检索结果-内蒙古大学图书馆

重庆医学 2017年第17期46卷 2305-2308页

作者：王高尚贾志栋李阳彭青高毅南方医科大学珠江医院肝胆二科/国家重点实验室器官衰竭协同创新中心/广东省人工器官与组织工程研究中心广州510282

目的利用海藻酸水凝胶构建一种新的肝细胞三维共培养模型。方法利用海藻酸钠、微流控芯片,以及肝细胞C3A和脐静脉内皮细胞***926制备出海藻酸钠水凝胶微纤维,实验组为仿肝板组,同时制备出混合无序水凝胶微纤维作为对照组。利用活细胞双... 详细信息

目的利用海藻酸水凝胶构建一种新的肝细胞三维共培养模型。方法利用海藻酸钠、微流控芯片,以及肝细胞C3A和脐静脉内皮细胞***926制备出海藻酸钠水凝胶微纤维,实验组为仿肝板组,同时制备出混合无序水凝胶微纤维作为对照组。利用活细胞双荧光标记验证微纤维内两种细胞排列结构,将微纤维培养1周,每天观察微纤维形态,检测肝细胞活力及清蛋白(Alb)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH-L)、α1抗胰蛋白酶(α1AT)、凝血因子Ⅶ(FⅦ)、谷胱甘肽S转移酶α1(GSTα1)、细胞色素P450氧化酶1A2(CYP1A2)的水平。结果仿肝板组水凝胶内C3A细胞在中间,有2~3排,***926细胞位于C3A细胞两侧,呈现肝板结构排布;对照组水凝胶内两种细胞则混杂在一起呈无序状态;大约3d肝组织条索形成;两组水凝胶微纤维直径随时间变化差异无统计学意义(P>0.05);仿肝板组肝细胞活力在第5天达到最大值,对照组在第6天达到最大值,两组除第1天较接近外,其余各天仿肝板组均高于对照组;两组清蛋白分泌水平变化趋势基本相同,在第3天达到最大值,第4天开始下降;仿肝板组ALT、AST、LDH-L在第3天下降到最小值,第4天以后变化趋势和对照组相同;两组α1AT除第5天外其余各时间点比较差异均有统计学意义(P<0.05);两组GSTα1分泌量随时间持续上升,仿肝板组各时间点明显高于对照组(P<0.05);仿肝板组FⅦ分泌量前7d逐渐升高,对照组于第2天持续下降,仿肝板组第3天开始明显高于对照组(P<0.05);对照组细胞内CYP1A2水平随时间变化不明显,仿肝板组从第4天开始明显高于对照组(P<0.05)。结论成功构建出一种仿肝板肝组织三维共培养模型,肝细胞功能有望得到长时间维持。

关键词：海藻酸钠水凝胶微流体肝细胞肝板三维共培养

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间接共培养体系中一氧化氮浓度对肝癌细胞和外周血单个核细胞活性的影响

引用

肿瘤研究与临床 2016年第7期28卷 433-436页

作者：姚慧蒋泽生高毅器官衰竭防治国家重点实验室器官衰竭防治协同创新中心广东省人工器官与组织工程研究中心南方医科大学珠江医院肝胆二科广州510000

目的：研究不同浓度一氧化氮（NO）对肝癌细胞HepG2和外周血单个核细胞（PBMC）活性的影响。方法通过设置不同的PBMC、HepG2细胞密度及使用不同药物调节培养体系中NO的浓度，分别测量单独培养和间接共培养体系中两种细胞活性变化，并与... 详细信息

目的：研究不同浓度一氧化氮（NO）对肝癌细胞HepG2和外周血单个核细胞（PBMC）活性的影响。方法通过设置不同的PBMC、HepG2细胞密度及使用不同药物调节培养体系中NO的浓度，分别测量单独培养和间接共培养体系中两种细胞活性变化，并与不加药对照组进行统计分析。结果间接共培养的PBMC活性仅在NO浓度大于120μmol／L时受到影响，而与PBMC间接共培养的HepG2细胞在NO浓度小于对照组时和NO浓度大于241μmol／L时受到抑制。在不同的NO浓度条件下，间接共培养的HepG2细胞活性均高于单独培养的HepG2细胞。间接共培养体系中，随着PBMC与HepG2细胞数比值的升高，NO浓度降低，而HepG2细胞活性增加。结论培养液中过高或过低的NO浓度都对HepG2细胞有损害，过高浓度的NO对PBMC有损害，低浓度NO对PBMC无显著影响，间接接触PBMC对HepG2细胞的生长有促进作用。

关键词：肝肿瘤共培养一氧化氮免疫疗法

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半乳糖凝集素-3联合HGF诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为肝样细胞

引用

重庆医学 2016年第15期45卷 2043-2047页

作者：吴增城康利民李阳郭斌冯磊彭青潘明新南方医科大学珠江医院肝胆二科/"器官衰竭防治"国家重点实验室/"器官衰竭防治"协同创新中心/广东省人工器官与组织工程研究中心广州510282 云南省普洱市人民医院肝胆外科 665000

目的探索半乳糖凝集素-3(Gal-3)联合肝细胞生长因子(HGF)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向肝样细胞分化的可行性及最佳诱导条件,并对诱导后的细胞进行鉴定。方法离心、贴壁培养分离大鼠BMSCs,流式细胞术鉴定表面标志。取第3代细胞进... 详细信息

目的探索半乳糖凝集素-3(Gal-3)联合肝细胞生长因子(HGF)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向肝样细胞分化的可行性及最佳诱导条件,并对诱导后的细胞进行鉴定。方法离心、贴壁培养分离大鼠BMSCs,流式细胞术鉴定表面标志。取第3代细胞进行分组诱导培养,A组:0μg/mL Gal-3+20ng/mL肝细胞生长因子(HGF);B组:0.1μg/mL Gal-3+20ng/mL HGF;C组:0.5μg/mL Gal-3+20ng/mL HGF;D组:1.0μg/mL Gal-3+20ng/mL HGF;E组:2.0μg/mL Gal-3+20ng/mL HGF;阳性对照组:SD大鼠肝脏细胞IAR20。分别于诱导后7、14、21、28d时段进行细胞形态学观察、免疫荧光染色检测、实时荧光定量核酸扩增检测(Q-PCR)鉴定其诱导分化情况。结果分组诱导培养后,各组BMSCs形态逐渐向肝样细胞转化,与大鼠原代肝脏细胞IAR20相似,其中28d时间段,C组转化成IAR20相似细胞比例最高;各组甲胎蛋白(AFP)、清蛋白(ALB)荧光染色阳性率明显增高,并且在28d时间点C组AFP、ALB的荧光染色阳性率最高;C组AFP、ALB mRNA表达明显增加,同时以28d时间点表达量达到峰值。结论 Gal-3联合HGF能有效诱导大鼠BMSCs分化为肝样细胞,分化后的肝样细胞能分泌肝细胞特异性产物AFP、ALB,且其诱导效率与诱导培养时间和Gal-3浓度有关。

关键词：间质干细胞甲胎蛋白类肝细胞生长因子骨髓间充质干细胞半乳糖凝集素-3 诱导肝样分化

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