检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2022年第4期17卷 420-424页

作者：邵雷赵松刘燕红叶钰滢应清界林红杨坤江苏省血液中心江苏南京210042 卫生和计划生育委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室江苏省血吸虫病防治研究所江苏奇天基因生物有限公司

目的建立快速检测田鼠巴贝西虫的重组酶介导核酸等温扩增方法(RAA)。方法选取田鼠巴贝西虫线粒体细胞色素C氧化酶亚基I(cox I)序列,设计检测田鼠巴贝西虫的通用引物,并对引物进行筛选和特异性检测,建立并优化田鼠巴贝西虫的重组酶介... 详细信息

目的建立快速检测田鼠巴贝西虫的重组酶介导核酸等温扩增方法(RAA)。方法选取田鼠巴贝西虫线粒体细胞色素C氧化酶亚基I(cox I)序列,设计检测田鼠巴贝西虫的通用引物,并对引物进行筛选和特异性检测,建立并优化田鼠巴贝西虫的重组酶介导核酸等温扩增体系。分别采用重组质粒和田鼠巴贝西虫成虫DNA为模板测试方法的灵敏度;利用其他种类寄生虫DNA,包括输血传播寄生虫评估该方法的特异性并对42例外籍献血者进行田鼠巴贝西虫筛查。结果筛选出1组扩增效果良好的引物。RAA反应过程在37℃20 min完成,最低可扩增浓度为10^(-1)copies/μL的重组质粒和浓度为10^(-3)ng/μL的田鼠巴贝西虫基因组。RAA方法具有良好的特异性,与其他寄生虫无交叉阳性反应。应用RAA方法检测42例外籍献血者标本均为阴性。结论成功建立了一种敏感、特异的检测田鼠巴贝西虫的RAA法,该方法可用于献血者血液筛查时的快速检测以及田野调查时大规模样品检测。

关键词：田鼠巴贝西虫重组酶介导等温扩增核酸检测

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基于深度学习技术的湖北钉螺视觉智能识别模型效能评价

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2021年第6期39卷 764-770页

作者：施亮熊春蓉刘毛毛魏秀参张键锋王鑫瑶王涛杭德荣羊海涛杨坤江苏省血吸虫病防治研究所国家卫生和计划生育委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室江南大学公共卫生研究中心无锡214064 南京医科大学公共卫生学院南京211166 南京理工大学计算机科学与工程学院高维信息智能感知与系统教育部重点实验江苏省社会安全图像与视频理解重点实验室南京210094

目的探讨基于深度学习技术建立日本血吸虫中间宿主湖北钉螺视觉智能识别模型并评价其分类识别效能。方法2019年3月—2020年10月,根据江苏省湖沼型、山丘型和水网型地区钉螺分布规律,选择南京、镇江、扬州、苏州、常州、无锡和盐城等7个... 详细信息

目的探讨基于深度学习技术建立日本血吸虫中间宿主湖北钉螺视觉智能识别模型并评价其分类识别效能。方法2019年3月—2020年10月,根据江苏省湖沼型、山丘型和水网型地区钉螺分布规律,选择南京、镇江、扬州、苏州、常州、无锡和盐城等7个地区为样品采集现场,每个地区随机选择3个钉螺孳生环境采集螺样及螺样图像,由6名血吸虫病防治专家根据图像质量与螺类特征进行筛选、分类后建立螺类图像分类标准数据集,并将该结果作为金标准,建立的数据集按照7∶3原则划分为训练集和测试集(分内部和外部测试集)。采用MobilenetV2、ResNet50、Inception-ResNet-V2等3种主流卷积神经网络模型在训练集完成模型训练;以分类标准数据集作为金标准,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,比较3种模型在内部测试集上的灵敏度、特异性、准确率、诊断一致率(Kappa值)和约登指数;选出最优识别模型再与20名查螺工作人员对外部测试集判断结果进行对比,评价模型在内部测试集和外部测试集中识别钉螺结果的准确性。结果共采集钉螺和方格短沟蜷、细钻螺、真管螺、拟钉螺等4种与钉螺相似的螺类图像3224幅,经过筛选后,螺类图像分类标准数据集共纳入2719幅图像,涵盖钉螺图像774幅和4种相似螺类的非钉螺图像1945幅。其中,训练集占70.2%(1910/2719),测试集占29.8%(749/2719)。内部测试中,MobilenetV2、ResNet50和Inception-ResNet-V2模型识别钉螺与金标准一致性Kappa值分别为0.78、0.83、0.88;Inception-ResNet-V2模型的灵敏度、特异性、准确率、约登指数和ROC曲线下面积(AUC)均最高,分别为92.00%、97.16%、96.13%、0.89、0.95;3种模型识别的灵敏度和特异性差异无统计学意义(χ^(2)=3.892、4.948,P>0.05),准确率差异有统计学意义(χ^(2)=8.607,P<0.05)。外部测试中,最优模型Inception-ResNet-V2模型识别和工作人员鉴别与金标准一致性较好,Kappa值分别为0.80和0.83,AUC分别为0.88和0.92,差异无统计学意义(P>0.05)。结论基于深度学习技术的钉螺视觉智能识别模型具有良好的准确性。

关键词：湖北钉螺智能识别深度学习计算机视觉机器学习血吸虫病监测

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重组酶介导核酸等温扩增荧光法用于日本血吸虫感染性钉螺早期检测的研究

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中国病原生物学杂志 2019年第11期14卷 1245-1249页

作者：董萱熊春蓉李婷赵松张键锋李伟杨坤国家卫生和计划生育委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室江苏省血吸虫病防治研究所

目的探索重组酶介导的核酸等温扩增(recombinase aided amplification,RAA)荧光法用于日本血吸虫感染性钉螺早期检测的可行性。方法用日本血吸虫毛蚴人工感染200只湖北钉螺,随机分为阳性对照组和实验组各100只,另取100只未感染钉螺作为... 详细信息

目的探索重组酶介导的核酸等温扩增(recombinase aided amplification,RAA)荧光法用于日本血吸虫感染性钉螺早期检测的可行性。方法用日本血吸虫毛蚴人工感染200只湖北钉螺,随机分为阳性对照组和实验组各100只,另取100只未感染钉螺作为阴性对照组。将阳性对照组钉螺饲养至70 d,通过逸蚴法观察感染情况并计算阳性率。实验组钉螺分别在3 h以及5、20、40、70 d随机取20只,压碎镜检,同时提取钉螺软体DNA,进行荧光RAA法检测,获得不同时间点的阳性率,并与阳性对照组相比较。通过二代测序法对RAA检测阳性的特异性扩增产物进行测序鉴定。结果毛蚴感染后3 h、5 d、20 d、40 d、70 d实验组钉螺RAA法检测阳性率分别为60%、60%、65%、60%、70%,压碎镜检的阳性率分别为0、0、0、15%、65%,除70 d外其余时间点两种检测方法的阳性率差异均有统计学(χ^2=17.14,χ^2=17.14,χ^220 d=19.26,χ^2=8.64,均P<0.01);各时间点间阳性率差异无统计学意义(χ^2=0.68,P>0.05),各时间点阳性率与阳性对照组阳性率64.6%比较差异均无统计学意义。RAA扩增产物经二代测序后与数据库比对,确认为血吸虫特异性基因片段。结论 RAA荧光法敏感、特异,可用于日本血吸虫感染性钉螺的早期检测。

关键词：血吸虫,日本重组酶介导的核酸等温扩增(RAA) 感染性钉螺早期核酸检测

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青蒿琥酯对日本血吸虫诱导的早期肝纤维化小鼠热休克蛋白47表达影响的研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2019年第2期37卷 115-120,126页

作者：周永华徐辰杨莹莹周春刚梅丛进赛雪许永良杨俊齐沈丽娟国家卫生和计划生育委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室江苏省血吸虫病防治研究所无锡214064 南京中医药大学无锡附属医院无锡214072

目的研究青蒿琥酯对日本血吸虫诱导的早期肝纤维化小鼠血清和肝组织中热休克蛋白47(HSP47)表达的影响,探讨青蒿琥酯抑制日本血吸虫病肝纤维化作用的可能机制。方法 30只ICR小鼠随机分成感染模型组、感染治疗组和健康对照组等3组,每组10... 详细信息

目的研究青蒿琥酯对日本血吸虫诱导的早期肝纤维化小鼠血清和肝组织中热休克蛋白47(HSP47)表达的影响,探讨青蒿琥酯抑制日本血吸虫病肝纤维化作用的可能机制。方法 30只ICR小鼠随机分成感染模型组、感染治疗组和健康对照组等3组,每组10只。感染组每鼠经腹部皮肤贴壁感染日本血吸虫尾蚴(20±1)条,健康对照组不感染。感染后第6周,用吡喹酮300 mg/kg 2日疗法杀虫,同时感染治疗组小鼠按60 mg/kg剂量每天腹腔注射0.3 ml青蒿琥酯,连续2周;感染模型组和健康对照组腹腔注射灭菌生理盐水0.3 ml。治疗结束次日,各组小鼠用戊巴比妥钠麻醉后采血,应用ELISA检测血清HSP47和转化生长因子β1 (TGF-β1)含量,取小鼠肝、脾称重,计算脏器指数。取部分肝组织,应用碱水解法检测肝羟脯氨酸含量。取部分肝组织,用10%多聚甲醛固定,行苏木素-伊红(HE)和Masson染色,观察肝组织病理学变化和胶原增生情况。取部分肝组织,应用实时荧光定量PCR检测肝脏HSP47 mRNA、Ⅰ型胶原α1链mRNA表达水平。结果健康对照组小鼠肝脏指数为(4.72±0.52),低于感染模型组(10.50±0.57)和感染治疗组(8.31±0.52)(P <0.01),感染治疗组小鼠肝脏系数与感染模型组差异有统计学意义(P <0.01);健康对照组小鼠脾脏系数为(0.38±0.04),低于感染模型组(2.41±0.44)和感染治疗组(2.26±0.06)(P <0.01),感染治疗组小鼠脾脏系数与感染模型组差异无统计学意义(P> 0.05)。HE染色结果显示,感染治疗组小鼠肝脏肿大程度和表面虫卵结节较感染模型对照组轻、小。Masson染色结果显示,感染治疗组小鼠肝脏肉芽肿大小和胶原纤维面积均较感染模型组小,感染模型组胶原增生面积为(25.78±2.61)%,高于感染治疗组的(6.87±3.54)%和健康对照组的(1.19±0.18)%(P <0.01)。ELISA检测结果显示,感染治疗组小鼠血清HSP47、 TGF-β1含量分别为(169.81±20.94) pg/ml、(20.82±1.90) ng/ml,均低于感染模型组[(203.14±46.29) pg/ml、(27.49±6.81) ng/ml](P <0.05),二者HSP47、TGF-β1含量均高于健康对照组(P <0.01)。羟脯氨酸含量和肝组织HSP47 mRNA、Ⅰ型胶原α1链mRNA表达量与血清HSP47、 TGF-β1含量的趋势一致:感染治疗组小鼠肝羟脯氨酸含量为(0.27±0.08) mg/g肝湿重,低于感染模型组的(0.69±0.07) mg/g肝湿重(P <0.01),二者肝羟脯氨酸含量均高于健康对照组[(0.11±0.04) mg/g肝湿重](P <0.05);感染治疗组小鼠肝脏HSP47 mRNA、Ⅰ型胶原α1链mRNA表达水平分别为(0.49±0.27)、(0.67±0.09),均低于感染模型组的(0.84±0.17)、(0.91±0.11)(P <0.05),二者HSP47 mRNA、Ⅰ型胶原α1链mRNA表达水平均高于健康对照组(0.24±0.04、 0.24±0.05)(P <0.01)。血清HSP47水平与TGF-β1水平呈正相关关系(r=0.928 0);血清HSP47水平、 TGF-β1水平与肝组织Ⅰ型胶原α1链mRNA表达水平间均呈正相关关系(r=0.926 2、 0.872 8)。结论青蒿琥酯对日本血吸虫诱导的小鼠早期肝纤维化具有较好的干预效果,其机制可能系通过下调HSP47的表达水平抑制胶原合成,进而减轻肝纤维化程度。

关键词：热休克蛋白47 青蒿琥酯肝纤维化日本血吸虫

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放线菌的研究现况与展望

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中国病原生物学杂志 2019年第1期14卷 110-113,122页

作者：张超群戴建荣江苏省血吸虫病防治研究所江苏无锡214064 国家卫生和计划生育委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室

随着科学的快速发展以及人类对微生物研究的不断深入,微生物资源逐渐被人类发现并重视起来,而微生物中的放线菌因其独特的次生代谢产物而备受关注,作为一种丰富的微生物活性资源,其具有巨大的产生天然活性产物的潜力,是一类极具应用前... 详细信息

随着科学的快速发展以及人类对微生物研究的不断深入,微生物资源逐渐被人类发现并重视起来,而微生物中的放线菌因其独特的次生代谢产物而备受关注,作为一种丰富的微生物活性资源,其具有巨大的产生天然活性产物的潜力,是一类极具应用前景的微生物资源。本文从放线菌的定义及分类、资源研究概况等方面进行了总结并展望。

关键词：放线菌微生物资源次级代谢产物综述

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结合重组酶介导的核酸等温扩增和荧光探针快速检测日本血吸虫基因片段

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2019年第1期37卷 23-27页

作者：赵松刘燕红李婷李伟张键锋郭利川应清界羊海涛杨坤国家卫生和计划生育委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室江苏省血吸虫病防治研究所无锡214064 江苏省奇天基因生物科技有限公司无锡214064

目的结合重组酶介导的核酸等温扩增(recombinase aided amplification, RAA)和荧光探针方法建立日本血吸虫特异性基因片段的快速检测方法。方法以日本血吸虫G28 (Sj G28)基因片段作为靶序列,应用DNAMAN 7.0软件设计合成引物及荧光探针,... 详细信息

目的结合重组酶介导的核酸等温扩增(recombinase aided amplification, RAA)和荧光探针方法建立日本血吸虫特异性基因片段的快速检测方法。方法以日本血吸虫G28 (Sj G28)基因片段作为靶序列,应用DNAMAN 7.0软件设计合成引物及荧光探针,建立荧光RAA反应体系。扩增不同拷贝数的Sj G28重组质粒,评价荧光RAA检测的敏感性;分别以日本血吸虫、曼氏血吸虫、细粒棘球绦虫、十二指肠钩口线虫、似蚓蛔线虫、华支睾吸虫基因组为模板进行荧光RAA检测,以评价该方法的特异性。采用荧光RAA分别检测500、 200和50条日本血吸虫尾蚴感染的兔粪中虫卵DNA。分别在50只阴性钉螺中混入1、 2、 3、 4、 5、 10只阳性钉螺,并提取DNA进行荧光RAA检测。结果以不同拷贝数的Sj G28重组质粒为模板进行荧光RAA扩增,在5 min时即可观察到明显的荧光信号,随着拷贝数的不断降低,检测到荧光信号的时间也随之延长,不同拷贝数的扩增均在10 min内完成,最低可检出的质粒浓度为10拷贝/μl。以曼氏血吸虫、细粒棘球绦虫、十二指肠钩口线虫、似蚓蛔线虫及华支睾吸虫基因组DNA为模板的荧光RAA扩增结果均为阴性。不同数量尾蚴感染的兔粪中提取的DNA样品经荧光RAA检测,均能得到有效的扩增,检测可在15 min内完成。含不同数量阳性钉螺的50只阴性钉螺提取的日本血吸虫DNA经荧光RAA检测,均能得到有效的扩增,检测可在10 min内完成。结论本研究建立的可检测日本血吸虫核酸片段的荧光RAA方法,反应快捷,敏感性和特异性均较高。

关键词：日本血吸虫基因检测核酸等温扩增荧光探针重组酶

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江苏省扬州市新砂滩农业生态综合开发消除血吸虫病效果

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中国热带医学 2020年第7期20卷 608-612页

作者：左引萍何日唐恺王建仇其令朱道建孙乐平杜广林马玉才周敬东扬州市疾病预防控制中心江苏扬州225002 扬州市人民政府血地防领导小组办公室江苏扬州225002 扬州市广陵区疾病预防控制中心江苏扬州225002 国家卫生和计划生育委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室、江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室、江苏省血吸虫病防治研究所江苏无锡214064 扬州市邗江区疾病预防控制中心江苏扬州225100

目的分析扬州市新砂滩利用农业生态综合开发消除血吸虫病效果,为血吸虫病传播阻断地区走向血吸虫病消除阶段提供借鉴。方法采用回顾性调查法,收集2005-2016年新砂滩查灭螺、环境改造、查治病、健康行为调查资料并对结果进行统计分析。... 详细信息

目的分析扬州市新砂滩利用农业生态综合开发消除血吸虫病效果,为血吸虫病传播阻断地区走向血吸虫病消除阶段提供借鉴。方法采用回顾性调查法,收集2005-2016年新砂滩查灭螺、环境改造、查治病、健康行为调查资料并对结果进行统计分析。结果新砂滩有螺面积年平均值从农业生态综合开发前(2005-2010年)194.86万㎡(1 169.18/6)下降到开发后(2011-2016年)12.13万㎡(72.75/6);血检阳性率从开发前9.28%下降到开发后1.05%,粪检阳性率从2.28%下降到0%;2017年4月调查新砂滩无害化卫生公厕经常使用率为88.1%;开发后每年共产生经济效益约为300万元。结论新砂滩以农业生态综合开发的治理方式,进一步消除血吸虫病危害,巩固了血防成果,提高了人群健康意识,并产生了可观的经济效益。

关键词：血吸虫病农业生态综合开发钉螺新砂滩

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江苏省血吸虫病查病质控体系的构建与应用Ⅱ县级人员病原学检测能力评估

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中国血吸虫病防治杂志 2018年第1期30卷 26-31页

作者：张键锋姚韵怡熊春蓉赵松冯云王鑫瑶李伟国家卫生和计划生育委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室江苏省血吸虫病防治研究所无锡214064

目的评价江苏省县级血防机构开展血吸虫病病原学检测水平,提高专业技术人员血吸虫病病原学检测能力,为构建血吸虫病现场查病质控体系提供技术支撑。方法人工获取家兔血吸虫肝卵,制备成4个不同浓度的虫卵悬液,采用单盲法开展虫卵孵化检测... 详细信息

目的评价江苏省县级血防机构开展血吸虫病病原学检测水平,提高专业技术人员血吸虫病病原学检测能力,为构建血吸虫病现场查病质控体系提供技术支撑。方法人工获取家兔血吸虫肝卵,制备成4个不同浓度的虫卵悬液,采用单盲法开展虫卵孵化检测,比较县级工作员检测结果与标准结果的符合率、误检率和漏检率。结果江苏省28个县(市、区)共检测虫卵悬液560份,检出阳性283份,阴性203份,总符合率为86.79%,总误检率为9.38%,总漏检率为15.77%,检测结果与标准结果差异有统计学意义(χ~2=12.99,P<0.01)。28个县(市、区)中有20个县(市、区)出现了漏检,占71.43%;13个县(市、区)出现了误检,占46.43%。江滩、山丘、水网和湖滩4类地区病原学检测误检率为4.55%~43.75%,差异有统计学意义(χ~2=30.34,P<0.01);漏检率为4.17%~20.45%,差异无统计学意义(χ~2=5.09,P=0.17)。传播控制和传播阻断2类流行区病原学检测误检与漏检率分别为7.50%、13.33%与10.42%、17.13%,差异无统计学意义(χ~2=0.229、0.575,P均>0.05)。达到血吸虫病传播控制10年及以上和不足10年地区误检与漏检率分别为11.81%、5.00%与16.67%、14.17%,差异无统计学意义(χ~2=2.804、2.848,P均>0.05)。达到血吸虫病传播阻断10年及以上与不足10年地区误检率分别为11.54%与10.00%,差异无统计学意义(χ~2=0.069,P=0.792);漏检率分别为10.90%与35.00%,差异有统计学意义(χ~2=17.364,P<0.01)。结论江苏省县级水平血吸虫病查病工作存在漏检、误检现象,现场病原学检测能力有待进一步提高。

关键词：血吸虫病诊断粪孵法质量控制现场评估

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曼氏血吸虫中间宿主光滑双脐螺在中国大陆的定殖风险及潜在地理分布研究

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中国血吸虫病防治杂志 2018年第3期30卷 249-254,259页

作者：王宜安杨坤梁幼生曲国立石锋邢云天戴建荣江苏省血吸虫病防治研究所国家卫生和计划生育委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室无锡214064

目的基于螺的生态学数据和气象站点的温度资料,预测曼氏血吸虫中间宿主光滑双脐螺在中国大陆定殖风险及潜在地理分布。方法采用生态学方法实验室测定光滑双脐螺螺卵、幼螺及成螺生存极值高温、极值低温、发育起点温度和世代发育有效积温... 详细信息

目的基于螺的生态学数据和气象站点的温度资料,预测曼氏血吸虫中间宿主光滑双脐螺在中国大陆定殖风险及潜在地理分布。方法采用生态学方法实验室测定光滑双脐螺螺卵、幼螺及成螺生存极值高温、极值低温、发育起点温度和世代发育有效积温;采集中国大陆南方11个省(直辖市、自治区)国家级气象站点1955-2010年温度资料,建立光滑双脐螺环境温度相关基础数据库,并基于地理信息系统(GIS)空间分析技术,预测光滑双脐螺在中国大陆定殖风险及潜在空间分布区域。结果光滑双脐螺螺卵、幼螺及成螺的半数致死低温分别为6.80、6.34℃和6.60℃,半数致死高温分别为35.99、33.59℃和32.20℃,发育起点温度为7.16℃,平均世代发育有效积温为(1 970.07±455.10)日·度。结合我国南方229个国家级气象站点温度资料的GIS分析显示,中国大陆云南省、广西壮族自治区、广东省和福建省的局部地区以及海南全省的气温条件已能满足光滑双脐螺生存的温度要求;其中广东少部分地区和整个海南省区,甚至可完成3个世代以上发育繁殖,可成为该螺入侵后的高风险潜在地理分布区域;并且随着全球气候变暖,中国大陆适合光滑双脐螺定殖的潜在地理分布区域有由南向北扩展的趋势。结论我国海南、广东、广西、云南、福建等地区已具备适合光滑双脐螺定殖的温度条件,且此区域呈由南向北扩展的趋势。因此,中国大陆存在光滑双脐螺传入后的定殖风险。

关键词：曼氏血吸虫光滑双脐螺定殖潜在地理分布地理信息系统中国大陆

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中华按蚊细胞色素P450基因表达特征分析

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中国血吸虫病防治杂志 2018年第2期30卷 149-154页

作者：卫沫唐建霞李菊林张梅花陈静徐岁曹园园杨蒙蒙朱国鼎周华云曹俊国家卫生和计划生育委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室江苏省血吸虫病防治研究所无锡214064

目的探讨6种溴氰菊酯抗性候选细胞色素P450(CYP)基因(CYP6M3、CYP6Y1、CYP6P5、CYP4H14、CYP4G17、CYP12F16)在中华按蚊体内的表达特征。方法收集中华按蚊不同发育时期(卵、幼虫、蛹、雌性成蚊和雄性成蚊)和组织(唾液腺、马氏管、中肠... 详细信息

目的探讨6种溴氰菊酯抗性候选细胞色素P450(CYP)基因(CYP6M3、CYP6Y1、CYP6P5、CYP4H14、CYP4G17、CYP12F16)在中华按蚊体内的表达特征。方法收集中华按蚊不同发育时期(卵、幼虫、蛹、雌性成蚊和雄性成蚊)和组织(唾液腺、马氏管、中肠、卵巢以及脂肪体)样本,以及雌性成蚊在暴露于不同溴氰菊酯剂量(0、1.25、3.75、6.25、12.5μg/瓶)和时间(0,5、15、30、60 min)后的样本.提取总RNA,利用反转录实时定量PCR(q PCR)技术分析CYP6M3、CYP6Y1、CYP6P5、CYP4H14、CYP4G17、CYP12F16基因在中华按蚊不同发育时期、组织以及不同溴氰菊酯接触剂量和时间下的相对表达量。结果 CYP6M3与CYP6Y1基因在雄性中华按蚊成蚊体内的表达量最高,CYP6M3基因在雄性成蚊体内的表达量是雌性成蚊的35.1倍,CYP6Y1基因在雄性成蚊体内的表达量是雌性成蚊的61.4倍;CYP4H14基因在幼虫期表达量最低,且在雌性成蚊体内表达量是四龄幼虫体内表达量的22.5倍。候选CYP基因在中华按蚊不同组织内的表达量差异具有统计学意义,CYP6M3基因在马氏管内的表达量是在卵巢中的38.9倍,CYP6Y1基因在脂肪体内的表达量是在卵巢中的9.1倍,CYP6P5基因在中肠内的表达量是在卵巢中的30.3倍,CYP4G17基因在脂肪体内的表达量是在卵巢中的4.6倍,CYP12F16基因在马氏管内的表达量是在卵巢中的4.4倍。接触不同溴氰菊酯剂量和时间对候选CYP基因的表达水平表现出一定的诱导效应,影响候选CYP基因在中华按蚊体内的表达。结论候选CYP基因在不同发育期中华按蚊体内和不同组织中差异表达,暴露于不同溴氰菊酯剂量和时间影响CYP基因在中华按蚊体内表达。

关键词：中华按蚊溴氰菊酯细胞色素P450基因表达特征

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