检索结果-内蒙古大学图书馆

中国比较医学杂志 2019年第9期29卷 1-9页

作者：李红威张玲李卓秦川国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心

目的利用SH-SY5Y细胞系作为神经细胞的体外模型,探索甲醛对神经细胞的损伤作用,为甲醛损伤神经细胞的机制提供一定的科学依据。方法将甲醛按不同作用浓度(对照组、0.05 mmol/L、0.1 mmol/L、0.25 mmol/L、0.5 mmol/L、1 mmol/L)处理SH-S... 详细信息

目的利用SH-SY5Y细胞系作为神经细胞的体外模型,探索甲醛对神经细胞的损伤作用,为甲醛损伤神经细胞的机制提供一定的科学依据。方法将甲醛按不同作用浓度(对照组、0.05 mmol/L、0.1 mmol/L、0.25 mmol/L、0.5 mmol/L、1 mmol/L)处理SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞。采用细胞划痕实验、高倍镜检、CTG细胞活性实验检测甲醛对细胞迁移能力、细胞形态及生存活性的影响;使用流式细胞术检测甲醛对细胞凋亡水平的影响;并通过透射电镜观察超微结构改变;使用免疫印迹法检测细胞内磷酸化tau蛋白、Aβ及线粒体裂解相关蛋白的表达水平。结果0.05 mmol/L甲醛即可抑制SH-SY5Y细胞的迁移能力,0.1 mmol/L作用4 h即可降低细胞生存活性和增殖能力,上述改变与甲醛剂量和作用时间呈正相关;0.05 mmol/L甲醛即可诱导SH-SY5Y细胞的凋亡,可导致SH-SY5Y超微结构线粒体的损伤;0.25 mmol/L甲醛增加线粒体分裂,上调神经细胞磷酸化tau蛋白的表达水平。结论甲醛可通过抑制SH-SY5Y细胞活性和增殖能力、降低其迁移能力、诱导凋亡等途径损伤神经细胞,可上调神经细胞tau蛋白的磷酸化水平。

关键词：甲醛神经细胞线粒体凋亡

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基于微滴式数字PCR技术对猪内源逆转录病毒拷贝数的检测方法的建立及应用

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中国比较医学杂志 2021年第9期31卷 90-97页

作者：卢天宇高虹杨博超于佳楠徐亚新王若琳秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的利用微滴式数字PCR(droplet digital PCR,dd PCR)技术,对猪基因组中猪内源逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)拷贝数测定方法进行优化,建立PERV拷贝数的检测方法。方法采用Taq Man探针双重dd PCR方法,分别以甘油醛-3-... 详细信息

目的利用微滴式数字PCR(droplet digital PCR,dd PCR)技术,对猪基因组中猪内源逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)拷贝数测定方法进行优化,建立PERV拷贝数的检测方法。方法采用Taq Man探针双重dd PCR方法,分别以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)和转铁蛋白受体(transferrin receptor,TFRC)为内参基因,确定对PERV拷贝数检测反应最适合退火温度和反应循环数。另外,通过对浓度梯度稀释的标准品质粒和猪细胞基因组进行检测,以确定最适模板浓度。采用dd PCR和q PCR两种方法测定来自猪源细胞系和巴马小型猪组织中PERV的拷贝数,比较两种检测方法的稳定性。结果基于dd PCR技术检测PERV拷贝数的最适退火温度为59.9℃,最佳反应循环数为50;模板基因组的最适浓度在1.25~7.5 ng;检测同一样品来源基因组中PERV的拷贝数的变异系数在0.44%~8.29%。结论本研究建立了基于dd PCR技术的PERV拷贝数的检测方法并系统的探索了最佳实验条件,与传统的q PCR相比,该方法具有更高的准确性和可重复性,为异种移植研究中供体动物基因组PERV拷贝数的测定提供了灵敏的方法和可靠依据。

关键词：微滴式数字PCR 猪内源逆转录病毒拷贝数绝对定量

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小鼠侧脑室下区基因表达的增龄性变化研究

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中国比较医学杂志 2020年第1期30卷 57-67页

作者：黄艺滢石桂英吕颖李珂雅白琳中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室

目的研究幼年期、成年期和老年期小鼠侧脑室下区(subventricular zone,SVZ)中基因表达的增龄性变化。方法分别提取3周龄、6月龄和20月龄C57小鼠SVZ的mRNA,基于转录组测序及实时荧光定量PCR技术,检测SVZ中在不同年龄阶段的基因表达差异... 详细信息

目的研究幼年期、成年期和老年期小鼠侧脑室下区(subventricular zone,SVZ)中基因表达的增龄性变化。方法分别提取3周龄、6月龄和20月龄C57小鼠SVZ的mRNA,基于转录组测序及实时荧光定量PCR技术,检测SVZ中在不同年龄阶段的基因表达差异。结果以幼年期小鼠为对照,成年期检测到253个差异表达的基因,老年期检测到519个,以成年期作对照,老年期检测到147个差异表达的基因。GO分析发现成年期小鼠与幼年期相比差异表达基因主要涉及营养和代谢,老年期小鼠与成年期相比主要涉及中枢神经系统神经元分化等。KEGG分析发现差异表达基因主要涉及通路为蛋白质消化吸收、神经活性配体-受体相互作用等。结论该研究提供了不同年龄段SVZ转录水平基因变化的数据,为探讨SVZ的功能发育和退化,进一步治疗和抵抗神经衰老提供新的理论依据和方法。

关键词：侧脑室下区增龄性变化转录组测序技术神经干细胞小鼠

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人载脂蛋白A1基因转基因小鼠的建立

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中国实验动物学报 2011年第6期19卷 461-464页

作者：张旭高昆张海涛高翔葛文平张小娟张连峰董伟中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京10002

目的建立系统性表达人载脂蛋白A1(APOA1)基因的转基因小鼠。方法将人APOA1基因插入系统性表达启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立人APOA1转基因C57BL/6J小鼠。并利用特异引物PCR法鉴定转基因小鼠的基因型,Western blo... 详细信息

目的建立系统性表达人载脂蛋白A1(APOA1)基因的转基因小鼠。方法将人APOA1基因插入系统性表达启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立人APOA1转基因C57BL/6J小鼠。并利用特异引物PCR法鉴定转基因小鼠的基因型,Western blot检测基因表达水平,血生化分析检测不同月龄转基因小鼠与同龄野生型小鼠的血脂指标。结果建立了2个不同表达水平的人APOA1基因的转基因小鼠品系;转入的人APOA1基因在血液、肝脏、心脏、肾脏、脾脏、血管组织中均有明显表达;血生化分析结果显示不同月龄转基因小鼠的血浆高密度脂蛋白胆固醇水平高于同龄的野生型小鼠,甘油三酯水平低于同龄野生型小鼠。结论成功建立了系统性表达人APOA1基因的转基因小鼠,为研究高血脂以及高血脂相关的心血管病提供了工具。

关键词：载脂蛋白A1 转基因小鼠高密度脂蛋白胆固醇

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不同接种量荧光素酶标记小鼠乳腺癌细胞4T1在小鼠体内生长及肺转移的比较

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中国实验动物学报 2012年第1期20卷 14-17,I0003页

作者：李小颖马元武张旭张连峰中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的采用活体成像技术比较四种剂量荧光素酶标记肿瘤细胞在小鼠体内生长及肺转移情况,为光学标记肿瘤模型的药物筛选或机制研究提供参考资料。方法以荧光素酶作为报告基因导入小鼠乳腺癌细胞4T1中,经G418筛选获得稳定表达荧光素酶的细... 详细信息

目的采用活体成像技术比较四种剂量荧光素酶标记肿瘤细胞在小鼠体内生长及肺转移情况,为光学标记肿瘤模型的药物筛选或机制研究提供参考资料。方法以荧光素酶作为报告基因导入小鼠乳腺癌细胞4T1中,经G418筛选获得稳定表达荧光素酶的细胞克隆并扩大培养。标记细胞稀释成1×107细胞/mL,2×107细胞/mL,5×107细胞/mL和1×108细胞/mL四种剂量,取0.1 mL接种于BALB/c小鼠右侧第二对乳腺脂肪垫内,制作小鼠原位乳腺癌模型,比较肿瘤细胞在小鼠体内生长及肺转移情况。结果获得稳定表达荧光素酶基因的细胞克隆,在致瘤性方面和亲代细胞无明显差别,四种剂量细胞接种BALB/c小鼠后,均有肿瘤生长,接种第28天时,四种剂量接种的原位移植瘤大小没有明显差别,但接种两个高剂量肿瘤细胞的小鼠组各有2只小鼠死亡;接种后31 d,发现四种剂量接种的原位移植瘤均发生不同程度的转移,随着观察天数的增加,转移程度逐渐严重,接种后42 d,小鼠陆续发生死亡。结论根据转移和死亡情况,确定接种1×106个细胞/只不仅肺转移明显,而且存活时间一般超过45 d,比高剂量接种存活时间长,为最佳肺转移剂量。

关键词： 4T1小鼠乳腺癌细胞株荧光素酶肺转移肿瘤模型

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北京市花鸟市场常见留鸟流感病毒携带情况调查

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中国实验动物学报 2014年第1期22卷 91-93页

作者：姚艳丰许黎黎鲍琳琳李枫棣吕琦谷松至袁静于品秦川中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的阐明H7N9爆发季节北京市禽流感的流行现状,为流感防控提供依据。方法对北京市花鸟市场开展流感监测,使用SPF鸡胚进行病毒分离。结果病毒分离显示从鸽子中分到1株高致病性新城疫病毒,从麻雀中分到1株禽副黏病毒2型,并未分离到H7N9流... 详细信息

目的阐明H7N9爆发季节北京市禽流感的流行现状,为流感防控提供依据。方法对北京市花鸟市场开展流感监测,使用SPF鸡胚进行病毒分离。结果病毒分离显示从鸽子中分到1株高致病性新城疫病毒,从麻雀中分到1株禽副黏病毒2型,并未分离到H7N9流感病毒。结论初步掌握了北京花鸟市场留鸟的病毒流行情况,H7N9流感病毒在此尚未流行,为流感防控提供第一手的材料。

关键词：花鸟市场留鸟流感流行病学

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小鼠、大鼠、食蟹猴与人的脂肪干细胞分离培养方法和生物学特性的比较分析

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中国比较医学杂志 2019年第6期29卷 14-21页

作者：李珂雅石桂英高舒平白琳秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室

目的比较分析实验动物脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)与人脂肪间充质干细胞的分离培养方法和生物学特性的差异,为自体脂肪干细胞移植治疗人类疾病的临床前研究提供临床前的实验数据和方法。方法将... 详细信息

目的比较分析实验动物脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)与人脂肪间充质干细胞的分离培养方法和生物学特性的差异,为自体脂肪干细胞移植治疗人类疾病的临床前研究提供临床前的实验数据和方法。方法将临床患者、食蟹猴、C57小鼠和SD大鼠的皮下脂肪组织进行分离培养后得到人脂肪间充质干细胞(hADSCs)、食蟹猴脂肪间充质干细胞(cynomolgus monkey adipose-derived mesenchymal stem cells,cADSCs)、小鼠脂肪间充质干细胞(mouse adipose-derived mesenchymal stem cells,mADSCs)和大鼠脂肪间充质干细胞(rat adipose-derived mesenchymal stem cells,rADSCs);采用流式细胞术鉴定ADSCs表面标记物;细胞成脂、成骨诱导分化,于诱导后21 d和28 d固定染色,鉴定ADSCs的成脂成骨分化能力。结果 hADSCs、cADSCs、mADSCs和rADSCs的分离培养方法类似,贴壁培养后均呈成纤维细胞样生长;流式检测显示,不同物种ADSCs间充质干细胞表面标记物CD90、CD29为阳性,少量表达造血干细胞标记物CD34,血管内皮细胞标记物CD31为阴性。成脂和成骨分化能力检测显示,hADSCs、cADSCs、mADSCs和rADSCs和均具有成脂成骨分化能力,但其成脂成骨分化的时间略有差异。结论实验动物ADSCs与hADSCs采用相同的分离培养方法,有类似的表面标记物表达及成脂成骨分化潜能,生物学特性具有一致性,是自体脂肪干细胞移植临床前研究的良好模型。

关键词：脂肪干细胞人食蟹猴 C57小鼠 SD大鼠

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季节性流感疫苗对小鼠感染H7N9禽流感病毒的保护效力

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中国实验动物学报 2014年第1期22卷 44-47页

作者：吕琦鲍琳琳许黎黎邓巍李枫棣袁静于品姚艳丰秦川中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的评价季节性流感裂解疫苗对流感病毒H7N9的免疫保护效力.方法用我国2012～2013年度季节性流感裂解疫苗,以腹腔注射方式免疫BALB/c小鼠,并设PBS免疫模型组,末次免疫14 d后以5 LD50 A/Anhui/1（H7N9）进行攻试验.感染后观察记录小鼠... 详细信息

目的评价季节性流感裂解疫苗对流感病毒H7N9的免疫保护效力.方法用我国2012～2013年度季节性流感裂解疫苗,以腹腔注射方式免疫BALB/c小鼠,并设PBS免疫模型组,末次免疫14 d后以5 LD50 A/Anhui/1（H7N9）进行攻试验.感染后观察记录小鼠临床表现,体重变化,并分别于第2天和第4天每组处死3只小鼠,取肺组织和鼻甲骨测病毒滴度和载量.结果感染后疫苗与模型组小鼠体重下降明显,疫苗组存活率为10%,模型组全部死亡.感染后第4天疫苗组鼻甲骨滴度显著低于模型组.血凝抑制试验及中和实验表明免疫小鼠血清无中和H7N9病毒抗体.结论季节性流感疫苗在小鼠中对于H7N9流感病毒感染无明显保护作用.

关键词： H7N9流感病毒季节性流感疫苗免疫保护效力

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恒河猴糖尿病动物模型血清及组织中细胞因子的变化

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中国实验动物学报 2013年第3期21卷 53-56,I0008页

作者：朱华徐艳峰刘颖黄澜秦川卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的探讨恒河猴糖尿模型病细胞因子的水平和变化规律。方法健康恒河猴5只,小剂量(30mg/kg)多次静脉注射链脲佐菌素(STZ),血糖稳定后3、9、12和19个月检测血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含... 详细信息

目的探讨恒河猴糖尿模型病细胞因子的水平和变化规律。方法健康恒河猴5只,小剂量(30mg/kg)多次静脉注射链脲佐菌素(STZ),血糖稳定后3、9、12和19个月检测血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。安乐濒死状态的动物,取胰腺、肝脏、肾脏制成石蜡切片,用免疫组化染色法显示组织中IL-6、IL-10、TNF-α的表达,并对结果进行图像分析和统计学处理。结果造模后9个月动物血清中IL-10浓度显著降低(P<0.01)。IL-6、TNF-α水平在采样的各个时间点均显著高于造模前(P<0.01)。胰腺组织中IL-6中等强度着色,对照组弱阳性表达(P<0.05)。对照组IL-10强阳性表达,模型组弱阳性(P<0.01)。模型组TNF-α中等强度表达,对照组弱阳性(P<0.05)。模型组肝脏组织TNF-α中等阳性表达,对照组弱阳性(P<0.05)。结论小剂量多次注射STZ后恒河猴细胞因子的含量及变化与临床类似,可作为相关研究的动物模型。

关键词：糖尿病恒河猴链脲佐菌素细胞因子

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H7N9禽流感病毒小鼠感染动物模型的建立

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中国实验动物学报 2014年第1期22卷 18-21,I0008页

作者：朱华许黎黎鲍琳琳邓巍陈霆吕琦李枫棣袁静徐艳峰黄澜李彦红刘江宁姚艳峰于品雍卫东魏强张连峰秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的建立H7N9禽流感病毒小鼠感染模型。方法 1×108,1×107或1×106TCID50H7N9禽流感病毒原液(A/Anhui/1/2013)滴鼻感染BALB/c小鼠。主要观测指标:临床症状、死亡率、病理变化、病毒载量和血清抗体检测。结果被感染的小鼠... 详细信息

目的建立H7N9禽流感病毒小鼠感染模型。方法 1×108,1×107或1×106TCID50H7N9禽流感病毒原液(A/Anhui/1/2013)滴鼻感染BALB/c小鼠。主要观测指标:临床症状、死亡率、病理变化、病毒载量和血清抗体检测。结果被感染的小鼠表现为竖毛、弓背、体重下降;病理表现为间质性肺炎,感染后第2天开始在呼吸道脱落细胞中检测到病毒;免疫组化或病毒分离方法在肺、肾、脑、肠、脾等组织检测到病毒;感染后14 d在小鼠血清中血凝抑制试验特异性抗体效价达到160;淋巴细胞减少,中性粒细胞增多。结论 H7N9感染BALB/c小鼠模型与人类禽流感感染疾病的基本特征相似,为研究该病的发病机制及药物疫苗的研发提供了工作基础。

关键词： H7N9禽流感病毒感染动物模型 BALB c小鼠

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