检索结果-内蒙古大学图书馆

P27^(kip1)与出核因子CRM1在人淋巴瘤细胞系中的表达及相互关系

基础医学与临床 2008年第8期28卷 820-824页

作者：王燏婵赵玥铭沈爱国张冬梅黄晓东陆建新何松程纯南通大学启秀校区微生物与免疫学教研室南通市肿瘤医院江苏南通226001

目的研究P27kip1与出核因子CRM1在淋巴瘤细胞中的表达及相互关系。方法运用血清饥饿同步化处理淋巴瘤细胞株Jurkat和Raji,10%血清刺激细胞增殖。Western blot分别检测生长阻滞及增殖的淋巴瘤细胞中P27kip1与CRM1的表达。用核浆分离方法... 详细信息

目的研究P27kip1与出核因子CRM1在淋巴瘤细胞中的表达及相互关系。方法运用血清饥饿同步化处理淋巴瘤细胞株Jurkat和Raji,10%血清刺激细胞增殖。Western blot分别检测生长阻滞及增殖的淋巴瘤细胞中P27kip1与CRM1的表达。用核浆分离方法检测P27kip1与CRM1分别在胞核、胞质的定位。免疫沉淀检测P27kip1与CRM1在淋巴瘤细胞中的结合。结果在不同状态的淋巴瘤细胞中,P27kip1与CRM1蛋白水平的表达均表现为负相关,并且P27kip1的核内外分布与CRM1的核内外分布一致。免疫沉淀结果验证在淋巴瘤细胞中P27kip1与CRM1相互结合。结论出核因子CRM1可能通过与P27kip1结合而影响P27kip1的核内外分布及表达水平,从而参与调控淋巴瘤细胞的生长。

关键词： P27^kip1 CRN1 出核淋巴瘤

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肺炎链球菌菌体蛋白LytA和CbpA对感染小鼠的诊断价值

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中华微生物学和免疫学杂志 2011年第4期31卷 366-370页

作者：霍琳红孙文平杨光陈晨邓燕燕罗红大连医科大学临床免疫与微生物教研室 116044

目的通过基因工程技术获取肺炎链球菌自溶素（autolysin，LytA）和胆碱结合蛋白A（choline binding proteinA，CbpA），探讨其对肺炎链球菌感染小鼠的血清学诊断价值。方法根据GenBank中lytA和cbpA基因保守序列设计合成特异性引物，采用... 详细信息

目的通过基因工程技术获取肺炎链球菌自溶素（autolysin，LytA）和胆碱结合蛋白A（choline binding proteinA，CbpA），探讨其对肺炎链球菌感染小鼠的血清学诊断价值。方法根据GenBank中lytA和cbpA基因保守序列设计合成特异性引物，采用PCR技术从肺炎链球菌基因组中扩增lytA和cbpA保守序列片段；经由IPTG诱导并通过等电点洗脱方法获取纯化的重组蛋白LytA和CbpA；Westernblot测定表达蛋白的抗体结合活性。以LytA和CbpA为抗原，建立ELISA反应模式测定感染小鼠血清中相应的IgG和IgM抗体，评价诊断价值。结果成功构建了原核表达载体pET-32a（＋）／lytA和pET-32a（＋）／cbpA，表达的重组蛋白LytA和CbpA具有较好的抗体结合活性。实验组小鼠（肺炎链球菌感染组）IgM和IgG类抗LytA抗体滴度高于对照组（正常对照组和乙型链球菌感染对照组），差异有统计学意义（P〈0．05），CbpA抗体与正常对照组差异有统计学意义，与乙型链球菌感染组差异无统计学意义（P〉0．05）。CbpA蛋白对感染小鼠诊断的敏感性较高（IgG：83．3％；IgM：75．0％），而LytA特异性较高（IgG：100％；IgM：100％）。结论协同利用重组蛋白CbpA诊断敏感性及LvtA的特异性，对肺炎链球菌感染小鼠的血清学诊断具有一定价值，为进一步用于临床检验奠定基础。

关键词：肺炎链球菌自溶素胆碱结合蛋白A 酶联免疫吸附试验

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LPS对大鼠雪旺氏细胞iNOS表达的影响

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中国免疫学杂志 2007年第9期23卷 815-818页

作者：王海波秦永伟程纯牛淑琼周丹沈爱国南通大学神经再生重点实验室南通226001 南通大学医学院微生物和免疫学教研室南通226001

目的:探讨内毒素脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)对大鼠雪旺氏细胞(Schwann cells,Scs)诱导型一氧化氮合酶(Inducible nitric-oxide synthase,iNOS)基因表达及一氧化氮(Nitric oxide,NO)生成的影响。方法:用不同浓度(1、10、100μg/ml)和同一浓度不同时间(1、2、4、6小时)的LPS刺激雪旺氏细胞,分别用RT-PCR和亚硝酸盐含量测定观察细胞iNOS mRNA的表达量和细胞培养液中亚硝酸盐的水平,同时用免疫荧光细胞化学染色检测iNOS的细胞定位。结果:用LPS10μg/ml刺激2小时后,iNOS mRNA的表达增加,4小时表达活性最高。细胞上清中的亚硝酸盐含量高峰在6小时。免疫细胞化学证明LPS诱导雪旺氏细胞iNOS的表达定位在胞浆。结论:LPS可在转录水平上诱导雪旺氏细胞iNOS mRNA表达,促进NO的合成,提示雪旺氏细胞在周围神经系统炎症过程中可能发挥免疫调节作用。

关键词：脂多糖雪旺氏细胞诱导型一氧化氮合酶

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β1，4-半乳糖基转移酶-Ⅰ在瘢痕疙瘩中的表达

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中华皮肤科杂志 2007年第9期40卷 568-570页

作者：杨圣菊陈晓栋王建力沈爱国南通大学附属医院皮肤性病科江苏省226001 南通大学微生物与免疫学教研室

目的探讨β1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ(beta-1,4-galactosyltransferase-Ⅰ,β-1,4-GalT-Ⅰ)在瘢痕疙瘩发病机制中的作用。方法取瘢痕疙瘩组织标本10份,同时以正常人皮肤6份、增生性瘢痕7份做对照,测定组织中羟脯氨酸含量,通过逆转录-聚合... 详细信息

目的探讨β1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ(beta-1,4-galactosyltransferase-Ⅰ,β-1,4-GalT-Ⅰ)在瘢痕疙瘩发病机制中的作用。方法取瘢痕疙瘩组织标本10份,同时以正常人皮肤6份、增生性瘢痕7份做对照,测定组织中羟脯氨酸含量,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和图像定量分析,检测组织中β-1,4-GalT-Ⅰ的表达水平。结果瘢痕疙瘩组织中羟脯氨酸含量明显高于正常人皮肤组织(P<0.01)。β-1,4-GalT-ⅠmRNA指数值在瘢痕疙瘩、正常人皮肤及增生性瘢痕组织分别为(0.2995±0.0825),(0.0451±0.0287),(0.2769±0.0975),瘢痕疙瘩组织与正常人皮肤比较,差异有统计学意义(P<0.01),与增生性瘢痕比较差异无统计学意义(P>0.05)。瘢痕疙瘩与增生性瘢痕组织中β-1,4-GalT-Ⅰ表达的高低与其中胶原的含量均呈正相关(r=0.9496,P<0.01;r=0.8202,P<0.05)。结论β-1,4-GalT-Ⅰ在瘢痕疙瘩纤维化进程中可能起着调节作用。

关键词：瘢痕疙瘩瘢痕,肥大性 β-N-乙酰基葡糖胺葡糖肽β—1,4-半乳糖转移酶

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天敌应激下小鼠血浆皮质酮、巨噬细胞产生NO、IL-1β水平与脑不对称性

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生物化学与生物物理进展 2004年第9期31卷 824-828页

作者：赵丽纯苏芸李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室汕头515031

为探讨天敌应激下脑不对称性对小鼠HPA轴活性及巨噬细胞功能的影响,通过伸爪取食法将Balb/c小鼠分为左利、右利、双利组,分别暴露在鼠类天敌———猫急性应激(4 5min,1次)、慢性应激(4 5min/次,每天 1次,连续 14天)刺激后,分别用EIA法... 详细信息

为探讨天敌应激下脑不对称性对小鼠HPA轴活性及巨噬细胞功能的影响,通过伸爪取食法将Balb/c小鼠分为左利、右利、双利组,分别暴露在鼠类天敌———猫急性应激(4 5min,1次)、慢性应激(4 5min/次,每天 1次,连续 14天)刺激后,分别用EIA法、硝酸还原酶法、ELISA法测定了血浆皮质酮、腹腔巨噬细胞培养上清中一氧化氮(nitricoxide,NO)、IL 1β水平.a 血浆皮质酮水平:急性应激下,右利、双利组小鼠血浆皮质酮升高,右利组更为显著,左利组呈下降趋势,右利、双利组显著高于左利组及相应正常对照组(P <0 0 5 );慢性应激下,右利、双利组显著高于相应正常对照组,左利、双利组也显著高于急性应激下相应组(P <0 0 5 ).b NO水平:急性应激下,左利组腹腔巨噬细胞培养上清中NO无显著变化,右利、双利组呈升高趋势,右利显著高于左利(P <0 0 5);慢性应激中,三组NO水平均显著高于相应正常对照组(P <0 0 5 ).c IL 1β水平:急性应激下,左利组IL 1β水平显著低于相应正常对照组,P<0 0 5;慢性应激下,左利、双利组与正常对照组相比均有所降低,但无统计学意义(P >0 0 5),右利组则显著高于相应正常对照组(P <0 0 5 ).上述研究结果提示,小鼠在暴露于天敌———猫应激下。

关键词：天敌应激,脑不对称皮质酮一氧化氮 IL-1β

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SOCS-3基因在Balb/c小鼠脑组织中的表达与脑不对称性

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生物化学与生物物理进展 2004年第8期31卷 727-730页

作者：赵丽纯苏芸李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室汕头515031

为探讨细胞因子信号传导抑制因子 3(suppressoofcytokinesignaling 3,SOCS 3)在Balb/c小鼠皮层、海马、下丘脑中的表达及其与脑不对称性的关系 .通过伸爪取食法将Balb/c小鼠分为左利组和右利组 ,取左、右侧皮层 ,左、右侧海马及下丘脑 ,... 详细信息

为探讨细胞因子信号传导抑制因子 3(suppressoofcytokinesignaling 3,SOCS 3)在Balb/c小鼠皮层、海马、下丘脑中的表达及其与脑不对称性的关系 .通过伸爪取食法将Balb/c小鼠分为左利组和右利组 ,取左、右侧皮层 ,左、右侧海马及下丘脑 ,以RT PCR法间接测定SOCS 3mRNA水平 .结果表明 :a 在左利鼠右侧皮层中 ,SOCS 3基因表达水平显著高于左侧皮层 (P <0 0 5 ) ;右利鼠左侧皮层SOCS 3表达显著高于左利鼠左侧皮层 (P <0 0 5 ) .b 海马中SOCS 3表达 :左利鼠右侧海马SOCS 3表达显著高于左侧海马 (P <0 0 5 ) ;右利鼠左侧海马SOCS 3表达显著高于左利鼠左侧海马 (P <0 0 5 ) .c 右利鼠下丘脑中SOCS 3显著高于左利鼠 (P<0 0 5 ) .上述研究结果提示 ,Balb/c小鼠脑中SOCS

关键词： SOCS-3基因小鼠脑组织表达脑不对称神经免疫内分泌细胞因子信号传导抑制因子

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细胞表面β-1,4-GalT-Ⅰ在T淋巴细胞活化中的作用

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现代免疫学 2011年第2期31卷 151-155页

作者：王滢吴圆圆薛琴贲志云孙晓雷胡迎青周晓荣汪晓莺南通大学医学院微生物学与免疫学教研室南通226001

本文探讨细胞表面β-1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ(β-1,4-galactosyltransferase-I,β-1,4-GalT-Ⅰ)在Jurkat细胞活化过程中的作用。采用植物凝集素(phytohemagglutinin,PHA)刺激Jurkat细胞,CCK-8法检测Jurkat细胞增殖;分别采用实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)技术、Western blot技术及流式细胞术检测活化过程中的不同时间点β-1,4-GalT-Ⅰ在Jurkat细胞中的表达变化;采用免疫荧光细胞化学法和激光共聚焦技术观察Jurkat细胞表面β-1,4-GalT-Ⅰ的分布。Jurkat细胞经PHA刺激后增殖,在36 h达高峰;细胞表面β-1,4-GalT-Ⅰ的mRNA表达量、蛋白表达量以及平均荧光表达强度均较未活化状态增高;Jurkat细胞表面β-1,4-GalT-Ⅰ在未活化状态下的平均分布于细胞表面,活化后其发生重排和聚集。结果提示在T细胞活化过程中细胞表面β-1,4-GalT-Ⅰ分子的表达增高且发生了分布变化。

关键词： β-1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ 活化 T淋巴细胞

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大鼠脊髓发育及损伤后NIDD mRNA表达的实验研究

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中国临床解剖学杂志 2007年第5期25卷 531-535,539页

作者：李欣程纯陈梦玲牛淑琼高尚峰沈爱国南通大学江苏省神经再生重点实验室南通大学医学院微生物与免疫学教研室江苏南通226001

目的：探讨在大鼠发育过程中及急性脊髓损伤后脊髓组织中NIDD （nNOS-interacting DHHC domain-containing protein with dendritic mRNA）mRNA的表达变化及意义。方法：采用改良Allen＇s打击法，咬除T8-10椎板后，造成大鼠脊髓损伤模... 详细信息

目的：探讨在大鼠发育过程中及急性脊髓损伤后脊髓组织中NIDD （nNOS-interacting DHHC domain-containing protein with dendritic mRNA）mRNA的表达变化及意义。方法：采用改良Allen＇s打击法，咬除T8-10椎板后，造成大鼠脊髓损伤模型，致伤量为10×10g·cm；借助实时荧光定量PCR、原位杂交与免疫荧光结合的方法，定量、定位研究发育过程中及脊髓损伤后早期大鼠脊髓组织中NIDD mRNA与nNOS mRNA表达的时间和空间分布特征。结果：大鼠发育过程中，胚胎16d的大鼠脊髓中可见NIDD mRNA的高表达，在生后1d，与nNOS共表达于尚未分化成熟的前角，在白质也见NIDD的阳性信号。成年后呈低表达；nNOS mRNA于生后1～3d出现表达高峰；脊髓损伤后NIDD mRNA表达明显增多，在8h到达高峰，分布于脊髓前角、中间带、中央管周围及后角nNOS阳性的神经元，7d恢复至正常水平；nNOS mRNA在损伤后8h达到高峰，1d降低至正常水平。而且，在脊髓损伤后NIDD mRNA与nNOS mRNA二者表达呈正相关。结论：胎鼠脊髓中，NIDD高表达于nNOS阳性细胞，提示其在脊髓组织的发育成熟过程中的作用可能与nNOS相关。脊髓损伤后脊髓组织中NIDD与nNOS表达增多，提示在脊髓损伤的病理过程中，NIDD可能通过调节nNOS的细胞亚定位及活性而发挥一定的生物学作用。

关键词： NIDD nNOS 实时荧光定量聚合酶链反应原位杂交脊髓损伤发育

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LPS对大鼠雪旺氏细胞TNF-α合成和释放的影响

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中国免疫学杂志 2007年第11期23卷 1004-1008页

作者：秦永伟沈爱国王海波邵晓轶高永静程纯南通大学基础医学院微生物和免疫学教研室南通226001 南通大学神经再生重点实验室南通226001

目的:探讨内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的诱导作用对大鼠雪旺氏细胞肿瘤坏死因子α(tumor nec-rosis factor-α,TNF-α)的表达。方法:不同浓度,不同时间用LPS刺激雪旺氏细胞,用酶联免疫吸附实验(ELISA)分别检测细胞胞液和上清... 详细信息

目的:探讨内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的诱导作用对大鼠雪旺氏细胞肿瘤坏死因子α(tumor nec-rosis factor-α,TNF-α)的表达。方法:不同浓度,不同时间用LPS刺激雪旺氏细胞,用酶联免疫吸附实验(ELISA)分别检测细胞胞液和上清中分泌的TNF-α的表达量,同时用间接免疫荧光细胞化学染色检测TNF-α的细胞定位。结果:用LPS10μg/ml刺激后2小时能显著促进雪旺氏细胞浆内TNF-α的表达,同时也检测到培养液上清中有TNF-α的释放。结论:细菌的致病因子LPS的诱导确能促进雪旺氏细胞高效表达和分泌TNF-α,从而为雪旺氏细胞作为免疫活性细胞在周围神经系统中发挥免疫调节作用提供初步依据。

关键词：脂多糖雪旺氏细胞肿瘤坏死因子-α

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p27^(kip1)和Skp2在大鼠坐骨神经夹伤后脊髓中的表达变化

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解剖学杂志 2007年第3期30卷 313-316,F0004页

作者：史淑贤程纯陈梦玲秦婧高尚锋沈爱国南通大学江苏省神经再生重点实验室南通大学医学院微生物与免疫学教研室南通226001

目的:研究p27^(kip1)和Skp2在正常和坐骨神经夹伤后大鼠脊髓中的表达变化。方法:Westem印迹法,免疫组织化学,免疫荧光双标。结果:Western印迹结果显示坐骨神经夹伤后,脊髓中p27^(kip1)表达下降后又有所恢复,并且p27^(kip1)和Skp2在脊髓... 详细信息

目的:研究p27^(kip1)和Skp2在正常和坐骨神经夹伤后大鼠脊髓中的表达变化。方法:Westem印迹法,免疫组织化学,免疫荧光双标。结果:Western印迹结果显示坐骨神经夹伤后,脊髓中p27^(kip1)表达下降后又有所恢复,并且p27^(kip1)和Skp2在脊髓中的表达变化呈负相关。免疫组织化学及免疫荧光双标显示,p27^(kip1)和Skp2在正常和损伤后的脊髓神经元和胶质细胞中都有表达。坐骨神经夹伤后p27^(kip1)和Skp2在脊髓腹角阳性细胞数目变化呈负相关。结论:坐骨神经损伤后p27^(kip1)。和Skp2在脊髓腹角神经元及其周围的胶质细胞表达变化相关,对研究脊髓损伤和修复的分子机制有重要意义。

关键词： p27kip1 Skp2 脊髓坐骨神经创伤和损伤大鼠

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