检索结果-内蒙古大学图书馆

交通医学 2025年第1期39卷 1-7,12页

作者：刘星雨丁肇诣李心怡王东沈筠恬南通大学医学院江苏226001 南通大学江苏省神经再生重点实验室

目的:探索牛膝多肽k(Achyranthes bidentata polypeptides,ABPPk)处理下施万细胞(Schwann cells,SCs)发育过程中动态功能RNA的变化以及时间依赖性特征。方法:将SCs设为DMEM组、含有ABPPk(0.5μg/mL)的ABPPk+DMEM组、含有神经生长因子(nerve growth factor,NGF)(0.1μg/mL)的NGF+DMEM组。ABPPk和NGF作用于SCs 0.25 h、0.5 h、1 h、2 h、3 h、6 h、12 h和24 h时分别收取SCs共75个样本,进行全转录组RNA测序,通过质量控制评估和表达验证,展示完整、深度测序且高度一致的时间序列数据集。结果:RNA测序结果显示所有样品均具有较高的RNA完整性数值(RNA integrity number,RIN),表明总RNA完整。UMAP分析显示两个主要的簇具有轻微的时间依赖性。差异表达分析显示,差异表达基因的数量在12 h和24 h变化较大。功能聚类分析显示,在12 h这个时间点,ABPPk处理所特有的上调基因主要参与调控蛋白质磷酸化、细胞凋亡、粘附连接等过程,而NGF处理所特有的上调基因主要参与调控内吞、GTP酶活性、氧化磷酸化等过程。在24 h这个时间点,ABPPk处理后上调的基因主要参与调节肌动蛋白骨架、DNA修复、轴突导向等过程,而NGF处理后上调的基因主要参与基因表达的正向调控及鞘脂信号通路的激活。实时PCR结果显示,参与SCs发育的基因Ccnd1、Foxo3、Pmp22、Lgals3、Usp1及Rps6ka1在RNA-seq和实时PCR之间的mRNA表达高度相关,表明数据准确。结论:本研究获得的数据集能助力探索动态功能RNA在施万细胞发育中的作用,以及在不同神经营养因子处理下的分子差异,有利于发现周围神经再生的新治疗靶点。

关键词：牛膝多肽施万细胞 RNA测序神经生长因子

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基于AAV的遗传性耳聋基因治疗的基础和临床研究进展

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中国科学:生命科学 2025年第4期55卷 697-710页

作者：周吟毅杨雪寒陆宜成王晓涵陈相琰范瑾怡张心茹伍贤敏张李燕谈方志齐洁玉柴人杰东南大学数字医学工程全国重点实验室附属中大医院耳鼻咽喉头颈外科生命科学与技术学院生命健康高等研究院江苏省生物医学高新技术研究重点实验室南京210096 南通大学神经再生联合创新中心南通226001 北京理工大学生命科学学院航天中心医院神经内科听力与平衡科学国家重点实验室北京100081 四川省医学科学院四川省人民医院/电子科技大学附属医院耳鼻咽喉头颈外科成都610072 东南大学深圳研究院深圳518063

听力障碍作为发病率极高的社会健康问题受到广泛关注.约60%的感音神经性耳聋由遗传物质突变引起.遗传性聋的临床治疗主要依赖人工耳蜗和助听器,更为有效全面的生物学治疗手段的开发迫在眉睫.修复受损的基因,是从根本上治疗遗传性耳聋的... 详细信息

听力障碍作为发病率极高的社会健康问题受到广泛关注.约60%的感音神经性耳聋由遗传物质突变引起.遗传性聋的临床治疗主要依赖人工耳蜗和助听器,更为有效全面的生物学治疗手段的开发迫在眉睫.修复受损的基因,是从根本上治疗遗传性耳聋的有效手段.多个研究已表明,替代或修复遗传性聋小鼠模型中的突变基因,可有效恢复小鼠受损的听力.目前,基因治疗已成功恢复携带OTOF突变的遗传性耳聋患者听力.包括OTOF在内的耳聋基因有200多种,作为一种精准疗法,基因治疗在遗传性耳聋中的应用尚有诸多问题需要解决.本文首先概述了遗传性耳聋的发生发展,随后深入探讨了目前基因治疗应用于遗传性耳聋临床治疗的研究进展,并提出了耳聋基因治疗现阶段面临的困境与挑战.

关键词：听力损失基因治疗遗传性耳聋耳蜗

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神经再生素对皮层细胞基因表达影响的基因芯片研究

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中国药科大学学报 2003年第1期34卷 78-80页

作者：丁斐顾星星王东顾晓松南通医学院江苏省神经再生重点实验室南通226001

目的 :采用基因芯片技术 ,观察神经再生素对体外培养的胚鼠大脑皮层细胞基因表达的影响。方法 :取ICR胚鼠 (15d)大脑皮层细胞 ,无血清培养。实验组加入神经再生素 (2 μg/ml) ,对照组加入等量基础培养液。培养 6h后 ,抽提实验组和对照... 详细信息

目的 :采用基因芯片技术 ,观察神经再生素对体外培养的胚鼠大脑皮层细胞基因表达的影响。方法 :取ICR胚鼠 (15d)大脑皮层细胞 ,无血清培养。实验组加入神经再生素 (2 μg/ml) ,对照组加入等量基础培养液。培养 6h后 ,抽提实验组和对照组皮层细胞总RNA ,经反转录分别用Cy5、Cy3荧光标记成cDNA探针。将荧光标记的cDNA与MGEC 40s基因表达谱芯片杂交 ,芯片扫描、数据处理。结果 :实验组和对照组大脑皮层细胞出现 64条差异性表达的基因。呈现上调的基因有 :钙调素结合蛋白、锌指蛋白激酶、核糖体蛋白等基因 ;下调基因有 :抑制细胞分裂因子等基因。结论 :神经再生素可作用于体外培养的胚鼠大脑皮层细胞。

关键词：神经再生素皮层细胞基因表达基因芯片研究

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周围神经损伤后Tropic 1808基因表达蛋白的免疫组织化学研究

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解剖学报 2004年第3期35卷 234-239页

作者：陈雪张沛云王晓冬吴坚南通医学院江苏省神经再生重点实验室南通226001

目的　研究Tropic 180 8基因表达蛋白在受损大鼠坐骨神经中的表达与分布。　方法　用酶联间接法和双重免疫荧光法进行免疫组织化学染色。并通过计算机图像处理技术 ,测量阳性区域的强度与面积。　结果　损伤神经的近侧端和远侧端中施万... 详细信息

目的　研究Tropic 180 8基因表达蛋白在受损大鼠坐骨神经中的表达与分布。　方法　用酶联间接法和双重免疫荧光法进行免疫组织化学染色。并通过计算机图像处理技术 ,测量阳性区域的强度与面积。　结果　损伤神经的近侧端和远侧端中施万细胞均有Tropic 180 8基因表达蛋白的阳性免疫反应 ,阳性免疫反应物主要分布于施万细胞膜上 ,远侧端的阳性反应物强度和面积强于和大于近侧端。　结论　周围神经损伤后 ,Tropic180 8基因表达蛋白分布于损伤近侧端和远侧端的施万细胞膜上 ,并且远侧端中该蛋白的表达强于近侧端。

关键词： Tropic 1808基因表达蛋白坐骨神经免疫组织化学大鼠

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糖元合成酶激酶3β对微管相关蛋白tau的磷酸化作用

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生物化学与生物物理进展 2007年第9期34卷 945-951页

作者：刘飞施建华丁绍红尹晓敏南通大学江苏省神经再生重点实验室南通大学医学院生化教研室南通226001

tau蛋白是中枢神经系统中重要的微管相关蛋白,其功能受磷酸化调节.异常过度磷酸化的tau蛋白是阿尔茨海默病患者脑中神经纤维缠结的主要组成部分.糖元合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)是重要的tau蛋白激酶之一,它虽... 详细信息

tau蛋白是中枢神经系统中重要的微管相关蛋白,其功能受磷酸化调节.异常过度磷酸化的tau蛋白是阿尔茨海默病患者脑中神经纤维缠结的主要组成部分.糖元合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)是重要的tau蛋白激酶之一,它虽可催化tau蛋白多个位点的磷酸化,但对不同位点,其催化效率不同.通过位点特异性、磷酸化依赖的tau蛋白抗体,用免疫印迹技术,检测GSK-3β对tau蛋白位点特异性的磷酸化作用及动力学.用双倒数作图,计算GSK-3β催化tau磷酸化以及各个位点磷酸化的Km值,并结合培养细胞中的实验,研究GSK-3β对tau蛋白磷酸化作用的位点特异性.结果显示,GSK-3β催化tau蛋白多个位点的磷酸化,其中包括Thr181、Ser199、Ser202、Thr205、Thr212、Thr217、Thr231、Ser396和Ser404,对不同的位点磷酸化作用,其Km值不同,GSK-3β对Ser396的Km值最低,即对Ser396位点的亲和性最高,催化其磷酸化的能力最强.在培养的细胞中,也显示了GSK-3β的表达引起Ser396位点的磷酸化最明显.

关键词： tau 糖元合成酶激酶3β(GSK-3β) 磷酸化

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肿瘤抑制因子PTEN蛋白在成年大鼠腰段脊髓和背根节中的表达与分布

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解剖学报 2002年第6期33卷 587-589页

作者：严志强张沛云王晓冬徐邦生衣昕南通医学院江苏省神经再生重点实验室南通226001

目的　观察肿瘤抑制因子PTEN蛋白在成年大鼠腰段脊髓和背根节中的表达和分布。　方法　免疫组织化学ABC法显示大鼠脊髓和背根神经节中PTEN阳性免疫反应产物。　结果　背根节神经元及穿越背根节神经纤维轴突有阳性免疫反应产物存在 ;PTE... 详细信息

目的　观察肿瘤抑制因子PTEN蛋白在成年大鼠腰段脊髓和背根节中的表达和分布。　方法　免疫组织化学ABC法显示大鼠脊髓和背根神经节中PTEN阳性免疫反应产物。　结果　背根节神经元及穿越背根节神经纤维轴突有阳性免疫反应产物存在 ;PTEN阳性免疫反应产物在脊髓主要位于灰质神经元。　结论　PTEN在成年大鼠腰段脊髓和背根节神经元及神经纤维轴突中表达。

关键词：肿瘤抑制因子 PTEN 腰段脊髓蛋白表达成年大鼠免疫组织化学ABC法背根节

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神经再生素对PC12细胞凋亡的影响

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解剖学报 2003年第5期34卷 472-476页

作者：陈罡王晓冬张沛云丁斐南通医学院江苏省神经再生重点实验室南通226001

目的　研究神经再生素 (NRF)对PC12细胞凋亡的影响并初步探讨其机制。　方法　通过观察细胞形态的变化、MTT微量比色法、流式细胞仪AnnexinV和caspase 3活力检测等方法 ,了解NRF对低浓度血清培养下PC12细胞凋亡的影响。NGF和RPMI16 40... 详细信息

目的　研究神经再生素 (NRF)对PC12细胞凋亡的影响并初步探讨其机制。　方法　通过观察细胞形态的变化、MTT微量比色法、流式细胞仪AnnexinV和caspase 3活力检测等方法 ,了解NRF对低浓度血清培养下PC12细胞凋亡的影响。NGF和RPMI16 40作对照。　结果　培养细胞的突起生长数量和长度、MTT微量比色的A值、AnnexinV PE 7AAD显示的凋亡细胞比例、caspase 3活力的检测等指标 ,在NRF组和NGF组间无明显差异 ;而与空白对照组间差异有显著性意义。　结论　神经再生素对低血清培养下PC12细胞的凋亡有抑制作用。

关键词：神经再生素 PC12细胞细胞凋亡磷脂结合蛋白

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神经生长液对兔周围神经损伤的修复作用研究

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中国临床解剖学杂志 2005年第1期23卷 83-86页

作者：张俊芳周鸣鸣刘梅丁斐南通医学院江苏省神经再生重点实验室江苏南通226001

目的:研究神经生长液(nerve growth decoction,NGD)促进兔周围神经损伤的修复作用。方法:大耳白兔40只,雌雄各半,行腓总神经夹伤术。实验分为五组:NGD低、中、高剂量组,弥可保组(阳性对照),空白对照组。口服给药四周后行电生理、组织学... 详细信息

目的:研究神经生长液(nerve growth decoction,NGD)促进兔周围神经损伤的修复作用。方法:大耳白兔40只,雌雄各半,行腓总神经夹伤术。实验分为五组:NGD低、中、高剂量组,弥可保组(阳性对照),空白对照组。口服给药四周后行电生理、组织学检测和超微结构观察。结果:NGD高、中剂量组和弥可保组在腓总神经传导速度恢复率,脊髓前角运动神经元的存活率及再生髓鞘计数均明显好于空白对照组(P<0.01)。超微结构观察给药组有髓神经纤维的髓鞘形态、厚度、成熟度均优于对照组,变性纤维的数目少于对照组。结论:神经生长液能促进损伤周围神经的再生和功能的恢复。

关键词：神经生长液/药理学神经再生/中药疗法周围神经损伤兔弥可保

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神经生长液对D-半乳糖衰老模型小鼠的影响

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中国老年学杂志 2003年第12期23卷 851-853页

作者：丁斐周鸣鸣张俊芳马振祥江苏省神经再生重点实验室南通医学院江苏南通226001

目的　观察中药合剂神经生长液对 D-半乳糖衰老模型小鼠的影响。方法　建立 D-半乳糖致小鼠衰老模型 ,以 Y型电迷宫检测其学习记忆能力 ,分别采用黄嘌呤氧化酶法、TBA比色法测定大脑 SOD活性和 MDA含量 ,观察小鼠服用神经生长液后上述... 详细信息

目的　观察中药合剂神经生长液对 D-半乳糖衰老模型小鼠的影响。方法　建立 D-半乳糖致小鼠衰老模型 ,以 Y型电迷宫检测其学习记忆能力 ,分别采用黄嘌呤氧化酶法、TBA比色法测定大脑 SOD活性和 MDA含量 ,观察小鼠服用神经生长液后上述指标的变化。结果　与 D-半乳糖模型组相比 ,神经生长液低、中、高剂量均可显著提高衰老模型小鼠的学习记忆能力 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1 ) ,显著增加 D-半乳糖所致衰老模型小鼠大脑 SOD活性、降低 MDA含量 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1 )。结论　神经生长液能改善 D-半乳糖所致衰老小鼠的多项体征。

关键词：神经生长液 D-半乳糖衰老小鼠学习记忆能力黄嘌呤氧化酶法 TBA比色法

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地高辛标记的大鼠p75RNA探针的制备和应用

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中国临床解剖学杂志 2005年第5期23卷 518-520页

作者：沈宓丁斐江苏省神经再生重点实验室南通医学院江苏南通226001

目的:制备用地高辛标记的神经生长因子低亲和力受体(p75)的RNA探针。研究p75在海马组织中的表达。方法:设计p75引物,构建p75/pGEM-T重组质粒,分别用ApaⅠ和SacⅠ进行酶切得到线性化DNA片段,以Sp6和T7聚合酶转录合成酶合成地高辛标记的(d... 详细信息

目的:制备用地高辛标记的神经生长因子低亲和力受体(p75)的RNA探针。研究p75在海马组织中的表达。方法:设计p75引物,构建p75/pGEM-T重组质粒,分别用ApaⅠ和SacⅠ进行酶切得到线性化DNA片段,以Sp6和T7聚合酶转录合成酶合成地高辛标记的(dig-)正反义RNA探针。运用点膜杂交的方法检验探针的敏感度,运用该探针,通过原位杂交分析p75在海马中的表达。结果:构建了p75/pGEM-T质粒,获得高效价的正、反义dig-p75RNA探针,应用该探针发现p75mRNA在海马中的表达。结论:成功制备了地高辛标记的p75RNA探针,为进一步研究p75在海马中发育和损伤过程中的表达打下基础。

关键词：神经生长因子(p75) 大鼠地高辛标记p75RNA探针原位杂交

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