检索结果-内蒙古大学图书馆

交通医学 2025年第1期39卷 1-7,12页

作者：刘星雨丁肇诣李心怡王东沈筠恬南通大学医学院江苏226001 南通大学江苏省神经再生重点实验室

目的:探索牛膝多肽k(Achyranthes bidentata polypeptides,ABPPk)处理下施万细胞(Schwann cells,SCs)发育过程中动态功能RNA的变化以及时间依赖性特征。方法:将SCs设为DMEM组、含有ABPPk(0.5μg/mL)的ABPPk+DMEM组、含有神经生长因子(nerve growth factor,NGF)(0.1μg/mL)的NGF+DMEM组。ABPPk和NGF作用于SCs 0.25 h、0.5 h、1 h、2 h、3 h、6 h、12 h和24 h时分别收取SCs共75个样本,进行全转录组RNA测序,通过质量控制评估和表达验证,展示完整、深度测序且高度一致的时间序列数据集。结果:RNA测序结果显示所有样品均具有较高的RNA完整性数值(RNA integrity number,RIN),表明总RNA完整。UMAP分析显示两个主要的簇具有轻微的时间依赖性。差异表达分析显示,差异表达基因的数量在12 h和24 h变化较大。功能聚类分析显示,在12 h这个时间点,ABPPk处理所特有的上调基因主要参与调控蛋白质磷酸化、细胞凋亡、粘附连接等过程,而NGF处理所特有的上调基因主要参与调控内吞、GTP酶活性、氧化磷酸化等过程。在24 h这个时间点,ABPPk处理后上调的基因主要参与调节肌动蛋白骨架、DNA修复、轴突导向等过程,而NGF处理后上调的基因主要参与基因表达的正向调控及鞘脂信号通路的激活。实时PCR结果显示,参与SCs发育的基因Ccnd1、Foxo3、Pmp22、Lgals3、Usp1及Rps6ka1在RNA-seq和实时PCR之间的mRNA表达高度相关,表明数据准确。结论:本研究获得的数据集能助力探索动态功能RNA在施万细胞发育中的作用,以及在不同神经营养因子处理下的分子差异,有利于发现周围神经再生的新治疗靶点。

关键词：牛膝多肽施万细胞 RNA测序神经生长因子

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糖元合成酶激酶3β对微管相关蛋白tau的磷酸化作用

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生物化学与生物物理进展 2007年第9期34卷 945-951页

作者：刘飞施建华丁绍红尹晓敏南通大学江苏省神经再生重点实验室南通大学医学院生化教研室南通226001

tau蛋白是中枢神经系统中重要的微管相关蛋白,其功能受磷酸化调节.异常过度磷酸化的tau蛋白是阿尔茨海默病患者脑中神经纤维缠结的主要组成部分.糖元合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)是重要的tau蛋白激酶之一,它虽... 详细信息

tau蛋白是中枢神经系统中重要的微管相关蛋白,其功能受磷酸化调节.异常过度磷酸化的tau蛋白是阿尔茨海默病患者脑中神经纤维缠结的主要组成部分.糖元合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)是重要的tau蛋白激酶之一,它虽可催化tau蛋白多个位点的磷酸化,但对不同位点,其催化效率不同.通过位点特异性、磷酸化依赖的tau蛋白抗体,用免疫印迹技术,检测GSK-3β对tau蛋白位点特异性的磷酸化作用及动力学.用双倒数作图,计算GSK-3β催化tau磷酸化以及各个位点磷酸化的Km值,并结合培养细胞中的实验,研究GSK-3β对tau蛋白磷酸化作用的位点特异性.结果显示,GSK-3β催化tau蛋白多个位点的磷酸化,其中包括Thr181、Ser199、Ser202、Thr205、Thr212、Thr217、Thr231、Ser396和Ser404,对不同的位点磷酸化作用,其Km值不同,GSK-3β对Ser396的Km值最低,即对Ser396位点的亲和性最高,催化其磷酸化的能力最强.在培养的细胞中,也显示了GSK-3β的表达引起Ser396位点的磷酸化最明显.

关键词： tau 糖元合成酶激酶3β(GSK-3β) 磷酸化

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自然衰老小鼠室管膜下区神经干细胞增龄性改变

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解剖学报 2016年第5期47卷 577-582页

作者：董传明金国华南通大学医学院人体解剖学系江苏省神经再生重点实验室江苏南通226001

目的探讨自然衰老小鼠室管膜下区(SVZ)神经干细胞(NSCs)在衰老过程中生物学特点的改变。方法 2月龄、28月龄小鼠,各10只,体外分离、培养、鉴定NSCs,5-溴-2-脱氧尿苷(Brd U)染色比较两组细胞的增殖水平;β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检... 详细信息

目的探讨自然衰老小鼠室管膜下区(SVZ)神经干细胞(NSCs)在衰老过程中生物学特点的改变。方法 2月龄、28月龄小鼠,各10只,体外分离、培养、鉴定NSCs,5-溴-2-脱氧尿苷(Brd U)染色比较两组细胞的增殖水平;β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测细胞衰老水平;细胞内活性氧(ROS)试剂盒检测细胞ROS表达水平;Western blotting检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p16及p19蛋白表达水平;体内用巢蛋白(Nestin)/性别决定基因高迁移率组蛋白-2(Sox2)检测两组小鼠SVZ区厚度的差异。结果年轻、年老小鼠的神经干细胞能表达Nestin及Sox2,符合神经干细胞的表达特性。与年轻小鼠相比,年老小鼠神经干细胞的Brd U阳性细胞比例显著下降,SA-β-Gal阳性细胞百分比显著升高,细胞活性氧水平显著升高,SVZ区厚度明显变薄,差异具有统计学意义(P<0.05)。在分子水平上表现为cyclin D1蛋白表达水平明显下降,p16、p19蛋白表达水平显著升高。结论年老小鼠NSCs出现增龄性变化,这些变化可能在大脑衰老中起重要作用。

关键词：神经干细胞衰老免疫印迹法小鼠

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红景天苷对谷氨酸损伤海马神经元的保护作用

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解剖学报 2008年第3期39卷 355-359页

作者：陈霞周松林顾晓松丁斐苏州大学医学院苏州215123 南通大学江苏省神经再生重点实验室南通226001

目的观察红景天苷(salidroside)对谷氨酸(Glu)损伤海马神经元的保护作用。方法胚鼠原代培养海马神经元,与不同浓度的红景天苷(10、20和40mg/L)共同孵育24h,加入125μmol/L谷氨酸损伤海马神经元15min。采用MTT法检测细胞活性;生化法测定... 详细信息

目的观察红景天苷(salidroside)对谷氨酸(Glu)损伤海马神经元的保护作用。方法胚鼠原代培养海马神经元,与不同浓度的红景天苷(10、20和40mg/L)共同孵育24h,加入125μmol/L谷氨酸损伤海马神经元15min。采用MTT法检测细胞活性;生化法测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活力的变化;膜联蛋白-V-FITC(annexin V-FITC)和碘化吡啶(PI)双标染色以及Hoechst染色观察细胞凋亡情况;激光共焦显微镜观察细胞内Ca2+的变化。结果红景天苷可明显改善谷氨酸损伤后细胞的活性,抑制谷氨酸损伤后培养液中LDH的活力,降低谷氨酸引起的细胞凋亡率,降低谷氨酸损伤后细胞内的Ca2+浓度。结论红景天苷可明显拮抗谷氨酸损伤海马神经元的作用,其机制可能与抑制谷氨酸引起的Ca2+内流有关。

关键词：红景天苷谷氨酸海马神经元细胞培养大鼠

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含种子细胞的丝素组织工程神经移植物修复大鼠脊髓损伤

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解剖学报 2015年第5期46卷 596-601页

作者：刘晓东薛成斌鞠前前杨晓华秦建兵田美玲吕广明南通大学医学院人体解剖学系江苏省神经再生重点实验室江苏南通226001

目的探讨体外构建含种子细胞的蚕丝丝素组织工程神经移植物（TENGs）的方法,评价其对大鼠脊髓损伤修复的影响。方法分离大鼠皮肤前体细胞并向施万细胞诱导分化,S-100免疫荧光染色鉴定。将皮肤前体细胞诱导分化的施万细胞（SKP-SCs）... 详细信息

目的探讨体外构建含种子细胞的蚕丝丝素组织工程神经移植物（TENGs）的方法,评价其对大鼠脊髓损伤修复的影响。方法分离大鼠皮肤前体细胞并向施万细胞诱导分化,S-100免疫荧光染色鉴定。将皮肤前体细胞诱导分化的施万细胞（SKP-SCs）作为种子细胞,联合蚕丝丝素神经导管和纤维支架共培养。共培养7d后将蚕丝丝素TENGs置入大鼠背侧T8-T10半横断损伤的脊髓中,于术后不同时间点利用BBB评分观察行为学的变化,术后8周取材,切片,免疫荧光染色观察脊髓损伤修复情况以及种子细胞的存活情况。结果相差显微镜下体外培养的SKP-SCs大部分细胞形态呈双极或3极,免疫荧光染色显示,SKP-SCs呈S-100阳性,将SKP-SCs与蚕丝丝素支架材料共培养,蚕丝丝素支架表面均匀贴附大量的细胞,生长状态良好。将该移植物移植入大鼠T8-T10半横断损伤脊髓处,术后BBB评分显示,从4周起至8周均优于对照组,且结果具有统计学差异;术后8周时取材切片仍能观察到大鼠体内有大量种子细胞存活。结论含种子细胞的蚕丝丝素组织工程神经移植物对于修复大鼠脊髓损伤具有一定的促进作用。

关键词：中枢神经系统组织工程施万细胞丝素蛋白脊髓损伤免疫荧光大鼠

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用于周围神经再生的纤维基导电型复合支架制备及性能研究

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中国修复重建外科杂志 2019年第3期33卷 356-362页

作者：戴伍飞石嘉琪刘莎徐梓淇石逸瑾赵亚红杨宇民南通大学江苏省与教育部神经再生重点实验室南通大学神经再生协同创新中心江苏南通226001 南通大学医学院江苏南通226001

目的探讨一种"壳-芯"结构的聚吡咯/丝素蛋白(polypyrrole/silk fibroin,PPy/SF)纤维基导电型复合支架的制备方法、理化性能与生物相容性,为其用于组织工程神经研究奠定基础。方法采用3D打印结合原位聚合反应制备"壳-芯&q... 详细信息

目的探讨一种"壳-芯"结构的聚吡咯/丝素蛋白(polypyrrole/silk fibroin,PPy/SF)纤维基导电型复合支架的制备方法、理化性能与生物相容性,为其用于组织工程神经研究奠定基础。方法采用3D打印结合原位聚合反应制备"壳-芯"结构导电纤维,联合静电纺形成PPy/SF纤维基导电型复合支架;另制备无SF内芯的PPy导电纤维及SF静电纺纤维。分别对各材料进行稳定性、生物力学、导电性、降解性能、生物活性检测,观察纤维基导电型复合支架的综合性能。结果与单纯无内芯的PPy导电纤维及SF静电纺纤维比较,"壳-芯"结构的纤维基导电型复合支架可以更好地保持稳定性能,增强复合支架的力学拉伸性,电导性维持长久,提升抗降解性能;同时PPy/SF纤维基导电型复合支架适合NIH3T3细胞附着,有利于细胞增殖,生物活性良好。结论PPy/SF纤维基导电型复合支架满足人工神经移植物在导电性、稳定性、生物活性等方面的要求,为研制高性能、多功能的复合材料提供了新思路。

关键词：组织工程周围神经导电型导向性生物活性支架材料

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大鼠皮质脊髓束神经电信号的记录与分析方法研究

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中国应用生理学杂志 2011年第2期27卷 168-172页

作者：沈卫星袁颖姜正林吕广明姚健南通大学医学院江苏省神经再生重点实验室南通大学航海医学研究所江苏南通226001

目的：探索皮质脊髓束（CST）电生理信号的采集记录方法,分析描述电信号的特征,从而为通过植入式微电极阵列进行信号采集的记录方法建立一定的实验基础,为将来进一步研究脊髓损伤修复与功能重建提供有价值的神经电生理基础资料。方法：... 详细信息

目的：探索皮质脊髓束（CST）电生理信号的采集记录方法,分析描述电信号的特征,从而为通过植入式微电极阵列进行信号采集的记录方法建立一定的实验基础,为将来进一步研究脊髓损伤修复与功能重建提供有价值的神经电生理基础资料。方法：使用神经信号采集处理系统（Cerebus System）,在SD大鼠的脊髓T8节段处的皮质脊髓束内通过插入微电极,记录大鼠皮质脊髓束神经电信号。利用神经信号分析软件Offline Sorter、Neuroexplorer对已存储的信号文件进行波形特点的描述,包括波长、波幅、放电频率、同一电极上记录到的不同放电单元之间的同步性、两根电极上记录到的不同放电单元之间的同步性、放电信号的峰间期（ISI）分析等。结果：长时间稳定记录到连续的皮质脊髓束自发放电信号,一般在同一电极上记录到3~4个来自不同放电单位（细胞）的放电信号。皮质脊髓束自发放电信号的波形呈双向型,波宽为0.6~1.3 ms,波幅为百μV级。在多次实验状态下均能达到很高的信噪比,信号采集效果理想。经快蓝（LFB）染色确认记录电极尖端位于皮质脊髓束内。结论：本实验采用Cere-bus神经信号采集处理系统,利用记录电极可在大鼠的皮质脊髓束内较长时间稳定地记录到较为稳定的微伏级神经电信号,并可进行有意义的神经电信号特征分析,为进一步研究脊髓损伤修复与功能重建提供了有价值的神经电生理基础资料。

关键词：皮质脊髓束神经信号采集处理系统神经电信号信号分析

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大鼠穹隆海马伞切割对海马伞内神经干细胞再生的影响

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解剖学报 2011年第6期42卷 751-755页

作者：高露李伟金国华张新化邹琳清田美玲秦建兵南通大学医学院人体解剖学系江苏省神经再生重点实验室江苏南通226001

目的检测损伤的穹隆海马伞内自体神经干细胞的再生情况。方法 SD大鼠7只,切割左侧穹隆海马伞,术后腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)。术后7d取脑组织制备冷冻切片,行Nestin、BrdU免疫荧光检测;取穹隆海马伞组织进行神经干细胞的体外分... 详细信息

目的检测损伤的穹隆海马伞内自体神经干细胞的再生情况。方法 SD大鼠7只,切割左侧穹隆海马伞,术后腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)。术后7d取脑组织制备冷冻切片,行Nestin、BrdU免疫荧光检测;取穹隆海马伞组织进行神经干细胞的体外分离培养,对获得的细胞球进行增殖性、胚胎性以及多分化潜能的检测。结果切割侧穹隆海马伞中见到较多的Nestin和BrdU阳性细胞,部分细胞表现为BrdU/Nestin双重阳性;取切割侧穹隆海马伞组织进行分离培养能获得Nestin与BrdU阳性的神经球,而正常侧海马伞未能培养出神经球;神经球可分化为微管相关蛋白-2(MAP-2)阳性细胞、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞或2,3-环核苷酸-3-磷酸二酯酶(CNP)阳性细胞。结论切割穹隆海马伞后,切割侧穹隆海马伞中出现了自体神经干细胞的再生及增殖。

关键词：穹隆海马伞神经干细胞神经元切割细胞培养免疫荧光大鼠

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切割穹隆海马伞海马提取液促进放射状胶质细胞增殖和向神经元分化

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解剖学报 2011年第6期42卷 721-725页

作者：秦建兵金国华李浩明施金洪田美玲谭雪锋张新化邹琳清南通大学医学院人体解剖学系江苏省神经再生重点实验室江苏南通226001

目的探讨海马微环境的变化对体外培养的放射状胶质细胞增殖和分化的影响。方法本实验在成功制备正常侧和切割穹隆海马伞侧海马提取液的基础上,分别使用正常侧和切割侧海马提取液,观察其在体外培养的放射状胶质细胞增殖和分化过程中所起... 详细信息

目的探讨海马微环境的变化对体外培养的放射状胶质细胞增殖和分化的影响。方法本实验在成功制备正常侧和切割穹隆海马伞侧海马提取液的基础上,分别使用正常侧和切割侧海马提取液,观察其在体外培养的放射状胶质细胞增殖和分化过程中所起的作用。结果在放射状胶质细胞增殖阶段,切割组与正常组及对照组相比,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记的增殖细胞比例明显提高(P<0.05);在放射状胶质细胞分化阶段,切割组与正常组及对照组相比,Tuj1阳性神经元数量明显增多(P<0.05)。结论切割穹隆海马伞侧海马提取液对大鼠放射状胶质细胞的增殖和向神经元的分化有明显促进作用,提示海马微环境对海马放射状胶质细胞的增殖和分化有重要影响。

关键词：放射状胶质细胞神经元海马海马提取液海马微环境细胞培养免疫荧光大鼠

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大鼠创伤性脑损伤后海马齿状回中脑脂结合蛋白的表达变化

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解剖学报 2011年第6期42卷 746-750页

作者：毛伟峰金国华衣昕秦建兵田美玲南通大学医学院人体解剖学系江苏省神经再生重点实验室江苏南通226001

目的观察大鼠创伤性脑损伤(TBI)后不同时间点海马结构齿状回中脑脂结合蛋白(BLBP)的表达变化。方法将72只SD大鼠随机分为脑损伤组、假手术组和空白对照组,制备大鼠颅脑液压损伤模型,伤后1、3、7、14d分别行海马组织Western blotting和B... 详细信息

目的观察大鼠创伤性脑损伤(TBI)后不同时间点海马结构齿状回中脑脂结合蛋白(BLBP)的表达变化。方法将72只SD大鼠随机分为脑损伤组、假手术组和空白对照组,制备大鼠颅脑液压损伤模型,伤后1、3、7、14d分别行海马组织Western blotting和BLBP、波形蛋白(Vimentin)免疫荧光双标检测。结果 Western blotting结果显示,伤后1d BLBP蛋白含量相对于空白对照组下降(P<0.01),后逐渐上升,至伤后7d BLBP蛋白含量与其他各组比较达到高峰(P<0.01),伤后14d又下降低于空白对照组水平(P<0.01)。BLBP和Vimentin双标阳性细胞数量变化趋势基本与Western blotting结果相一致。损伤侧海马BLBP和Vimentin双标阳性细胞主要分布于海马齿状回颗粒下层,多数呈放射状胶质细胞(RGCs)形态;伤后7d,齿状回门区也出现BLBP和Vimentin双标阳性细胞,大多为反应性星形胶质细胞形态。结论大鼠创伤性脑损伤后,损伤侧海马齿状回中BLBP的表达呈现先下降后上升,至伤后7d达到高峰,后又急剧下降的规律,BLBP的表达变化可能与海马神经再生和神经功能恢复有关。

关键词：创伤性脑损伤齿状回放射状胶质细胞脑脂结合蛋白波形蛋白免疫印迹法免疫荧光大鼠

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