目的观察完全弗氏佐剂(complete Freund′s adjuvant,CFA)诱导的小鼠慢性炎症性疼痛模型中,单核细胞趋化因子(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)及其受体CCR2在杏仁核脑区(the central nucleus of the amygdala,CeA)中的表达...
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目的观察完全弗氏佐剂(complete Freund′s adjuvant,CFA)诱导的小鼠慢性炎症性疼痛模型中,单核细胞趋化因子(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)及其受体CCR2在杏仁核脑区(the central nucleus of the amygdala,CeA)中的表达变化以及细胞定位情况。方法足底皮下注射CFA 20μL,制作慢性炎症性疼痛模型,用行为学方法检测小鼠的机械性刺激缩爪阈值和热刺激缩爪潜伏期的变化;用real-time PCR法检测造模后不同时间点CeA中MCP-1/CCR2mRNA的表达变化;用Western blot法检测造模后不同时间点CeA中CCR2蛋白的表达变化;选择CFA 7天组,用免疫荧光染色来观察CeA中MCP-1/CCR2蛋白的表达情况,并用双标染色来定位表达MCP-1/CCR2的细胞类型。结果造模1h后小鼠同侧后爪机械性缩爪阈值和热缩爪潜伏期显著降低(P<0.001),并能维持7天以上;造模1天后,CeA中MCP-1mRNA表达量增加(P<0.05),7天达高峰(P<0.01),一直持续到14天(P<0.05);CCR2mRNA从造模6h起表达增加(P<0.05);Western blot结果显示CeA中CCR2蛋白在造模后各个时间点均有表达上调,7天达高峰(P<0.01),一直持续到14天(P<0.01);免疫荧光染色显示,CFA 7天组CeA中MCP-1/CCR2蛋白的表达与生理盐水对照组相比均有增加,而且荧光双标染色显示MCP-1/CCR2蛋白主要与神经元核标记物(NeuN)共标。结论足底皮下注射CFA能诱导小鼠产生机械性触诱发痛和热痛觉过敏,CeA中MCP-1/CCR2mRNA和蛋白表达均增加,且均在神经元表达,提示该部位表达增加的MCP-1/CCR2可能参与炎症性疼痛的维持过程。
目的研究银杏内酯(Gin)预处理诱导 PC12细胞对缺血的耐受及相关机制。方法将大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤 PC12株细胞随机分成对照组、缺血9 h 组、缺血预处理(IP)1.5 h+缺血9 h组和银杏内酯预处理+缺血9 h 组,用噻唑蓝比色分析、细胞形态学观...
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目的研究银杏内酯(Gin)预处理诱导 PC12细胞对缺血的耐受及相关机制。方法将大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤 PC12株细胞随机分成对照组、缺血9 h 组、缺血预处理(IP)1.5 h+缺血9 h组和银杏内酯预处理+缺血9 h 组,用噻唑蓝比色分析、细胞形态学观察、Western 印迹法以及凝胶电泳迁移实验等方法比较银杏内酯预处理对 PC12细胞缺血模型的影响。结果在 PC12细胞缺血模型中,9 h 缺血可明显降低 PC12细胞活力,细胞存活率为(49.3±2.8)%。而银杏内酯24 h 预处理能显著提高9 h 缺血细胞的存活率(65.9±2.8)%(P<0.01);细胞形态学显示银杏内酯预处理后再缺血处理9 h,可明显减轻缺血9 h 所致的细胞损害,较多细胞保留突起,突起网络依然存在,胞体完好。与对照组比,银杏内酯预处理能明显增加缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达(P<0.01);银杏内酯预处理诱导表达的 HIF-1具有生物学活性,它能与 DNA 结合,并激活下游基因促红细胞生成素(EPO)蛋白表达(P<0.01)。结论银杏内酯预处理可以诱导 PC12细胞对缺血的耐受,其诱导耐受的作用可能与银杏内酯预处理诱导 PC12细胞 HIF-1α稳定表达、提高 HIF-1与 DNA 结合活性以及增加其下游基因 EPO 蛋白表达有关。
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