检索结果-内蒙古大学图书馆

响应面优化贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)菌株YH-18产芽孢培养基和培养条件

南京林业大学学报（自然科学版） 2023年第1期47卷 209-218页

作者：石慧敏叶建仁王焱陆蓝翔史纪武南京林业大学林学院南方现代林业协同创新中心江苏南京210037 上海市林业总站上海200072

【目的】贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)菌株YH-18是优良的抗病促生微生物,其制成的微生物菌剂具有无害、高效、环保等特点。通过优化菌株YH-18的培养基组分和培养条件,提高发酵液中的有效活菌数,以期增加发酵液中的芽孢数,延长... 详细信息

【目的】贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)菌株YH-18是优良的抗病促生微生物,其制成的微生物菌剂具有无害、高效、环保等特点。通过优化菌株YH-18的培养基组分和培养条件,提高发酵液中的有效活菌数,以期增加发酵液中的芽孢数,延长储存时间,降低发酵成本,提高其在工业化生产发酵中的质量效益。【方法】以贝莱斯芽孢杆菌(***)菌株YH-18发酵液芽孢数为质量指标,采用单因素分析法对发酵液培养基(碳源、氮源、无机盐及其浓度)和培养条件(温度、转速、初始pH、装液量、接菌量)进行初步筛选。将初筛结果结合响应面试验设计[plackett-burman(PB)、最陡爬坡试验、box-behnken design(BBD)],筛选出对贝莱斯芽孢杆菌菌株YH-18产芽孢影响最为显著的因素进一步验证,建立各显著性因素的二次回归方程模型,完成对菌株YH-18培养基组分和培养条件的系统优化。对比优化前后发酵液产品的去菌体滤液对根癌农杆病菌(Agrobacterium tumefaciens)菌株C58生长的抑制效果。每隔4个月测定优化后发酵液中的活菌数和芽孢数,考察优化发酵液的货架期。【结果】单因素试验初步筛选后得到培养基组分为1.0%(质量分数,后同)玉米浆干粉、1.0%葡萄糖、0.4%碳酸钙、0.4%磷酸氢二钾、0.2%的硫酸镁,培养条件为装液量50 mL三角瓶的40%、摇床转速200 r/min、培养温度33℃、接菌量0.5%、初始pH 7.3。将单因素试验后的结果进行PB试验筛选得到玉米浆干粉质量分数、装液量和接菌量是影响发酵液芽孢数最显著的3个因素。最陡爬坡试验确定了响应面试验因素水平的中心点为0.8%玉米浆干粉、接菌量1.1%、装液量32%。BBD试验最终确定,培养基组分(质量分数)为0.83%玉米浆干粉、1.0%葡萄糖、0.4%碳酸钙、0.4%磷酸氢二钾、0.2%的硫酸镁,培养条件为装液量31.53%、摇床转速200 r/min、培养温度33℃、接菌量1.12%、初始pH 7.3时,可获得较高发酵液芽孢产量。在本优化体系下,发酵液产品的芽孢数可达3.25×109cfu/mL,较LB基础培养基芽孢数提高了9.48倍。菌株优化后发酵液产品的去菌体滤液对根癌农杆病菌菌株菌株C58的抑制能力较未优化的明显增强,能在前16 h使根癌农杆菌菌株C58基本不生长,且在48 h后仍有较好的抑制效果。在50 L发酵罐中使用优化配方发酵得到的发酵液产品储存1 a后有效活菌数和芽孢数仍然分别为初始值的87.50%和89.74%,原始发酵方法的发酵液产品在储存4个月后有效活菌数仅为初始值的0.06%。【结论】确定了贝莱斯芽孢杆菌菌株YH-18摇瓶发酵产芽孢的最适培养基和培养条件。优化后显著提高了发酵液芽孢数,增强了发酵液去菌体滤液的抑菌能力,延长了产品储存时间,降低了生产成本,为贝莱斯芽孢杆菌菌株YH-18未来的工业化生产和推广应用提供了重要的技术支持。

关键词：贝莱斯芽孢杆菌芽孢培养基培养条件响应面法发酵优化

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南京市早春访花昆虫种类及其行为研究

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南京林业大学学报（自然科学版） 2015年第1期39卷 33-38页

作者：郝德君胡海桃陈娟陈瑞旭凌梦沁陈梦义南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院江苏南京210037

针对南京地区早春主要开花植物,于2013年3月5日至5月15日,采用捕捉、鉴定、视频、图像采集等方法,对访花昆虫的种类、访花行为、访花频率和日活动规律进行了观察研究。结果表明:南京地区主要开花植物的访花昆虫有7目20科32种,主要类群... 详细信息

针对南京地区早春主要开花植物,于2013年3月5日至5月15日,采用捕捉、鉴定、视频、图像采集等方法,对访花昆虫的种类、访花行为、访花频率和日活动规律进行了观察研究。结果表明:南京地区主要开花植物的访花昆虫有7目20科32种,主要类群为双翅目、鳞翅目、膜翅目,其中东方蜜蜂、黄胸木蜂、长木蜂、赤足木蜂、黑颚条蜂、食蚜蝇以及菜粉蝶为主要访花昆虫。它们的弹花频率、每小花停留时间等访花行为受到花色、花的味道、花的结构以及访花昆虫自身结构的影响而表现出不同的特点。

关键词：早春访花昆虫弹花频率访花停留时间访花行为南京市

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‘锦绣’海棠花粉生活力测定与花粉贮藏

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分子植物育种 2022年

作者：任文玲王娟宋珂史锋厚沈永宝南京林业大学林学院南京林业大学南方现代林业协同创新中心

以‘锦绣’海棠花粉为实验材料，分别采用双因素随机区组试验设计，探究TTC染液浓度和染色时间对生活力测定效果的影响以及花粉含水量和花粉贮藏温度对花粉贮藏效果的影响，对花粉生活力TTC染色测定条件进行优化筛选并探索‘锦绣’海棠...

以‘锦绣’海棠花粉为实验材料，分别采用双因素随机区组试验设计，探究TTC染液浓度和染色时间对生活力测定效果的影响以及花粉含水量和花粉贮藏温度对花粉贮藏效果的影响，对花粉生活力TTC染色测定条件进行优化筛选并探索‘锦绣’海棠花粉适宜的贮藏条件。结果表明：TTC染液浓度与染色时间对于花粉生活力测定效果的影响均达到极显著水平(P<0.01)，且两者存在极显著的交互作用；生活力测定效果随着TTC染液浓度的增大而极显著增强，以0.5%为最佳浓度；延长TTC染色时间，有助于提高生活力测定的准确性，但染色20 min和30 min处理结果不存在差异。花粉含水量和花粉贮藏温度以及两者的交互作用对花粉贮藏效果的影响均达到极显著影响，花粉生活力随着贮藏时间的延长呈现逐渐下降的变化趋势；对花粉进行适当自然干燥，可以明显降低花粉含水量，虽影响花粉生活力，但却有助于花粉贮藏；室温不宜用于‘锦绣’花粉贮藏，降低贮藏温度有助于花粉生活力的维持。综上所述，TTC染色法测定‘锦绣’海棠花粉生活力的最佳条件为：采用0.5% TTC溶液对花粉进行浸染，在35 ℃恒温箱内避光染色20～30 min后，在(10倍×10倍)显微镜下进行镜检观察判读。‘锦绣’海棠花粉适宜的贮藏方法为：采用室内自然干燥3 h的方法，待花粉含水量降至10.21%后，将花粉贮藏于-18 ℃和-38 ℃温度条件下，有利于花粉活力的保持。

关键词：

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Zn对解淀粉芽孢杆菌JK-JS8生物膜形成及拮抗能力的影响

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微生物学通报 2022年第10期49卷 4134-4143页

作者：汤雨葳于孟叶建仁南京林业大学林学院南方现代林业协同创新中心江苏南京210037

【背景】锌(Zn)是一种微量元素,对细菌细胞的结构和调节系统非常重要。细菌在环境中会受到高浓度锌离子影响,进而影响其自身的功能。【目的】研究Zn对解淀粉芽孢杆菌JK-JS8生物膜及拮抗松枯梢病病菌能力的影响,探讨二者之间的联系和可... 详细信息

【背景】锌(Zn)是一种微量元素,对细菌细胞的结构和调节系统非常重要。细菌在环境中会受到高浓度锌离子影响,进而影响其自身的功能。【目的】研究Zn对解淀粉芽孢杆菌JK-JS8生物膜及拮抗松枯梢病病菌能力的影响,探讨二者之间的联系和可能的作用机制,为生防菌在不同环境条件下的应用提供理论依据。【方法】观察解淀粉芽孢杆菌JK-JS8在不同浓度锌离子条件下生物膜的形成情况,采用平板对峙法探究非致死浓度的锌离子对解淀粉芽孢杆菌JK-JS8拮抗松枯梢病病菌效果的影响,通过RT-qPCR检测ZnCl_(2)处理后生物膜相关基因的表达,检测抗菌产物的生成情况。【结果】300μmol/L ZnCl_(2)对解淀粉芽孢杆菌JK-JS8的生长量无影响,但显著抑制了JK-JS8生物膜形成能力及拮抗病原菌能力。Zn胁迫下,tasA、spo0A和bamD等生物膜相关基因的表达量与对照组相比明显下调,通过液相色谱检测到抑菌产物bacillomycin D的产量在24、48和72 h时分别降低了39.1%、58.8%和61.0%。【结论】环境中的锌离子浓度过高会影响解淀粉芽孢杆菌JK-JS8的生物膜形成,进而降低其拮抗病原菌的能力。

关键词： Zn 解淀粉芽孢杆菌生物膜拮抗作用

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观赏海棠SSR-PCR体系优化及引物筛选应用

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南京林业大学学报（自然科学版） 2018年第3期42卷 51-57页

作者：黄彬倪州献周婷张往祥徐立安南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院江苏南京210037

【目的】为探究适用于观赏海棠SSR反应分子标记研究的最佳PCR反应条件,采用正交设计法对观赏海棠SSR-PCR体系进行优化,并利用优化体系筛选适于观赏海棠的多态性SSR引物。【方法】以6个二倍体观赏海棠DNA模板为材料,采用L16(45)正交试验... 详细信息

【目的】为探究适用于观赏海棠SSR反应分子标记研究的最佳PCR反应条件,采用正交设计法对观赏海棠SSR-PCR体系进行优化,并利用优化体系筛选适于观赏海棠的多态性SSR引物。【方法】以6个二倍体观赏海棠DNA模板为材料,采用L16(45)正交试验对DNA模板浓度、Taq酶浓度、引物浓度、Mg2+浓度和d NTP浓度进行优化实验,确立了观赏海棠SSR-PCR最佳反应体系。【结果】得出15μL优化体系各成分为:DNA模板5 mg/L、Taq酶1.25 U、引物0.3μmol/L、Mg2+2 mmol/L、d NTP 0.25 mmol/L、1×Buffer1.5μL。利用优化体系在73对苹果属SSR引物中筛选出15对条带清晰、多态性丰富、重复性好的SSR引物并确定各引物的退火温度,其多态信息含量均大于0.25。【结论】正交试验结果达到优化目的,利用优化体系筛选的15对多态性引物可直接应用于观赏海棠SSR分子标记实验中,为观赏海棠品种鉴定、分类以及遗传育种等研究提供了有效工具。

关键词：观赏海棠 SSR-PCR 体系优化引物筛选

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马尾松感染松材线虫后的早期诊断指标筛选

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南京林业大学学报(自然科学版) 2024年

作者：郑哲李越陈凤毛李敏王梦瑶王立超南京林业大学林草学院南方现代林业协同创新中心

【目的】利用受不同线虫侵染的马尾松（Pinus massoniana）茎干部位代谢组，筛选出适合用于松材线虫病（pine wilt disease，PWD）早期诊断的代谢物指标，以有效提高对松材线虫病的防控。【方法】选择3种具有不同的致病力的线虫：强毒... 详细信息

【目的】利用受不同线虫侵染的马尾松（Pinus massoniana）茎干部位代谢组，筛选出适合用于松材线虫病（pine wilt disease，PWD）早期诊断的代谢物指标，以有效提高对松材线虫病的防控。【方法】选择3种具有不同的致病力的线虫：强毒力松材线虫（Bursaphelenchus xylophilus）虫株FCBX，强毒力拟松材线虫（Bursaphelenchus mucronatus）虫株BM7，无毒力拟松材线虫（Bursaphelenchus mucronatus）虫株FCBM，均于南京林业大学森林病理实验室分离和培养。将其接种生长状态相似的4年生马尾松，以验证其对马尾松的毒力，空白对照（CK）接种无菌水。利用超高效液相色谱和串联质谱（ultra-high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry， UPLC-MS/MS）测定接种3 d后马尾松茎干部位的代谢组，利用主成分分析对代谢组进行质控，通过P值和投影重要性（variable importance projection， VIP）值相结合的方法筛选出在松材线虫接种后特异性表达的代谢产物，并利用高效液相色谱仪（ultra-performance liquid chromatography， UPLC）对筛选出的特异性代谢物进行靶向检测和验证。【结果】马尾松茎干部位检测代谢产产物组的结果可靠，3种线虫对马尾松的毒力有明显差异。7-脱氢胆固醇（7-Dehydrocholesterol）是在接种不同线虫的马尾松代谢比较组中共同的差异代谢物，利用高效液相色谱测定其在马尾松接种不同线虫后3、7、21 d的含量，该物质只在接种强毒力松材线虫FCBX处理组中可以检测到，含量分别为4.09、66.77、28.8 μg/g，在无菌水对照处理组CK以及接种强毒力和无毒力两种拟松材线虫（BM7、FCBM）处理组中无法检测到7-脱氢胆固醇的存在。【结论】在马尾松代谢组中筛选出的7-脱氢胆固醇，是松材线虫早期侵染马尾松后的一种特异性代谢物，该特异性可以将松材线虫侵染与其他不同种线虫侵染的马尾松区分开，因此检测7-脱氢胆固醇含量可以用于松材线虫病早期诊断。

关键词：松材线虫病松材线虫拟松材线虫马尾松代谢组学代谢物液相色谱法病害检测

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两株解磷青霉对马尾松根际土壤的微生态效应及其促生作用

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南京林业大学学报（自然科学版） 2016年第6期40卷 109-116页

作者：乔欢吴小芹魏伟南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院江苏南京210037

为了研究从马尾松根际土壤中筛选出的2株高效解磷真菌(瓜纳卡斯特青霉JP-NJ2和嗜松青霉JPNJ4)对马尾松根际土壤微生物种群数量及松树生长的影响。该研究通过Biolog微平板法探究该两株解磷青霉对马尾松根际土壤微生物群落结构的影响,同... 详细信息

为了研究从马尾松根际土壤中筛选出的2株高效解磷真菌(瓜纳卡斯特青霉JP-NJ2和嗜松青霉JPNJ4)对马尾松根际土壤微生物种群数量及松树生长的影响。该研究通过Biolog微平板法探究该两株解磷青霉对马尾松根际土壤微生物群落结构的影响,同时观测其对马尾松的持续促生效果,并对马尾松根际土壤产生的微生态效应进行初步分析。结果表明:冬夏两季,2种解磷真菌及其代谢产物均对土壤中微生物物种优势度及丰富度产生了显著影响;相对于对照处理,解磷真菌处理的根际土壤中细菌数量显著提高,夏季时最高,为59.27×104cfu/g;瓜纳卡斯特青霉JP-NJ2及嗜松青霉JP-NJ4菌悬液处理的根际土壤,夏季时物种丰富度指数分别为2.835 0与3.120 0,均低于对照处理,说明夏季时解磷青霉降低了土壤物种丰富度。两株解磷青霉接种600 d后对马尾松仍具有良好的促生作用,苗高增长率可达88.7%,地径增长率最高为53.5%。解磷青霉的施用,明显改变了根际微生物群落中细菌、真菌及放线菌数量,微生物总量也随之变化;两株供试青霉均对马尾松具有良好的持续促生作用,其中瓜纳卡斯特青霉JP-NJ2菌悬液的促生效果最佳。

关键词：马尾松解磷真菌微生物群落功能多样性促生

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松材线虫高效复配制剂的药效分析

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南京林业大学学报(自然科学版) 2024年

作者：张娇叶建仁陈婷婷程浩南京林业大学林草学院南方现代林业协同创新中心

【目的】研究自制一种新型复配杀线虫剂3%氟吡菌酰胺·5%甲维盐微乳剂，探究其对松材线虫的毒力活性以及在防治松材线虫病方面的潜力，为研发出更加高效并且具备快速输导能力的药剂提供参考。【方法】采用浸虫法测定这种新型复配微... 详细信息

【目的】研究自制一种新型复配杀线虫剂3%氟吡菌酰胺·5%甲维盐微乳剂，探究其对松材线虫的毒力活性以及在防治松材线虫病方面的潜力，为研发出更加高效并且具备快速输导能力的药剂提供参考。【方法】采用浸虫法测定这种新型复配微乳剂（3%氟吡菌酰胺·5%甲维盐微乳剂）以及另外两种市售常用药剂（5%甲维盐微乳剂和5%阿维菌素乳油）的杀线效果；以3种药剂的两种亚致死浓度(LC10和LC30)处理松材线虫来检测其对线虫繁殖能力的影响；在林间将这3种药剂进行树干注射，观察药剂的可吸收性，以及观察被树体成功吸收药剂对松树造成的敏感性状况；在注药90 d后采集注干马尾松的样本检测分析药剂在树体内的输导分布动态；并在注药后100 d对处理马尾松进行人工接种松材线虫，观察统计各药剂对松材线虫病的防治效果。【结果】3%氟吡菌酰胺·5%甲维盐自配微乳剂、5%甲维盐微乳剂、5%阿维菌素乳油处理松材线虫24 h后测定的致死中浓度(LC50)数值分别为2.644 0、27.678 4、42.891 1 mg/L，3 种供试药剂中，3%氟吡菌酰胺·5%甲维盐微乳剂的杀线能力最强。并且经过低浓度药剂处理过的松材线虫的种群繁殖数量也均显著低于对照组。3种药剂注射7 d后，自制复配药剂和5%阿维菌素乳油能够被树体完全吸收，5%甲维盐微乳剂难以被吸收。各药剂注射180 d后，自制复配药剂对树体造成的敏感性情况轻微，注药点的木质部产生轻微的变色情况，5%阿维菌素乳油对树体造成的敏感性严重，注药点的木质部产生了严重的变色情况。在注药90 d后，在树体顶部能够检测到所有药剂的残留量。在注干点以下0.5 m位置，复配3%氟吡菌酰胺·5%甲维盐微乳剂中氟吡菌酰胺残留量达到最高，为0.13 mg/kg，甲维盐残留量0.07 mg/kg，5%阿维菌素残留量0.1 mg/kg。2种药剂残留量均在注干点以上0.5 m位置达到最高，此部位复配药剂中的氟吡菌酰胺的残留量为55.65 mg/kg，残留量显著高于其余药物。并且从整体看，复配药剂中的氟吡菌酰胺在树体内的残留量高于复配中的甲维盐的残留量以及5%阿维菌素乳油。于当年7月中旬接种松材线虫，在接种270 d后注射过药剂的马尾松均保持健康，而未经药剂处理的松树在接种后100 d出现感染迹象，所有药剂都能有效预防松材线虫病的发生。【结论】新型自制复配药剂对松材线虫的毒力效果分析表明其不仅具有较强的毒力作用，在林间对马尾松进行注射后，其可吸收性良好，对马尾松的敏感性轻微，并且在松树体内具有良好的输导能力。同时，能够预防松线虫的感染，具备良好的防效，可继续开展配方的优化以及林间的大面积应用。

关键词：松材线虫病复配药剂毒力分析树干注射

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61个观赏海棠品种的SSR指纹图谱构建及遗传多样性分析

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南京林业大学学报（自然科学版） 2018年第3期42卷 45-50页

作者：荣浩黄彬周琦张往祥徐立安南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院江苏南京210037

【目的】观赏海棠种类繁多且同名异物和同物异名的现象严重,寻找一种从分子角度快速准确鉴定观赏海棠品种的技术手段,弥补依靠表型性状的分类和鉴定的不足,满足观赏海棠的品种资源鉴别需要。【方法】对61个主要观赏海棠品种,利用从苹果... 详细信息

【目的】观赏海棠种类繁多且同名异物和同物异名的现象严重,寻找一种从分子角度快速准确鉴定观赏海棠品种的技术手段,弥补依靠表型性状的分类和鉴定的不足,满足观赏海棠的品种资源鉴别需要。【方法】对61个主要观赏海棠品种,利用从苹果属多个种中筛选出的10对SSR引物对其进行PCR扩增检测,分析其遗传多样。【结果】10对SSR引物共扩增出78条条带,平均每个SSR位点扩增出7.8条,多态性条带百分率为100%。61个观赏海棠品种Nei多样性指数(H)和Shannon指数(I)分别为0.205 2和0.348 8,若以共显性标记的方式进行分析,43个海棠品种的Nei多样性指数的变化范围在0.623 9~0.881 8,平均为0.788 3,表现出较丰富的遗传多样性。【结论】最终利用2对SSR引物成功地构建了61个观赏海棠的指纹图谱,为品种资源的鉴别和深入挖掘利用提供依据。

关键词：观赏海棠 SSR标记指纹图谱遗传多样性

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3个桂花品种花香组分动态特征及花被片结构解剖学观测

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南京林业大学学报（自然科学版） 2020年第4期44卷 12-20页

作者：施婷婷杨秀莲王良桂南京林业大学风景园林学院江苏南京210037 南京林业大学林学院南方现代林业协同创新中心江苏南京210037

【目的】桂花[Osmanthus fragrans(Thunb.)Lour.]是我国著名的香花植物,对其花香组分动态特征及花被片结构解剖学观测的研究能够为桂花的进一步开发利用提供参考。【方法】选取‘日香桂’(‘Rixiang Gui’)、‘雨城丹桂’(‘Yucheng Dan... 详细信息

【目的】桂花[Osmanthus fragrans(Thunb.)Lour.]是我国著名的香花植物,对其花香组分动态特征及花被片结构解剖学观测的研究能够为桂花的进一步开发利用提供参考。【方法】选取‘日香桂’(‘Rixiang Gui’)、‘雨城丹桂’(‘Yucheng Dan’)和‘波叶银桂’(‘Boye Yin’)3个桂花品种,采用顶空固相微萃取(HS-SPME)与气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术对其花香成分进行检测分析,并结合多元统计分析对3个桂花品种的花香进行评价。同时,利用扫描电镜和透射电镜观察比较这3个桂花品种的超微结构。【结果】3个桂花品种共鉴定出51种挥发性花香物质,均以萜烯类物质为主,其中芳樟醇及其氧化物、α-紫罗兰酮、β-紫罗兰酮及二氢-β-紫罗兰酮为主要花香物质,但相对含量存在差异。偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)表明,3个不同桂花品种的花香存在差异,并通过变量重要性投影(VIP)值选出了10种关键的差异花香物质,包括丁酸乙酯、顺式-芳樟醇氧化物、反式-β-罗勒烯等。基于这10种关键差异花香物质聚类分析发现,不同的品种或花期对桂花花香都有影响,但主要还是取决于品种的不同。此外,花被片超微结构观察发现桂花花香成分的聚合体(嗜饿酸基质颗粒)在细胞质体中形成,然后溢出细胞壁,最后通过表皮细胞上丰富的褶皱结构向外释放花香。【结论】3个桂花品种具有相似的特征花香物质,也存在着差异花香物质,同时这些花香物质在3个不同桂花品种中迥异的含量分布,共同形成了不同桂花品种的特有花香。此外,3个桂花品种花被片表皮细胞的褶皱结构,以及嗜饿酸基质颗粒的差异,也可能是3个桂花品种花香差异的原因之一。

关键词：桂花花香成分顶空固相微萃取气相色谱-质谱联用偏最小二乘法判别分析超微结构

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