检索结果-内蒙古大学图书馆

中国康复医学杂志 2015年第9期30卷 877-882页

作者：杨伟伟金国华秦建兵李浩明田美玲南京中医药大学第二临床医学院江苏南京210023 南通大学医学院人体解剖学系江苏省神经再生重点实验室

目的:探讨海马胆碱能神经元刺激肽(HCNP)对切割穹窿海马伞后海马胆碱能神经元的促进作用。方法:36只SD大鼠随机分成两组,切割右侧穹窿海马伞后,术后连续5d腹腔注射BrdU,经侧脑室分别注射HCNP和人工脑脊液(ACSF),每3天1次,共6次。切割术... 详细信息

目的:探讨海马胆碱能神经元刺激肽(HCNP)对切割穹窿海马伞后海马胆碱能神经元的促进作用。方法:36只SD大鼠随机分成两组,切割右侧穹窿海马伞后,术后连续5d腹腔注射BrdU,经侧脑室分别注射HCNP和人工脑脊液(ACSF),每3天1次,共6次。切割术前、术后及治疗术后行Morris水迷宫行为学测试;术后第35天,灌注取脑行溴脱氧尿苷(5-BrdU)、胆碱乙酰转移酶(ChAT)免疫荧光检测;提取总RNA,RT-PCR检测ChAT mRNA表达量;提取总蛋白,Western blot检测ChAT蛋白表达。结果:切割穹窿海马伞后,两组大鼠平均逃避潜伏期(AEL)均明显增加,记忆力下降,经过治疗后,实验组大鼠AEL显著缩短,对照组无改善,两组AEL有显著性差异(P<0.05);HCNP组海马齿状回颗粒下层可见较多BrdU阳性细胞及海马ChAT阳性神经元,ACSF组仅见少量BrdU阳性细胞,未见ChAT阳性神经元;RT-PCR结果显示,HCNP组ChAT mRNA约为ACSF组2倍(P<0.01);Western blot结果表明,实验组ChAT蛋白相对表达量为0.412±0.018、对照组为0.218±0.017,实验组明显高于对照组,二者存在显著性差异(P<0.01)。结论:HCNP可促进海马齿状回颗粒下层神经干细胞的增殖及其向胆碱能神经元分化。

关键词：海马胆碱能神经元刺激肽海马神经干细胞神经元胆碱能神经元

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流式细胞仪分选转基因斑马鱼胚胎荧光标记细胞的一种快速方法

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中国细胞生物学学报 2014年第3期36卷 356-360页

作者：王新张素珍王学谦李丽萍张晶晶刘东南通大学江苏省神经再生重点实验室南通226001 广东医学院附属医院湛江524001

荧光蛋白在特异组织和器官表达的转基因斑马鱼已经在发育生物学和疾病模型研究中得到了广泛的应用。这些转基因系有助于追踪和分析数量较少的细胞群。但是如果要分离得到这些细胞来定量分析mRNA或蛋白质的表达情况比较困难。利用流式细... 详细信息

荧光蛋白在特异组织和器官表达的转基因斑马鱼已经在发育生物学和疾病模型研究中得到了广泛的应用。这些转基因系有助于追踪和分析数量较少的细胞群。但是如果要分离得到这些细胞来定量分析mRNA或蛋白质的表达情况比较困难。利用流式细胞仪分选这些荧光标记细胞是一种解决办法。此方法在不同的实验室中被广泛地应用,也有相关流程的介绍。但是流程一般较为繁琐,操作比较困难。该文以从转基因斑马鱼Tg(Kdrl:EGFP)中分选绿色荧光蛋白阳性的血管内皮细胞为例,介绍利用流式细胞仪分选转基因斑马鱼荧光标记细胞的实验流程和技术要点。该文作者在前人工作的基础上结合大量的实验经验,发展并优化了一套操作简便、效率较高的流程来分选这些细胞,在此做详细的介绍给大家以供参考。

关键词：转基因分选流式细胞仪斑马鱼

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大鼠坐骨神经缺损半个月后人工组织神经移植物修复的实验研究

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神经解剖学杂志 2007年第5期23卷 467-472页

作者：林巍巍姚健施伟焦海山李奕王晓冬南通大学医学院组织学与胚胎学教研室江苏省神经再生重点实验室南通226001

为了观察人工组织神经移植物对大鼠坐骨神经非新鲜损伤的修复作用。我们在成年SD大鼠左侧股中部切除部分坐骨神经制造神经缺损模型。15d后,实验组(9只)用人工组织神经移植物修复神经缺损,自体神经修复作为阳性对照(6只),保持神经缺损为... 详细信息

为了观察人工组织神经移植物对大鼠坐骨神经非新鲜损伤的修复作用。我们在成年SD大鼠左侧股中部切除部分坐骨神经制造神经缺损模型。15d后,实验组(9只)用人工组织神经移植物修复神经缺损,自体神经修复作为阳性对照(6只),保持神经缺损为阴性对照(6只)。第二次手术后3个月,电生理学、形态学结果显示实验组的再生神经虽略差于自体对照组,但明显优于缺损对照组,腓肠肌的萎缩形态学指标变化则较接近自体对照组。实验结果表明人工组织神经移植物对已缺损15d的大鼠周围神经具有较好修复作用。

关键词：坐骨神经人工组织神经移植物非新鲜损伤神经再生大鼠

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轴突成束和延伸蛋白ζ-1基因在1型和2型星形胶质细胞中的表达

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解剖学报 2008年第5期39卷 636-639页

作者：何江虹张晔夏春林张万钰朱婷万明辉苏州大学医学院解剖学教研室暨细胞神经生物学研究室江苏苏州215123 南通大学江苏省神经再生重点实验室江苏南通226001

目的探讨轴突成束和延伸蛋白ζ-1(FEZ1)基因在1型和2型星形胶质细胞(T1A、T2A)中的表达差异,及其在新生SD大鼠中枢神经系统中的表达。方法培养、分离、纯化T1A和T2A,提取总RNA,分别以Cy3-dCTP和Cy5-dCTP标记T1A和T2A的mRNA,进行基因表... 详细信息

目的探讨轴突成束和延伸蛋白ζ-1(FEZ1)基因在1型和2型星形胶质细胞(T1A、T2A)中的表达差异,及其在新生SD大鼠中枢神经系统中的表达。方法培养、分离、纯化T1A和T2A,提取总RNA,分别以Cy3-dCTP和Cy5-dCTP标记T1A和T2A的mRNA,进行基因表达谱芯片检测分析。选取其中与轴突延伸相关的FEZ1基因,应用半定量RT-PCR法研究FEZ1在新生大鼠中枢神经系统多个部位的表达。结果T1A和T2A中差异表达基因138条,其中60条在T1A中高表达,78条在T2A中高表达。FEZ1基因在T2A中高表达。RT-PCR结果显示,FEZ1在新生大鼠中枢神经系统大脑皮层、嗅球和脊髓组织中均有表达。结论T1A和T2A中存在多个差异表达基因,其中与轴突延伸相关的FEZ1基因表达明显差异,提示T1A和T2A可能在诱导轴突生长方面有不同功能;FEZ1基因与中枢神经系统的发育和再生相关。

关键词：轴突成束和延伸蛋白ζ-1 星形胶质细胞胶质细胞谱系基因表达谱芯片反转录-聚合酶链式反应大鼠

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大鼠创伤性脑损伤后损伤区周围脑组织脑脂结合蛋白的表达变化

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苏州大学学报（医学版） 2011年第5期31卷 718-722页

作者：毛伟峰金国华衣昕秦建兵田美玲南通大学医学院人体解剖学系江苏省神经再生重点实验室江苏南通226001

目的观察大鼠创伤性脑损伤(TBI)后不同时间点脑损伤区周围脑组织脑脂结合蛋白(BLBP)的表达变化。方法采用大鼠颅脑液压损伤模型,在伤后1、3、7、14 d用Western blot检测损伤区周围脑组织BLBP的表达,用免疫荧光双标法检测BLBP和波形蛋白... 详细信息

目的观察大鼠创伤性脑损伤(TBI)后不同时间点脑损伤区周围脑组织脑脂结合蛋白(BLBP)的表达变化。方法采用大鼠颅脑液压损伤模型,在伤后1、3、7、14 d用Western blot检测损伤区周围脑组织BLBP的表达,用免疫荧光双标法检测BLBP和波形蛋白。结果 TBI后1 d,BLBP含量显著下降,后逐渐上升,至伤后7 d达到高峰,伤后14 d又急剧下降(均P<0.01)。BLBP和波形蛋白双标阳性细胞主要分布在损伤区周围皮质及损伤侧胼胝体,损伤侧皮质阳性细胞大多为反应性星形胶质细胞形态;损伤侧胼胝体阳性细胞基本呈放射状胶质细胞(RGCs)形态。结论 TBI后损伤区周围脑组织RGCs样细胞可能与皮质神经再生和神经功能恢复有关。

关键词：创伤性脑损伤脑脂结合蛋白波形蛋白皮质胼胝体放射状胶质细胞大鼠

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小鼠神经缺损管式修复后长时程功能恢复与再生评价

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解剖学报 2014年第5期45卷 599-604页

作者：糜大国张燕平顾天文赵亚红胡文南通市中医院骨伤科江苏南通226001 南通大学江苏省神经再生重点实验室江苏南通226001 南通大学医学院江苏南通226001

目的了解壳聚糖/聚乳酸-乙醇酸共聚体(PLGA)人工神经移植物修复小鼠神经缺损后神经功能长时程恢复水平与再生神经成熟度。方法采用人工神经移植物桥接修复小鼠坐骨神经缺损(n=6),以自体神经修复(n=6)和缺损组(n=6)为对照,术后1年采用热... 详细信息

目的了解壳聚糖/聚乳酸-乙醇酸共聚体(PLGA)人工神经移植物修复小鼠神经缺损后神经功能长时程恢复水平与再生神经成熟度。方法采用人工神经移植物桥接修复小鼠坐骨神经缺损(n=6),以自体神经修复(n=6)和缺损组(n=6)为对照,术后1年采用热痛阈测定、电生理学、激光多普勒血流检测评定神经功能,采用靶肌湿重比、组织学和电子显微镜等技术综合评定神经重支配和再生神经成熟度。结果人工神经移植物组足底痛觉反应潜伏期、神经源性血管扩张程度、腓肠肌复合肌动作电位(CMAPs)波幅和潜伏期、靶肌湿重比、再生轴突数量等指标与自体神经修复组相近,但与健侧相比CMAPs潜伏期较长,髓鞘较薄,轴突直径分布滞后。结论人工神经移植物修复小鼠神经缺损术后1年感觉及自主神经功能、再生神经数量和靶肌重支配水平与自体神经修复相当,但再生神经纤维成熟度未达正常。

关键词：神经损伤神经修复壳聚糖聚乳酸-乙醇酸共聚体激光多普勒血流检测电生理学小鼠

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大鼠坐骨神经夹伤后SSeCKS的表达变化

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神经解剖学杂志 2007年第2期23卷 133-138页

作者：陈莉秦婧沈爱国刘海鸥牛淑琼高尚峰史淑贤南通大学基础医学院病理学教研室江苏省神经再生重点实验室南通226001

为了探讨大鼠坐骨神经夹伤后SSeCKS(Src抑制的蛋白激酶C底物)在神经中的表达变化及其意义,本研究制备了成年SD大鼠坐骨神经夹伤模型,通过Western blotting和免疫组织化学方法检测坐骨神经夹伤后SSeCKS表达的时空变化。Western blotting... 详细信息

为了探讨大鼠坐骨神经夹伤后SSeCKS(Src抑制的蛋白激酶C底物)在神经中的表达变化及其意义,本研究制备了成年SD大鼠坐骨神经夹伤模型,通过Western blotting和免疫组织化学方法检测坐骨神经夹伤后SSeCKS表达的时空变化。Western blotting结果显示:大鼠坐骨神经夹伤后,SSeCKS的表达迅速升高,伤后6h即达到高峰,之后逐渐下降。免疫组织化学染色结果表明SSeCKS在神经夹伤两端高表达,以近端明显,呈簇状聚集。夹伤远端表达较近端稍低。远离夹伤处及相应对侧,SSeCKS的表达水平有所下降且分布较为均一。免疫荧光组织化学双标记结果显示:夹伤两端SSeCKS与S100和NF200的共存不明显,但可见部分SSeCKS与GAP43双标纤维。本研究提示大鼠坐骨神经夹伤可引起SSeCKS的表达变化,该变化可能参与周围神经损伤后某些伤害性刺激信号分子的转导并与损伤后神经的再生及功能修复有关。

关键词：坐骨神经夹伤 SSeCKS 免疫组织化学 Western blotting 大鼠

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基于AAV的遗传性耳聋基因治疗的基础和临床研究进展

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中国科学:生命科学 2025年第4期 697-710页

作者：周吟毅杨雪寒陆宜成王晓涵陈相琰范瑾怡张心茹伍贤敏张李燕谈方志齐洁玉柴人杰北京理工大学生命科学学院航天中心医院神经内科听力与平衡科学国家重点实验室东南大学数字医学工程全国重点实验室附属中大医院耳鼻咽喉头颈外科生命科学与技术学院生命健康高等研究院江苏省生物医学高新技术研究重点实验室南通大学神经再生联合创新中心四川省医学科学院四川省人民医院/电子科技大学附属医院耳鼻咽喉头颈外科东南大学深圳研究院

听力障碍作为发病率极高的社会健康问题受到广泛关注.约60%的感音神经性耳聋由遗传物质突变引起.遗传性聋的临床治疗主要依赖人工耳蜗和助听器,更为有效全面的生物学治疗手段的开发迫在眉睫.修复受损的基因,是从根本上治疗遗传性耳聋的... 详细信息

听力障碍作为发病率极高的社会健康问题受到广泛关注.约60%的感音神经性耳聋由遗传物质突变引起.遗传性聋的临床治疗主要依赖人工耳蜗和助听器,更为有效全面的生物学治疗手段的开发迫在眉睫.修复受损的基因,是从根本上治疗遗传性耳聋的有效手段.多个研究已表明,替代或修复遗传性聋小鼠模型中的突变基因,可有效恢复小鼠受损的听力.目前,基因治疗已成功恢复携带OTOF突变的遗传性耳聋患者听力.包括OTOF在内的耳聋基因有200多种,作为一种精准疗法,基因治疗在遗传性耳聋中的应用尚有诸多问题需要解决.本文首先概述了遗传性耳聋的发生发展,随后深入探讨了目前基因治疗应用于遗传性耳聋临床治疗的研究进展,并提出了耳聋基因治疗现阶段面临的困境与挑战.

关键词：听力损失基因治疗遗传性耳聋耳蜗

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壳聚糖乙酰化甲壳素材料与许旺细胞的体外相容性

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第32期12卷 6230-6234页

作者：陈颖任艳玲李奕林巍巍杨宇民王晓冬南通大学医学院组织学与胚胎学教研室江苏省南通市226001 江苏省神经再生重点实验室江苏省南通市226001

背景:天然甲壳素溶解性差,不易加工处理。传统工艺制备的甲壳素存在较多致炎性杂质蛋白。目的:观察由高纯度壳聚糖乙酰化制备的甲壳素材料与许旺细胞的体外生物相容性。设计、时间及地点:对比观察实验,于2006-09/2007-10在南通大学医学... 详细信息

背景:天然甲壳素溶解性差,不易加工处理。传统工艺制备的甲壳素存在较多致炎性杂质蛋白。目的:观察由高纯度壳聚糖乙酰化制备的甲壳素材料与许旺细胞的体外生物相容性。设计、时间及地点:对比观察实验,于2006-09/2007-10在南通大学医学院组织学与胚胎学教研室及江苏省神经再生重点实验室完成。材料:新生一两天的SPF级SD大鼠坐骨神经和臂丛神经用于培养许旺细胞,自制壳聚糖膜,脱乙酰度为92.5%。方法:将脱乙酰度92.5%的壳聚糖膜浸入5%的醋酐甲醇溶液中进行乙酰化反应后制备甲壳素膜。体外接种许旺细胞分别至壳聚糖膜和甲壳素膜上。主要观察指标:共培养6d后通过抗S-100蛋白免疫细胞化学的方法鉴定,并进行光镜、扫描电镜观察细胞形态。CCK-8试剂检测在壳聚糖膜浸出液、甲壳素膜浸出液、L-15培养基、有机锡浸出液中生长2,4,6d许旺细胞的细胞活力。结果:抗S-100蛋白免疫细胞化学的鉴定结果提示这类细胞为许旺细胞;光镜、扫描电镜观察均发现细胞能够在壳聚糖膜和甲壳素膜表面正常生长,细胞贴附牢固,外形饱满,大多数细胞呈长梭形,边缘清晰,细胞增殖情况良好。细胞活力检测的结果显示壳聚糖膜浸出液和甲壳素膜浸出液中生长的许旺细胞与L-15培养基中生长的细胞相比,细胞活力无明显差异(P>0.05)。有机锡浸出液中生长的许旺细胞活力均低于其他浸出液,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:壳聚糖乙酰化制备的甲壳素材料与许旺细胞体外生物相容性良好。

关键词：甲壳素壳聚糖乙酰化许旺细胞生物相容性生物材料

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P38在LPS诱导大鼠雪旺氏(Schwann)细胞TNF-α表达中的作用

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中国生物化学与分子生物学报 2007年第5期23卷 382-387页

作者：秦永伟程纯王海波高永静邵晓轶沈爱国江苏省神经再生重点实验室南通226001 南通大学医学院微生物和免疫学教研室南通226001 南通大学航海医学研究所南通226001

研究P38对脂多糖(LPS)诱导的大鼠雪旺氏细胞(Schwann cell)肿瘤坏死因子-alpha(TNF-α)表达的作用.采用Western印迹检测细胞中P38激酶的活性;用P38的特异性抑制剂(SB202190)预处理细胞后,用ELISA检测细胞中TNF-α水平;RT-PCR检测细胞中T... 详细信息

研究P38对脂多糖(LPS)诱导的大鼠雪旺氏细胞(Schwann cell)肿瘤坏死因子-alpha(TNF-α)表达的作用.采用Western印迹检测细胞中P38激酶的活性;用P38的特异性抑制剂(SB202190)预处理细胞后,用ELISA检测细胞中TNF-α水平;RT-PCR检测细胞中TNF-αmRNA的表达;用免疫荧光双标法检测磷酸化P38的表达定位.LPS可显著激活雪旺氏细胞中的P38信号通路,其激活高峰在LPS刺激后15～30min,60min后,P38磷酸化水平开始逐渐下降,120min时又升高;用SB202190预处理细胞后,可显著抑制细胞TNF-αmRNA以及TNF-α的表达;LPS刺激细胞后通过与细胞膜表面Toll-like receptor 4(TLR4)结合后引起P38磷酸化,SB202190可抑制该过程.P38信号通路的激活可能是LPS诱导TNF-α表达的前提.通过阻断细胞内信号转导通路来减少TNF-α及其它细胞因子的产生,为抑制周围神经损伤后的炎症以及免疫反应发生提供了一条新的思路.

关键词： P38 脂多糖雪旺氏细胞(Schwanncell) 肿瘤坏死因子-alpha(TNF-α)

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