检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实验动物学报 2014年第1期22卷 22-26页

作者：李枫棣许黎黎鲍琳琳吕琦秦川中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的建立季节性流感病毒H1N1的鼠肺适应株,并对适应的分子机理进行研究。方法以病毒滴鼻感染小鼠,通过在BALB/c小鼠肺组织中连续传代,观察小鼠存活情况及肺病理改变,来获得季节性流感病毒H1N1的鼠肺适应株。结果季节性流感H1N1 A/Brisba... 详细信息

目的建立季节性流感病毒H1N1的鼠肺适应株,并对适应的分子机理进行研究。方法以病毒滴鼻感染小鼠,通过在BALB/c小鼠肺组织中连续传代,观察小鼠存活情况及肺病理改变,来获得季节性流感病毒H1N1的鼠肺适应株。结果季节性流感H1N1 A/Brisbane/59/2007病毒野生型毒株,经过在小鼠体内进行8次传代后,毒力逐渐增强,从无致病力到致死率达到100%,对鼠肺适应株与野生型毒株进行基因比对,发现适应株HA基因发生了3个有义突变。结论野生季节性低致病力H1N1流感病毒可经在小鼠中经过多次传代而获得高致病力H1N1鼠肺适应株,HA蛋白89位Thr至Ile的突变对毒力的增强起决定性作用。

关键词：季节性流感病毒H1N1 鼠肺适应株感染模型连续传代

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动物笼具和垫料蒸汽灭菌条件的优化

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中国比较医学杂志 2017年第3期27卷 81-83页

作者：陈霆张丽芳金迎春邓巍丛喆中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的评估几种动物笼具和动物垫料的高压灭菌效果,为安全操作提供依据。方法分别用三种方法高压动物笼具和垫料,用压力蒸汽灭菌化学指示卡和嗜热脂肪芽孢杆菌(ATCC 7953)3MTM压力蒸汽灭菌生物指示剂做为指示高压灭菌效果的指标。结果整... 详细信息

目的评估几种动物笼具和动物垫料的高压灭菌效果,为安全操作提供依据。方法分别用三种方法高压动物笼具和垫料,用压力蒸汽灭菌化学指示卡和嗜热脂肪芽孢杆菌(ATCC 7953)3MTM压力蒸汽灭菌生物指示剂做为指示高压灭菌效果的指标。结果整包垫料高压,垫料干燥效果不好;直接分装到笼具中高压,灭菌效果不稳定;垫料整包高压后,分装到笼具中再次高压,灭菌效果好,垫料干燥。结论单独高压整包垫料,之后将垫料按实际使用量铺放在笼具里进行再次灭菌的方法效果最好,且垫料干燥。

关键词：屏障设施高压灭菌垫料笼具

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动脉粥样硬化合并血清诱导型炎性关节炎小鼠肠道菌群和免疫系统的变化

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中华微生物学和免疫学杂志 2019年第4期39卷 283-291页

作者：石娜张抒扬牛海涛中国医学科学院医学实验动物研究所国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室100021 北京协和医院心内科 100010

目的探讨动脉粥样硬化(动脉硬化)合并血清诱导型炎性关节炎小鼠肠道菌群及免疫系统的变化。方法实验分为ApoE基因缺陷(ApoE^-/-)组和C57BL/6对照组,通过给8周龄ApoE^-/-小鼠和C57BL/6小鼠分别饲喂高脂食物,ELISA法检测血脂蛋白水平,油红... 详细信息

目的探讨动脉粥样硬化(动脉硬化)合并血清诱导型炎性关节炎小鼠肠道菌群及免疫系统的变化。方法实验分为ApoE基因缺陷(ApoE^-/-)组和C57BL/6对照组,通过给8周龄ApoE^-/-小鼠和C57BL/6小鼠分别饲喂高脂食物,ELISA法检测血脂蛋白水平,油红O染色来评价动脉硬化斑块面积,从而评估小鼠患动脉硬化的严重程度。从17周龄起腹腔注射K/BxN血清至26周龄,游标卡尺测量小鼠踝关节宽度,通过踝关节宽度和血清诱导型炎性关节炎评分来评价小鼠患血清诱导型炎性关节炎的程度。取小鼠粪便并提取DNA进行16S V4区PCR扩增,Illumina HiSeq PE250上机测序。分离小鼠脾脏细胞和骨髓细胞并用流式抗体染色,经流式细胞仪分析免疫细胞分布的改变。结果与C57BL/6对照组相比,动脉硬化合并血清诱导型炎性关节炎小鼠血脂水平显著升高,动脉硬化斑块面积显著增加;踝关节宽度和血清诱导型炎性关节炎评分降低;肠道菌群多样性降低,疣微菌纲显著降低;脾脏和骨髓CD3^+T细胞和CD19^+B细胞显著降低,CD11b^+巨噬细胞显著升高。结论动脉硬化合并血清诱导型炎性关节炎引起小鼠免疫细胞分布改变,肠道菌群多样性降低,细菌菌群分布改变,健康肠道的潜在生物标志物艾克曼菌丰度降低。推测肠道微生物的改变可能参与动脉硬化合并血清诱导型炎性关节炎的发病机制。

关键词：动脉硬化血清诱导型炎性关节炎肠道微生物自身免疫

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脂肪组织切片制备方法的改进

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中国比较医学杂志 2017年第1期27卷 79-84页

作者：徐玉环徐艳峰刘颖黄澜于品韩云林李彦红赵文杰邓巍秦川朱华中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

目的探讨脂肪组织石蜡切片及冰冻切片方法的改进。方法取脂肪组织迅速固定于10%中性福尔马林中,设置不同的脱水程序制备石蜡切片,HE染色。免疫组化法观察PPARγ和ITLN1的表达。取脂肪组织迅速固定于甲醛钙或10%中性福尔马林固定液中24 ... 详细信息

目的探讨脂肪组织石蜡切片及冰冻切片方法的改进。方法取脂肪组织迅速固定于10%中性福尔马林中,设置不同的脱水程序制备石蜡切片,HE染色。免疫组化法观察PPARγ和ITLN1的表达。取脂肪组织迅速固定于甲醛钙或10%中性福尔马林固定液中24 h以上,OCT包埋,置于-80℃冰箱至少30 min,设置冰冻切片机箱体温度-20℃,样品头温度-30℃,切片后HE染色。结果用改进方法制备的脂肪组织石蜡切片,切面平整,无皱褶,无裂隙,脂肪细胞结构完整,染色清晰,且对免疫组化结果无影响;冰冻切片的改进提高了切片质量,结构完整,形态好,染色清晰。结论改进的脂肪组织石蜡切片和冰冻切片均可成功应用于不同实验动物,为脂肪组织的研究提供了有力的支撑条件。

关键词：脂肪组织石蜡切片冰冻切片

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H7N9禽流感病毒与其他流感病毒对雪貂致病性与传播力的比较

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中国实验动物学报 2014年第1期22卷 32-37,I0010页

作者：邓巍许黎黎鲍琳琳朱华陈霆吕琦李枫棣袁静向志光高凯徐艳峰黄澜李彦红姚艳丰于品雍伟东张连峰秦川中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的针对2013年3月中国爆发的人感染H7N9禽流感病毒,在雪貂体内进行致病性及传播力的研究,并与甲型H1N1流感病毒、H5N1禽流感病毒进行比较。方法对新发H7N9毒株、甲型H1N1流感病毒、H5N1禽流感病毒感染雪貂后的临床症状、体征,呼吸道排... 详细信息

目的针对2013年3月中国爆发的人感染H7N9禽流感病毒,在雪貂体内进行致病性及传播力的研究,并与甲型H1N1流感病毒、H5N1禽流感病毒进行比较。方法对新发H7N9毒株、甲型H1N1流感病毒、H5N1禽流感病毒感染雪貂后的临床症状、体征,呼吸道排毒情况,组织病理学变化等进行评价和比较,并对H7N9毒株在雪貂群体中的传播力进行研究。结果雪貂模型的临床症状、死亡率、病毒传播以及组织病理学分析显示:H7N9病毒的致病性低于H5N1,与2009年起源于北美的甲型H1N1流感病毒相当。新发H7N9禽流感病毒可以在雪貂的呼吸道、心脏、肝脏以及嗅球进行复制。值得注意的是H7N9禽流感可以通过飞沫在雪貂间进行低水平的传播,并且在传播过程中,病毒基因组内有多个位点的氨基酸发生了替换。结论 H7N9禽流感病毒对雪貂的致病性较H5N1禽流感病毒低,与甲型H1N1流感病毒对雪貂的致病性相当,H7N9禽流感病毒可在雪貂间进行传播。

关键词： H7N9禽流感病毒致病性传播力动物模型雪貂

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BALB/c小鼠和雪貂感染H7N9禽流感病毒后的肺组织动态病理学变化

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中国实验动物学报 2014年第1期22卷 13-17,I0006-I0007页

作者：邓巍李彦红朱华徐艳峰陈霆李枫棣鲍琳琳许黎黎黄澜吕琦袁静向志光高凯姚艳丰于品秦川中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的了解用H7N9禽流感病毒分别感染BALB/c小鼠和雪貂后,其肺部动态病理改变,为临床诊断、治疗、预防及机制研究提供帮助.方法 BALB/c小鼠经鼻腔接种106EID50（50 μL）H7N9禽流感病毒后第1、2、3、5、7、14、28天分别安乐死2～3只小鼠... 详细信息

目的了解用H7N9禽流感病毒分别感染BALB/c小鼠和雪貂后,其肺部动态病理改变,为临床诊断、治疗、预防及机制研究提供帮助.方法 BALB/c小鼠经鼻腔接种106EID50（50 μL）H7N9禽流感病毒后第1、2、3、5、7、14、28天分别安乐死2～3只小鼠;雪貂经鼻腔吸入接种106EID50（500 μL）H7N9禽流感病毒后第3、7、14、28天分别安乐死1只雪貂,分别观察动物的临床特征改变,肺组织的大体组织形态学变化,HE染色观察动态病理改变,免疫组化染色观察病毒分布及肺组织各种炎细胞的浸润情况.结果感染病毒后的小鼠出现竖毛、嗜睡、死亡等表现,雪貂表现为打喷嚏、鼻腔分泌物、稀便、嗜睡等;大体观察小鼠与雪貂肺组织均可见到暗红色病灶;光镜观察小鼠与雪貂的肺组织均呈现坏死性支气管炎和渗出性间质性肺炎、肺泡炎.感染第2天开始出现炎性病变,7～9 d炎症病变最严重,14 d后逐渐修复吸收,28 d基本完全吸收; T、B淋巴细胞,巨噬细胞不同程度的表达增多,以T细胞增多为主,尤其是CD8＋ T细胞两种动物均大量表达.结论 H7N9禽流感病毒感染可引起BALB/c小鼠和雪貂肺组织急性支气管炎和肺炎,感染后7～9 d肺部炎症的组织病理学变化最严重,CD8＋T细胞明显增多,14 d后病灶逐渐吸收.该研究可为临床诊断、治疗、预防该病及进行疾病机制研究提供帮助.

关键词： H7N9禽流感病毒 BALB c小鼠雪貂肺组织病理学变化

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一种包含转座子Sleeping Beauty和PiggyBac的新型多功能载体的构建

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中国生物化学与分子生物学报 2012年第2期28卷 182-189页

作者：马元武廉虹王冬梅王贵利张连峰中国医学科学院和北京协和医学院中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室中国医学科学院和北京协和医学院中国医学科学院医学实验动物研究所国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

DNA转座子作为一种遗传学工具对脊椎动物的转基因、突变体产生、癌基因发现和基因治疗方面都有巨大的贡献.目前,哺乳动物中应用最为广泛、活性最高的DNA转座子为重构于鲑鱼的Sleeping Beauty(SB)转座子和来源于甘蓝蠖度尺蛾(cabbage loo... 详细信息

DNA转座子作为一种遗传学工具对脊椎动物的转基因、突变体产生、癌基因发现和基因治疗方面都有巨大的贡献.目前,哺乳动物中应用最为广泛、活性最高的DNA转座子为重构于鲑鱼的Sleeping Beauty(SB)转座子和来源于甘蓝蠖度尺蛾(cabbage looper moth Trichoplusia ni)的PiggyBac(PB)转座子.本研究中,我们成功构建了包含PB和SB两种转座子的杂合转座载体,命名为PBSBD.在杂合转座载体中融入了基因捕获框及loxp/Frt元件,用以实现转座过程中的基因捕获和条件性敲除.在HepG2细胞中通过检测报告基因的表达情况及阳性克隆的定位,对构建的杂合转座载体PBSBD进行了活性的初步验证.结果表明,PBSBD能够有效被2种转座酶识别,并能检测到报告基因的表达.本研究所构建的杂合转座载体PBSBD结合2种转座酶,可以应用于大规模筛选突变基因和研究基因功能.并且该杂合转座载体还可以利用SB转座酶的邻近转座特性,结合载体内所包含的loxp/Frt元件用以邻近区域DNA片段的条件性敲除,研究大片段DNA在生物体中的作用.

关键词：转座子 Sleeping Beauty PiggyBac 基因工程载体

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DEAE-葡聚糖在SHIV病毒TCID50滴定及扩增中的作用

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中国实验动物学报 2011年第3期19卷 193-196页

作者：丛喆姚南蒋虹金光魏强中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的确定DEAE-葡聚糖对CEMx174细胞的半数抑制浓度,明确其在SHIV病毒TCID50滴定及病毒扩增中的促进作用。方法分别使用含DEAE和无DEAE的DMEM完全培养基测定SHIVchn19p7的TCID50。用无血清DMEM培养基系列稀释DEAE,加入CEMx174细胞,使用cc... 详细信息

目的确定DEAE-葡聚糖对CEMx174细胞的半数抑制浓度,明确其在SHIV病毒TCID50滴定及病毒扩增中的促进作用。方法分别使用含DEAE和无DEAE的DMEM完全培养基测定SHIVchn19p7的TCID50。用无血清DMEM培养基系列稀释DEAE,加入CEMx174细胞,使用cck-8测定细胞破坏率。分别选取DEAE浓度为28.125μg/mL和14.0625μg/mL的无血清DMEM培养基对CEMx174细胞预处理3 h。再加入SHIV-KB9病毒液,定期测定培养上清中的P24水平,同时做正常病毒对照和DEAE-1640对照,比对不同处理下的病毒扩增情况。结果使用了DEAE后,SHIVchn19p7的TCID50达到了3.16×104 TCID50/mL,不使用DEAE,病毒的TCID50测定为阴性。DEAE对CEMx174细胞的IC50为44.85μg/mL。经浓度为28.125μg/mL和14.0625μg/mL的DEAE预处理后,SHIV-KB9病毒扩增在13 d～17 d达到高峰。而用不含DEAE的1640生长液培养的实验孔在19 d才开始出现阳性反应。结论高浓度的DEAE对细胞有较强的杀伤作用,低浓度的DEAE对细胞的破坏率较低,并且能显著促进病毒扩增。DEAE在病毒进入细胞的过程中确实起了重要的作用。

关键词： DEAE-葡聚糖 TZM-bl细胞半数组织培养感染剂量半数抑制浓度

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CEMx174细胞中SAMHD1蛋白表达与SIVmac239病毒水平的相关性研究

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中国比较医学杂志 2016年第4期26卷 41-45页

作者：彭灵娟丛喆薛婧宋铭晶魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的研究SIV在感染CEMx174细胞过程中,SAMHD1在基因和蛋白水平的变化与病毒水平之间的相关性。方法 SIVmac239病毒感染CEMx174细胞后,每天收集上清和细胞,应用Taq Man探针实时荧光定量RT-PCR方法,检测细胞内SAMHD1 mRNA的相对表达量的变... 详细信息

目的研究SIV在感染CEMx174细胞过程中,SAMHD1在基因和蛋白水平的变化与病毒水平之间的相关性。方法 SIVmac239病毒感染CEMx174细胞后,每天收集上清和细胞,应用Taq Man探针实时荧光定量RT-PCR方法,检测细胞内SAMHD1 mRNA的相对表达量的变化;用Western blot检测SAMHD1蛋白与SIVmac239P27蛋白表达量的变化,并分析其相关性。结果 CEMx174细胞感染SIVmac239后,细胞中的SAMHD1 mRNA基于内参基因GAPDH的相对表达量逐渐增加,前3 d分别增加了14%,16%,42%,随后开始迅速增加,第4天达到了200%,第6天更是达到了890%;细胞中SAMHD1蛋白的表达量在感染后第1、2天时变化不大,随后逐渐降低,到第5、6天时,几乎检测不到,呈现逐渐下降的趋势。结论 CEMx174细胞感染SIVmac239后,SAMHD1基因表达上调,与上清中病毒载量水平正相关,细胞内SAMHD1蛋白水平与SIVmac239 P27蛋白水平呈负相关。

关键词： SAMHD1 HIV-1 SIV 实时荧光定量RT-PCR

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SAMHD1限制HIV/SIV病毒复制功能研究的最新进展

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中国比较医学杂志 2015年第10期25卷 71-74页

作者：彭灵娟丛喆魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

SAMHD1是宿主限制性天然免疫分子,主要在髓系细胞及静息CD4+T细胞中表达,通过降低胞内d NTP水平限制HIV-1的复制和感染。近来研究发现SAMHD1还能够促进HIV/SIV病毒的基因重组、降解病毒基因组RNA以及抑制病毒在细胞间的传播,在病毒的感... 详细信息

SAMHD1是宿主限制性天然免疫分子,主要在髓系细胞及静息CD4+T细胞中表达,通过降低胞内d NTP水平限制HIV-1的复制和感染。近来研究发现SAMHD1还能够促进HIV/SIV病毒的基因重组、降解病毒基因组RNA以及抑制病毒在细胞间的传播,在病毒的感染、复制、包装、传播等整个生命过程中都发挥着一定的作用。目前这一天然抗病毒蛋白分子已经成为HIV研究领域的新热点,本文将就SAMHD1抗HIV病毒研究的最新进展做一综述。

关键词： SAMHD1 HIV-1 Vpx

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