检索结果-内蒙古大学图书馆

免疫学杂志 2013年第5期29卷 369-375页

作者：卞成蓉刘娜邢丽段跃强王希良周娅杨鹏辉宁夏医科大学基础医学院病原生物学和免疫学教研室银川750004 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 解放军第302医院临床检验中心北京100039

目的构建和拯救重组嵌合表达G蛋白表位的流感病毒载体RSV疫苗株,并通过动物实验评价其免疫原性及免疫保护性。方法利用流感病毒反向遗传学技术,以流感病毒为载体,将RSV保护性抗原G蛋白表位的基因插入到流感病毒非结构蛋白NS1基因,拯救... 详细信息

目的构建和拯救重组嵌合表达G蛋白表位的流感病毒载体RSV疫苗株,并通过动物实验评价其免疫原性及免疫保护性。方法利用流感病毒反向遗传学技术,以流感病毒为载体,将RSV保护性抗原G蛋白表位的基因插入到流感病毒非结构蛋白NS1基因,拯救重组嵌合表达G蛋白中和表位的流感病毒载体RSV疫苗株rFLU/RSV/G,进而对rFLU/RSV/G的特性进行全面鉴定。rFLU/RSV/G滴鼻免疫Balb/c小鼠,通过检测中和抗体效价、血清抗体(IgG、IgG1、IgG2a)和黏膜抗体sIgA效价以及细胞因子(IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ和TNF-α)的分泌量来评价机体产生的体液、细胞和黏膜免疫反应。攻毒实验评价rFLU/RSV/G的免疫保护性,观测小鼠的体质量变化、病毒载量、存活情况以及肺病理变化。结果成功拯救出重组嵌合表达G蛋白表位的流感病毒载体RSV疫苗株rFLU/RSV/G。重组病毒rFLU/RSV/G与流感病毒颗粒形态和大小分布相符,并且表达针对RSV的特异性蛋白NS1-G。动物实验表明rFLU/RSV/G诱导小鼠机体产生较高的中和抗体、RSV特异性的Th1型细胞免疫反应以及黏膜免疫反应。攻毒实验显示rFLU/RSV/G对RSV A2株和PR8流感病毒野毒株具有一定免疫保护效果,能够有效降低肺鼻的病毒载量,肺组织病变情况明显减轻,且无小鼠死亡。结论重组嵌合表达G蛋白表位的流感病毒载体RSV疫苗株rFLU/RSV/G是一个有前景的RSV候选疫苗株,具有较高的免疫原性和免疫保护性,值得在棉鼠和猴子进行进一步研究。

关键词：流感病毒 RSV G蛋白表位病毒载体

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人巨细胞病毒无症状性感染者UL146基因特征分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2017年第9期37卷 650-658页

作者：杨敏叶思思杨佳婷林丛李辉婷邱炜郭刚强施红英李宝青薛向阳温州医科大学第二临床医学院 325035 温州医科大学基础医学院微生物和免疫学教研室 325035 温州医科大学公共卫生与管理学院 325035 温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院检验科 325000

目的研究人巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV）UL146基因序列在无症状性感染者中的多态性.方法采集47例HCMV DNA阳性无症状感染者尿标本,采用聚合酶链反应（PCR）扩增UL146基因全序列,阳性扩增产物测序后,运用生物信息学软件... 详细信息

目的研究人巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV）UL146基因序列在无症状性感染者中的多态性.方法采集47例HCMV DNA阳性无症状感染者尿标本,采用聚合酶链反应（PCR）扩增UL146基因全序列,阳性扩增产物测序后,运用生物信息学软件进行序列特征分析.结果 47例无症状HCMV感染者尿沉渣标本中,17例标本UL146基因扩增阳性.序列分析显示：无症状HCMV感染者UL146基因核苷酸变异率为0～42.5％,氨基酸变异率为0～67.7％,突变遍布整个基因;与Towne株相比,其信号肽序列（signal sequence）及羧基末端（C-terminal）变异较大;种系进化树分析显示,17例无症状HCMV感染者UL146基因分布在G1、G8、G9和G11四个型别中,未见其他基因型.分析翻译后修饰位点显示,四个型别修饰方式差异较大,但其重要功能区ELRCXC趋化因子区呈现高度保守性.二级结构预测提示,其活性蛋白均以无规卷曲居多,四个型别等电点和分子量大小不尽相同.结论 HCMV无症状性感染者UL146基因在核苷酸序列和氨基酸结构层面均高度变异,但重要功能区高度保守,其基因型于无症状性感染者中的分布,与既往显性感染的研究结果不存在明显差异,但以G1、G8、G9、G11四个型别为主.

关键词：人巨细胞病毒(HCMV) 无症状性感染 ULl46 多态性

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重组EV71和CVA16型手足口病双价VLP疫苗构建及免疫保护效果评价

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免疫学杂志 2014年第6期30卷 469-473页

作者：袁媛刘鑫周娅段跃强杨晓岚张立赵忠鹏王希良宁夏医科大学基础医学院病原生物学和免疫学教研室银川750004 军事医学科学院微生物流行病研究所免疫学研究室病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 解放军第302医院临床检验中心北京100039 总参警卫局卫生保健处北京100017

目的运用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达EV71和CVA16的病毒样颗粒，并对纯化的重组EV71、CVA16双价病毒样颗粒疫苗进行免疫效果评价。方法构建重组杆状病毒Bacmid-P1-3CD，转染Sf9昆虫细胞，纯化EV71、CVA16的病毒样颗粒并检测其形态... 详细信息

目的运用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达EV71和CVA16的病毒样颗粒，并对纯化的重组EV71、CVA16双价病毒样颗粒疫苗进行免疫效果评价。方法构建重组杆状病毒Bacmid-P1-3CD，转染Sf9昆虫细胞，纯化EV71、CVA16的病毒样颗粒并检测其形态和生物特性；通过EV71、CVA16的病毒样颗粒免疫ICR雌鼠后，以EV71、CVA16强毒株腹腔攻击5日龄乳鼠，对重组EV71、CVA16型双价VLP免疫保护性进行评价。结果利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统成功构建并表达EV71和CVA16病毒样颗粒，颗粒大小约为23-30nm，存在Mr约39000VP1特异性蛋白表达。重组EV71、CVA16双价VLP疫苗免疫接种能够诱导小鼠机体产生高效价的特异性抗体（EV71中和抗体效价为1：960，CVA16中和抗体效价为1：624）并发挥优于单价VLP疫苗的有效免疫保护效果。结论重组EV71、CVA16型双价VLP疫苗免疫原性和保护性显著高于单价疫苗，为手足口病疫苗的研发提供了新的思路及实验基础。。

关键词： EV71 CVA16 双价疫苗病毒样颗粒

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系统性红斑狼疮患者外周血人巨细胞病毒感染状态分析及意义

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中华风湿病学杂志 2014年第3期18卷 199-202页

作者：陈静熊江彪叶文静朱小春章慧娣张丽芳薛向阳温州医科大学附属第一医院风湿免疫科 325000 温州医科大学附属第一医院肾内科 325000 温州医科大学分子病毒与免疫学研究所基础医学院微生物和免疫学教研室

目的检测SLE患者外周血人巨细胞病毒（HCMV）的感染状况，探讨HCMV感染在SLE发病中的作用。方法采集并抽提60例已确诊的SLE患者和111名健康人外周血白细胞DNA，利用巢式PCR技术检测HCMV糖蛋白gB（UL55）基因以确定HCMV感染情况。应用2... 详细信息

目的检测SLE患者外周血人巨细胞病毒（HCMV）的感染状况，探讨HCMV感染在SLE发病中的作用。方法采集并抽提60例已确诊的SLE患者和111名健康人外周血白细胞DNA，利用巢式PCR技术检测HCMV糖蛋白gB（UL55）基因以确定HCMV感染情况。应用2个独立样本t检验、非参数检验、χ2检验及Fisher确切概率法统计分析。结果琼脂糖凝胶电泳及测序显示建立的巢式PCR能特异地检测***55基因，SLE患者外周血中HCMV检出率明显高于对照组[分别为41．7％（25／60）和1．8％（2／111），χ2=46．551，P〈0．01]。与外周血HCMV阴性组SLE患者相比，HCMV阳性组SLE患者抗核糖体P蛋白抗体（Rib．P）阳性率[分别为26％（9／35），56％（14／25），χ2=5．659，P=0．017]、直接Coomb’s试验阳性率[分别为37％（13／35），72％（18／25），χ2=7．096，P=-0．008]及抗β2糖蛋白1（GP1）抗体水平[分别为21．3（9．9，51．8）U/ml，13．6（5．9，23．1）U／ml；U=2．017，P=0．044]明显升高，血液系统相关指标中的红细胞[分别为（3．65±0．10）×10^12／L，（3．17±0．17）×10^12／L；t=2．574，P=0．013]、淋巴细胞[分别为（1．37±0．14）×10^12／L，（0．90±0．13）×10^12；t=2．456，P=0．017]、血红蛋白[分别为（110±19）g／L，（98±5）g／L；t=2．034，P=0．048]明显减少；肾损害相关指标中的血尿阳性率[分别为40％（14／35），72％（18／25）；χ2=6．000，P=0．014]、尿蛋白定量（24h）水平[分别为0．80（0．53，2．37）g，0．48（0．13，1．21）g；U=2．140，P=0．032]明显上升。结论外周血细胞HCMV感染可能参与SLE发生、发展过程。

关键词：红斑狼疮,系统性巨细胞病毒聚合酶链反应

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无针皮内注射免疫甲型H7N9流感裂解疫苗的免疫效果评价

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免疫学杂志 2015年第5期31卷 386-390页

作者：任天宇张肖邢丽张良艳于姝孙溢张爱军周娅王希良宁夏医科大学基础医学院病原生物学和免疫学教研室银川750004 军事医学科学院微生物流行病研究所病源微生物生物安全实验室北京100071 江苏丞宇米特医疗器械有限公司泰州225300 北京老年医院内分泌科 100095

目的开展无针皮内注射免疫甲型H7N9裂解流感疫苗的安全性及有效性评价,为无针注射免疫疫苗提供实验依据。方法采用无针皮内注射H7N9裂解流感疫苗免疫小鼠和大鼠,并用有针肌肉注射免疫做对照,通过活体成像技术观察疫苗的分布情况,并采用... 详细信息

目的开展无针皮内注射免疫甲型H7N9裂解流感疫苗的安全性及有效性评价,为无针注射免疫疫苗提供实验依据。方法采用无针皮内注射H7N9裂解流感疫苗免疫小鼠和大鼠,并用有针肌肉注射免疫做对照,通过活体成像技术观察疫苗的分布情况,并采用血疑抑制试验测定疫苗免疫后的血清中和抗体效价、滴鼻攻毒评价免疫保护及DRAIZE评分与病理检测注射损伤情况。结果无针皮内注射免疫疫苗在真皮内呈池状分布,且疫苗驻留时间明显长于在肌肉层的驻留时间。无针皮内免疫3μg抗原的甲型H7N9流感裂解疫苗可起到肌肉免疫15μg抗原的同样血清学保护水平及免疫保护效果。结论无针皮内注射免疫甲型H7N9裂解流感疫苗安全、有效,且抗原用量是有针肌肉注射免疫抗原用量的1/5量,将为流感疫苗免疫防控提供新的技术策略。

关键词：无针皮内免疫 H7N9流感裂解疫苗免疫有效性安全性

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不同状态乙型肝炎病毒感染患者血清中HBV DNA定量聚合酶链反应测定

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郑州大学学报（医学版） 2004年第1期39卷 118-121页

作者：秦东春巫光宏曹孟德郭小兵梅园丁郑州大学第一附属医院检验科郑州450052 华南农业大学生命科学学院广州510000 郑州大学基础医学院微生物学和免疫学教研室郑州450052

目的 :采用荧光定量聚合酶链反应 (FQ -PCR)测定不同状态乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒 (HBV)的载量 ,为乙型肝炎的临床诊断、病程判断和治疗提供参考。方法 :采用实时定量PCR方法 ,检测不同病程状态的乙肝患者血清样本 1 90份 ,其中H... 详细信息

目的 :采用荧光定量聚合酶链反应 (FQ -PCR)测定不同状态乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒 (HBV)的载量 ,为乙型肝炎的临床诊断、病程判断和治疗提供参考。方法 :采用实时定量PCR方法 ,检测不同病程状态的乙肝患者血清样本 1 90份 ,其中HBeAg阳性的慢性乙型肝炎 (CHB)患者 2 5例 4 7份样品 ,HBeAg阴性的 4例CHB患者 4份样品 ,接受α-干扰素治疗后发生HBeAg血清学转归的患者 5例 4 0份样品 ,非活动性HBV携带者 37例 5 7份样品。由CHB康复患者 2 1例 4 2份样品。结果 :HBeAg阳性的CHB血清中HBVDNA水平为 8.3× 1 0 8拷贝 /ml,明显高于HBeAg阴性的CHB患者 (7.0× 1 0 6拷贝 /ml)和HBeAg血清转归患者HBVDNA水平 (6 .2× 1 0 3 拷贝 /ml)以及非活动性HBsAg携带者HBVDNA水平 (5 .6× 1 0 3 拷贝 /ml)。乙型肝炎康复者中未检出HBVDNA。结论

关键词：聚合酶链反应乙型肝炎肝炎病毒定量测定

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低分子壳聚糖对缺氧/复氧大鼠心肌细胞中ClC-3表达的影响

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吉林大学学报（医学版） 2016年第3期42卷 491-495,I0002页

作者：万鑫何建平张欢林玲辉张甜费瑜吉林大学基础医学院细胞生物学系吉林长春130021 邢台医学高等专科学校微生物和免疫学教研室河北邢台054000 吉林大学第二医院心内科吉林长春130041

目的:研究低分子壳聚糖(LMCTS)对缺氧/复氧(H/R)损伤大鼠心肌细胞中氯离子通道3(ClC-3)表达的影响,探讨LMCTS对大鼠心肌细胞H/R损伤的保护作用及其与ClC-3通道的关系。方法:原代培养的大鼠心肌细胞分为空白对照组,模型组和200、400及600... 详细信息

目的:研究低分子壳聚糖(LMCTS)对缺氧/复氧(H/R)损伤大鼠心肌细胞中氯离子通道3(ClC-3)表达的影响,探讨LMCTS对大鼠心肌细胞H/R损伤的保护作用及其与ClC-3通道的关系。方法:原代培养的大鼠心肌细胞分为空白对照组,模型组和200、400及600mg·L-1 LMCTS组。除空白对照组细胞不做任何处理、正常培养外,其余各组细胞均进行低压缺氧处理1h,之后在37℃条件下复氧24h,构建心肌细胞H/R损伤模型,其中模型组不加药物,正常培养;而不同浓度LMCTS组细胞在构建模型前分别给予200、400和600mg·L-1 LMCTS。采用RT-PCR法检测大鼠心肌细胞中ClC-3mRNA的表达水平;Western blotting法和免疫荧光法检测大鼠心肌细胞中ClC-3蛋白的相对表达水平。结果:RT-PCR法和Western blotting法检测,与空白对照组比较,模型组大鼠心肌细胞中ClC-3mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,不同浓度LMCTS组大鼠心肌细胞中ClC-3mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05),其中以600mg·L-1LMCTS组心肌细胞中ClC-3mRNA和蛋白表达水平最低。免疫荧光检测,与空白对照组比较,模型组大鼠心肌细胞荧光强度明显增强;与模型组比较,不同浓度LMCTS组大鼠心肌细胞荧光强度明显降低。结论:大鼠心肌细胞中ClC-3表达水平与心肌细胞H/R损伤有关联,LMCTS可降低ClC-3表达水平,其可能通过降低ClC-3表达水平对大鼠心肌细胞H/R损伤发挥保护作用。

关键词：壳聚糖心肌细胞缺氧复氧氯离子通道3

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猪鼻支原体抗原在人结肠腺癌细胞表达的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 1999年第6期19卷 28-28页

作者：刘斌波,刘先洲,刘东瀛,汤纪路,张绍金湖北医科大学基础医学院微生物学和免疫学教研室!武汉430071 湖北医科大学基础医学院微生物学和免疫学教研室!武汉430071 湖北医科大学基础医学院微生物学和免疫学教研室!武汉430071 湖北医科大学基础医学院微生物学和免疫学教研室!武汉430071 湖北医科大学基础医学院微生物学

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甲型H7N9流感裂解疫苗制备及免疫保护效果的评价

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免疫学杂志 2014年第7期30卷 608-611页

作者：陈锐段跃强赵忠鹏张良艳邢丽刘娜张立周娅王希良杨鹏辉宁夏医科大学基础医学院病原生物学和免疫学教研室银川750004 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 解放军第302医院医疗部北京100039 总参警卫局卫生保健处北京100071

目的构建、拯救重配甲型H7N9流感病毒疫苗候选株并制备甲型H7N9流感裂解疫苗,动物实验评价甲型H7N9流感裂解疫苗的免疫原性及免疫保护性效果。方法采用反向遗传学技术将A/Anhui/1/2013(H7N9)疫苗株的HA、NA基因和A/Puerto Rico/8/34(PR8... 详细信息

目的构建、拯救重配甲型H7N9流感病毒疫苗候选株并制备甲型H7N9流感裂解疫苗,动物实验评价甲型H7N9流感裂解疫苗的免疫原性及免疫保护性效果。方法采用反向遗传学技术将A/Anhui/1/2013(H7N9)疫苗株的HA、NA基因和A/Puerto Rico/8/34(PR8)毒株的PB2、PB1、PA、NP、M、NS基因进行重配,转染细胞后筛选拯救甲型H7N9流感病毒疫苗候选株,制备rgPR8-H7N9流感裂解疫苗抗原。腹腔注射免疫Balb/c小鼠,检测血清IgG、IgG1、IgG2a、HI效价,进一步用野生株攻毒,评价rgPR8-H7N9流感裂解疫苗的免疫保护效果。结果成功拯救甲型H7N9流感病毒疫苗候选株rgPR8-H7N9。制备的重配甲型H7N9流感裂解疫苗对小鼠产生较高的HI抗体效价。IgG1/IgG2a亚型检测结果表明小鼠体内以诱导体液免疫为主。攻毒实验显示甲型H7N9流感裂解疫苗能够有效降低肺部的病毒载量,肺组织病变显著减轻、体质量下降后趋于稳定,疫苗剂量达到15μg即可全部存活。A/Anhui/1/2013(H7N9)野生株流感病毒攻毒,甲型H7N9流感裂解疫苗能够达到保护小鼠效果。结论成功拯救重配甲型H7N9流感病毒疫苗候选株rgPR8-H7N9,制备的甲型H7N9流感裂解疫苗具有较好的免疫原性及免疫保护性,为H7N9流感裂解疫苗的研发及进入临床研究提供了实验依据。

关键词：反向遗传学 H7N9流感病毒裂解疫苗免疫保护性

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TNF-α和TNF受体在大鼠坐骨神经炎症中的表达变化

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中华微生物学和免疫学杂志 2010年第4期30卷 323-323页

作者：徐大伟刘海鸥沈爱国王友华江苏南通大学附属医院骨科 226001 南通大学医学院微生物和免疫学教研室

肿瘤坏死因子（tumour necrosis factor，TNF）能够引起炎症，具有抗病毒和免疫调节作用，可引起肿瘤细胞溶胞及抑制其生长。本实验主要研究TNF—α及TNF受体在LPS诱导大鼠坐骨神经炎症中的表达变化及分布情况，以探索其在周围神经损伤... 详细信息

肿瘤坏死因子（tumour necrosis factor，TNF）能够引起炎症，具有抗病毒和免疫调节作用，可引起肿瘤细胞溶胞及抑制其生长。本实验主要研究TNF—α及TNF受体在LPS诱导大鼠坐骨神经炎症中的表达变化及分布情况，以探索其在周围神经损伤后炎症过程中，可能发挥的作用和意义。

关键词： TNF受体神经炎症表达变化诱导大鼠 TNF-α 坐骨肿瘤坏死因子免疫调节作用

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