检索结果-内蒙古大学图书馆

中华神经医学杂志 2012年第6期11卷 575-580页

作者：李兵陈祎招蒋伟平邓心情杨硕徐如祥南方医科大学珠江医院神经外科广东省神经外科研究所广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510282 北京军区总医院八一脑科医院北京100700

目的探讨脑出血后血脑屏障微血管内皮细胞间紧密连接蛋白occludin的表达变化。方法将SD雄性大鼠按随机数字表法分为正常对照组和脑出血组．再按时间因素将脑出血组分为出血后6h、24h、48h、72h、7d、14d6个亚组。采用脑内注入自体血法... 详细信息

目的探讨脑出血后血脑屏障微血管内皮细胞间紧密连接蛋白occludin的表达变化。方法将SD雄性大鼠按随机数字表法分为正常对照组和脑出血组．再按时间因素将脑出血组分为出血后6h、24h、48h、72h、7d、14d6个亚组。采用脑内注入自体血法制作脑出血模型。HE染色观察脑出血后血肿周围脑组织的形态学改变：透射电镜观察脑出血后血肿周围紧密连接的超微结构改变；免疫荧光染色检测脑出血后血肿周围紧密连接蛋白occludin的表达分布状况：定量RT—PCR检测脑出血后血肿周围脑组织中occludinmRNA的表达状况。结果与正常对照组相比，脑出血组血肿周围脑组织出现水肿，在48h左右尤为明显，局部可见明显脑细胞坏死及炎细胞浸润。脑出血后血肿周围紧密连接发生明显破坏，内皮细胞间出现裂隙。免疫荧光染色结果显示：正常对照组紧密连接蛋白occludin呈强阳性表达。脑出血后6hoccludin的表达即开始下降，呈阳性表达；脑出血后24～72hoccludin的表达维持在较低水平，呈弱阳性表达。定量RT-PCR结果显示：脑出血后血肿周围脑组织中occludinmRNA相对含量明显降低，在6—72h持续维持在较低水平，与正常对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论脑出血发生后，紧密连接蛋白occludin的表达下降，这可能是脑出血发生后血脑屏障破坏及脑水肿发生发展的重要分子基础之一。

关键词：脑出血血脑屏障紧密连接 occludin

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胶质瘤氩氦冻融产物负载树突状细胞对颅内胶质瘤大鼠的免疫治疗研究

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中华神经医学杂志 2012年第4期11卷 342-346页

作者：苏道庆卢国辉胡丽娟王保安李明何骁征姜晓丹柯以铨张世忠南方医科大学珠江医院神经外科广东神经外科研究所广东省脑功能修复重点实验室广州510282 肿瘤科影像科

目的观察C6胶质瘤细胞经氩氦冷冻后，冻融产物对Wistar大鼠骨髓源性树突状细胞（***）成熟的影响，以及致敏的树突状细胞（DCs）对胶质瘤模型大鼠的抗肿瘤作用。方法体外常规培养C6胶质瘤细胞，双循环氩氦冷冻法冻融C6细胞悬液为实验组... 详细信息

目的观察C6胶质瘤细胞经氩氦冷冻后，冻融产物对Wistar大鼠骨髓源性树突状细胞（***）成熟的影响，以及致敏的树突状细胞（DCs）对胶质瘤模型大鼠的抗肿瘤作用。方法体外常规培养C6胶质瘤细胞，双循环氩氦冷冻法冻融C6细胞悬液为实验组，只插入探针不作冷冻为阴性对照组，双循环氩氦冷冻法冻融等量PBS为空白对照组；应用重组大鼠白细胞介素-4（rmIL-4）、重组大鼠粒一巨噬细胞集落刺激因子（***）和肿瘤坏死因子d（TNFd）诱导Wistar大鼠骨髓DCs成熟，培养第7天分别加入各组冷冻产物，48h后光镜下观察DCs细胞形态，流式细胞仪检测各组DCs细胞表面共刺激分子CD80和CD86的表达，EUSA法检测各组上清液中IL-12含量；将C6细胞接种于Wistar大鼠建立荷脑胶质瘤模型，第3、10天分别皮下注射空白对照组、阴性对照组、实验组DCs疫苗，比较各组大鼠的中位生存期。结果培养第7天未成熟DCs加入冷冻产物48h后实验组具有成熟DCs形态学特征，表面分子CD80、CD86阳性表达率、上清中IL-12的分泌量高于阴性对照组和空白对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）；实验组DCs疫苗治疗后荷脑胶质瘤大鼠中位生存期高于阴性对照组和空白对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论胶质瘤氩氦冻融产物可以诱导DCs成熟，介导大鼠脑胶质瘤的免疫治疗，为冷冻免疫机制提供一定理论基础，同时该DCs疫苗为胶质瘤个体化治疗的研究提供一种新的方法。

关键词：氩氦冷冻神经胶质瘤树突状细胞疫苗免疫治疗

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人Tau基因多表位肽段原核表达载体的构建与表达

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南方医科大学学报 2012年第2期32卷 185-188页

作者：孙海涛杨化强杨璐军李正阳杜谋选陈宇新姜晓丹南方医科大学广东神经外科研究所//珠江医院神经外科//广东省脑功能修复与再生重点实验室//国家临床重点专科广东广州510282 中国科学院广州生物医药与健康研究院华南干细胞与再生医学重点实验室广东广州510530

目的构建含人Tau多表位肽段基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并纯化目的蛋白,检测Tau多表位DNA疫苗免疫小鼠后特异性抗体产生情况。方法以质粒pVAX1-Tau为模板,用PCR扩增人Tau多表位肽段基因,插入表达载体pGEX-4T-2中,构建原核... 详细信息

目的构建含人Tau多表位肽段基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并纯化目的蛋白,检测Tau多表位DNA疫苗免疫小鼠后特异性抗体产生情况。方法以质粒pVAX1-Tau为模板,用PCR扩增人Tau多表位肽段基因,插入表达载体pGEX-4T-2中,构建原核表达质粒pGEX-4T-2-TauP1/P2。将鉴定后的阳性重组质粒转入*** BL21(DE3)中,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并采用GST法纯化、SDS-PAGE鉴定目的蛋白的表达。以TauP1/P2 DNA疫苗免疫小鼠获取血清,Dot-blot检测TauP1/P2特异性抗体产生情况。结果 PCR扩增出约300 bp的基因片段,克隆至表达载体后,经酶切和测序验证正确;获得了纯化的目的蛋白,并证实了GST-TauP1/P2融合蛋白的表达。Dot-blot检测到特异性TauP1/P2抗体的产生。结论成功构建和表达人Tau多表位肽段基因的目的蛋白GST-TauP1/P2,能够识别Tau多表位DNA疫苗免疫后小鼠产生的特异性TauP1/P2抗体。

关键词： Tau 质粒原核表达融合蛋白

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人TN-R蛋白及其EGF-L片段抗血清对大鼠皮层神经元的影响

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中华神经医学杂志 2012年第3期11卷 217-221页

作者：赵海林酉建唐国强张茂营姜晓丹徐如祥南方医科大学珠江医院神经外科广东神经外科研究所广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510282 北京军区总医院八一脑科医院神经外科北京 100700

目的制备Tenascin-R（TN．R）蛋白的EGF-L功能片段及该片段抗血清，联合TN-R蛋白研究其在体外对大鼠皮层神经元的作用，探讨该功能片段抗血清用于治疗中枢神经系统（CNSl损伤后轴突再生的可行性。方法制备人TN-R蛋白EGF-L片段抗血清，... 详细信息

目的制备Tenascin-R（TN．R）蛋白的EGF-L功能片段及该片段抗血清，联合TN-R蛋白研究其在体外对大鼠皮层神经元的作用，探讨该功能片段抗血清用于治疗中枢神经系统（CNSl损伤后轴突再生的可行性。方法制备人TN-R蛋白EGF-L片段抗血清，再以该抗血清联合TN-R蛋白包被多孔板形成不同的铺板状态，分EGF．L抗血清组、TN-R蛋白组、TN-R蛋白＋EGF-L抗血清组，仅包被有多聚赖氨酸（PLL）处为对照组。单细胞悬液法原代培养大鼠皮层神经元24h后免疫荧光染色检测β-Ⅲ-tubulin，比较不同的铺板状态下所黏附的细胞数；7d后免疫荧光染色检测β-Ⅲ-tubulin，观察神经元的形态并比较神经元突起主干、分支点数量及突起总长度。小组织块法培养大鼠皮层神经元7d后观察包被的蛋白与PLL之间形成的边界对神经元突起生长的影响。结果成功制备高浓度的TN-R蛋白EGF-L片段抗血清。4组所黏附的细胞密度不同，比较差异有统计学意义（P〈0．05）。与EGF-L抗血清组和对照组比较，TN-R蛋白组所黏附的细胞密度、神经元的突起主干、分支点数量及突起总长度较低，TN-R蛋白＋EGF-L抗血清组上述指标均较高，差异有统计学意义（P〈0．05）；TN-R蛋白组从组织块中迁徙出的细胞及细胞突起均几乎不能越过边界，TN-R蛋白＋EGF-L抗血清组可见有少量的细胞突起越过边界生长。结论TN-R蛋白EGF-L片段抗血清在体外能削弱TN-R蛋白对于神经元生长的抑制功能，有望将该抗血清用于体内，为CNS损伤后轴突再生创造有利的内环境。

关键词： Tenascin-R蛋白 EGF-L抗血清神经元轴突再生

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负载VEGF聚合物修饰铂金微弹簧圈栓塞动脉瘤模型的研究

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中华神经医学杂志 2012年第1期11卷 2-6页

作者：姬斌汪求精孙新林薛杉杜谋选蔡颖谦唐艳萍陈镇洲姜晓丹山西省长治市人民医院神经外科 046000 南方医科大学珠江医院神经外科．广东神经外科研究所广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510282

目的探讨负载血管内皮生长因子（VEGF）的聚合物修饰铂金微弹簧圈对动脉瘤的栓塞效果. 方法健康雌性SD大鼠54只采用随机数字表法分为普通铂金微弹簧罔组、聚合物涂层修饰组和负载VEGF组,每组各18只.分别将各组弹簧圈片断植入大鼠右侧... 详细信息

目的探讨负载血管内皮生长因子（VEGF）的聚合物修饰铂金微弹簧圈对动脉瘤的栓塞效果. 方法健康雌性SD大鼠54只采用随机数字表法分为普通铂金微弹簧罔组、聚合物涂层修饰组和负载VEGF组,每组各18只.分别将各组弹簧圈片断植入大鼠右侧颈总动脉,在弹簧圈远端将颈总动脉结扎后恢复血流,则颈总动脉残端形成囊状动脉瘤,弹簧圈片断位于动脉瘤囊内.于术后15d、30 d和90 d每组取6只大鼠,将包含有弹簧圈的一段动脉切下,同时切取普通铂金微弹簧圈组大鼠左侧一段颈总动脉作为空白对照组.HE染色观察标本内皮细胞的增殖和纤维化程度；免疫组织化学染色检测血管性假血友病因子（vwf）的表达；Western blotting检测动脉瘤局部VEGF的释放情况. 结果术后10d、30 d、90 d时负载VEGF组动脉瘤组织纤维化分级明显高于普通铂金微弹簧圈组,术后30d时负载VEGF组纤维化分级高于聚合物涂层修饰组,差异均有统计学意义（P＜0.05）；免疫组织化学染色检测显示负载VEGF组铂金微弹簧圈在栓塞动脉瘤模型后很快形成血栓并机化,动脉瘤腔内完全被纤维化的组织填塞,并且纤维化的组织中有呈vwf阳性表达的新生小血管形成,另外3组均未观察到vwf呈阳性表达的新生血管；Western blotting结果显示负载VEGF组在术后15d、30 d时动脉瘤壁组织中VEGF因子水平明显高于其他组,而90 d时VEGF因子水平明显低于其他组. 结论负载VEGF的聚合物修饰铂金微弹簧圈可在动脉瘤腔内缓慢释放VEGF,刺激动脉瘤内细胞增生,促进血栓机化,形成致密的纤维化组织,达到更快、更完全地闭塞动脉瘤的效果.

关键词：颅内动脉瘤铂金微弹簧圈血管内皮生长因子

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尼莫司汀局部用药于大鼠正常脑组织对其神经功能损伤评分的影响

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中华神经医学杂志 2012年第7期11卷 672-675页

作者：虞云张卫华姜晓丹南方医科大学珠江医院神经外科广东神经外科研究所广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510282 佛山市第二人民医院神经外科 528000

目的研究不同剂量的化疗药尼莫司汀（ACNU）局部用于SD大鼠正常脑组织后，对大鼠改良神经功能损伤评分（mNSS）的影响。方法SD大鼠45只按随机数字表法分成A、B、C、D、E5组（E组5只，余每组10只），施以麻醉后常规开颅，暴露左侧大脑半... 详细信息

目的研究不同剂量的化疗药尼莫司汀（ACNU）局部用于SD大鼠正常脑组织后，对大鼠改良神经功能损伤评分（mNSS）的影响。方法SD大鼠45只按随机数字表法分成A、B、C、D、E5组（E组5只，余每组10只），施以麻醉后常规开颅，暴露左侧大脑半球，剪开硬脑膜、蛛网膜，用2mm×2mm×2mm的明胶海绵分别蘸取0．4mL ACNU溶液（A-E组剂量分别为2mg／kg、lmg／kg、0．5mg／kg、0．25mg／kg、0mg／kg）敷于大鼠左侧大脑半球表面，手术缝合伤口。术后6h、1d、3d、7d、10d、14d观察大鼠mNSS的变化。结果不同剂量组大鼠之间mNSS不同，差异有统计学意义（P〈0．05）；各组大鼠正常脑组织局部应用ACNU后不同时间mNSS的变化趋势不同，差异有统计学意义（P〈0．05）；其中D、E组变化较为稳定；在相同时间点上，A、B、C组大鼠mNSS评分高于D、E组，差异有统计学意义（P〈0．05）；各组大鼠mNSS评分随着时间的延长先增加后减少。结论0．25mg／kg及以下剂量的ACNU溶液可作为接触大鼠正常脑组织的安全剂量。

关键词：尼莫司汀抗肿瘤药药物副作用改良神经功能损伤评分

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骨髓基质细胞及血管内皮祖细胞共移植对局灶性脑缺血大鼠系列生长因子表达的影响

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中华神经医学杂志 2012年第8期11卷 775-779页

作者：何旭英徐如祥段传志张忻蔡颖谦陈镇洲南方医科大学珠江医院神经外科广东神经外科研究所广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510280 北京军区总医院附属八一脑科医院北京100700

目的观察经静脉移植骨髓基质细胞（BMSCs）及血管内皮祖细胞（EPCs）后血管内皮生长因子（VEGF）、基质细胞衍生因子-1（SDF-1）、碱性成纤维生长因子（bFGF）、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）、转化生长因子β（TGF—β）、血小板源性生... 详细信息

目的观察经静脉移植骨髓基质细胞（BMSCs）及血管内皮祖细胞（EPCs）后血管内皮生长因子（VEGF）、基质细胞衍生因子-1（SDF-1）、碱性成纤维生长因子（bFGF）、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）、转化生长因子β（TGF—β）、血小板源性生长因子（PDGF）、脑源性生长因子（BDNF）、胶质源性生长因子（GDNF）和神经生长因子（NGF）这9种细胞因子的表达。方法80只健康成年Wistar大鼠按照随机数字表法分为模型对照组、BMSCs移植组、EPCs移植组及联合移植组，每组20只。线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞模型。造模24h后，分别取浓度为3×10^6个／mL的BMSCs、EPCs悬液及两者混合液1mL经鼠尾静脉移植入BMSCs移植组、EPCs移植组及联合移植组；模型对照组鼠尾静脉注射1mL生理盐水。移植后7d，实时荧光PCR、Westem boltting检测各组大鼠脑内生长因子的表达。结果联合移植组中bFGF、VEGF、BDNFmRNA表达水平最高，与其他3组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。BMSCs移植组中NGF、GDNF、TGF—BmRNA表达水平最高，与其他3组比较差异均有统计学意义（P〈0．05），联合移植组次之。EPCs组中***、IGF-1、SDF-1 mRNA表达水平最高，与其他3组比较差异均有统计学意义（P〈0．05），联合移植组次之。结论BMSCs及EPCs联合静脉移植可上调脑内生长因子表达水平，为提高细胞移植效率提供了新的尝试途径。

关键词：脑缺血骨髓基质细胞血管内皮祖细胞细胞移植细胞因子

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6-羟基多巴胺致帕金森病模型大鼠步态的CatWalk定量分析

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中华神经医学杂志 2012年第4期11卷 364-368页

作者：王军张旺明罗敏捷潘琪蔡颖谦姜晓丹徐如祥南方医科大学珠江医院神经外科广东神经外科研究所广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510282 北京军区总医院附属八一脑科医院北京100047

目的探讨对单侧注射6-羟基多巴胺（6-OHDA）致帕金森病模型大鼠步态进行CatWalk定量分析的可行性。方法24只雄性Wistar大鼠按完全随机数字表分为6-OHDA组fn=12）、假手术组（n=6）与对照组m=6），其中6-OHDA组和假手术组采用立体定向手... 详细信息

目的探讨对单侧注射6-羟基多巴胺（6-OHDA）致帕金森病模型大鼠步态进行CatWalk定量分析的可行性。方法24只雄性Wistar大鼠按完全随机数字表分为6-OHDA组fn=12）、假手术组（n=6）与对照组m=6），其中6-OHDA组和假手术组采用立体定向手术将6-OHDA溶液和等量生理盐水分别注入大鼠的左侧内侧纵束，对照组仅行麻醉处理。造模前1周训练大鼠并采集行为学数据基线值。造模后3d、1周、2周对大鼠依次进行圆柱实验，再将大鼠置于CatWalk自动步态分析仪中，记录其步态变化，离线分析相关数据。结果圆柱实验结果显示：造模后3d、1周、2周时．与理论值50％比较，6．0HDA组大鼠右前肢的使用比例均较左前肢明显下降，差异均有统计学意义（P〈0．051；对照组及假手术组大鼠右前肢使用比例无明显异常，差异无统计学意义（尸〉0．05）。CatWalk分析结果显示：对照组、假手术组大鼠造模后左、右肢体对比，各肢体的造模前、造模后对比中各指标比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。6-OHDA组大鼠左、右肢体对比中，右前肢的最大接触面积、爪印长度、爪印宽度和爪印面积较左前肢增加，左后肢的最大接触面积较右后肢增加，差异均有统计学意义（P〈0．05）；6-OHDA组大鼠各肢体的造模前、造模后对比中，左前肢的爪印长度、爪印宽度和爪印面积较造模前有所下降，右前肢的爪印面积、爪印长度和最大接触面积较造模前下降．在左后肢中仅爪印宽度下降．右后肢的最大接触面积、爪印长度、爪印宽度和爪印面积均较造模前减少，差异均有统计学差异（P〈0．05）。结论CatWalk可对帕金森病模型大鼠步态的变化进行定量分析，其中最大接触面积可能是最佳参数之一，可为深入研究帕金森病提供有益参考。

关键词：帕金森病模型动物步态 CatWalk分析 6-羟基多巴胺

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交通事故性重型颅脑损伤院内急救后效果分析（附1107例报告）

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中华神经医学杂志 2012年第9期11卷 916-919页

作者：胡明军徐如祥姜晓丹蔡颖谦罗成义王钢崔健杭军温大平西安市第一医院神经外科 710002 北京军区总医院八一脑科医院北京100700 南方医科大学珠江医院神经外科广东神经外科研究所广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510280

目的通过对交通事故性重型颅脑损伤在院内急救期间各生命体征、意识、瞳孔及时间等环节上的变化，显示院内急救的重要性和一般规律．为我国相关部门制定急性颅脑创伤的预防和控制措施做出参考依据。方法以南方医科大学珠江医院神经外科... 详细信息

目的通过对交通事故性重型颅脑损伤在院内急救期间各生命体征、意识、瞳孔及时间等环节上的变化，显示院内急救的重要性和一般规律．为我国相关部门制定急性颅脑创伤的预防和控制措施做出参考依据。方法以南方医科大学珠江医院神经外科组织制定及7l家医院专家委员会审定的《交通事故性重型颅脑损伤统计表》为依据收集自2008年4月1日至2009年3月30日因交通事故致重型颅脑损伤患者1107例的临床资料，根据在院内急救过程中患者意识状态、瞳孔变化、GCS评分、血压、呼吸、脉搏等指标在转入及转出急诊科间的变化，进行函数推算，分析判断病情发展趋势、抢救效果和下一步治疗措施。结果根据院内急救时间显示在10～60min内入急诊的患者最多．尤其在10～30min占总就诊患者的38．9％。直观发现，患者经过院内急救有效治疗后，意识状态、瞳孔变化、GCS评分、血压、呼吸、脉搏等指标中表现差的患者例数逐渐减少，表现中等、较好和好的例数增多，在进入下一步专科治疗之前，患者各项生命体征及检测指标逐渐趋于平稳。函数推算支持此结果。结论院内急救有效的治疗，及时控制各项指标稳定，正确判断伤情，提高院内急救一切合理措施，有助于提高交通事故性重型颅脑损伤患者的急救质量。

关键词：交通事故伤颅脑损伤院内急救

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神经外科三维可视化工作站的研制及临床初步应用

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中华神经医学杂志 2012年第9期11卷 891-894页

作者：陈祎招黄大勇徐如祥聂永庚王向宇张世忠柯以铨南方医科大学珠江医院神经外科广东神经外科研究所广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510282 北京军区总医院附属八一脑科医院 100700 娄底市人民医院神经外科 417000

目的探索一款适用于神经外科的直观且精确可靠的三维可视化定位系统及影像学信息存储、管理工具。方法通过自行研制的神经外科影像与手术工作平台系统f简称神经外科工作站，又称神经外科三维可视化工作站1对7例重型颅脑外伤硬膜外血肿... 详细信息

目的探索一款适用于神经外科的直观且精确可靠的三维可视化定位系统及影像学信息存储、管理工具。方法通过自行研制的神经外科影像与手术工作平台系统f简称神经外科工作站，又称神经外科三维可视化工作站1对7例重型颅脑外伤硬膜外血肿、凹陷性骨折，8例垂体瘤，5例脑胶质瘤，3例脑膜瘤患者的影像学资料进行三维重建，根据外科手术要求在工作站上进行手术计划，辅助行手术治疗。结果神经外科三维可视化工作站可以直观显示颅内各种病变与各解剖结构、体表标志的三维空间量化关系，迅速辅助定位并设计最佳个体化手术人路，提高手术精确性与手术效率。同时，神经外科三维可视化工作站可便捷管理患者影像学资料及手术录像等各种信息，提高科研与临床工作效率。结论神经外科三维可视化工作站是一种直观快捷、功能强大的神经外科手术辅助工具及影像学信息管理工具。

关键词：神经外科信息技术三维重建计算机工作站

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