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中华神经医学杂志 2010年第11期9卷 1090-1094页

作者：叶昇胡海燕孟伟郭洪波中山大学附属第一医院肿瘤科广州510080 南方医科大学珠江医院血液科广州510282 神经外科南方医科大学广东神经外科研究所广东省脑功能修复与再生重点实验室

目的研究胚胎肝细胞对脑组织辐射损伤的修复作用.方法 24只雌性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组和治疗组,每组8只.后2组大鼠行一次性全脑照射20GyX线制备脑辐射损伤模型,造模后1、7、14、21 d治疗组大鼠后尾静脉注射雄性大鼠... 详细信息

目的研究胚胎肝细胞对脑组织辐射损伤的修复作用.方法 24只雌性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组和治疗组,每组8只.后2组大鼠行一次性全脑照射20GyX线制备脑辐射损伤模型,造模后1、7、14、21 d治疗组大鼠后尾静脉注射雄性大鼠胚胎肝细胞1 mL（3×106个/mL）,模型组大鼠尾静脉注射等量生理盐水.于每次输注后12h取各组大鼠血清,分光光度计测定丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的水平,ELISA法测定肿瘤坏死因子α（TNFα）、白介素-1（IL-1）和白介素-6（IL-6）的含量.造模28 d后处死大鼠,RT-PCR检测治疗组大鼠脑组织Y染色体mRNA的表达,HE染色观察海马区脑组织的病理变化.结果造模后1、7、14、21、28 d,与对照组比较,模型组和治疗组大鼠血清SOD水平较低,而MDA、TNFα、IL-1和IL6水平较高,差异有统计学意义（P＜0.05）;与模型组比较,治疗组大鼠血清SOD水平较高,而MDA、TNFα、IL-1和IL6水平较低,差异有统计学意义（P＜0.05）;RT-PCR结果显示治疗组大鼠脑组织有Y染色体mRNA表达;HE染色显示治疗组大鼠海马区虽可见凋亡状态的尼氏小体,但大脑皮质较模型组大鼠明显增厚,可见再生的海马神经元.结论胚胎肝细胞能够修复脑组织的辐射损伤.

关键词：肝细胞辐射损伤细胞修复

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高血压丘脑出血的神经内镜微创手术治疗

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中华神经医学杂志 2010年第9期9卷 936-939页

作者：陈祎招徐如祥聂永庚赛力克王向宇罗成义张世忠柯以铨南方医科大学珠江医院神经外科南方医科大学广东神经外科研究所广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510282 北京军区总院神经外科北京100700 娄底市人民医院神经外科 417000 新疆医科大学第一附属医院神经外科新疆830011

目的探索神经内镜微创手术治疗高血压丘脑出血的效果.方法通过改进现有神经内镜手术技术与设备,南方医科大学珠江医院等4家医院神经外科自2007年7月至2010年6月通过常规骨孔在神经内镜下微创手术治疗高血压丘脑出血患者15例,分析患者... 详细信息

目的探索神经内镜微创手术治疗高血压丘脑出血的效果.方法通过改进现有神经内镜手术技术与设备,南方医科大学珠江医院等4家医院神经外科自2007年7月至2010年6月通过常规骨孔在神经内镜下微创手术治疗高血压丘脑出血患者15例,分析患者的临床资料和手术疗效.结果本组患者平均手术时间（1.5±0.4）h,手术失血量约30～40mL,丘脑脑内血肿平均清除率为（86.2±7.9）%.随访3个月显示恢复良好3例（21.4%）,轻度残疾4例（28.6%）,重度残疾4例（28.6%）,植物状态2例（14.3%）,死亡1例（7.1%）.结论神经内镜微创手术治疗高血压丘脑出血具有微创、高效、快速、出血少等特点.

关键词：颅内出血,高血压性神经内镜神经外科手术

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雌激素缺乏对大鼠颅内动脉瘤形成的影响

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中华神经医学杂志 2009年第12期8卷 1217-1220页

作者：王双全段传志姜晓丹姬斌杜谋选薛杉张鹏法志强王建奇南方医科大学广东神经外科研究所南方医科大学珠江医院神经外科广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510282

目的建立雌激素缺乏的颅内动脉瘤模型，并在此基础上初步研究雌激素缺乏对颅内动脉瘤形成、生长的影响及其可能机制。方法雌性Wistar大鼠30只按随机数字表法分为实验组（切除双侧卵巢＋颅内动脉瘤模型）、实验对照组（切除双侧卵巢旁与... 详细信息

目的建立雌激素缺乏的颅内动脉瘤模型，并在此基础上初步研究雌激素缺乏对颅内动脉瘤形成、生长的影响及其可能机制。方法雌性Wistar大鼠30只按随机数字表法分为实验组（切除双侧卵巢＋颅内动脉瘤模型）、实验对照组（切除双侧卵巢旁与其大小相当的一块脂肪＋颅内动脉瘤模型）、空白对照组（每组各10只）。大鼠去势模型或腹部假手术模型制作后2周用猪胰弹性蛋白酶滴加到颈外动脉及分叉处动脉壁周围，在颈外动脉距分叉处约1．5mm位点用两根手术线结扎颈外动脉，在两根线之间剪断颈外动脉，使颈外动脉的盲段形成颈内动脉的一个动脉瘤。动脉瘤模型制作6周后取右心房全血2mL，离心取上清液后于-20℃冰箱保存，用于检测大鼠血清中雌激素的含量，同时游标卡尺测量颅内动脉瘤长度和直径，并取实验组及实验对照组的颅内动脉瘤组织和空白对照组相应的一段颈外动脉组织用于常规组织切片染色。结果实验组血清中雌激素水平为（105．00±12．96）pmol／L，实验对照组为（178．50±25．96）pmol／L，空白对照组为（180．40±18．70）pmol／L，实验组与实验对照组及空白对照组组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。实验组颅内动脉瘤长度扩张率为（131.31±6．63）％，直径扩张率为（125．10±5．49）％，实验对照组为（109．90±3．44）％和（106．82±2.49）％，比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论雌激素缺乏对颅内动脉瘤的形成、生长有一定的促进作用。本研究使用盲段法结合酶消化法制作颅内动脉瘤模型简便可行。

关键词：颅内动脉瘤雌激素动物模型

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骨髓基质细胞移植治疗中枢神经损伤效应

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广东医学 2009年第2期30卷 304-306页

作者：周辉姜晓丹南方医科大学广东神经外科研究所南方医科大学珠江医院神经外科广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510282

中枢神经系统(central nerve system,CNS)损伤修复是神经科学的重大课题。尽管临床采用了综合救治措施、神经保护措施及康复期功能重建等手段,但仍无法使缺失的神经元再生。随着干细胞研究的深入,神经干细胞(neural stem cells,NSCs)移... 详细信息

中枢神经系统(central nerve system,CNS)损伤修复是神经科学的重大课题。尽管临床采用了综合救治措施、神经保护措施及康复期功能重建等手段,但仍无法使缺失的神经元再生。随着干细胞研究的深入,神经干细胞(neural stem cells,NSCs)移植替代疗法已成为治疗中枢神经损伤的一种新策略。骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)是骨髓细胞中的非造血干细胞,支持造血干细胞的诱导分化,且自身具有增殖与多分化潜能,[第一段]

关键词：细胞移植治疗中枢神经系统骨髓基质细胞损伤效应神经干细胞 cells 造血干细胞综合救治措施

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脑动脉瘤模型制作及高血压对其影响的实验研究

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中华神经医学杂志 2009年第11期8卷 1098-1102页

作者：姬斌姜晓丹段传志王双全杜谋选汪求精南方医科大学广东神经外科研究所南方医科大学珠江医院神经外科广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510282

目的建立脑动脉瘤动物模型并初步探讨高血压对脑动脉瘤的影响。方法45只雄性SD大鼠按随机数字表法分为高血压组、正常血压组和正常对照组。高血压组行脑动脉瘤模型制作＋双侧肾动脉狭窄术；正常血压组只建立脑动脉瘤模型；正常对照组不... 详细信息

目的建立脑动脉瘤动物模型并初步探讨高血压对脑动脉瘤的影响。方法45只雄性SD大鼠按随机数字表法分为高血压组、正常血压组和正常对照组。高血压组行脑动脉瘤模型制作＋双侧肾动脉狭窄术；正常血压组只建立脑动脉瘤模型；正常对照组不予任何处理。各组在术前，术后6周、12周三个时间点分别测量各组大鼠动脉收缩压。术后12周测量脑动脉瘤大小，并灌注固定，取脑动脉瘤部位血管组织，应用HE染色、Van Geson染色和Verhoeff染色进行病理检查。结果高血压组在处死前血压明显升高[（197．48±15．44）mmHg]，与手术前的血压[（104．40±14．70）mmHg]相比差异有统计学意义（P〈0．05）；处死前脑动脉瘤的长度[（2．38±0．31）mm]和宽度[（1．89±0．35）mm]与脑动脉瘤制作完成时的长度[（1．62±0．18）mm]和宽度[（1．36±0．09）mm]相比差异有统计学意义（P〈0．05）；正常血压组和正常对照组无明显变化。病理检查显示高血压组血管内膜消失，弹力层完全断裂；正常血压组尚存部分弹性纤维；正常对照组血管组织无改变。结论本实验采用的脑动脉瘤模型稳定性好，制作方便，具有与人类脑动脉瘤相似的形态和病理结构。高血压对脑动脉瘤的弹力蛋白和胶原蛋白有明显影响，是影响脑动脉瘤增大的重要因素之一。

关键词：脑动脉瘤高血压动物模型

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骨髓基质细胞分化为神经元样细胞后与皮质神经元间突触的建立

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中华神经医学杂志 2009年第4期8卷 331-334,339页

作者：周辉姜晓丹陈祎招杨丽法志强邹雨汐广东神经外科研究所南方医科大学珠江医院神经外科广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510282

目的观察与大脑皮质神经元共培养的骨髓基质细胞（BMSCs）经诱导分化成神经元样细胞后，与脑皮质神经元之间形成功能性突触的情况。方法无菌条件下取绿色荧光蛋白（GFP）转基因小鼠骨髓，用贴壁筛选法体外培养获得GFP转基因小鼠BMSCs（G... 详细信息

目的观察与大脑皮质神经元共培养的骨髓基质细胞（BMSCs）经诱导分化成神经元样细胞后，与脑皮质神经元之间形成功能性突触的情况。方法无菌条件下取绿色荧光蛋白（GFP）转基因小鼠骨髓，用贴壁筛选法体外培养获得GFP转基因小鼠BMSCs（GFP-GM-BMSCs），在体外培养、扩增、纯化。取第3代GFP-GM-BMSCs，种植到源于小鼠大脑的原代皮质神经元和胶质细胞中，培养介质为加有20ng／mL表皮生长因子（EGF）、20ng／mL碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的无血清培养基（Neurobasal-A＋2％B27），体外模拟建立细胞移植的共培养体系。共培养第10天，利用FM1-43荧光染料染色活动突触小泡的特性，通过荧光显微镜观察共培养的两种细胞之间形成的突触。结果与神经元共培养的GFP-GM-BMSCs在含有EGF、bFGF的无血清培养基中7d后分化为神经元样细胞。共培养10d后，FM1-43染色阳性的突触囊泡明显增加，主要位于神经元样细胞胞体、突起及其末端结构上。结论在体外模拟细胞移植共培养体系中，分化自GFP-GM-BMSCs的神经元样细胞能与神经元之间形成突触样连接。

关键词：突触骨髓基质细胞神经元共培养 FM1-43

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重组VEGF165-PE38融合基因对裸鼠移植性人胶质瘤血管生成的抑制作用

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中华神经医学杂志 2009年第12期8卷 1203-1206页

作者：柯以铨胡昌辰姜晓丹王育胜孙新林薛杉张发兵姚鹏飞蔡颖谦南方医科大学珠江医院神经外科广东神经外科研究所广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510282

目的研究血管内皮细胞生长因子（VEGF）和铜绿假单胞菌外毒素A（PE）融合基因的真核表达载体对裸鼠移植性人脑恶性胶质瘤血管生成的影响，探索抗肿瘤血管生成的新方法。方法采用裸鼠背部皮下注射U251细胞建立移植性恶性胶质瘤模型，9d... 详细信息

目的研究血管内皮细胞生长因子（VEGF）和铜绿假单胞菌外毒素A（PE）融合基因的真核表达载体对裸鼠移植性人脑恶性胶质瘤血管生成的影响，探索抗肿瘤血管生成的新方法。方法采用裸鼠背部皮下注射U251细胞建立移植性恶性胶质瘤模型，9d后按随机数字表法将裸鼠分为未治疗组、PBS组、空质粒组、重组质粒组，采用HE染色观察肿瘤组织的形态学变化，免疫组织化学SP法检测胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、CD31、PE的表达，分析肿瘤组织的微血管密度（MVD）。结果注射后第16天重组质粒组裸鼠移植瘤体积明显小于其他3组，差异有统计学意义（P〈0．05）；重组质粒组裸鼠移植瘤MVD低于其他3组，差异均有统计学意义（P〈0．05）；重组质粒组裸鼠肿瘤组织PE呈阳性表达，而在空质粒组、PBS组及未治疗组均为阴性表达。结论VEGF165-PE38融合基因的表达产物对人脑恶性胶质瘤有明显的抑制作用，并能抑制肿瘤新生血管生成，可能为一种有效抗肿瘤血管治疗的新策略。

关键词：血管内皮细胞生长因子铜绿假单胞菌外毒素A 融合基因基因治疗抗血管治疗神经胶质瘤

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骨髓源及脂肪源干细胞向神经元样细胞诱导分化潜力的比较研究

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中华神经医学杂志 2009年第5期8卷 441-445页

作者：马旭姜晓丹张洪钿林建浩闫中杰秦玲莎南方医科大学珠江医院神经外科广东神经外科研究所广东省脑功能修复与再生重点实验室广州501282

目的比较骨髓源基质干细胞（BMSCs）和脂肪源间充质干细胞（ADSCs）向神经元样细胞诱导分化的潜力。方法体外分离培养来自成年SD大鼠的BMSCs和ADSCs．传至第5代时加入表皮生长因子（EGF，10ng／mL）和碱性成纤维细胞生长因子fbFGF，20ng... 详细信息

目的比较骨髓源基质干细胞（BMSCs）和脂肪源间充质干细胞（ADSCs）向神经元样细胞诱导分化的潜力。方法体外分离培养来自成年SD大鼠的BMSCs和ADSCs．传至第5代时加入表皮生长因子（EGF，10ng／mL）和碱性成纤维细胞生长因子fbFGF，20ng／mL），诱导6h、12h、24h、72h、1周、2周后，用免疫荧光染色和Western blot检测两种细胞的神经细胞特异性标志（巢蛋白和B．微管蛋白Ⅲ）的表达，并做统计学分析。结果BMSCs和ADSCs经诱导后，细胞形态发生变化，均表达神经细胞特异性标志。免疫荧光染色结果显示诱导后各时间点BMSCs和ADSCsnstin^J性率或***阳性率比较差异均有统计学意义（P〈O．05），且诱导后ADSCs表达nestin阳性细胞或B—mbulinIII的能力在各个时间点都EE诱导后BMSCs强，说明诱导后的ADSCs向神经元样细胞方向分化的能力更强。Westernblot结果也与免疫荧光染色结果类似。结论两种不同来源的干细胞在分化成神经元样细胞方面的能力不同，ADSCs比BMSCs具有相对更强的神经元样细胞分化能力。

关键词：骨髓源基质干细胞脂肪源间充质干细胞神经元样细胞细胞分化

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不同方法诱导大鼠脂肪基质细胞定向分化为神经细胞的比较研究

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中华神经医学杂志 2009年第8期8卷 790-793页

作者：唐艳平姜晓丹张洪钿邹雨汐徐如祥广东神经外科研究所南方医科大学珠江医院神经外科广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510282

目的探索提高大鼠脂肪基质细胞（ADSCs）向神经细胞定向诱导分化比例的实验方法。方法根据所采用的不同细胞诱导分化方法分为A组f直接诱导组：以含血清及神经营养因子的Neurobasal培养基直接诱导ADSCs向神经细胞分化）和B组[神经球诱导... 详细信息

目的探索提高大鼠脂肪基质细胞（ADSCs）向神经细胞定向诱导分化比例的实验方法。方法根据所采用的不同细胞诱导分化方法分为A组f直接诱导组：以含血清及神经营养因子的Neurobasal培养基直接诱导ADSCs向神经细胞分化）和B组[神经球诱导组：先以无血清Neurobasal培养基将ADSCs诱导为神经干细胞CNSCs）球，再以含血清及营养因子的Neurobasal培养基诱导神经球干细胞向神经细胞分化]。通过细胞形态学观察以及免疫细胞化学检测巢蛋白（nestin）、β-微管蛋白Ⅲ（β-tubulin Ⅲ）、微管相关蛋白2（MAP2ab）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达，鉴定细胞分化结果。结果免疫细胞化学结果证实，两组细胞均有效表达nestin和β-tubulin Ⅲ。A组细胞在诱导6h时nestin表达可达高峰（73．8％±6．5％），并很快下降（24h为50.3％±3．8％，72h为10．5％±3．0％），72h后即检测不到；β-tubulinⅢ在诱导后24h开始表达（33．5％±6．6％），1周达高峰（84.3％±33％）。B组nestin的高表达持续整个神经球阶段，β-tubulinⅢ在神经球阶段有少量表达（成球后7d为14．1％±3.3％），神经球细胞分化后其表达明显增加（分化后3d为46．4％±6．1％）；B组在由NSCs向神经细胞诱导一定时间后可检测到一定比例的MAP2ab阳性细胞（24．5％）。结论ADSCs在体外稳定扩增传代并在适宜诱导条件下，可以向神经细胞定向分化。应用神经球诱导法和直接诱导法均可得到较高比例的nestin及β-mbulinⅢ阳性细胞，神经球诱导组nestin表达稳定，并有一定比例MAP2ab阳性细胞出现。

关键词：脂肪基质细胞细胞诱导细胞分化神经元样细胞

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颅内动脉瘤动物模型的制作

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中华神经医学杂志 2009年第8期8卷 862-864页

作者：姬斌姜晓丹段传志广东神经外科研究所南方医科大学珠江医院神经外科.广东省脑功能修复与再生重点实验室广州510282

颅内动脉瘤是最常见的脑血管病之一，发病率仅次于脑血栓形成和高血压性脑出血。动脉瘤破裂每年发病率约10／10万人，而未破裂动脉瘤由于多数无症状，发病率难以准确计算，根据尸检及影像检查结果估算为0．2％～8．9％。因此，探讨颅内... 详细信息

颅内动脉瘤是最常见的脑血管病之一，发病率仅次于脑血栓形成和高血压性脑出血。动脉瘤破裂每年发病率约10／10万人，而未破裂动脉瘤由于多数无症状，发病率难以准确计算，根据尸检及影像检查结果估算为0．2％～8．9％。因此，探讨颅内动脉瘤的组织病理学与病理生理学改变、动脉瘤的演变过程和破裂机制对预防颅内动脉瘤破裂和临床治疗具有极其重要的意义，而这些研究在一定程度上均依赖于建立稳定可靠的颅内动脉瘤模型。

关键词：颅内动脉瘤动物模型

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