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郑州大学学报（医学版） 2008年第6期43卷 1117-1119页

作者：程晓丽温雯静刘晓东赵国强曾昭书郑红连建华薛长贵郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院寄生虫学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院解剖学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院法医学教研室郑州450001

目的:对河南分离株阴道毛滴虫铁氧还蛋白(Fd)基因突变进行检测分析。方法:采用改良法提取阴道毛滴虫全基因组DNA,应用特异性引物对Fd基因进行扩增,随机选取河南省内5个地区来源的10个虫株的Fd基因扩增片段直接进行双向测序,应用Chromas... 详细信息

目的:对河南分离株阴道毛滴虫铁氧还蛋白(Fd)基因突变进行检测分析。方法:采用改良法提取阴道毛滴虫全基因组DNA,应用特异性引物对Fd基因进行扩增,随机选取河南省内5个地区来源的10个虫株的Fd基因扩增片段直接进行双向测序,应用Chromas和Clustalx软件对测序结果进行分析,将测序所得Fd基因核苷酸序列与GenBank中的Fd基因(M33717)进行比对,对所得Fd基因的同源性进行分析。结果:河南省内5个地区来源的Fd基因的核苷酸序列无差异,与Fd基因(M33717)对比,在第200位发生碱基插入,插入碱基为ctg,与Fd基因M33717的同源性为99%。结论:经NIHGenBank基因命名委员会认定,本研究中Fd基因为新型基因,收录编号为EU652852。

关键词：阴道毛滴虫 DNA测序铁氧环蛋白

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同时沉默Livin基因和MTA1基因的siRNA载体的构建

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郑州大学学报（医学版） 2008年第2期43卷 202-205页

作者：杨松华赵国强郑红李月白赵继敏冯龙董子明郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院生物化学教研室郑州450001

目的:构建同时沉默Livin基因和MTA1基因的小干扰RNA(siRNA)载体。方法:设计Livin和MTA1的siRNA靶序列,合成它们互补的寡核苷酸链,分别退火后重组入pRNAT-U6.2载体,得到pRNAT-U6.2-Livin和pR-NAT-U6.2-MTA1。AccⅡ和XhoⅠ酶切pRNAT-U6.2-MTA1,回收475bp的MTA1siRNA单元,然后与XhoⅠ和PmeⅠ酶切线形化的pRNAT-U6.2-Livin重组,得到pRNAT-U6.2-Livin-MTA1,后者用脂质体包被转染人食管癌细胞EC9706,采用RT-PCR法分别检测转染细胞Livin和MTA1基因mRNA的表达情况。结果:针对Livin基因和MTA1基因的siRNA的双链寡核苷酸片段分别克隆入pRNAT-U6.2载体,经测序分析插入片段正确。PCR扩增证实MTA1siRNA单元重组入pRNAT-U6.2-Livin。RT-PCR检测显示,转染pRNAT-U6.2-Livin-MTA1的EC9706细胞Livin基因和MTA1基因mRNA表达水平皆明显降低。结论:同时沉默Livin基因和MTA1基因表达的siRNA载体构建成功。

关键词： RNA干扰 Livin MTA1 载体构建

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基于社区水平的珠海市大人群地中海贫血的遗传筛查和产前诊断

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中华医学遗传学杂志 2008年第3期25卷 256-261页

作者：周玉球莫秋华卢金汉李莉艳梁雄贾世奇肖鸽飞周万军肖奇志徐湘民广东省珠海市妇幼保健院/珠海市医学遗传研究所 519001 南方医科大学基础医学院医学遗传学教研室

目的阐述在广东省珠海市开展基于社区的控制重型α和β地中海贫血（简称地贫）的预防模式。方法构建由6家医院组成的二级地贫遗传服务网络，以珠海市婚前医学或产前检查人群作为筛查对象，采用常规杂合子筛查策略，以标准的血液学分析... 详细信息

目的阐述在广东省珠海市开展基于社区的控制重型α和β地中海贫血（简称地贫）的预防模式。方法构建由6家医院组成的二级地贫遗传服务网络，以珠海市婚前医学或产前检查人群作为筛查对象，采用常规杂合子筛查策略，以标准的血液学分析流程进行α和β地贫特征的筛查。对所有地贫疑诊对象进行随访和遗传咨询，并采用基于PCR的分子诊断技术对高风险夫妇进行确诊。在知情同意和选择的情况下，对高风险妊娠实施产前基因诊断并通过选择性引产淘汰受累的重型地贫胎儿。结果从1998年1月至2005年12月，共筛查了85522例拟婚育龄青年和10439例孕妇，婚检地贫筛查覆盖率达到71.38％。在6563例地贫筛查阳性的病例中，α和β地贫分别为4312例（4.5％）和2251例（2．3％）；总计发现148对有生育重型地贫儿可能的高风险夫妇（α地贫103对，β地贫45对），其中有142对（95．9％）高风险夫妇进行了产前诊断（α地贫98例，β地贫44例）。本项目启动后共减少了41例重型地贫患儿的出生，其中包括HbBarts水肿胎23例、HbH病4例和重型肛地贫14例。结论这是我国首次基于社区水平的、在拥有129万人口的珠海市实施的前瞻性α和β地贫预防监控计划。这一预防模式对我国其他地贫高发区和其他发展中国家开展地贫和其他血红蛋白病的预防有着重要的借鉴意义。

关键词：社区医学地中海贫血遗传筛查产前诊断预防计划

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MUS81基因在喉癌中的突变和表达

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中华医学遗传学杂志 2008年第5期25卷 560-565页

作者：李婵媛王淑云袁海明李巍李子政李晓渝郭星李福才中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室沈阳110001 中国医科大学附属第一临床学院耳鼻喉科

目的探讨MUS81基因突变和表达与喉癌发生发展的相关性。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析技术结合DNA测序检测分析了42例喉癌患者MUS81基因第9、10外显子的突变；应用半定量逆转录-PCR和Western印迹方法分析MUS81基因在喉癌组... 详细信息

目的探讨MUS81基因突变和表达与喉癌发生发展的相关性。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析技术结合DNA测序检测分析了42例喉癌患者MUS81基因第9、10外显子的突变；应用半定量逆转录-PCR和Western印迹方法分析MUS81基因在喉癌组织中的表达情况。结果42例喉癌、癌旁组织标本中，癌旁正常组织均无突变，喉癌组织标本中19例发生突变，占45．2％（19／42），11例喉癌组织第9外显子发现有突变，占26．2％（11／42），8例喉癌组织第10外显子有突变，占19％（8／42），分析表明具有统计学意义（P〈0．01）。逆转录．PCR结果表明，42例喉癌中有17例MUS81基因mRNA低表达，占40．48％（17／42）。Western印迹方法分析结果表明，42例喉癌中有17例MUS81蛋白质低表达，占40．48％（17／42），经统计学分析肿瘤组与对照组差异有统计学意义（P〈0．01）。分析表明MUS81基因突变与mRNA和蛋白质低表达有显著相关性（P〈0．01）。统计结果显示喉癌MUS81基因突变与TNM分期、年龄和淋巴结转移无相关性（P〉0．05）。MUS81基因低表达与TNM分期、年龄和淋巴结转移无相关性（P〉0．05）。结论发现MUS81基因在喉癌组织中有突变发生及表达异常，提示MUS81基因突变和表达异常可能是喉癌发生及发展的重要因素之一。

关键词：喉鳞状细胞癌 MUS81基因聚合酶链反应-单链构象多态性

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儿童哮喘与诱导型一氧化氮合酶基因5′调控区(CCTTT)n缺失关系研究

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中国实用儿科杂志 2008年第4期23卷 260-262页

作者：靳秀红王群思沈照波李晓文郑州市儿童医院呼吸科河南郑州450053 郑州大学基础医学院医学遗传学教研室河南郑州450052

目的探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因与哮喘的关系。方法2005年1月至9月,在郑州市儿童医院应用聚合酶链反应(PCR)扩增其短串联重复序列,对扩增产物进行聚丙烯酰胺变性凝胶电泳检测,银染显色并分析结果。结果(1)iNOS基因5′调控区(CCTT... 详细信息

目的探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因与哮喘的关系。方法2005年1月至9月,在郑州市儿童医院应用聚合酶链反应(PCR)扩增其短串联重复序列,对扩增产物进行聚丙烯酰胺变性凝胶电泳检测,银染显色并分析结果。结果(1)iNOS基因5′调控区(CCTTT)n短串联重复序列PCR检测结果:该序列在77例哮喘患儿有63例缺失,在102例正常对照组中有25例缺失,差异有统计学意义。(2)iNOS基因该序列缺失与哮喘患儿病情的严重程度有关。(3)iNOS基因该序列缺失与哮喘患儿年龄无关。结论儿童支气管哮喘患者存在iNOS基因5′调控区(CCTTT)n短串联重复序列缺失,与正常儿童差异有统计学意义。iNOS基因5′调控区(CCTTT)n短串联重复序列与儿童支气管哮喘和病情严重程度有关。

关键词：诱导型一氧化氮合酶哮喘短串联重复序列

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两种中药配伍抗诱变作用的比较

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西安交通大学学报（医学版） 2008年第3期29卷 353-353,F0004页

作者：祝威刘洋付涛张桐菲刘冰吉林大学第一医院耳鼻喉科吉林大学基础医学院医学遗传学教研室英国格拉斯哥大学生物医学与生命科学研究所

目的观察及对比抗诱变中药人参、五加皮、猪苓、甘草(配伍1)及人参、五加皮、茯苓、当归(配伍2)的抗诱变作用。方法以诱变剂敏感性与肿瘤易感性关系的理论为依据,采用诱变剂敏感性实验方法,取正常人外周血淋巴细胞进行培养,比较各实验... 详细信息

目的观察及对比抗诱变中药人参、五加皮、猪苓、甘草(配伍1)及人参、五加皮、茯苓、当归(配伍2)的抗诱变作用。方法以诱变剂敏感性与肿瘤易感性关系的理论为依据,采用诱变剂敏感性实验方法,取正常人外周血淋巴细胞进行培养,比较各实验组的染色体断裂率(b/c:每分裂相染色单体的断裂数),观察并比较两种配伍的抗诱变效果。结果配伍1、配伍2抗诱变组与对照组之间差异无统计学意义(P>0.05),配伍1、配伍2抗诱变组与博来霉素处理组之间差异有统计学意义(P<0.01),但两配伍组相比较,无明显差异。结论配伍1、配伍2具有良好的抗诱变作用且本身不具有诱变作用,对肿瘤易感人群具有保护作用。

关键词：抗诱变中药配伍诱变剂敏感性

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小檗胺对K562细胞增殖和凋亡的影响

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郑州大学学报（医学版） 2008年第6期43卷 1154-1156页

作者：申琦赵攀付春景黄幼田张艳艳李继成郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室郑州450001 北京大学医学部病理生理学教研室北京100083 郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450001 郑州大学药学院郑州450001

目的:探讨小檗胺(BBM)对K562细胞增殖及凋亡的影响及其可能机制。方法:K562细胞分为5组,前4组为实验组,分别加入终浓度为0.8、8.0、40.0、80.0 mg/L的BBM,对照组加入等量RPMI 1640,分别作用不同时间后,采用MTT法检测BBM对K562细胞增殖... 详细信息

目的:探讨小檗胺(BBM)对K562细胞增殖及凋亡的影响及其可能机制。方法:K562细胞分为5组,前4组为实验组,分别加入终浓度为0.8、8.0、40.0、80.0 mg/L的BBM,对照组加入等量RPMI 1640,分别作用不同时间后,采用MTT法检测BBM对K562细胞增殖的抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫细胞化学检测各组Caspase-3蛋白和Survivin蛋白的表达。结果:BBM能呈时间剂量依赖性地抑制K562细胞增殖和诱导其凋亡;免疫细胞化学结果显示BBM作用24 h后K562细胞Caspase-3蛋白表达升高,Survivin蛋白表达降低(P均<0.05)。结论:BBM能抑制K562细胞增殖和诱导其凋亡,其机制可能与Caspase-3蛋白的表达增高及Survivin蛋白的表达降低有关。

关键词：白血病 K562细胞小檗胺 Survivin Caspase-3

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骨保护素基因敲除对小鼠左心室收缩功能的影响

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上海交通大学学报（医学版） 2008年第3期28卷 285-288页

作者：李西华颜美珠许勇庞晓芬王铸钢上海交通大学基础医学院医学遗传学教研室上海交通大学医学院瑞金医院老年科上海200025 上海交通大学医学院瑞金医院伤骨科研究所上海200025

目的探讨左心室收缩功能与骨保护素配体(RANKL)和雌激素在骨保护素(OPG)基因敲除小鼠引起骨质疏松之间的关系。方法建立OPG基因敲除小鼠模型,并设对照组;ELISA法检测小鼠血清OPG和RANKL水平,放射免疫法检测血清雌激素水平;利用心脏超声... 详细信息

目的探讨左心室收缩功能与骨保护素配体(RANKL)和雌激素在骨保护素(OPG)基因敲除小鼠引起骨质疏松之间的关系。方法建立OPG基因敲除小鼠模型,并设对照组;ELISA法检测小鼠血清OPG和RANKL水平,放射免疫法检测血清雌激素水平;利用心脏超声对心功能进行评价。结果与对照组比较,OPG基因敲除组小鼠的心脏质量、心脏质量与体质量的比值、左室心肌细胞的横切面积均明显增大(P<0.01),左心室收缩末期内径和左心室收缩末期容积也明显增大(P<0.05)。OPG基因敲除组小鼠血清RANKL浓度明显高于对照组(P<0.001),两组血清雌激素水平则无显著差异(P>0.05)。结论OPG缺乏导致血清RANKL水平升高,左心室心肌细胞肥大,但不影响血清雌激素水平。

关键词：骨保护素骨保护素配体左心室小鼠

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血小板膜糖蛋白Ibα基因VNTR多态性与冠心病相关性的研究

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中国现代医学杂志 2008年第1期18卷 90-92页

作者：赵洛沙张静华郑红毋淑珍杨文薛国华杨帆王培郑州大学第一附属医院心内科河南郑州450052 郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室河南郑州450052

目的探讨我国河南汉族人群血小板GPIbα基因巨糖肽区串联重复序列(VNTR)多态性与冠心病的关系。方法选择404例确诊冠心病的患者和500例无心脏病史的健康体检者作对照,应用PCR方法进行VNTR多态性检测。结果扩增产物电泳显示,在中国河南... 详细信息

目的探讨我国河南汉族人群血小板GPIbα基因巨糖肽区串联重复序列(VNTR)多态性与冠心病的关系。方法选择404例确诊冠心病的患者和500例无心脏病史的健康体检者作对照,应用PCR方法进行VNTR多态性检测。结果扩增产物电泳显示,在中国河南汉族人群中,发现VNTR的6种基因型:AC、BC、BD、CC、CD、DD。本研究未发现VNTR各基因型及等位基因与冠心病的发生间存在明显相关性。P值均大于0.05。与其他基因型相比,在CD基因型中,Gensini冠状动脉评分≥40组与评分<40组间的差异具有显著性,P<0.05,OR=2.3(95%可信区间1.2～4.4)。结论血小板膜GPIbα基因巨糖肽区VNTR的CD基因型与冠心病的严重程度有关。

关键词：血小板膜糖蛋白类冠心病基因

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25例原发性胆囊癌临床病理分析

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延边大学医学学报 2008年第3期31卷 199-201页

作者：张伟华陈秋艳黄勇杨康鹃延边大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室吉林延吉133000

[背景]探讨原发性胆囊癌的临床病理特点.[病例报告]回顾性分析25例胆囊癌手术标本的病理资料,结果见浸润型为16例,乳头突起型为6例,溃疡坏死型为3例;低分化腺癌为12例,高分化腺癌为6例,乳头状腺癌为4例,鳞状细胞癌为2例,黏液腺癌为1例.... 详细信息

[背景]探讨原发性胆囊癌的临床病理特点.[病例报告]回顾性分析25例胆囊癌手术标本的病理资料,结果见浸润型为16例,乳头突起型为6例,溃疡坏死型为3例;低分化腺癌为12例,高分化腺癌为6例,乳头状腺癌为4例,鳞状细胞癌为2例,黏液腺癌为1例.[讨论]胆囊癌主要临床表现与慢性胆囊炎相似,术前诊断较困难,B型超声波检查是胆囊癌诊断最常用且可靠的手段,提高胆囊癌患者生存率的关键仍是早期诊断及早期治疗.

关键词：胆囊肿瘤病理分型胆囊炎

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