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苏州大学学报（医学版） 2009年第6期29卷 1057-1060,I0011页

作者：毛伟峰金国华衣昕秦建兵田美玲南通大学医学院人体解剖学教研室神经生物学研究所江苏省神经再生重点实验室江苏南通226001

目的观察大鼠创伤性脑损伤后损伤区周围皮质不同时点聚二磷酸腺苷核糖多聚酶(PARP)阳性细胞的表达变化。方法采用大鼠自由落体脑损伤模型,伤后2、6、12、24、72、168 h取脑切片,行PARP、β-Tubline-Ⅲ、Hoechst荧光检测。结果损伤区周... 详细信息

目的观察大鼠创伤性脑损伤后损伤区周围皮质不同时点聚二磷酸腺苷核糖多聚酶(PARP)阳性细胞的表达变化。方法采用大鼠自由落体脑损伤模型,伤后2、6、12、24、72、168 h取脑切片,行PARP、β-Tubline-Ⅲ、Hoechst荧光检测。结果损伤区周围于伤后2 h即可观察到PARP阳性细胞,主要出现在大脑皮质第3层,6 h数量达到第1个高峰;后PARF阳性细胞出现部位逐渐向深部迁移,至伤后72 h数量达到第2个高峰,表达部位主要位于大脑皮质第5层。伤后各时点均可观察到部分PARP、β-TubulinⅢ双标阳性细胞,其核hoechst着色不均匀,表达变化趋势与PARP阳性细胞基本一致。结论大鼠创伤性脑损伤后损伤区周围PARP阳性细胞数量的变化与伤后时程有关,表达部位逐渐远离损伤区,PARP阳性细胞部分为凋亡的神经元。

关键词：创伤性脑损伤聚二磷酸腺苷核糖多聚酶 Hoechst 神经元凋亡大鼠

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MPTP诱导的小鼠PD模型中相关脑区小胶质细胞反应性差异研究

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神经解剖学杂志 2009年第3期25卷 323-329页

作者：张志军董玉林刘晓娟刘娟夏春林倪衡建南通大学医学院人体解剖学教研室神经生物学研究所江苏省神经再生重点实验室南通226001 苏州大学细胞神经生物学研究室暨衰老与神经疾病实验室苏州215123 南通大学医学院微生物学教研室南通226001

为了探讨Parkinson病(PD)小鼠相关脑区的小胶质细胞反应性是否存在差异,本研究采用MPTP诱导的小鼠PD模型,用GSA I-B4-HRP组织化学染色方法对黑质致密部(SNc)、尾壳核(CPu)、腹侧被盖区(VTA)和额叶联合皮层(FrA)四个部位中小胶质细胞的... 详细信息

为了探讨Parkinson病(PD)小鼠相关脑区的小胶质细胞反应性是否存在差异,本研究采用MPTP诱导的小鼠PD模型,用GSA I-B4-HRP组织化学染色方法对黑质致密部(SNc)、尾壳核(CPu)、腹侧被盖区(VTA)和额叶联合皮层(FrA)四个部位中小胶质细胞的形态和数量进行了观察;同时用免疫荧光染色检测了SNc和VTA中TH阳性神经元的数量,用Western blot方法检测CPu和FrA内TH蛋白含量的变化情况。结果显示:SNc中TH阳性神经元的数量和CPu中TH蛋白的含量在MPTP腹腔注射后1 d即大幅度降低(降幅约为68%);在MPTP腹腔注射后3 d起SNc中TH阳性神经元的数量和CPu中TH蛋白的含量逐步增加;小胶质细胞在MPTP腹腔注射后1～3 d的反应明显,然后逐渐减弱。VTA中TH阳性神经元的数量和FrA中TH蛋白的含量在MPTP腹腔注射后降幅不明显(降幅约在15%),小胶质细胞在MPTP腹腔注射后1 d的反应较为明显,其它时段的变化不显著。本研究结果提示:PD模型小鼠SNc和CPu中的小胶质细胞反应明显强于VTA和FrA区,反应性小胶质细胞在SNc中的多巴胺(DA)能神经元损伤过程中扮演了重要角色。

关键词： Parkinson病 MPTP 多巴胺能神经元小胶质细胞小鼠

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MPTP诱导的小鼠帕金森病模型中相关脑区iNOS时程表达变化

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南通大学学报（医学版） 2009年第1期29卷 30-33页

作者：董玉林张志军刘娟郁晓燕倪衡建南通大学医学院人体解剖学教研室神经生物学研究所江苏省神经再生重点实验室南通226001

目的:观察1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的小鼠急性损伤PD模型中纹状体(CPu)、黑质致密部(SNpc)、额叶皮层联合区(FrA)和腹侧被盖区(VTA)中iNOS基因和蛋白的时程表达变化。方法:用RT-PCR和Western blot方法对MPTP诱导的小... 详细信息

目的:观察1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的小鼠急性损伤PD模型中纹状体(CPu)、黑质致密部(SNpc)、额叶皮层联合区(FrA)和腹侧被盖区(VTA)中iNOS基因和蛋白的时程表达变化。方法:用RT-PCR和Western blot方法对MPTP诱导的小鼠PD模型中相关脑区iNOS基因和蛋白的表达量进行检测。结果:MPTP诱导的小鼠PD模型中SNpc和CPu脑区iNOS基因和蛋白在给药后多个时间点均有显著性表达,其中1d是表达高峰;VTA和FrA脑区iNOS基因和蛋白的表达没有SNpc和CPu脑区表达显著。结论:表达增高的iNOS可能对SNpc和VTA脑区DA能神经元及CPu和FrA脑区的DA能神经元末梢起了损伤作用,从而导致了DA能神经元的减少及其末梢退变的发生。

关键词：帕金森病 1-甲基-4-苯基-1 2 3 6-四氢吡啶诱导型一氧化氮合酶小鼠

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基于连续切片的成年SD大鼠红核三维重建

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中国数字医学 2009年第8期4卷 42-45页

作者：吴辉群镇敏敏吕广明韩笑李耀富耿兴云蒋葵董建成南通大学医学院医学信息学系南通大学数字医学实验室江苏省南通市啟秀路11号226001 南通大学医学院人体解剖学教研室江苏省神经再生重点实验室226001

为利用三维重建工具软件对成年SD大鼠部分脑干、中脑导水管及红核结构进行三维重建，并对重建的红核进行观察和测量，探索了一种方法，即：制作大鼠脑干连续冰冻切片，Nissl染色后进行分步显微摄像并进行拼接；扫描大鼠脑定位图谱相关... 详细信息

为利用三维重建工具软件对成年SD大鼠部分脑干、中脑导水管及红核结构进行三维重建，并对重建的红核进行观察和测量，探索了一种方法，即：制作大鼠脑干连续冰冻切片，Nissl染色后进行分步显微摄像并进行拼接；扫描大鼠脑定位图谱相关红核切面图像；利用PhotoshopCS3软件将上述获得的连续图像分别进行图像后处理，并利用3D-DOCTOR4．0软件分别对上述连续切片图像进行配准、分割和三维重建，对两种不同方式重建的红核进行比较。结果显示，利用大鼠脑干连续冰冻切片和大鼠脑定位图谱可以对SD大鼠红核等结构进行三维重建，重建出的结构具有立体感。可以在PC机中自由观察和测量，两种重建方法得到的红核形状大小基本类似。因此，得出结论：利用大鼠脑干的连续冰冻染色切片可以对大鼠红核进行三维重建。

关键词：红核三维重建连续切片大鼠3D-DOCTOR

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切割穹隆海马伞后大鼠海马中83ku差异蛋白的质谱分析

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江苏大学学报（医学版） 2009年第4期19卷 277-280页

作者：朱蕙霞秦建兵金国华田美玲张新化黄镇南通大学医学院生物化学与分子生物学教研室江苏南通226001 南通大学医学院人体解剖学教研室神经生物学研究所江苏南通226001 南通大学医学院江苏省神经再生重点实验室江苏南通226001

目的:探讨切割穹隆海马伞海马中具有诱导神经干细胞向神经元分化生物活性的83 ku差异蛋白的组成成分及其功能。方法:切割SD大鼠穹隆海马伞后14 d海马进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native PAGE),应用电喷雾质谱分析、蛋白质数据库和文... 详细信息

目的:探讨切割穹隆海马伞海马中具有诱导神经干细胞向神经元分化生物活性的83 ku差异蛋白的组成成分及其功能。方法:切割SD大鼠穹隆海马伞后14 d海马进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native PAGE),应用电喷雾质谱分析、蛋白质数据库和文献分析等方法对83 ku差异蛋白进行检测和功能分析。结果:质谱分析找到了17组肽段,这些蛋白按照其功能可以分为:细胞骨架蛋白、参与代谢的酶、信号传递、蛋白降解、氧化应激、神经递质运输、突触形成、功能未知蛋白。结论:切割穹隆海马伞海马83 ku差异蛋白可以通过参与Rho信号通路,调控神经干细胞向神经元分化。

关键词： 83 ku蛋白切割穹隆海马伞海马非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳质谱分析

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正常成年小鼠脊髓内部结构的三维重建

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中国数字医学 2009年第9期4卷 24-26页

作者：吴辉群耿兴云蒋葵吕广明韩笑季达峰董建成南通大学医学院医学信息学系江苏省南通市兽秀路11号226001 南通大学医学院人体解剖学教研室江苏省神经再生重点实验室江苏省南通市倍秀路11号226001 南通大学数字医学研究所所长江苏省南通市兽秀路11号226001

小鼠脊髓内部结构的三维重建对于“人工脊髓”生物材料的制备具有重要意义，因此，我们利用小鼠脊髓参照图谱和三维重建工具软件对小鼠脊髓内部结构进行三维重建。方法是获得小鼠脊髓参照图谱，并利用小鼠脊髓Nissl和LFB染色切片验证其... 详细信息

小鼠脊髓内部结构的三维重建对于“人工脊髓”生物材料的制备具有重要意义，因此，我们利用小鼠脊髓参照图谱和三维重建工具软件对小鼠脊髓内部结构进行三维重建。方法是获得小鼠脊髓参照图谱，并利用小鼠脊髓Nissl和LFB染色切片验证其可靠性，利用Photoshop软件对获得的图谱图片进行配准和批处理。利用3D—DOCTOR软件对小鼠脊髓内部的板层和主要传导束进行分割和三维重建。结果重建出小鼠脊髓外形、脊髓灰质、板层、皮质脊髓束、薄束、楔束等结构，重建的结构具有立体感，并能在PC机中任意角度观察。

关键词：三维重建连续切片小鼠脊髓 3D—DOCTOR

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采用Photoshop软件对成年SD大鼠脊髓中皮质脊髓束三维重建的研究

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解剖学报 2008年第4期39卷 488-492页

作者：吕广明吴辉群汤乐民韩笑季达峰顾晓松南通大学医学院人体解剖学教研室神经生物学研究所江苏省神经再生重点实验室南通226001 南通大学医学院影像工程实验室南通226001

目的利用大鼠脊髓连续切片,结合三维重建工具软件对正常大鼠皮质脊髓束进行三维重建。方法制作正常成年SD大鼠脊髓连续横断切片,进行Luxol快蓝（LFB）染色并摄片,获得大鼠脊髓皮质脊髓束连续切片图像。在Photoshop软件环境下完成切片图... 详细信息

目的利用大鼠脊髓连续切片,结合三维重建工具软件对正常大鼠皮质脊髓束进行三维重建。方法制作正常成年SD大鼠脊髓连续横断切片,进行Luxol快蓝（LFB）染色并摄片,获得大鼠脊髓皮质脊髓束连续切片图像。在Photoshop软件环境下完成切片图像的配准、分割、灰度化。利用3D-DOCTOR软件进行阈值分割并对大鼠脊髓、脊髓灰质、双侧皮质脊髓束结构进行三维重建,在普通台式机（PC）上对重建结构进行任意角度的观察、切割和测量。结果重建出的大鼠脊髓、脊髓灰质、双侧皮质脊髓束具有立体感,大鼠皮质脊髓束于大鼠颈1节段（C1）～骶4节段（S4）走行于大鼠脊髓后索腹侧,紧贴灰质中间带背侧,呈逐渐变细的类圆柱状形态。在PC机中进行切割后可以对切割后剩余结构进行表面积和体积的数据测量。结论利用大鼠脊髓的连续LFB染色切片,结合计算机三维重建技术,能够进行大鼠皮质脊髓束的三维重建,并提供测量数据。

关键词：皮质脊髓束连续切片 3D-DOCTOR软件三维重建大鼠

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一种基于大鼠颈髓连续切片的计算机三维重建方法

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解剖学报 2008年第1期39卷 131-134页

作者：吴辉群吕广明汤乐民季达峰顾晓松南通大学医学院人体解剖学教研室神经生物学研究所江苏省神经再生重点实验室南通226001 南通大学医学院影像工程实验室南通226001 江苏省神经再生重点实验室南通226001

目的以个人计算机(PC)为平台,探讨一种基于大鼠颈髓切片进行脊髓三维重建方法。方法制作正常SD大鼠颈髓节段包埋蜡块,于颈髓标本四周进行外定位标记,Leica石蜡切片机进行连续横断切片,每切3张,用CANON数码相机对蜡块中的颈髓标本及其外... 详细信息

目的以个人计算机(PC)为平台,探讨一种基于大鼠颈髓切片进行脊髓三维重建方法。方法制作正常SD大鼠颈髓节段包埋蜡块,于颈髓标本四周进行外定位标记,Leica石蜡切片机进行连续横断切片,每切3张,用CANON数码相机对蜡块中的颈髓标本及其外定位标记进行摄片,获得连续切片图像。所得图像进行排序,裁切,转换为灰度图像并进行背景不均匀校正后,利用3D-DOCTOR软件对每张图像上的颈髓、颈髓灰质及定位孔进行边缘提取,利用定位孔对连续图像进行自动配准,三维表面重建后在PC机上进行任意角度观察、切割和测量。结果利用大鼠颈髓连续切面图像重建得到大鼠颈髓白质和灰质,并对其进行测量,获得了表面积和体积等数据。结论利用石蜡包埋和"硬"定位技术可以获得颈髓节段连续横断切面图像,进行三维重建并对重建结构进行自由观察和测量。

关键词：脊髓石蜡切片 3D-DOCTOR软件三维重建大鼠

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切割穹窿海马伞大鼠海马内Lhx8 mRNA表达的变化

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解剖学杂志 2008年第2期31卷 145-147,172页

作者：蒋媛媛金国华秦建兵田美玲张新化王磊朱蕙霞南通大学医学院人体解剖学教研室神经生物学研究所江苏省神经再生重点实验室

目的:探讨切割穹窿海马伞大鼠切割侧与正常侧海马内Lhx8 mRNA表达的差异。方法:切割SD大鼠右侧穹窿海马伞。切割后7d制备海马冰冻切片,用体外转录法制备地高辛标记的Lhx8 RNA探针进行原位杂交,分析切割侧和正常侧海马锥体细胞层和齿状... 详细信息

目的:探讨切割穹窿海马伞大鼠切割侧与正常侧海马内Lhx8 mRNA表达的差异。方法:切割SD大鼠右侧穹窿海马伞。切割后7d制备海马冰冻切片,用体外转录法制备地高辛标记的Lhx8 RNA探针进行原位杂交,分析切割侧和正常侧海马锥体细胞层和齿状回颗粒层中及齿状回门区和颗粒下层中的Lhx8 mRNA阳性细胞的数量和平均光密度值。结果:切割侧和正常侧海马锥体细胞层和齿状回颗粒层Lhx8 mRNA阳性细胞数量无明显差异,但切割侧平均光密度值较正常侧明显增加;在齿状回的门区和颗粒下层,切割侧Lhx8 mRNA阳性细胞数和平均光密度值均较正常侧升高。结论:切割穹窿海马伞后海马中Lhx8 mRNA表达上调,可能与其中的神经干细胞向胆碱能神经元分化的神经再生机制有关。

关键词：穹窿海马伞切割海马 Lhx8

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PEBP在切割穹窿海马伞大鼠海马中的表达变化

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神经解剖学杂志 2008年第6期24卷 619-624页

作者：李浩明张蕾金国华秦建兵朱蕙霞田关玲南通大学医学院人体解剖学教研室神经生物学研究所江苏省神经再生重点实验室南通226001

切割大鼠右侧穹窿海马伞,应用Western blot、免疫组化技术,观察切割后海马中磷脂酰乙醇胺结合蛋白(phosphatidyle-thanolamine binding protein,PEBP)的表达的时空变化。Western blot结果显示:PEBP在切割后3 d表达开始上升,7 d达最高水... 详细信息

切割大鼠右侧穹窿海马伞,应用Western blot、免疫组化技术,观察切割后海马中磷脂酰乙醇胺结合蛋白(phosphatidyle-thanolamine binding protein,PEBP)的表达的时空变化。Western blot结果显示:PEBP在切割后3 d表达开始上升,7 d达最高水平,随后缓慢下降,28 d时降至正常。免疫组化结果显示:术后各时间点切割侧海马CA1～CA3区的锥体细胞层和齿状回颗粒层的PEBP阳性细胞数与正常侧相比无显著性差异(P>0.05),但切割侧PEBP阳性细胞染色加深,7 d时最为明显,两侧比较灰度值有显著性差异(P<0.01)。切割侧齿状回门区和颗粒下层中可见较多深染的PEBP阳性细胞,其细胞数和灰度值与正常侧相比均有显著性差异(P<0.05)。结合本课题组以往的工作,本结果提示切割穹窿海马伞后PEBP的高表达可能与海马神经再生有关。

关键词：磷脂酰乙醇胺结合蛋白切割穹窿海马伞海马大鼠

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