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汕头大学医学院学报 2015年第2期28卷 90-93页

作者：刘少辉霍霞张志奇章伟利徐锡金汕头大学医学院环境医学与发育毒理学实验室广东汕头515041 汕头大学医学院汕头大学医学院细胞生物学与遗传学教研室广东汕头515041

目的:探讨汕头地区男性不育者精液质量状况。方法:对汕头地区1 221例男性不育者精液进行常规分析。结果:精液常规质量参数全部正常24.9%,异常75.1%。本组无精症者10.4%,精液p H值异常26.1%,精液液化时间大于30 min77.2%,精液粘稠度异常3... 详细信息

目的:探讨汕头地区男性不育者精液质量状况。方法:对汕头地区1 221例男性不育者精液进行常规分析。结果:精液常规质量参数全部正常24.9%,异常75.1%。本组无精症者10.4%,精液p H值异常26.1%,精液液化时间大于30 min77.2%,精液粘稠度异常36.9%,畸形率>20 68.1%,精子活力(a+b)级≤50 48.0%;正常与异常精液的精液量、精子密度、活动率和活力等差异有统计学意义(P<0.001)。结论:汕头地区男性不育者主要以精子畸形率偏高,活力降低为主,且精子活率、活力、畸形率和密度等质量指标受年龄、精液量、精液粘稠度和液化时间的影响。

关键词：精液质量分析男性不育汕头

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肝配蛋白B2在牙龈卟啉单胞菌诱导单核细胞黏附人脐静脉内皮细胞中的作用

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中华口腔医学杂志 2014年第10期49卷 614-618页

作者：张彩霞宋洁徐杨吴娟孙卫斌李宽钰南京大学医学院细胞生物学与遗传学教研室·江苏省医学分子技术重点实验室 210093

目的检测肝配蛋白B2 （erythropoietin producing hepatomocellular receptor interacting protein B2,Ephrin B2）及其受体在单核细胞THP-1黏附人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）中的作用,揭示牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,Pg）感染增强THP-1黏附HUVEC的分子机制.方法应用厌氧罐培养Pg,以感染复数1∶100感染人单核细胞株THP-1,感染8和24 h后,收集部分样品分别用于检测THP-1细胞Ephrin B2及其受体表达水平的变化;其余样品与转染空载体或过表达Ephrin B2的HUVEC细胞共培养,用实时荧光定量和蛋白质印迹法检测HUVEC细胞Ephrin B2的表达水平,并观察Ephrin B2对THP-1与HUVEC黏附的影响.结果 Pg感染24 h后,THP-1细胞Ephrin B2受体EphB3、EphB4和EphA4的mRNA表达水平分别提高至5.169±0.152、11.040± 1.195和4.976±0.122,与未感染对照组（结果数据为1）相比差异均有统计学意义（P＜0.01）;与经Pg感染的THP-1共培养后,HUVEC细胞Ephrin B2的表达提高至8.938±0.962,与未感染对照组相比差异均有统计学意义（P=0.008）;不经过感染,HUVEC直接过表达Ephrin B2后,THP-1对HUVEC黏附性显著增加.结论感染Pg的THP-1黏附HUVEC的数量增多与Ephrin B2及其受体的相互作用有关,提示动脉血管内皮细胞特异性表达的Ephrin B2分子参与动脉粥样硬化的发生.

关键词：紫单胞菌龈单核细胞内皮细胞促红细胞生成素产生的肝细胞受体-肝配蛋白B2

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牙龈卟啉单胞菌感染对单核细胞与人脐静脉内皮细胞黏附的影响

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中华口腔医学杂志 2014年第3期49卷 151-154页

作者：张彩霞宋洁黎景景高鑫孙卫斌李宽钰南京大学医学院细胞生物学和遗传学教研室·江苏省医学分子技术重点实验室 210093

目的观察牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gigivalis,Pg）感染单核细胞后是否增加单核细胞对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）的黏附并探讨其分子机制,为从牙周病的角度预防动脉粥样硬化的发生提供新... 详细信息

目的观察牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gigivalis,Pg）感染单核细胞后是否增加单核细胞对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）的黏附并探讨其分子机制,为从牙周病的角度预防动脉粥样硬化的发生提供新的研究思路.方法应用厌氧罐培养Pg,以感染复数为1∶100感染人单核细胞株THP-1.感染0（对照组）、8和24h后与HUVEC共培养1h,去除未黏附的THP-1后观察THP-1对HUVEC的黏附,再培养23 h后用酶联免疫吸附测定法检测相应细胞因子的表达及黏附分子的变化.结果 Pg感染24h后,THP-1对HUVEC的黏附较对照组提高了13.8％～35.2％（P =0.006）;细胞间黏附分子1的表达量[（164.9±9.1） ng/L]显著高于对照组[（132.5±7.7） ng/L] （P =0.005）;单核细胞趋化蛋白1的分泌量[（221.0±4.9）ng/L]显著高于对照组[（183.2±3.1）ng/L]（P=0.012）;细胞分泌白细胞介素8的量[（787.2±10.3） ng/L]亦显著高于对照组[（587.2±5.1）ng/L] （P=0.002）.结论 Pg感染促进单核细胞与HUVEC的黏附;Pg感染可能是动脉粥样硬化发生的危险因素.

关键词：紫单胞菌,龈单核细胞内皮细胞细胞粘附分子

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精子DNA完整性和hOGG1 rs1052133与原发性男性不育的相关性研究

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中国男科学杂志 2015年第9期29卷 18-23页

作者：马强申琴焦海燕宁夏医科大学医学遗传学与细胞生物学系银川750004 川北医学院附属医院检验科宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室

目的探讨人类8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶（human 8-hydroxyguanine deoxyribonucleic acid glycosidase,hOGG1）基因rs1052133（Cys326Ser）及精子DNA完整性对原发性男性不育的影响。方法收集2011年8月至2012年12月间在宁夏医科大学总医院就诊的332例原发性男性不育患者和329例健康体检者分别作为病例组和对照组，采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术检测两组人群西OGG1 rs1052133基因型；采用精子染色质扩散实验（SCD）检测病例组和对照组精子DNA损伤程度。分析精子DNA完整性与精液参数的相关性以及hOGG1 rs1052133不同基因型与原发性男性不育的相关性以及对精子DNA完整性的影响。结果原发性男性不育患者精子DNA碎片指数（DFI）高于对照组；原发性男性不育患者精子DFI与前向运动精子和非前向运动精子呈负相关（r=-0．35和-0．13，P〈0．05），与不动精子呈正相关（r=0．24，P〈0．05）；携带hOGG1 rs1052133CC基因型的个体患原发性少弱精子症的风险是携带GG型个体的1．93倍。rs1052133与吸烟和饮酒与原发性男性不育的发病风险无交互作用，同时该位点三种不同基因型的患者间精子DFI差异无统计学意义。结论原发性男性不育患者精子DNA完整性降低，并且精子DNA损伤可导致精液质量下降，是原发性男性不育的病因之一。hOGG1 rs1052133CC基因型可能是原发性男性不育的危险因素，但该位点可能不影响精子DNA完整性。

关键词：人类8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶多态性单核苷酸不育男性

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利用靶向二代测序技术对一个Alport综合征家系进行基因突变分析

利用靶向二代测序技术对一个Alport综合征家系进行基因突变分析

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第十四次全国医学遗传学学术会议

作者：陈晨卢超霞王琼曹丽华罗阳张学中国医科大学医学基因组学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院医学遗传学系

目的:Alport综合征(Alport syndrome,AS)是一种遗传性肾病,以血尿,进行性肾功能衰竭,感音神经性耳聋和眼部异常为主要特征,其致病基因是分别编码Ⅳ型胶原α3,α4和α5链的COL4A3,COL4A4和COL4A5基因。Ⅳ型胶原是肾小球基底膜的主要成分... 详细信息

目的:Alport综合征(Alport syndrome,AS)是一种遗传性肾病,以血尿,进行性肾功能衰竭,感音神经性耳聋和眼部异常为主要特征,其致病基因是分别编码Ⅳ型胶原α3,α4和α5链的COL4A3,COL4A4和COL4A5基因。Ⅳ型胶原是肾小球基底膜的主要成分,因此上述基因的突变,均可影响Ⅳ型胶原的折叠、分泌及基质形成等分子生物学功能,从而引起AS。方法:我们利用Ion AmpliseqTM Inherited Disease Panel,通过靶向二代测序技术进行包括COL4A3,COL4A4和COL4A5基因在内的328个基因的突变筛查,针对可疑突变进行Sanger测序验证及进一步的RNA水平分析。结果:靶向二代测序区域未直接检测到致病突变,但我们在分析原始数据中发现COL4A5基因外显子4,10,17,20,21,37和45未被Disease Panel的探针完全覆盖,Sanger测序验证以上区域,发现先证者COL4A5基因内含子9存在剪接突变c.547-3C>A,其母亲该位点为杂合突变。经RNA提取及cDNA测序分析显示先证者发生COL4A5基因外显子1 0跳跃,整码缺失21个氨基酸。结论:本研究首次发现COL4A5基因的一个新剪接突变,导致外显子10缺失,据此分析在蛋白水平Ⅳ型胶原α5链将丢失7个典型的Gly—X-Y结构,很可能影响胶原分子的构象、弹性及组装。综上,我们利用二代测序技术检测到X连锁Alport综合征家系的致病突变,并在RNA水平验证了该突变导致的外显子跳跃,帮助确定临床诊断,并为后续的遗传咨询和产前诊断提供可靠依据。

关键词：先证者靶向二代测序 Alport 综合征基因突变分析

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BAMBI基因过表达人结肠癌细胞移植斑马鱼致肝转移模型的构建

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中华临床医师杂志（电子版） 2015年第21期9卷 88-92页

作者：崔戈谢珊珊张婷李芳张晓涓桂建芳周天华冯文明湖州师范学院附属第一医院中心实验室浙江省313000 浙江大学医学院基础医学系细胞生物学教研室杭州310058 湖州师范学院医学院病理学教研室浙江省313000 中国科学院水生生物研究所鱼类生物学及渔业生物技术研究中心鱼类发育遗传学与细胞工程学学科组武汉430072

目的构建BAMBI基因过表达人结肠癌细胞移植斑马鱼肝转移模型,分析斑马鱼肝内转移性结肠癌细胞BAMBI基因表达水平与肝转移发生率的关联性。方法分别构建BAMBI过表达稳转结肠癌细胞株SW620(BAMBI+组)、空载体红色荧光蛋白基因转染结肠癌... 详细信息

目的构建BAMBI基因过表达人结肠癌细胞移植斑马鱼肝转移模型,分析斑马鱼肝内转移性结肠癌细胞BAMBI基因表达水平与肝转移发生率的关联性。方法分别构建BAMBI过表达稳转结肠癌细胞株SW620(BAMBI+组)、空载体红色荧光蛋白基因转染结肠癌细胞株SW620(EV组),分别显微注射到受精后第2天转基因斑马鱼Tg(Apo14∶GFP)胚胎卵黄囊(每组各680条),激光共聚焦荧光显微镜观察、拍摄,采用Image J软件测量转移至斑马鱼肝脏内结肠癌细胞红色荧光表达强度,计算肝转移发生率;采用t检验比较BAMBI+组及EV组斑马鱼肝脏内结肠癌细胞红色荧光表达强度及肝转移发生率的差异。结果与EV组相比,激光共聚焦荧光显微观察显示BAMBI+组斑马鱼肝内结肠癌细胞红色荧光表达量显著增加(t=6.247,P=0.003 3);BAMBI+组斑马鱼肝转移发生率与EV组相比显著增加(t=4.276,P=0.012 9)。结论构建了基因修饰人结肠癌细胞移植斑马鱼致肝转移模型,可较好地模拟活体状态的结肠癌肝转移;BAMBI基因可促进异种移植入斑马鱼的结肠癌细胞发生肝转移。

关键词：结肠肿瘤肝转移斑马鱼模型 BAMBI

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丹参酮ⅡA对人肾小球系膜细胞晚期糖化终产物受体表达及氧化应激水平的影响研究

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中国全科医学 2014年第30期17卷 3585-3589页

作者：蔡伟徐积兄朱凌燕肖钧仁李刚南昌大学医学院医学遗传与细胞生物学教研室江西省南昌市330006 南昌大学第一附属医院内分泌科

目的探讨丹参酮ⅡA(TanⅡA)对晚期糖化终末产物(AGE)诱导人肾小球系膜细胞(HMCs)的晚期糖化终末产物受体(RAGE)表达和氧化应激水平的影响。方法常规方法培养HMCs,分为:对照组;AGE组〔晚期糖化终末产物牛血清清蛋白(AGE-BSA)1.0、10.0、5... 详细信息

目的探讨丹参酮ⅡA(TanⅡA)对晚期糖化终末产物(AGE)诱导人肾小球系膜细胞(HMCs)的晚期糖化终末产物受体(RAGE)表达和氧化应激水平的影响。方法常规方法培养HMCs,分为:对照组;AGE组〔晚期糖化终末产物牛血清清蛋白(AGE-BSA)1.0、10.0、50.0、100.0μg/ml〕;AGE+TanⅡA组(AGE-BSA50.0μg/ml,TanⅡA 0、0.1、1.0、5.0、10.0μg/ml),以GAPDH为内参照,分别采用Western blotting和实时定量PCR法检测RAGE和mRNA表达水平,同时检测细胞培养上清液超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)水平。结果对照组与不同浓度AGE组HMCs RAGE和mRNA表达比较,差异均有统计学意义(F值分别为4.428和5.031,P<0.05);其中与对照组比较,10.0、50.0、100.0μg/ml AGE组HMCs RAGE和mRNA表达水平升高(P<0.05)。对照组与AGE+不同浓度TanⅡA组HMCs RAGE和mRNA表达比较有差异(F值为5.002和5.312,P<0.05);其中与AGE+0μg/ml TanⅡA组比较,对照组、AGE+0.1μg/ml TanⅡA组、AGE+1.0μg/ml TanⅡA组、AGE+5.0μg/ml TanⅡA组、AGE+10.0μg/ml TanⅡA组HMCs RAGE和mRNA表达降低(P<0.05)。对照组与不同浓度AGE组及AGE+TanⅡA组上清液SOD、GSH-Px和MDA水平比较有差异(P<0.05)。结论 TanⅡA能够明显降低AGE诱导HMCs RAGE和mRNA的表达水平,同时氧化应激水平也得到明显改善。

关键词：丹参酮晚期糖化终产物受体氧化性应激肾小球系膜细胞

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TCF7 L2基因单核苷酸多态性与2型糖尿病研究现状

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中华内分泌外科杂志 2014年第6期8卷 467-468,490页

作者：王玉萍赵潇溟金艳花杨康鹃延边大学附属医院中心实验室延吉133002 延边大学医学院细胞生物学与医学遗传学教研室延吉133002

2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）是一种具有明显异质性的多基因遗传病，又称为复杂性疾病（ complex disease），胰岛素抵抗（insulin resistance，IR）或胰岛素分泌相对不足而引起慢性高血糖构成其发病主要原因。 T2DM受... 详细信息

2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）是一种具有明显异质性的多基因遗传病，又称为复杂性疾病（ complex disease），胰岛素抵抗（insulin resistance，IR）或胰岛素分泌相对不足而引起慢性高血糖构成其发病主要原因。 T2DM受环境、遗传、饮食、种族、年龄、生活方式等多种因素的影响，而遗传因素在其发生发展中起着重要作用。2006年Grant等首次发现了核转录因子7类似物2（variant of transcrip-tion factor 7 like 2， TCF7L2）基因的微卫星 DG10S478与T2DM显著相关，更多的相关研究陆续展开，并得出一致结论：TCF7L2是 T2DM 发生高度相关的易感基因。本文就TCF7L2基因SNPs与T2DM相关性研究现状进行综述。

关键词：多基因遗传病 2型糖尿病单核苷酸多态性 insulin T2DM 胰岛素抵抗复杂性疾病慢性高血糖

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基于遗传编码代谢物探针的抗肿瘤药物筛选

基于遗传编码代谢物探针的抗肿瘤药物筛选

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第十一届CST细胞生物学青年论坛

作者：赵玉政呼庆勋程飞雄苏倪王傲雪邹叶君胡晗阳陈显军周海梦黄心智杨凯朱倩王雪易静朱麟勇钱旭红陈立新唐赟 Joseph Loscalzo 杨弋合成生物学与生物技术实验室生物反应器工程国家重点实验室上海生物生产技术协同创新中心中国上海华东理工大学200237梅陇路130号光遗传学&分子成像交叉学科研究中心脑科学卓越人才CAS中合成生物学与生物技术实验室生物反应器工程国家重点实验室上海生物生产技术协同创新中心中国上海华东理工大学200237梅陇路130号药学院上海市新药设计重点实验室中国上海华东理工大学200237梅陇路130号合成生物学与生物技术实验室生物反应器工程国家重点实验室上海生物生产技术协同创新中心中国上海华东理工大学200237梅陇路130号光遗传学&分子成像交叉学科研究中心脑科学卓越人才CAS中浙江省应用酶学重点实验室中国嘉兴清华大学长三角研究院院314006 生物化学与分子细胞生物学系细胞分化与凋亡教育部重点实验室上海交通大学医学院中国上海重庆南路280号200025 合成生物学与生物技术实验室生物反应器工程国家重点实验室上海生物生产技术协同创新中心中国上海华东理工大学200237梅陇路130号光遗传学&分子成像交叉学科研究中心脑科学卓越人才CAS中结构可控先进功能材料及其制备教育部重点实验室精细化工研究所中国上海华东理工大学梅陇路130号200237 上海市化学生物学重点实验室中国上海华东理工大学200237 上海市实验动物中心中国科学院中国上海201615 哈佛大学医学院布莱根女子医院医学系美国波士顿MA 02115

70多年前诺贝尔奖获得者沃贝格(Warburg)就提出癌症是一种代谢性疾病，但是直到最近几年来Warburg效应才获得了重视，越来越多的研究显示癌细胞内代谢发生了剧烈的变化，增加对肿瘤细胞代谢改变的本质理解，通过控制这些代谢，使之回到... 详细信息

70多年前诺贝尔奖获得者沃贝格(Warburg)就提出癌症是一种代谢性疾病，但是直到最近几年来Warburg效应才获得了重视，越来越多的研究显示癌细胞内代谢发生了剧烈的变化，增加对肿瘤细胞代谢改变的本质理解，通过控制这些代谢，使之回到正常细胞，将是一种全新的癌症治疗策略。然而利用传统的酶学、色谱或者质谱测定等生化分析方法来研究代谢，存在着重要的技术瓶颈。

关键词：细胞代谢遗传编码代谢物探针药物筛选

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调控天然免疫系统促进丙肝病毒在人胚胎干细胞来源的肝脏细胞中的感染和复制

调控天然免疫系统促进丙肝病毒在人胚胎干细胞来源的肝脏细胞中的...

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广东省遗传学会第九届代表大会暨学术研讨会

作者：周小玲孙平楠汕头大学医学院细胞生物学与遗传学教研室广东省感染病与分子免疫病理重点实验室

肝炎性病毒感染严重影响着人类生命健康,但迄今仍缺乏能真实反映病毒与宿主之间相互作用的研究模型。建立能够真实反映肝炎性病毒与人肝脏细胞相互作用的细胞模型对肝炎性病毒致病机制和抗病毒新药的开发具有重要意义。我们开展了应用... 详细信息

肝炎性病毒感染严重影响着人类生命健康,但迄今仍缺乏能真实反映病毒与宿主之间相互作用的研究模型。建立能够真实反映肝炎性病毒与人肝脏细胞相互作用的细胞模型对肝炎性病毒致病机制和抗病毒新药的开发具有重要意义。我们开展了应用人胚胎干细胞定向分化获得的肝脏细胞建立肝炎病毒感染模型的研究,成功的应用人胚胎干细胞建立了HCV感染复制体外模型,该模型能够支持HCV完整的生命周期(包括新产生病毒的释放)。研究发现HCV的感染在该模型中产生了很强的III型干扰素反应,因此推测这可能导致了HCV在该感染模型中的效率比肝癌细胞系Huh7低。当用特异性的抑制剂抑制JAK/STAT信号通路(主要的干扰素通路)后,HCV的感染和复制效率显著提高。然而同样的处理对Huh7并没有明显的效果。这一新模型的建立为深入研究肝炎性病毒和宿主之间的相互作用提供了强有力的支持。

关键词：丙型肝炎病毒(HCV) 人胚胎干细胞肝脏细胞感染复制

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