检索结果-内蒙古大学图书馆

四川大学学报（医学版） 2005年第5期36卷 637-640页

作者：李宏汤慧方定志刘秉文四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室成都610041

目的研究天然高密度脂蛋白(N-HDL)及氧化修饰高密度脂蛋白(OX-HDL)对培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)部分分泌功能的影响。方法采用培养人脐静脉内皮细胞,以0.01mol/LPBS为空白对照,以N-HDL为正常对照,分别加入不同质量浓度OX-HDL(5mg/L,10... 详细信息

目的研究天然高密度脂蛋白(N-HDL)及氧化修饰高密度脂蛋白(OX-HDL)对培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)部分分泌功能的影响。方法采用培养人脐静脉内皮细胞,以0.01mol/LPBS为空白对照,以N-HDL为正常对照,分别加入不同质量浓度OX-HDL(5mg/L,10mg/L,50mg/L)共同孵育24h后,观察培养基中内皮细胞分泌一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、组织型纤溶酶原激活物(tPA)和纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)水平的变化。结果和空白对照相比,N-HDL组NO的量(P<0.05)和NOS活性(P<0.01)明显升高,tPA和PAI-1的差异没有统计学意义(P均>0.05);OX-HDL组NO的量和NOS活性均显著下降,并呈剂量依赖关系,PAI-1活性也显著升高(P<0.05),tPA的水平差异无统计学意义。结论N-HDL可以明显提高培养人脐静脉内皮细胞分泌NO的量并提高NOS活性,对tPA和PAI-1的产生则没有显著影响;而OX-HDL明显抑制内皮细胞NO合成和NOS活性,它不影响tPA的水平,却增加内皮细胞PAI-1活性。

关键词：高密度脂蛋白氧化修饰内皮细胞一氧化氮合酶纤溶酶原激活物抑制剂

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中药成分CDP逆转高甲基化状态的GSTP1基因启动子低转录活性的研究

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四川大学学报（医学版） 2007年第5期38卷 761-765页

作者：张军哲王锦红覃扬傅强四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室成都610041

目的研究中药成分CDP逆转高甲基化状态的GSTP1基因启动子低转录活性的作用。方法构建含完全甲基化GSTP1启动子区的重组质粒pGL3-GSTP1prom并转染MCF-7细胞,分别用不同剂量的CDP和5-aza-C作用细胞,检测表达的萤光素酶活性。观察GSTP1启... 详细信息

目的研究中药成分CDP逆转高甲基化状态的GSTP1基因启动子低转录活性的作用。方法构建含完全甲基化GSTP1启动子区的重组质粒pGL3-GSTP1prom并转染MCF-7细胞,分别用不同剂量的CDP和5-aza-C作用细胞,检测表达的萤光素酶活性。观察GSTP1启动子转录活性的变化。结果GSTP1启动子区被完全甲基化后转录活性显著降低;CDP能够逆转高甲基化状态下GSTP1基因启动子区的低转录活性且呈剂量依赖关系。结论中药成分CDP能够逆转高甲基化状态的GSTP1基因启动子区的低转录活性。

关键词： CDP 高甲基化GSTP1启动子 MCF-7 转染萤光素酶报告基因

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CDP抑制乳腺癌细胞T47D生长及逆转p16基因甲基化的研究

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四川大学学报（医学版） 2004年第6期35卷 792-796页

作者：徐丹覃扬孙芝琳孙泽芳四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室成都610041

目的　研究 CDP(一种中药成分 )抑制乳腺癌 T4 7D细胞株生长的机制。方法　不同浓度的 5 -氮杂胞苷 (5 - azacytidine,5 - aza- CR)或 CDP与 T4 7D细胞培养数天 ,细胞增殖试验 (MTT法 )检测对 T4 7D细胞生长的影响 ;流式细胞术检测凋亡... 详细信息

目的　研究 CDP(一种中药成分 )抑制乳腺癌 T4 7D细胞株生长的机制。方法　不同浓度的 5 -氮杂胞苷 (5 - azacytidine,5 - aza- CR)或 CDP与 T4 7D细胞培养数天 ,细胞增殖试验 (MTT法 )检测对 T4 7D细胞生长的影响 ;流式细胞术检测凋亡峰和细胞周期改变 ;甲基化特异性 PCR(MSP)检测用药前后 p16基因甲基化、非甲基化状态及程度的改变。结果　 5 - aza- CR和 CDP均对细胞生长呈浓度和时间依赖性抑制作用 (P<0 .0 5 ) ;在试验药物浓度 5 - aza- CR2 μm ol/ L,CDP5 0 μm ol/ L 的作用下 ,对细胞生长周期有影响 :G0 / G1 期细胞数由 6 5 .1%增加到71.3%和 84 .3% ,S期细胞数由 19.4 %减少到 14 .3%和 7.2 % ;药物作用细胞 6 d后对 p16基因有完全去甲基化作用。结论　 CDP可以逆转 p16基因高甲基化 ,并可能因此抑制肿瘤细胞生长。

关键词： CDP 5-氮杂胞苷乳腺癌 p16基因甲基化特异性PCR

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肝脏在高甘油三酯血症中的作用

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生理科学进展 2005年第2期36卷 166-169页

作者：崔晓燕方定志四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室成都610041

高甘油三酯血症(HTG)是心脑血管疾病的独立危险因子。肝脏在甘油三酯的合成和分解代谢过程中起着十分重要的作用,肝脏甘油三酯合成过剩或/和甘油三酯分解障碍,均能使血浆甘油三酯升高,形成HTG。肝脏甘油三酯合成过剩的因素包括一些参与... 详细信息

高甘油三酯血症(HTG)是心脑血管疾病的独立危险因子。肝脏在甘油三酯的合成和分解代谢过程中起着十分重要的作用,肝脏甘油三酯合成过剩或/和甘油三酯分解障碍,均能使血浆甘油三酯升高,形成HTG。肝脏甘油三酯合成过剩的因素包括一些参与甘油三酯合成的酶活性增加;甘油三酯分解代谢延缓的因素包括Angptl3和肝脏X受体(LXR)功能加强,肝脂酶活性受抑制,ApoE2 和ApoCIII含量升高;既能使甘油三酯合成增加,也能使甘油三酯分解代谢延缓的因素包括餐后,ApoAⅡ与胆固醇酯转移蛋白(CETP)的协同作用等。

关键词：肝脏高甘油三酯血症极低密度脂蛋白乳糜微粒

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小鼠受精卵早期发育过程中PKB/Akt对p21蛋白表达及定位的影响

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生物工程学报 2007年第3期23卷 493-496页

作者：武迪迪冯晨刘莹张杰宗志宏具英花李雪松于秉治中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室沈阳110001

初步探讨在小鼠受精卵早期发育过程中PKB/Akt对p21蛋白表达及定位的影响。通过显微操作技术注射野生型、持续激活型及激酶失活型的PKB的mRNA,用免疫荧光方法检测p21蛋白的细胞定位、Western blot方法检测p21蛋白的表达。结果显示在注射... 详细信息

初步探讨在小鼠受精卵早期发育过程中PKB/Akt对p21蛋白表达及定位的影响。通过显微操作技术注射野生型、持续激活型及激酶失活型的PKB的mRNA,用免疫荧光方法检测p21蛋白的细胞定位、Western blot方法检测p21蛋白的表达。结果显示在注射不同形式的PKB mRNA后p21蛋白的表达无明显差别,但是细胞定位发生改变,PKB被激活后,p21蛋白滞留在胞浆中。因而初步认为在小鼠受精卵中,PKB/Akt通过影响p21的细胞定位而影响细胞周期的进程。

关键词：蛋白激酶B p21 细胞周期小鼠受精卵

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转录因子CTCF与表观遗传及疾病的关系

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中华医学遗传学杂志 2012年第2期29卷 176-180页

作者：刘秋英覃扬四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室成都610041

CTCF是普遍存在于真核生物中的多功能转录因子，通过其11锌指结构可与多种基因和蛋白质结合而广泛参与基因的表达调控，表现出各种生物学功能。CTCF参与染色质重塑和基因印迹等表观遗传调控并且起关键作用。CTCF参与的调控若发生异常将... 详细信息

CTCF是普遍存在于真核生物中的多功能转录因子，通过其11锌指结构可与多种基因和蛋白质结合而广泛参与基因的表达调控，表现出各种生物学功能。CTCF参与染色质重塑和基因印迹等表观遗传调控并且起关键作用。CTCF参与的调控若发生异常将引起生长发育或神经功能异常等疾病。作者就近年来CTCF与表观遗传、疾病之间的关系作一介绍。

关键词： CTCF蛋白基因调控表观遗传

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绒毛膜促性腺激素对人胃腺癌细胞增殖的影响

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四川大学学报（医学版） 2003年第4期34卷 678-679页

作者：张群洲陈曼玲李蓉晖廖英四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室成都610041

目的　探讨人绒毛膜促性腺激素 (h CG)对人胃腺癌 SGC- 790 1细胞增殖生长的影响。方法　用 MTT法检测细胞生长率及存活率。结果　 h CG在 10 - 1 1～ 10 - 6 mol/ L 范围内 ,对胃腺癌细胞的生长具有促进作用 ,但无明显的时间依赖关系... 详细信息

目的　探讨人绒毛膜促性腺激素 (h CG)对人胃腺癌 SGC- 790 1细胞增殖生长的影响。方法　用 MTT法检测细胞生长率及存活率。结果　 h CG在 10 - 1 1～ 10 - 6 mol/ L 范围内 ,对胃腺癌细胞的生长具有促进作用 ,但无明显的时间依赖关系。结论　 h CG对胃腺癌细胞的生长具有一定的促进作用 ,提示 h

关键词：绒毛膜促性腺激素胃腺癌细胞增殖 MTT法

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Lactoferricin B基因与几种变异克隆的构建及其在酿酒酵母中的表达与鉴定

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四川大学学报（医学版） 2007年第4期38卷 578-582页

作者：冯永潜查晓军翟朝阳四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室成都610041

目的构建牛乳铁多肽(Lactoferricin B)的真核表达质粒pYES2/Lactoferricin B,实现其在酿酒酵母***中的表达,并初步检测其不同变异的体外抗菌活性。方法通过分别合成Lactoferricin B基因两条单链的部分序列,让其互为模板、引物进行PCR扩... 详细信息

目的构建牛乳铁多肽(Lactoferricin B)的真核表达质粒pYES2/Lactoferricin B,实现其在酿酒酵母***中的表达,并初步检测其不同变异的体外抗菌活性。方法通过分别合成Lactoferricin B基因两条单链的部分序列,让其互为模板、引物进行PCR扩增,得到Lactoferricin B与3种变异的基因序列。将它们克隆到穿梭质粒pYES2中,构建pYES2/Lactoferricin B及3种变异基因重组质粒,转化到大肠杆菌Top10中,让其大量增殖。提取重组质粒经纯化后将其转化到***中,通过营养缺陷型筛选获得重组酵母菌并通过半乳糖诱导使其表达目的蛋白。经离子交换柱纯化收集目的蛋白后,通过体外抑菌实验比较Lactoferricin B及3种变异重组蛋白的抗菌活性。结果经PCR扩增检验、DNA测序表明成功构建pYES2/Lactoferricin B与3种变异基因重组质粒。提取诱导后的蛋白进行SDS-PAGE电泳及质谱检测,证实目的蛋白的存在,相对分子质量约为3.4×103。在大肠埃希菌及金黄色葡萄球菌的抑菌实验中观测到Lactoferricin B和A17-Lactoferricin B产生了抑菌圈。结论成功构建pYES2/Lactoferricin B及变异基因重组质粒,该重组质粒能在***中诱导表达目的蛋白,为进一步研究其生物功能及抗菌活性奠定了基础。

关键词：抗菌肽乳铁蛋白B 基因序列变异酵母表达

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ACE基因I/D多态性对高糖低脂膳食诱导的健康青年血脂比值及血压变化的影响

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四川大学学报（医学版） 2013年第5期44卷 731-735页

作者：张荣荣宋永燕樊梅李元昊姜喆张珍方定志四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室成都610041

目的探讨血管紧张素转换酶(ACE)基因16内含子插入/缺失(I/D)多态性对高糖低脂(HC/LF)膳食诱导的健康汉族青少年血脂比值及血压变化的影响。方法 56名健康青年志愿者,给予7d平衡膳食和6d HC/LF膳食,分别于第1d、第8d和第14d清晨抽取空腹... 详细信息

目的探讨血管紧张素转换酶(ACE)基因16内含子插入/缺失(I/D)多态性对高糖低脂(HC/LF)膳食诱导的健康汉族青少年血脂比值及血压变化的影响。方法 56名健康青年志愿者,给予7d平衡膳食和6d HC/LF膳食,分别于第1d、第8d和第14d清晨抽取空腹静脉血,测定血压和血脂水平并计算血脂比值。聚合酶链式反应检测ACE基因16内含子I/D多态性。结果在整体受试人群及性别分层各组中,基础值、HC/LF膳食前、HC/LF膳食后的血脂比值及血压水平在Ⅱ基因型与D等位基因携带者(ID+DD基因型)之间均无统计学差异。与HC/LF膳食前相比,在整体受试人群中,HC/LF膳食后低密度脂蛋白胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇(LDLC/HDL-C)和总胆固醇(TC)/HDL-C在两组基因型受试者中均降低;收缩压(SBP)仅在Ⅱ基因型受试者中降低。性别分层分析发现,HC/LF膳食后甘油三酯(TG)/HDL-C和log(TG/HDL-C)仅在女性Ⅱ基因型受试者中升高,TG/HDL-C和log(TG/HDL-C)仅在男性Ⅱ基因型受试者中降低;TC/HDL-C和LDL-C/HDL-C在所有男性受试者和女性D携带者中降低;SBP仅在男性D携带者中降低。结论 HC/LF与ACE基因16内含子I/D多态性I等位基因相互作用可降低男性TG/HDL-C和log(TG/HDL-C)、升高女性TG/HDL-C和log(TG/HDL-C);与D等位基因相互作用可降低男性收缩压、女性TC/HDL-C和LDL-C/HDL-C。

关键词：血管紧张素转换酶基因多态性血脂比值血压高糖低脂膳食

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限制性内切酶结合半巢式PCR法检测人肝癌P16抑癌基因启动子区甲基化研究

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四川大学学报（医学版） 2007年第1期38卷 53-56页

作者：蒋磊覃扬孙芝琳孙泽芳王锦红杨鲁川四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室成都610041

目的建立甲基化敏感的限制性内切酶结合半巢式降落PCR方法,研究原发性肝癌P 16基因启动子区甲基化状态。方法针对P 16基因启动子区富含CpG的序列,设计3条引物,进行半巢式降落PCR扩增,检测原发性肝癌P 16基因启动子区甲基化状态;并将P 1... 详细信息

目的建立甲基化敏感的限制性内切酶结合半巢式降落PCR方法,研究原发性肝癌P 16基因启动子区甲基化状态。方法针对P 16基因启动子区富含CpG的序列,设计3条引物,进行半巢式降落PCR扩增,检测原发性肝癌P 16基因启动子区甲基化状态;并将P 16基因启动子区340 bp片段克隆到pM D 18-T载体,*** JM 109扩增此质粒后经CpG甲基化酶M.S ssⅠ处理,再用Hp aⅡ酶切验证获得P 16基因启动子区甲基化阳性的质粒P 16Pm+并进行特异性和灵敏度实验。以此甲基化敏感的限制性内切酶结合半巢式降落PCR方法检测40例人原发性肝癌和3例正常人肝组织DNA样品的P 16基因启动子区甲基化状态。结果所采用的Hp aⅡ酶切后半巢式PCR方法的特异性强,灵敏度达100 fg;对40例人原发性肝癌组织DNA样品P 16基因的启动子区甲基化状态检测显示甲基化阳性率为30%(12/40),3例正常人肝组织均为阴性(0/3)。结论P 16抑癌基因启动子区甲基化可能与肝癌发生发展有关。本实验方法简便、成本低廉,并有高度的特异性与灵敏度,在大规模检查中有实际应用价值。

关键词：半巢式PCR 甲基化敏感性内切酶人原发性肝癌 P16基因启动子甲基化

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