lisfranc损伤的安全性、有效性及初步应用疗效。方法①收集新鲜成人足部标本6支,采用足底入路解剖标本,以明确足底入路的皮肤切口和放置钢板... 详细信息

目的探讨采用单一足底入路或联合足背入路治疗足背软组织条件差、跖侧撕脱性骨折或多柱复杂的Lisfranc损伤的安全性、有效性及初步应用疗效。方法①收集新鲜成人足部标本6支,采用足底入路解剖标本,以明确足底入路的皮肤切口和放置钢板螺钉内固定的安全区域,并完成相应钢板、螺钉固定。②足底入路解剖研究明确后,对2020年9月至2021年11月南方医科大学第三附属医院足踝外科收治的3例足背皮肤挫伤严重坏死或跖骨基底撕脱性移位骨折的Lisfranc损伤患者采用足底入路治疗,其中男2例,女1例;年龄平均为51岁(34~68岁)。通过分析患者的复位效果、末次随访时的疼痛视觉模拟评分(VAS)、美国足踝外科协会(AOFAS)的中足评分、Maryland评分、Kofoed评分、骨折愈合情况、术后并发症以评估初步疗效。结果①解剖显露范围:内侧可显露内侧柱(内至第1跖楔关节跖侧),外侧可显露中间柱(外至第3跖楔关节跖侧);可探查腓骨长肌肌腱、Lisfranc足底韧带及骨间韧带;模拟手术后X线片示钢板位置满意。②临床结果:所有患者均获随访,时间6~14个月(平均11个月)。末次随访时VAS评分为0~1分(平均0.5分),AOFAS评分为85~92分(平均89分),Maryland评分为93~96分(平均95分),Kofoed评分为92~95分(平均94分)。所有患者骨折均愈合,均未发生并发症。结论在明确解剖研究后,采用单一足底入路或联合足背入路治疗足背软组织条件差、跖侧撕脱性骨折或合并多柱复杂Lisfranc损伤安全、有效,初步疗效满意。

关键词：足解剖学局部骨折固定术,内足底跖趾关节 Lisfranc损伤

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反思与元认知在PBL课程中对批判性思维的训练

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基础医学教育 2023年第11期25卷 952-955页

作者：相大勇姜楠贾会明陈静仪王海明江汕张洪武南方医科大学南方医院创伤骨科广州510515 南方医科大学南方医院教务处南方医科大学第三附属医院医务处南方医科大学第一临床医学院技能中心南方医科大学基础医学院解剖学教研室

器官系统整合是新医科背景下的教学课程创新。为改善以学生为中心的教学模式,增强批判性思维的训练,文章探讨了教师将反思与元认知培训融入问题为基础学习(PBL)课程设计的教学实践,在各教学环节中,引导学生进行反思。教师评价包含元认... 详细信息

器官系统整合是新医科背景下的教学课程创新。为改善以学生为中心的教学模式,增强批判性思维的训练,文章探讨了教师将反思与元认知培训融入问题为基础学习(PBL)课程设计的教学实践,在各教学环节中,引导学生进行反思。教师评价包含元认知内容,旨在提升学生的脑力激荡、团队合作、问题解决等能力,从而有效培养医学生的批判性思维能力。

关键词：问题为基础的学习器官系统整合课程批判性思维反思元认知

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生物3D打印技术用于功能性骨骼肌3D组织构建的研究进展

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中国生物医学工程学报 2024年第5期43卷 620-630页

作者：张飞虎李婷林智伟李严兵黄文华广东医科大学基础医学院/人体解剖与组织胚胎学教研室广东东莞523808 南方医科大学基础医学院人体解剖学国家重点学科广州510515 广东省医学生物力学重点实验室广州510515 广东省医学3D打印应用转化工程技术研究中心广州510515

骨骼肌作为机体运动系统的重要组成,对维持运动功能不可或缺。然而,体积性骨骼肌缺失(VML)所致运动功能丧失严重限制了机体的活动能力,并伴随多种并发症。当前,临床对VML的治疗主要依赖于移植手术,但其受限于供体部位发病率、供体组织... 详细信息

骨骼肌作为机体运动系统的重要组成,对维持运动功能不可或缺。然而,体积性骨骼肌缺失(VML)所致运动功能丧失严重限制了机体的活动能力,并伴随多种并发症。当前,临床对VML的治疗主要依赖于移植手术,但其受限于供体部位发病率、供体组织缺乏以及对高技能手术团队的依赖。鉴于此,生物3D打印技术凭借其高效精准的特点,为功能性肌肉的制造以及VML的再生修复开辟了新的途径。综述了生物3D打印技术在功能化骨骼肌组织构建方面的研究现状,回顾了生物3D打印的多种技术方案,探讨了生物墨水在功能性肌肉构建中的应用进展。重点讨论了该技术在构建血管化和神经化骨骼肌仿生组织方面的最新方法,总结了各种3D打印构建的功能化骨骼肌结构对骨骼肌缺损修复的作用,最后分析了现有技术的局限性,展望了生物3D打印功能化骨骼肌结构领域的发展趋势.

关键词：生物3D打印功能性骨骼肌神经化/血管化肌肉骨骼肌组织工程体积性骨骼肌损失

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体外培养的人胸腺组织移植到裸鼠不同部位后的免疫重建效果分析

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免疫学杂志 2024年第2期40卷 113-121页

作者：关万青罗贵华撖菁萱糜建红冯泽清吴玉章南方医科大学基础医学院免疫学教研室广州510000 重庆国际免疫研究院 401338 陆军军医大学基础医学院免疫学教研室重庆400038 重庆理工大学药学与生物工程学院 400054

目的通过分析人胸腺组织切片移植到裸鼠肾包膜,皮下和股四头肌后的免疫重建效果,探究胸腺组织异位移植的最佳位置。方法收集先天性心脏病患者手术废弃的胸腺组织,制作成0.5~1 mm厚的组织切片,体外培养以清除免疫细胞。利用H&E染色... 详细信息

目的通过分析人胸腺组织切片移植到裸鼠肾包膜,皮下和股四头肌后的免疫重建效果,探究胸腺组织异位移植的最佳位置。方法收集先天性心脏病患者手术废弃的胸腺组织,制作成0.5~1 mm厚的组织切片,体外培养以清除免疫细胞。利用H&E染色、免疫组织化学染色和定量PCR等方法评估组织切片中残余的组织结构、细胞类型和功能。最后将胸腺组织切片分别移植入裸鼠的肾包膜、皮下和股四头肌3个部位,并通过流式细胞术和组织学检测等手段比较3个部位移植后的免疫重建效果。结果体外培养14 d的胸腺组织切片中T淋巴细胞的清除率达90%以上,上皮细胞网状结构保存完整,残存大量的巨噬细胞、树突状细胞、内皮细胞。定量PCR结果显示,体外培养能有效维持胸腺组织切片中上皮细胞标志物及其分泌细胞因子的基因表达量。流式细胞术显示移植后16周,不同移植组小鼠外周血中T细胞的比例均显著增加,其中股四头肌移植组小鼠的T细胞比例最高。原位组织学检测显示,移植物在3个部位均能检出胸腺组织再生。但是肾包膜组移植物检出率为40%,皮下组移植物检出率为60%,股四头肌组移植物检出率为100%。结论体外培养14 d的胸腺组织切片保留了完整的胸腺基质微环境,移植人的胸腺组织切片后可有效重建裸鼠的T细胞比例,且股四头肌部位移植的效果优于肾包膜和皮下部位。

关键词：人胸腺组织切片胸腺移植免疫重建

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结合SMOTE技术与优化算法的支持向量机在慢性心衰不良结局预测中的应用

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中国卫生统计 2024年第6期41卷 802-806页

作者：李晓桐程璠田晶闫晶晶张岩波韩清华山西医科大学基础医学院生理学系 030001 山西医科大学细胞生理学教育部重点实验室山西医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室山西医科大学第一医院心内科重大疾病风险评估山西省重点实验室山西中医药大学

目的应用优化算法的支持向量机(support vector machine,SVM)结合合成少数类过采样技术(synthetic minority over-sampling technique,SMOTE)预测慢性心衰患者不良结局,提高分类模型预测性能。方法顺序入选2014年1月至2017年12月,山西... 详细信息

目的应用优化算法的支持向量机(support vector machine,SVM)结合合成少数类过采样技术(synthetic minority over-sampling technique,SMOTE)预测慢性心衰患者不良结局,提高分类模型预测性能。方法顺序入选2014年1月至2017年12月,山西省两所三级甲等医院心内科确诊为慢性心力衰竭的1183例住院患者,收集患者的病历资料。基于原始训练集构建logistic回归(logistic regression,LR)与支持向量机模型,同时结合SMOTE算法构建LR、SVM、遗传算法支持向量机(genetic algorithm support vector machine,GA-SVM)和粒子群支持向量机模型(particle swarm support vector machine,PSO-SVM),通过灵敏度(sensitivity,SEN)、准确度(accuracy,ACC)、特异度(specificity,SPE)、G-means、F-measure、ROC曲线下面积(area under receiver operating characteristic curve,AUC)等指标综合评价各模型的分类性能。结果相较于对原始数据进行直接分类,应用SMOTE技术均衡化数据集后,模型性能明显提高。均衡化训练集构建LR、SVM、GA-SVM和PSO-SVM模型结果表明,GA-SVM和PSO-SVM在SPE、ACC指标低于LR;SEN、G-means、F-measure和AUC均优于LR。GA-SVM和PSO-SVM的综合效果显著高于SVM(SEN、G-means、F-measure指标表现均优于SVM)。结论基于均衡化数据集构建GA-SVM或PSO-SVM模型可提高SVM对于心衰预后的预测性能。

关键词： SMOTE 支持向量机遗传算法优化粒子群算法优化慢性心力衰竭

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