检索结果-内蒙古大学图书馆

中国临床解剖学杂志 2007年第4期25卷 419-423页

作者：沈爱国高尚锋程纯赵剑陈梦玲李欣牛淑琼南通大学江苏省神经再生重点实验室南通大学基础医学院微生物与免疫学教研室南通大学附属医院骨科江苏南通226001

目的:探讨突触后密度蛋白-95(PSD-95)在大鼠脊髓发育过程中的表达变化以及细胞定位。方法:采用实时定量PCR(Real-Time PCR)和Western blot测定发育不同时期PSD-95 mRNA及蛋白水平的表达变化。采用免疫荧光染色显示PSD-95在发育脊髓中的... 详细信息

目的:探讨突触后密度蛋白-95(PSD-95)在大鼠脊髓发育过程中的表达变化以及细胞定位。方法:采用实时定量PCR(Real-Time PCR)和Western blot测定发育不同时期PSD-95 mRNA及蛋白水平的表达变化。采用免疫荧光染色显示PSD-95在发育脊髓中的细胞定位。结果:大鼠脊髓发育过程中PSD-95 mRNA及其蛋白水平从生后1d开始逐渐升高,在生后1周达高锋,成年后维持在一定的生理水平。免疫荧光双标证实PSD-95在生后发育早期主要定位于脊髓灰质,与神经元的标记物NeuN和突触的标记物synapsin存在共定位;成年后广泛分布于脊髓前角、后角以及白质,分别与NeuN和synapsin以及小胶质细胞的标记物OX-42共定位。结论:大鼠脊髓发育过程中PSD-95在基因和蛋白水平呈现明显的时相变化,在生后发育早期主要表达在前角运动神经元和后角感觉神经元,提示PSD-95参与了神经元的发育和成熟。

关键词：突触后密度蛋白-95(PSD-95) 脊髓发育 NMDA受体大鼠

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突触后密度蛋白-95在大鼠坐骨神经损伤后的表达

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神经解剖学杂志 2007年第2期23卷 150-154页

作者：高尚锋程纯陈梦玲史淑贤秦婧沈爱国南通大学江苏省神经再生重点实验室南通226001 南通大学基础医学院微生物与免疫学教研室南通226001

为了探讨突触后密度蛋白-95(PSD-95)在周围神经损伤过程中的表达变化,本实验建立大鼠坐骨神经夹伤模型,采用荧光定量PCR(real-timePCR)和Western blotting对PSD-95 mRNA及其蛋白水平进行定量检测,应用免疫荧光双标技术观察PSD-95与神经... 详细信息

为了探讨突触后密度蛋白-95(PSD-95)在周围神经损伤过程中的表达变化,本实验建立大鼠坐骨神经夹伤模型,采用荧光定量PCR(real-timePCR)和Western blotting对PSD-95 mRNA及其蛋白水平进行定量检测,应用免疫荧光双标技术观察PSD-95与神经型一氧化氮合酶(nNOS)的共定位情况。结果显示,PSD-95 mRNA及其蛋白在正常坐骨神经中度表达,损伤后迅速下降;PSD-95 mRNA从损伤后2d开始表达上调;而其蛋白水平于损伤后1周明显升高。免疫荧光双标染色证实在坐骨神经损伤后1周PSD-95与nNOS共定位于Schwann细胞上,而与神经丝蛋白NF-200共定位不明显。本研究结果提示PSD-95通过nNOS参与了周围神经损伤修复过程。

关键词：突触后密度蛋白-95 坐骨神经神经型一氧化氮合酶 NMDA受体大鼠

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p27^(kip1)和Skp2在损伤后大鼠坐骨神经中的表达变化

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神经解剖学杂志 2007年第1期23卷 20-24页

作者：史淑贤程纯陈梦玲秦婧高尚锋沈爱国南通大学江苏省神经再生重点实验室南通226001 南通大学基础医学院微生物学与免疫学教研室南通226001

为了探讨损伤后周围神经p27kip1和S期激酶相关蛋白2(Skp2)的定位表达和变化,本实验将成年SD大鼠随机分为正常对照组、夹伤组和切断组,运用Western blot结合免疫组织化学及免疫荧光双标,在大鼠坐骨神经损伤时,对p27kip1和Skp2表达的影响... 详细信息

为了探讨损伤后周围神经p27kip1和S期激酶相关蛋白2(Skp2)的定位表达和变化,本实验将成年SD大鼠随机分为正常对照组、夹伤组和切断组,运用Western blot结合免疫组织化学及免疫荧光双标,在大鼠坐骨神经损伤时,对p27kip1和Skp2表达的影响进行了研究。结果表明:(1)坐骨神经夹伤后,p27kip1蛋白表达先逐渐下降,后又逐渐上升;坐骨神经切断后,远侧段p27kip1蛋白表达持续下降,而近侧段p27kip1蛋白表达在切断后6h明显下降,后又逐渐升高至正常水平,而Skp2表达变化与之相反;(2)免疫组织化学染色结果显示,坐骨神经切断后1w,远侧段从断端到末端,p27kip1阳性信号逐渐增加,而Skp2阳性信号逐渐减弱;(3)免疫荧光双标显示,正常和损伤坐骨神经的雪旺氏细胞中都有p27kip1和Skp2表达。以上结果提示:周围神经损伤后影响雪旺氏细胞中p27kip1和Skp2的表达变化,为进一步研究它们在周围神经损伤和修复中的作用机制奠定基础。

关键词： p27^kip1 Skp2 雪旺氏细胞坐骨神经 Western blot 免疫组织化学大鼠

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p27^(kip1)和Spy1在肝癌细胞HuH7增殖过程中的表达变化及其相互关系

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苏州大学学报（医学版） 2009年第4期29卷 628-631,F0004页

作者：柯靖柯青陆牡丹王酉严美娟南通大学附属医院普外科江苏南通226001 南通大学医学院微生物与免疫学教研室江苏南通226001 南通大学医学院神经再生重点实验室江苏南通226001

目的探讨p27kip1和Spy1在肝癌细胞HuH7增殖过程中的表达变化及相互关系。方法采用血清饥饿合并释放处理肝癌细胞株HuH7,通过流式细胞术检测该处理对HuH7细胞生长周期的影响;同时采用Western blot、免疫荧光技术检测不同生长状态的HuH7... 详细信息

目的探讨p27kip1和Spy1在肝癌细胞HuH7增殖过程中的表达变化及相互关系。方法采用血清饥饿合并释放处理肝癌细胞株HuH7,通过流式细胞术检测该处理对HuH7细胞生长周期的影响;同时采用Western blot、免疫荧光技术检测不同生长状态的HuH7细胞中p27kip1和Spy1的表达及亚细胞定位情况;采用免疫沉淀方法检测HuH7细胞中p27kip1与Spy1的结合情况。结果血清饥饿造成HuH7细胞生长周期停滞,Spy1表达下降,p27kip1蛋白总量增加,差异有统计学意义(P<0.05或<0.01)。与此同时,p27kip1的阳性信号也由整个细胞分布转变为胞核高分布,而Spy1的阳性信号则由胞核高分布转变为胞浆高分布。血清释放后刺激细胞进入细胞周期,上述分子呈现相反的变化,且p27kip1的阳性信号在胞浆分布增强。结论Spy1可能通过与p27kip1结合来介导p27kip1的核内外分布并影响其表达,从而参与调控肝癌细胞的生长。

关键词： p27kip1 Spy1 肝癌 HuH7

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N-糖链合成相关β-1,4半乳糖基转移酶在人星形胶质细胞瘤中的表达

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临床检验杂志 2005年第4期23卷 241-243页

作者：严美娟沈爱国邵晓轶李爱红王惠民顾建新程纯南通大学微生物与免疫学教研室南通大学附属医院检验中心江苏南通226001 复旦大学上海医学院基因研究中心上海200032

目的分析与N-糖链合成相关β-1,4半乳糖基转移酶-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ(β1,4-galactosyltransferaseⅠ、Ⅱ、Ⅴ,β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ)mRNA在正常脑组织和各级人星形胶质细胞瘤的表达变化。方法采用RT-PCR方法,分析β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ在人... 详细信息

目的分析与N-糖链合成相关β-1,4半乳糖基转移酶-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ(β1,4-galactosyltransferaseⅠ、Ⅱ、Ⅴ,β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ)mRNA在正常脑组织和各级人星形胶质细胞瘤的表达变化。方法采用RT-PCR方法,分析β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ在人星形胶质细胞瘤的表达存在。以扩增的3种同工酶cDNA片段作为探针进行标记,Northernblot分析其mRNA在正常脑组织和各级人星形胶质细胞瘤中的表达变化。结果RT-PCR检测到β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ在人星形胶质细胞瘤中的表达存在。northernblot发现β-1,4-GalT-Ⅱ、Ⅴ在正常脑组织中有表达,但β-1,4-GalT-Ⅱ的表达较低,而β-1,4-GalT-Ⅰ在正常脑组织中表达极低。β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ在星形胶质细胞瘤中的表达显著高于正常脑组织。其中,β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ在各级胶质瘤中的表达没有明显差异。而β-1,4-GalT-Ⅴ的表达随胶质瘤分级的增高而增加。结论N-糖链合成相关的β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ在人脑星形胶质细胞瘤发生过程中的表达不同,尤其是β-1,4-GalT-Ⅴ的表达与人星型胶质瘤的恶性程度显著相关。

关键词：半乳糖基转移酶 N-糖链 β-1 相关合成正常脑组织 RT-PCR方法 Northern RT-PCR检测 northern 脑星形胶质细胞瘤 cDNA片段表达变化 blot 胶质瘤 mRNA 发生过程恶性程度同工酶

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β-1，4-GalT-I在炎症反应中的初步研究

β-1，4-GalT-I在炎症反应中的初步研究

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2008年全国糖生物学学术会议

作者：沈爱国钱佶程纯南通大学医学院微生物和免疫学教研室

目的:观察β-1,4-GalT-I 及其催化合成的 Galβ1-4GlcNAc 糖链在大鼠腹腔注射 LPS 致内毒素血症模型及大鼠局部皮肤创伤模型中的表达情况及细胞定位,明确炎症因子刺激内皮细胞β-1,4-GalT-I 表达上调的意义,探讨其在炎症因子刺激内皮细... 详细信息

目的:观察β-1,4-GalT-I 及其催化合成的 Galβ1-4GlcNAc 糖链在大鼠腹腔注射 LPS 致内毒素血症模型及大鼠局部皮肤创伤模型中的表达情况及细胞定位,明确炎症因子刺激内皮细胞β-1,4-GalT-I 表达上调的意义,探讨其在炎症因子刺激内皮细胞与单核细胞粘附中的生物学作用。方法:(1)利用分子生物学于段获取β-1,4-GalT-I TaqMan 探针与 cDNA 探针。(2)SD

关键词：炎症反应初步研究 GalT-I 细胞粘附

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中枢神经系统炎症过程中β1，4-半乳糖基转移酶1在脊髓的表达

中枢神经系统炎症过程中β1，4-半乳糖基转移酶1在脊髓的表达

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2008年全国糖生物学学术会议

作者：陈建平程纯沈爱国南通大学医学院微生物和免疫学教研室

目的:本课题组探讨中枢神经系统(CNS)炎症过程中β1,4半乳糖基转移酶I(β-1,4-GalT-I) 以及其催化合成的 Galβ1-4GlcNAc 糖链的表达以及其生物功能。方法:(1)大鼠脊髓局部注射脂多糖(LPS)建立大鼠 CNS 炎症模型,通过 Real-time PCR,Wes... 详细信息

目的:本课题组探讨中枢神经系统(CNS)炎症过程中β1,4半乳糖基转移酶I(β-1,4-GalT-I) 以及其催化合成的 Galβ1-4GlcNAc 糖链的表达以及其生物功能。方法:(1)大鼠脊髓局部注射脂多糖(LPS)建立大鼠 CNS 炎症模型,通过 Real-time PCR,Western Blot 和免疫组化等

关键词：中枢神经系统炎症半乳糖基转移酶免疫荧光双标

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一种高效准确定量计数噬菌体肽库目标分子的方法

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2011年第3期29卷 236-238页

作者：王可耕曾庆仁禹正杨曾铁兵刘彦南华大学医学院寄生虫学教研室衡阳421001 中南大学医学细胞与分子生物学实验中心长沙410013 南华大学附属第一医院肿瘤外科衡阳421001 南华大学医学院微生物学和免疫学教研室衡阳421001

利用双层琼脂平板法与荧光实时定量PCR(Real-time PCR)技术分别测定少量、中量和大量噬菌体的效价。结果显示,双层琼脂平板法与Real-time PCR法均可准确测定噬菌体效价。双层琼脂平板法所得符合条件的平板约为总数的1/3,需重复测定10次... 详细信息

利用双层琼脂平板法与荧光实时定量PCR(Real-time PCR)技术分别测定少量、中量和大量噬菌体的效价。结果显示,双层琼脂平板法与Real-time PCR法均可准确测定噬菌体效价。双层琼脂平板法所得符合条件的平板约为总数的1/3,需重复测定10次,每次消耗噬菌体10μl,测得噬菌体效价的组内变异系数为4.93%～30.38%。Real-timePCR法重复测定3次即可,每次消耗噬菌体1μl,其组内变异系数仅为0.02%～0.25%,明显低于双层琼脂平板法。提示,Real-time PCR技术可简单、迅速地测定噬菌体效价。

关键词：噬菌体效价双层琼脂平板法荧光实时定量PCR

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DC单抗调节供、受体大鼠免疫功能和抑制排斥反应的研究

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中国免疫学杂志 2004年第7期20卷 467-470页

作者：邵启祥尹岚王胜军许化溪刘恭植曹友清沈关心江苏大学医学技术学院微生物学和免疫学教研室镇江212001 江苏大学医学院病理解剖学教研室镇江212001 华中科技大学同济医学院免疫学系武汉430030

目的 :研究体内应用大鼠DC单抗WZD3对大鼠免疫状态的影响 ,在此基础上应用DC单抗同时处理供、受体 ,进行同种异体心脏移植 ,研究单抗诱导供、受体间双向移植耐受可能机理 ,为联合应用单抗和耐受性DC诱导移植免疫耐受奠定基础。方法 :用... 详细信息

目的 :研究体内应用大鼠DC单抗WZD3对大鼠免疫状态的影响 ,在此基础上应用DC单抗同时处理供、受体 ,进行同种异体心脏移植 ,研究单抗诱导供、受体间双向移植耐受可能机理 ,为联合应用单抗和耐受性DC诱导移植免疫耐受奠定基础。方法 :用不同剂量WZD3处理SD(受体 )和Wistar(供体 )大鼠 ,两周后观察单向、双向混合淋巴细胞培养结果和经ConA或LPS刺激脾细胞产生的细胞因子水平变化。选择合适WZD3剂量同时对供、受体大鼠体内注射 ,进行异体异位心肺联合移植 ,术后观察移植器官存活时间和器官排斥终点时受体脾细胞分泌细胞因子水平。结果 :高剂量 (8mg kg体重 )WZD3对大鼠单向、双向MLC以及脾细胞产生IL 2和TNF有明显抑制作用 ,且能明显延长移植心脏存活时间 ;中剂量 (4mg kg体重 )和低剂量 (2mg kg体重 )WZD3对上述指标有轻度或无抑制作用。结论 :采用高剂量WZD3能下调大鼠免疫功能 ;同时处理供、受体大鼠 ,能诱导供、受体间双向免疫耐受 ,明显延长移植器官存活时间 ,其机制可能与清除DC、下调Th1细胞功能有关。

关键词：树突状细胞单抗免疫功能移植排斥反应

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细胞外信号调节激酶在脂多糖诱导内皮细胞β-1，4-半乳糖基转移酶-Ⅰ表达中的作用

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南通大学学报（医学版） 2008年第6期28卷 430-432页

作者：贲志云程纯钱佶肖锋张福鹏季玉红南通大学医学院微生物学与免疫学教研室南通226001

目的:研究细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated protein kinase,ERK)对脂多糖(LPS)诱导内皮细胞β-1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ(β-1,4-galactosyltransferase-Ⅰ,β-1,4-GalT-Ⅰ)表达的调节作用。方法:应用ERK通路抑制剂U0126预处理人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)2 h,再用LPS刺激HUVECs 4 h,分别用RT-PCR和Western-blot方法检测β-1,4-GalT-ⅠmRNA及蛋白水平表达变化,并通过内皮-单核细胞黏附试验观察HUVECs黏附能力的改变。结果:U0126显著抑制LPS引起的HUVECsβ-1,4-GalT-Ⅰ表达的上调及其黏附能力的上词。结论:ERK信号转导通路可能参与调节LPS诱导的内皮细胞β-1,4-GalT-Ⅰ的表达,并影响内皮细胞的黏附能力。

关键词：细胞外信号调节激酶脂多糖 β-1 4-半乳糖基转移酶-Ⅰ 内皮细胞

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