人类WNK4(Human With No lysine[K]kinase 4,hWVK4)基因编码一种特殊类型的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,该基因的错义突变可导致一种遗传性高血压——Ⅱ型假性低醛固酮血症(Pseudohypoaldosteronism typeⅡ,PHAⅡ,OMIM,No.145260),其主要临...
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人类WNK4(Human With No lysine[K]kinase 4,hWVK4)基因编码一种特殊类型的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,该基因的错义突变可导致一种遗传性高血压——Ⅱ型假性低醛固酮血症(Pseudohypoaldosteronism typeⅡ,PHAⅡ,OMIM,No.145260),其主要临床表现为高血压和高血钾。研究表明WNK4激酶主要表达在肾脏,通过调节肾脏远曲小管和集合管上的多种离子转运体和离子通道参与机体水盐代谢和血压调节。目前关于hWK4基因的研究主要集中在功能方面,而hWNK4基因表达调控机制研究较少。生物信息学分析显示hWNK4基因近端启动子区未见典型的TATA盒,但富含GC序列和一些潜在的转录因子作用元件,如Sp1、AP-1和C/EBP等。为检验转录因子Sp1是否参与hWNK4基因表达调控,本研究选用人胚肾细胞系HEK293细胞为细胞模型,应用不同浓度的Sp1特异性抑制剂Mithramycin A处理细胞,24小时后收集细胞,提取RNA,紫外分光光度计检测标本RNA纯度和浓度后,利用试剂盒将mRNA反转录成cDNA,采用Real-time PCR技术检测处理前后HEK293细胞中WVK4基因mRNA表达水平变化情况。结果显示Mithramycin A负性调节HEK293细胞中WNK4基因mRNA表达,且随着Mithramycin A作用浓度增大,下调效应增强,具有浓度依赖性。该结果提示转录因子Sp1可能参与WNK4基因表达调控。
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