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南京林业大学学报(自然科学版) 2022年第4期46卷 1-7页

作者：丁晓磊张悦林司曦叶建仁南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院

松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)是松树萎蔫病的病原，严重威胁欧亚等国的松林资源和生态安全。自2011年松材线虫基因组首次公布以来，高通量测序技术成为该病害的重要研究手段之一。笔者从松材线虫的功能基因、非编码RNA、转录... 详细信息

松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)是松树萎蔫病的病原，严重威胁欧亚等国的松林资源和生态安全。自2011年松材线虫基因组首次公布以来，高通量测序技术成为该病害的重要研究手段之一。笔者从松材线虫的功能基因、非编码RNA、转录表达差异和基因组学等方面综述其致病机理，认为随着高通量测序技术的快速发展，在转录组相关研究方面，可尝试开展空间转录组、单细胞测序等新技术，在染色体基因组的支持下寻找松材线虫中具有潜在调控功能的长链非编码RNA、融合基因和环状RNA等罕见核酸分子，挖掘可能存在的甲基化、RNA编辑、结构变异等未知现象；在基因组学研究方面，可以开展基因家族扩增、大样本全基因组关联分析和数量性状定位等研究，以挖掘与松材线虫致病力和繁殖力等重要性状紧密关联的基因或位点，阐明松材线虫不同种群在进化过程中发生的适应性变化。

关键词：松材线虫高通量测序转录组学基因组学

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簸箕柳组培再生体系的建立

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南京林业大学学报(自然科学版) 2019年第2期43卷 31-37页

作者：孙永莲戴晓港李小平陈赢男南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院

【目的】建立簸箕柳组培再生体系,为在簸箕柳中开展功能基因组研究奠定基础。【方法】分别以簸箕柳带腋芽茎段和种子为外植体,比较不同消毒方法、基本培养基类型、光照条件及植物生长调节剂等因素对不同外植体脱分化和再分化能力的影响... 详细信息

【目的】建立簸箕柳组培再生体系,为在簸箕柳中开展功能基因组研究奠定基础。【方法】分别以簸箕柳带腋芽茎段和种子为外植体,比较不同消毒方法、基本培养基类型、光照条件及植物生长调节剂等因素对不同外植体脱分化和再分化能力的影响。【结果】簸箕柳组培基本培养基成分以MS+蔗糖(30 g/L)+Phytagel (植物凝胶)(4.4 g/L)为宜。以幼嫩茎段为外植体,最佳消毒方法为70%(体积分数)酒精处理30 s+20%(质量分数)的次氯酸钠处理10 min,适宜诱导腋芽的生长调节剂组合为6-BA(1 mg/L)+NAA (0.01 mg/L),丛生芽继代增殖的适宜生长调节剂配比为6-BA (0.5 mg/L)+NAA (0.05 mg/L),适宜腋芽生根的生长调节剂组合为IBA (0.2 mg/L)+NAA (0.03 mg/L)。以种子为外植体,最佳消毒方法为70%(体积分数)酒精处理10 s+20%(质量分数)的次氯酸钠处理2 min,光照条件下诱导愈伤组织的生长调节剂配比为6-BA (0.5 mg/L)+NAA (0.3 mg/L),并利用6-BA (0.5 mg/L)+NAA (0.5 mg/L)和6-BA (0.5 mg/L)+NAA (0.8 mg/L)两种组合方式交替使用进行愈伤组织的继代培养;愈伤组织分化成芽的生长调节剂配比为6-BA (0.5 mg/L)+TDZ (0.2 mg/L),生根培养基只需添加NAA (0.01 mg/L)。【结论】以茎段和种子作为外植体,通过不同的再生途径,均可以建立簸箕柳组织培养再生体系。

关键词：簸箕柳组织培养愈伤组织分化再生

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不同生境对银杏雌、雄株嫁接苗叶中聚戊烯醇等成分积累的影响

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南京林业大学学报(自然科学版) 2023年第1期47卷 121-128页

作者：王孟珂国颖汪贵斌苑柯杨晓明国靖南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院

【目的】探究生境对银杏(Ginkgo biloba)叶中聚戊烯醇、可溶性糖、可溶性蛋白和类脂4类代谢产物积累的影响，探索影响代谢产物积累的主要立地因子，为银杏栽培提供理论依据。【方法】采用随机区组试验设计，方差分析、多重比较、相关性... 详细信息

【目的】探究生境对银杏(Ginkgo biloba)叶中聚戊烯醇、可溶性糖、可溶性蛋白和类脂4类代谢产物积累的影响，探索影响代谢产物积累的主要立地因子，为银杏栽培提供理论依据。【方法】采用随机区组试验设计，方差分析、多重比较、相关性分析和逐步回归分析等方法，研究雌株和雄株银杏在7个生境下叶中聚戊烯醇、可溶性糖、蛋白质和类脂等变化规律。【结果】来自不同生境银杏叶中聚戊烯醇、可溶性糖、蛋白质和类脂的含量存在显著差异(P<0.05),来自石家庄地区叶中聚戊烯醇、可溶性糖、可溶性蛋白和类脂的含量最高；聚戊烯醇含量与类脂含量呈极显著正相关关系(P<0.01),但与蛋白质含量呈显著负相关关系(P<0.05);平均最暖月气温是影响银杏叶中聚戊烯醇、可溶性糖、可溶性蛋白和类脂积累的关键环境因子，此外日照时长和土壤中P、K含量对其的积累也具有较大的影响。【结论】环境因素会显著影响银杏叶中代谢产物的含量，温暖的生境有助于聚戊烯醇等类脂类物质的合成与积累。

关键词：银杏生境聚戊烯醇代谢产物积累立地因子

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青钱柳药用优良单株评价与选择

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南京林业大学学报(自然科学版) 2021年第1期45卷 21-28页

作者：田力徐骋炜尚旭岚洑香香南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院

【目的】以青钱柳表型性状作为优良单株第1轮选择依据,结合叶生物活性物质含量进行第2轮选择,再基于年度间稳定性评价进行决选,为青钱柳生物活性物质原料生产提供优良种植材料。【方法】2017年3月,根据植株叶片(叶色、叶形、叶面积)、... 详细信息

【目的】以青钱柳表型性状作为优良单株第1轮选择依据,结合叶生物活性物质含量进行第2轮选择,再基于年度间稳定性评价进行决选,为青钱柳生物活性物质原料生产提供优良种植材料。【方法】2017年3月,根据植株叶片(叶色、叶形、叶面积)、分枝角、冠型(扁平和饱满)等表型性状,结合优良种源进行第1轮优良单株选择;并于当年9月底采收入选单株叶片测定总黄酮、总三萜和多糖含量,评价入选单株的改良潜力并进行第2轮选择。2018年9月对第2轮选择出的优株进行生物活性物质含量年度稳定性评价并进行优良单株决选。【结果】第1轮选择出的36份材料叶片的3种生物活性物质含量均存在显著差异,总黄酮、总三萜和水溶性多糖的改良潜力分别为34.3%、43.43%和36.41%;据此,单指标结合多指标第2轮选择出10株优良单株。比较第2轮选择优株连续两年叶内的活性物质含量,决选出含量稳定的3株优株LC1、LC4和CP3。分析表明,嫩叶红色的表型性状与叶内总黄酮、总三萜含量呈极显著相关;总三萜含量与植株具较大分枝角和饱满冠型分别呈极显著和显著相关关系;但水溶性多糖含量与观测的表型性状无显著相关。【结论】基于青钱柳红色嫩叶、大分枝角和饱满冠型与植株叶内总黄酮、总三萜含量呈显著相关性,可将3种表型特征作为药用优株的选择依据。终选优株LC1、LC4和CP3叶内生物活性物质不仅含量高,而且年度间表达稳定。为了保证高产稳产,需对选择优株进行多点试验并研究其遗传与环境互作效应,以确定其适宜生境和相应的栽培策略。

关键词：表型性状生物活性物质性状相关稳定性评价优树选择

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无机氮素形态对银杏苗期碳氮代谢的影响

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南京林业大学学报(自然科学版) 2019年第2期43卷 197-202页

作者：黄东静曹福亮汪贵斌南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院

【目的】研究不同氮素形态配比施肥对银杏碳氮代谢的影响,为银杏合理施肥提供理论依据。【方法】以1年生银杏实生苗为材料,采用温室盆栽试验,设置5种不同铵硝比[m（NH+4-N）∶m（NO-3-N）]处理,分别为T1（100∶0）、T2（75∶25）、T3（5... 详细信息

【目的】研究不同氮素形态配比施肥对银杏碳氮代谢的影响,为银杏合理施肥提供理论依据。【方法】以1年生银杏实生苗为材料,采用温室盆栽试验,设置5种不同铵硝比[m（NH+4-N）∶m（NO-3-N）]处理,分别为T1（100∶0）、T2（75∶25）、T3（50∶50）、T4（25∶75）和T5（0∶100）,分析了不同处理下银杏叶片全氮、可溶性蛋白、游离氨基酸、全碳、可溶性糖、淀粉和蔗糖含量以及淀粉酶（AMS）、蔗糖合成酶（SS）、蔗糖磷酸合成酶（SPS）、硝酸还原酶（NR）、谷氨酰胺合成酶（GS）和谷氨酸合成酶（GOGAT）活性的变化规律。【结果】随着NO-3-N比例的增加,银杏幼苗叶片碳氮代谢物含量和相关酶活性总体上（除可溶性蛋白含量）呈先增后减的变化趋势。碳氮代谢物方面,T3处理的蔗糖和游离氨基酸含量最高,T4处理的全氮、全碳、可溶性糖、可溶性蛋白、淀粉和蔗糖含量均最高,而T1处理除可溶性蛋白含量外,剩余碳氮代谢物的含量均最低。酶活性方面,T3处理的SS和SPS活性最高,T4处理的AMS、NR、GS和GOGAT活性均最高,而T1处理的AMS、SS和NR活性均最低,T5处理的SPS、GS和GOGAT活性均最低。总体上,T3和T4处理碳氮代谢物含量和酶活性均显著高于其他处理,但T3与T4处理间无显著差异。【结论】NH+4-N和NO-3-N混合施用增强了银杏的碳氮代谢能力,在当前土壤条件下,m（NH+4-N）∶m（NO-3-N）为25∶75时效果最佳,在生产中应根据实际情况进行适当的调整。

关键词：银杏硝态氮铵态氮碳氮代谢

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蜡样芽孢杆菌NJSZ-13菌株诱导马尾松抗松材线虫病研究

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南京林业大学学报(自然科学版) 2022年第4期46卷 53-58页

作者：吴佳雯尹艳楠谈家金郝德君南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院

【目的】蜡样芽孢杆菌NJSZ-13是1株能杀死松材线虫的松树内生细菌，研究该菌株能否诱导马尾松抗松材线虫病，为进一步开发利用该菌株抗松材线虫病提供理论依据。【方法】通过对2年生马尾松苗根部施用NJSZ-13菌株菌悬液和灭活的菌悬液后... 详细信息

【目的】蜡样芽孢杆菌NJSZ-13是1株能杀死松材线虫的松树内生细菌，研究该菌株能否诱导马尾松抗松材线虫病，为进一步开发利用该菌株抗松材线虫病提供理论依据。【方法】通过对2年生马尾松苗根部施用NJSZ-13菌株菌悬液和灭活的菌悬液后4 d再接种松材线虫，以观察不同处理的病情发展。测定该菌诱导处理后4天内和接种松材线虫AMA3虫株后28天内马尾松体内防御相关酶活性的变化。【结果】接种松材线虫后42 d,菌悬液和灭活菌悬液处理诱导马尾松抗松材线虫病的效果达54%和33%,且发病时间延迟。接种NJSZ-13菌株后，马尾松体内丙二醛(MDA)含量减少，过氧化氢酶(CAT)活性降低，而过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)和多酚氧化酶(PPO)活性均显著高于对照；接种松材线虫后，菌悬液和灭活菌悬液处理的马尾松这5种酶活性明显高于未接种菌株的马尾松苗。总体上，菌悬液处理比灭活菌悬液处理的马尾松防御相关酶活性变化显著。【结论】蜡样芽孢杆菌NJSZ-13菌株能诱导马尾松抗松材线虫病，并且菌悬液的诱抗效果最佳。

关键词：内生细菌蜡样芽孢杆菌马尾松诱导抗病性松材线虫

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海水处理对沼泽小叶桦苗木生长和生理的影响

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南京林业大学学报(自然科学版) 2021年第5期45卷 102-108页

作者：佘建炜张康郑旭赵小军程方唐罗忠南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院

【目的】了解沼泽小叶桦(Betula microphylla ***)在海水处理土壤和海水处理叶片两种条件下的生长和生理响应,为耐盐树种的选择与应用提供依据。【方法】用稀释成不同盐度(含盐量)的海水对1.5年生的沼泽小叶桦扦插苗进行根系浇灌和叶片... 详细信息

【目的】了解沼泽小叶桦(Betula microphylla ***)在海水处理土壤和海水处理叶片两种条件下的生长和生理响应,为耐盐树种的选择与应用提供依据。【方法】用稀释成不同盐度(含盐量)的海水对1.5年生的沼泽小叶桦扦插苗进行根系浇灌和叶片喷雾处理。根系浇灌处理的盐度为盆栽基质质量的0%(CK)、0.2%、0.4%、0.6%(质量分数,下同);叶片喷雾处理的盐度为0(CK)、3.07、6.14、15.35 g/L。观察苗木的形态变化,并测定其生长和生理指标。【结果】当用海水处理土壤(根系浇灌)的盐度在0.6%以下、处理叶片(叶片喷雾)的盐度在6.14 g/L以下时,沼泽小叶桦苗所受盐害较小,存活率均为100%。低盐度的海水处理(0.2%)土壤能提高沼泽小叶桦叶片叶绿素含量和可溶性蛋白含量,并促进苗木生长。海水处理土壤和海水处理叶片均导致叶片相对电导率升高,且海水处理叶片的涨幅更大。海水处理土壤条件下的苗木叶片丙二醛(MDA)含量低于CK,海水处理叶片条件下的MDA含量高于CK,但差异均不显著。除高盐度的海水处理(15.35 g/L)叶片外,其他海水处理的苗木叶片SOD活性总体上均低于CK。海水处理后,苗木叶片过氧化物酶(POD)活性在处理早期高于CK,在处理后期低于CK。【结论】沼泽小叶桦能耐受盐度为0.6%的土壤海水浇灌处理或盐度为6.14 g/L的叶片海水喷雾处理,表现出较强的耐盐特性,在滨海盐碱地绿化中具有一定的应用潜力。

关键词：沼泽小叶桦盐胁迫海水处理苗木生长生理特性

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外施24-表油菜素内酯(EBR)对银杏叶片发育和生理特征影响

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南京林业大学学报(自然科学版) 2023年第4期47卷 81-87页

作者：王孟珂杨晓明汪贵斌周婷婷国颖国靖南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院

【目的】通过喷施不同质量浓度的24-表油菜素内酯(EBR),探索外源EBR对银杏(Ginkgo biloba)实生苗生长发育及其生理特征的影响，为银杏栽培提供理论依据。【方法】以1年生银杏半同胞家系为试验材料，采用完全随机区组试验设计，叶面喷施... 详细信息

【目的】通过喷施不同质量浓度的24-表油菜素内酯(EBR),探索外源EBR对银杏(Ginkgo biloba)实生苗生长发育及其生理特征的影响，为银杏栽培提供理论依据。【方法】以1年生银杏半同胞家系为试验材料，采用完全随机区组试验设计，叶面喷施不同浓度(质量浓度0～2.0 mg/L)EBR后，对银杏幼苗生长、叶片光合特性及激素含量进行测定。【结果】外施EBR处理后，银杏实生苗的生长存在显著差异(P<0.05),叶长、叶面积、苗高、叶质量和生物量等均在1.0 mg/L处理下最高，与对照相比分别提高了23.6%、52.6%、140.2%、87.7%和69.1%。1.5和2.0 mg/L EBR处理下银杏净光合速率比对照提高了40.2%和41.5%。银杏叶中双氢玉米素、吲哚丙酸、赤霉毒和脱落酸等内源激素含量在1.5 mg/L处理时达到最大值，而生长素处于最小值。外源EBR处理下，银杏叶中内源油菜素内酯的含量与茉莉酸和吲哚丙酸的含量显著正相关，与玉米素含量之间显著负相关(R>0.5,P<0.05)。【结论】喷施适宜浓度的外源EBR能够提高银杏的净光合速率、调节各内源激素的含量，进而促进茎的伸长生长、叶面积的扩展和叶干质量的积累。

关键词：银杏 24-表油菜素内酯(EBR) 内源激素光合特性

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淹水处理下杨树不同无性系苗木根系形态变化

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南京林业大学学报(自然科学版) 2019年第5期43卷 1-8页

作者：赵小军程方张康黄开栋倪云孟晓唐罗忠南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院

【目的】了解淹水处理下不同杨树无性系苗木根系的形态变化规律,揭示杨树对淹水胁迫的根系适应策略,为筛选耐水的杨树无性系提供依据。【方法】选用3804杨、1388杨、895杨、110杨和328杨5个杨树无性系,设置对照、渍水和淹水3种处理,测... 详细信息

【目的】了解淹水处理下不同杨树无性系苗木根系的形态变化规律,揭示杨树对淹水胁迫的根系适应策略,为筛选耐水的杨树无性系提供依据。【方法】选用3804杨、1388杨、895杨、110杨和328杨5个杨树无性系,设置对照、渍水和淹水3种处理,测定苗木根系的生物量、长度、数量、表面积、体积等指标。【结果】①渍水处理下杨树根生物量与对照无显著差异,但淹水处理下的根生物量却显著小于对照。②渍水和淹水处理下的多数杨树无性系苗木一级根数量与对照之间没有显著差异,但总根长、总根投影面积、总根表面积和总根体积却大于对照。③与对照相比,渍水和淹水处理下的杨树苗木根系平均直径有所减小,但根尖数、分叉数和交叉数却增大。④主成分分析提取出的2个主成分累积贡献率为88.58%,可较好地反映杨树苗木根系形态特征。【结论】隶属函数法分析表明,在渍水处理下5个杨树无性系根系形态表现的优劣顺序是1388杨>895杨>3804杨>110杨>328杨;在淹水处理下的优劣顺序是1388杨>895杨>110杨>328杨>3804杨。所以,从根系形态表现看,1388杨和895杨的耐水性较强。

关键词：杨树无性系渍水处理淹水处理根系形态综合评价

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杨小舟蛾MtroOBP1基因的克隆、序列分析及表达

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南京林业大学学报(自然科学版) 2020年第5期44卷 215-221页

作者：张雨丰凯汤方南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院

【目的】气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)是一种嗅觉相关的蛋白,该蛋白参与大多数气味分子的识别过程,并与气味分子相结合。获得杨小舟蛾[Micromelalopha troglodyta (Graeser)]OBPs以明确其特性。【方法】选择羽化后健康... 详细信息

【目的】气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)是一种嗅觉相关的蛋白,该蛋白参与大多数气味分子的识别过程,并与气味分子相结合。获得杨小舟蛾[Micromelalopha troglodyta (Graeser)]OBPs以明确其特性。【方法】选择羽化后健康的杨小舟蛾触角为模板,通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术克隆杨小舟蛾MtroOBP1基因,利用生物信息学分析软件研究其基因序列和蛋白结构,运用实时荧光定量PCR(qPCR)技术研究MtroOBP1的组织表达模式。【结果】利用RT-PCR技术从杨小舟蛾触角总RNA中扩增得到MtroOBP1基因(GenBank登录号:MN056510),序列分析表明,MtroOBP1开放阅读框为777 bp,一共编码了258个氨基酸残基,且翻译的氨基酸序列仅含有4个保守的半胱氨酸位点,表明得到的OBP基因的编码蛋白不属于典型气味结合蛋白家族,而是属于Minus-C家族。蛋白质理化性质预测显示:MtroOBP1蛋白的分子量为29 66457 u,等电点为6.23,有18个潜在的磷酸化位点,没有明显的跨膜区,疏水指数为-2.011～3.078,有一个由19个氨基酸组成的信号肽,说明为分泌型蛋白。组织表达模式表明MtroOBP1在杨小舟蛾的各部位都表达,但在触角中表达量最高。【结论】首次克隆得到杨小舟蛾MtroOBP1基因,在触角中高表达,推测其蛋白具有运输气味分子的功能,在杨小舟蛾的嗅觉识别中起着至关重要的作用。

关键词：杨小舟蛾 MtroOBP1基因基因克隆嗅觉系统组织表达谱

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