检索结果-内蒙古大学图书馆

中华肿瘤杂志 2014年第3期36卷 177-182页

作者：石立莹陈骏钟启平耿鹏何建民天津医科大学基础医学院微生物学教研室 300070

目的通过小鼠结肠癌动物模型探讨仙台病毒Tianjin株缺损干扰颗粒（DIP）的抗肿瘤作用及其机制。方法将CT26细胞悬液0．1ml皮下注射BalB／c小鼠背部，建立小鼠结肠癌模型，将小鼠随机分为Tianjin株DIP组（注射CT26后第4、7、10和13天，... 详细信息

目的通过小鼠结肠癌动物模型探讨仙台病毒Tianjin株缺损干扰颗粒（DIP）的抗肿瘤作用及其机制。方法将CT26细胞悬液0．1ml皮下注射BalB／c小鼠背部，建立小鼠结肠癌模型，将小鼠随机分为Tianjin株DIP组（注射CT26后第4、7、10和13天，每天瘤内注射1次Tianjin株DIP0．1m1）和生理盐水对照组（瘤内注射生理盐水0．1ml），每组10只。通过测量肿瘤大小和观察小鼠存活率确定DIP的抑瘤作用。采用流式细胞仪和酶联免疫吸附（ELISA）法检测DIP在体外对小鼠树突状细胞（DCs）成熟及分泌白细胞介素6（IL-6）、干扰素Q（IFN-α）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的促进作用。采用realtimeRT—PCR和免疫组化法检测DIP对小鼠肿瘤组织中CD4＋、CD8＋T细胞及CD11c＋DCs表达的影响。结果至注射CT26后第22天，Tianjin株DIP组小鼠的肿瘤体积为（33．2±2．0）mm3，与生理盐水对照组[（2376．0±130．8）mm3]比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。至注射CT26后第50天，Tianjin株DIP组小鼠的存活率为90．0％，明显高于生理盐水对照组（30．0％，P〈0．01）。流式细胞仪检测显示，小鼠DCs表面CIM0、CD80和CD86标志分子的表达率随病毒剂量的升高而升高，且Tianjin株DIP组和完整病毒组之间的差异无统计学意义（均P〉0．05）。ELISA法检测显示，DIP能够促进小鼠DCs分泌IL-6、IFN-α和TNF-α，且呈剂量依赖性。realtimeRT-PCR检测结果显示，停止给药后24、48和120h取得的小鼠肿瘤组织中CD4、CD8和CDllcmRNA的表达水平均有所升高，且在120h表达达高峰。免疫组化检测结果显示，Tianjin株DIP组肿瘤组织中CD4＋T细胞、CD8＋T细胞和CD11c＋DCs占总细胞的百分比分别为（21．60±1．49）％、（22．12±2．84）％和（23．05±2．91）％，而生理盐水对照组分别为（2．62±0．60）％、（4．05±0．12）％和（3．10±0．09）％，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论Tianjin株DIP可以在小鼠体内发挥抗肿瘤作用，其作用机制与激活DCs和T细胞诱导的抗肿瘤免疫有关。

关键词：仙台病毒Tianjin株缺损干扰颗粒树突状细胞 T淋巴细胞免疫小鼠

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黄芩素作为佐剂对抗原提呈细胞的免疫增强作用

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免疫学杂志 2016年第8期32卷 645-650页

作者：刘泽媛张丽张丽娜钱冬萌王爽王斌青岛大学基础医学院微生物学教研室 266071

目的从体外和体内2个方面检测黄芩素对抗原提呈细胞的免疫增强活性,为促进临床肿瘤免疫治疗的发展提供实验基础。方法在体外实验中,以LPS作为阳性对照,不同浓度的黄芩素分别刺激DC2.4细胞系和RAW264.7细胞系,应用流式细胞仪检测2种细胞... 详细信息

目的从体外和体内2个方面检测黄芩素对抗原提呈细胞的免疫增强活性,为促进临床肿瘤免疫治疗的发展提供实验基础。方法在体外实验中,以LPS作为阳性对照,不同浓度的黄芩素分别刺激DC2.4细胞系和RAW264.7细胞系,应用流式细胞仪检测2种细胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ表达量变化;在体内试验中,以弗式完全佐剂与灭活的肿瘤抗原作为阳性对照,黄芩素与灭活的肿瘤抗原作为实验组对小鼠进行免疫,免疫3 d后对其免疫效果进行评价。结果在体外实验中,不同浓度的黄芩素分别刺激DC2.4和RAW264.7细胞后,细胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ都有不同程度表达上调,在体内实验中,不同浓度的黄芩素可使抗原提呈细胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ都有不同程度表达上调,同时使细胞因子IL-12和TNF-α有不同程度表达上调,而使IL-10表达下调。结论黄芩素在体外和体内具有较强的激活抗原提呈细胞的作用,并且使抗原提呈细胞表面标志和细胞因子上调,黄芩素有可能成为具有潜在应用价值的肿瘤细胞疫苗佐剂。

关键词：黄芩素抗原提呈细胞佐剂疫苗黑色素瘤

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肠道病毒71型VP1蛋白研究进展

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中国人兽共患病学报 2015年第4期31卷 377-379,390页

作者：张志勤项国仕黄孝天南昌大学医学院微生物学教研室南昌330006

肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)为手足口病的主要病原体。目前,手足口病的发病机制并不完全清楚,临床上缺乏有效的疫苗及特异性治疗药物。作为EV71主要衣壳蛋白,VP1在EV71的吸附和穿入过程中起着重要作用。另一方面,VP1上存在特异性... 详细信息

肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)为手足口病的主要病原体。目前,手足口病的发病机制并不完全清楚,临床上缺乏有效的疫苗及特异性治疗药物。作为EV71主要衣壳蛋白,VP1在EV71的吸附和穿入过程中起着重要作用。另一方面,VP1上存在特异性中和性抗原表位,在EV71疫苗研究中占有重要地位。本文主要概括EV71VP1结构、功能及与之相关疫苗的研究进展。

关键词：手足口病肠道病毒71型衣壳蛋白

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HCMV截短UL83基因真核表达重组体的构建、转染及其免疫效力研究

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微生物学报 2006年第3期46卷 451-455,T0001页

作者：高荣保李艳秋王明丽安徽医科大学基础医学院微生物学教研室合肥230032

为了构建人巨细胞病毒（HCMV）截短UL83基因真核表达重组体，实现其在Hep-2细胞中的稳定表达，研究该截短UL83基因真核表达重组体免疫效力，采用基因重组的方法，将HCMVAD169株截短UL83基因定向克隆到带有绿色荧光蛋白（GFP）作为报告... 详细信息

为了构建人巨细胞病毒（HCMV）截短UL83基因真核表达重组体，实现其在Hep-2细胞中的稳定表达，研究该截短UL83基因真核表达重组体免疫效力，采用基因重组的方法，将HCMVAD169株截短UL83基因定向克隆到带有绿色荧光蛋白（GFP）作为报告基因的真核表达载体pEGFP-C1上，构建真核重组表达质粒pEGFP-C1-UL83；脂质体转染至Hep-2细胞中，G418筛选获得稳定表达pp65细胞表达系。经基因测序屁示，重组体中截短UL83基因完全正确。RT-PCR和Westem blot检测证实其可在Hep-2细胞中稳定表达。用该重组体和其表达产物在HCMV先天性感染小鼠模型上进行免疫保护试验显示，母鼠血清可检测到特异性抗HCMVpp65抗体，效价为：1：2．51～1：50．79；子鼠脑组织内未分离出病毒，亦未检测出病毒pp65蛋白抗原表达。初步结果表明，pEGFP-C1-UL83具有较好的免疫原性，可作为DNA疫苗刺激机体产生有效抗体。并具有阻止病毒垂直传播的保护性作用。

关键词： HCMV截短uL83基因绿色荧光蛋白转染 Hep-2细胞 DNA疫苗

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呼吸内科常见菌及鲍曼不动杆菌质粒上耐药基因的研究

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中国抗生素杂志 2009年第11期34卷 691-694页

作者：李蓉徐小文陈娇刘晓庆莫冰黎帆南昌大学基础医学院微生物学教研室南昌330006 南昌市东湖区卫生监督所南昌330008

目的分析155株呼吸内科分离菌的种类、分布、耐药性及鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,AB)质粒上的耐药基因。方法用Microscan-autoscan-φ型自动微生物分析仪鉴定到种并测定其对常用抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC50),按美国临床实... 详细信息

目的分析155株呼吸内科分离菌的种类、分布、耐药性及鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,AB)质粒上的耐药基因。方法用Microscan-autoscan-φ型自动微生物分析仪鉴定到种并测定其对常用抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC50),按美国临床实验室标准化研究所(CLSI/NCCLS)2003年版标准判断结果,利用WHONET5.2软件进行统计和分析,并用聚合酶链式反应(PCR)分析AB质粒上的耐药基因。结果呼吸内科分离菌中革兰阴性菌占85.81%,常见的菌种是肺炎克雷伯菌(17.29%),AB(15.79%),洛菲不动杆菌(13.53%),铜绿假单胞菌(11.28%),大肠埃希菌(9.77%)和短黄杆菌(9.02%),非发酵菌的分离率明显上升,占分离菌总数的45.81%,91.61%的标本来自痰液。革兰阴性菌菌耐药率高,有一株AB对除亚胺培南以外的14种常用抗生素均高度耐药且其质粒上携带可接合传递并稳定传代的3种耐药基因。结论细菌的多重耐药日趋严重,开展细菌耐药性监测,对指导临床合理使用抗生素,降低医院感染率和病死率有重要意义。质粒上带一或多种可接合传递并稳定传代的blaTEM-1、blaPER-1和blaOXA-23基因是呼吸内科AB多重耐药的分子学机制之一。

关键词：呼吸内科 AB 耐药基因质粒

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不同浓度Nocodazole对Hela细胞G_2/M期同步化的调节作用

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上海交通大学学报（医学版） 2010年第3期30卷 284-287页

作者：徐秋芳余克花易婷黎帆刘发娣应颖邹伟文何平黄孝天南昌大学基础医学院微生物学教研室南昌330006 江西省儿童医院检验科南昌330006 上海交通大学基础医学院病原生物学教研室上海200025

目的观察不同浓度有丝分裂阻滞剂Nocodazole对Hela细胞株G_2/M期同步化的调节作用及其对纺锤体结构的影响。方法分别以3.0、1.0、0.3μmol/L Nocodazole处理Hela细胞(Nocodazole 3.0、1.0、0.3μmol/L处理组)18 h。于Nocodazole撤除后0(处理18 h)、3、6、9 h时间点收集细胞,流式细胞仪检测G_2/M期细胞百分比;间接免疫荧光染色激光共聚焦显微镜观察细胞有丝分裂器纺锤体α-微管蛋白(α-tubulin)排列。以不添加Nocodazole处理的Hela细胞作为对照组。结果Nocodazole处理18 h,Nocodazole 3.0、1.0、0.3μmol/L处理组Hela细胞G_2/M期细胞百分比分别为55.95%、51.09%和47.81%,均显著高于对照组的9.54%(P<0.05)。在Nocodazole撤除后3、6、9 h时间点,Nocodazole 3.0μmol/L和1.0μmol/L处理组G_2/M期细胞百分比无明显变化;而Nocodazole 0.3μmol/L处理组G_2/M期细胞百分比下降明显(30.43%、12.91%、10.23%),撤除后6 h时间点的G_2/M期细胞百分比与对照组比较差异已无统计学意义(P>0.05)。α-tubulin荧光染色激光共聚焦显微镜观察显示,Nocodazole撤除后Nocodazole 0.3μmol/L处理组G_2/M期细胞微管迅速再聚合形成两极纺锤体且纺锤丝结构清晰。结论Nocodazole对Hela细胞G_2/M期同步化具有调节作用;药物撤离后,0.3μmol/L Nocodazole处理组细胞周期恢复迅速且对纺锤体结构影响最小。

关键词： Nocodazole Hela细胞细胞周期纺锤体 G2/M期

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甲型流感病毒血凝素基因HA和HA_1真核载体的构建及其表达研究

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四川大学学报（医学版） 2006年第2期37卷 176-179页

作者：张卫东曹康李明远施桥发王保宁蒋忠华李虹四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室

目的构建甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)血凝素基因HA和HA1真核表达载体,并检测其在HEK293细胞中的表达。方法利用RT-PCR技术克隆流感病毒株血凝素HA和HA1基因片段并插入真核表达载体pcDNA3.1(+)。经酶切、PCR和测序鉴定后用PolyFect脂质... 详细信息

目的构建甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)血凝素基因HA和HA1真核表达载体,并检测其在HEK293细胞中的表达。方法利用RT-PCR技术克隆流感病毒株血凝素HA和HA1基因片段并插入真核表达载体pcDNA3.1(+)。经酶切、PCR和测序鉴定后用PolyFect脂质体转入HEK293细胞,通过免疫荧光技术检测其瞬时表达。结果血凝素基因HA和HA1的真核表达载体构建成功。转染后免疫荧光技术检测显示两者皆可在HEK293细胞中正确表达。结论成功构建的流感病毒HA和HA1真核表达载体为深入研究病毒的作用机制及核酸疫苗的研究奠定了基础。

关键词：流感病毒血凝素 pcDNA3.1(+) 免疫荧光技术

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临床诊断为非甲～戊型肝炎患者的病原学研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2002年第1期16卷 7-10页

作者：何忠平庄辉宋淑静王雪萍王融冰刘庄北京大学基础医学院微生物学教研室 100083 北京地坛医院

目的　探讨临床诊断为非甲～戊型肝炎患者的病原学。方法　采用巢式PCR(nPCR)检测HBV、TTV、B19、和SENVDNA ;用逆转录巢式PCR(RT nPCR)检测HGV和HCVRNA。结果　 6 0例临床诊断为非甲～戊型肝炎患者中 ,单独HBVDNA阳性 30例 (阳性率为 5... 详细信息

目的　探讨临床诊断为非甲～戊型肝炎患者的病原学。方法　采用巢式PCR(nPCR)检测HBV、TTV、B19、和SENVDNA ;用逆转录巢式PCR(RT nPCR)检测HGV和HCVRNA。结果　 6 0例临床诊断为非甲～戊型肝炎患者中 ,单独HBVDNA阳性 30例 (阳性率为 5 0 0 % ) ,HBV和TTVDNA阳性10例 (16 7% ) ,HBV和B19DNA阳性 6例 (10 0 % ) ,HCVRNA、HBV和SENVDNA阳性 1例 (1 7% ) ,单独HCVRNA阳性 1例 (1 7% ) ,HCVRNA和B19DNA阳性 1例 (1 7% ) ,HGVRNA无一例阳性 ,单独B19DNA阳性 2例 (3 3% ) ,单独TTVDNA阳性 1例 (1 7% ) ,另 8例 (13 3% )上述病毒核酸均为阴性。HBV合并感染TTV或B19对其血清学生化指标无影响。结论　HBV是临床诊断为非甲～戊型肝炎的主要病原 ,HGV、TTV。

关键词：病毒性肝炎乙型肝炎病毒丙型肝炎病毒庚型肝炎病毒病原学诊断

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抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌天然药物研究进展

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中草药 2016年第20期47卷 3742-3748页

作者：王鑫刘奇大理大学基础医学院医学微生物学及免疫学教研室云南大理671000

以抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)天然药物为对象,检索了近年来对其天然药物研究的相关文献,并进行归纳整理。来源于植物、动物、微生物的能有效抗MRSA的化合物,包括植物中的黄酮类、... 详细信息

以抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)天然药物为对象,检索了近年来对其天然药物研究的相关文献,并进行归纳整理。来源于植物、动物、微生物的能有效抗MRSA的化合物,包括植物中的黄酮类、萜类、蒽醌类等,动物中的抗菌肽及毒素,以及部分微生物的代谢产物等。部分化合物可作为未来抗MRSA的候选药物。目前抗MRSA的天然药物研究已经成为该领域的研究热点之一,但是多数研究仅停留在对活性药物的筛选上,缺少对候选药物的毒理、药理等深入研究。

关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌天然药物动物植物微生物

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葡萄球菌肠毒素B突变体基因表达和功能的初步研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2001年第2期21卷 200-203页

作者：俞红钱利生上海医科大学基础医学院微生物学教研室 200032

目的　应用PCR致变及基因克隆技术 ,获得抗原性保留 ,但超抗原毒性明显下降的葡萄球菌肠毒素B(SEB)突变体 ,用作新型淋巴细胞激活分子和超抗原疫苗的研究。方法　用PCR和PCR致变技术 ,从SEB标准株扩增SEB(SEB N)和SEB突变基因 (SEB M) ... 详细信息

目的　应用PCR致变及基因克隆技术 ,获得抗原性保留 ,但超抗原毒性明显下降的葡萄球菌肠毒素B(SEB)突变体 ,用作新型淋巴细胞激活分子和超抗原疫苗的研究。方法　用PCR和PCR致变技术 ,从SEB标准株扩增SEB(SEB N)和SEB突变基因 (SEB M) ,分别与原核表达质粒pTrc99A重组 ,转化大肠杆菌JM10 9,经筛选获得重组质粒pTrcNb和pTrcMb ,用双脱氧链终止法作序列分析。表达的SEB N和SEB M蛋白 ,经双向免疫扩散试验作抗原性鉴定后 ,刺激小鼠脾细胞并由ELISA法检测培养上清中IL 2的水平。结果　SEB N 15 0位苏氨酸 (密码子ACT)非定向突变为丙氨酸(密码子GCT) ,SEB M 2 3位天冬酰胺 (密码子AAT)定向突变为丝氨酸 (密码子AGT)。两种突变基因表达的蛋白均与抗SEB形成明显沉淀线 ,与天然SEB刺激小鼠脾细胞产生IL 2水平相比 ,SEB N和SEB M突变体蛋白分别下降 12 .5倍和 40倍。结论　获得了能表达SEB N和SEB M突变体蛋白的 2株工程菌。表达的突变体蛋白具有良好的免疫反应性 ,但刺激小鼠脾细胞产生白细胞介素 2的超抗原生物学活性明显下降。

关键词：葡萄球菌肠毒素B 突变体蛋白超抗原白细胞介素2

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