检索结果-内蒙古大学图书馆

Dectin-1在curdlan诱导的慢性肉芽肿病高炎症反应中的作用机制

生物化学与生物物理进展 2016年第6期43卷 592-598页

作者：原慧萍车福刚杨泽北京医院卫生部北京老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室北京100730

慢性肉芽肿病(CGD)是一种罕见的遗传免疫缺陷综合症.CGD病人最常见为NADPH氧化酶2(NADPH oxidase 2,NOX2)功能缺失造成吞噬细胞内活性氧生成障碍,不能清除外源的细菌与真菌的感染.凝胶多糖curdlan属于1,3-β-葡聚糖,是白色念珠菌细胞壁... 详细信息

慢性肉芽肿病(CGD)是一种罕见的遗传免疫缺陷综合症.CGD病人最常见为NADPH氧化酶2(NADPH oxidase 2,NOX2)功能缺失造成吞噬细胞内活性氧生成障碍,不能清除外源的细菌与真菌的感染.凝胶多糖curdlan属于1,3-β-葡聚糖,是白色念珠菌细胞壁的主要成分.目前,作为吞噬细胞中主要的模式识别受体,凝集素dectin-1是否参与curdlan诱导巨噬细胞参与免疫炎症反应以及其分子机制不十分清楚.为了研究这一机制,我们采用luminol和Amplex Red法检测活性氧生成水平,ELISA检测炎症因子IL-1β水平以及免疫荧光法检测NF-κB信号通路的激活情况.结果表明,curdlan浓度依赖性上调巨噬细胞活性氧生成,NOX2缺失显著降低活性氧产生,dectin-1缺失部分降低活性氧的生成和部分阻断NF-κB信号通路的激活.NOX2 KO小鼠炎症因子IL-1β水平显著升高,Dectin-1缺失后NOX2 KO小鼠IL-1β水平降低;Dectin-1 KO小鼠的IL-1β水平与WT小鼠比无显著差异,与Dectin-1/NOX2 KO小鼠比差异显著.上述结果提示,curdlan刺激下机体通过巨噬细胞内的dectin-1受体诱导免疫应答,激活NF-KB信号通路释放炎症因子IL-1β,同时通过dectin-1受体激活NOX2释放活性氧清除病原,促进机体修复.在这一过程中dectin-1不是唯一参与的受体.

关键词：慢性肉芽肿性疾病 curdlan 活性氧 dectin-1 IL-1β

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外源性Rb基因对平滑肌细胞p21基因表达的影响

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1999年第2期31卷 59-62页

作者：王抒唐蔚青黎健卫生部老年医学重点实验室卫生部北京老年医学研究所

应用ＲＴＰＣＲ和免疫组化法测定ｐ２１ｍＲＮＡ及蛋白表达水平；蛋白质印迹法观察Ｒｂ蛋白的磷酸化；流式细胞术分析细胞周期，并以细胞形态观察和β半乳糖苷酶染色检测细胞衰老。结果发现，外源性Ｒｂ基因导入人脐动脉血管平滑肌... 详细信息

应用ＲＴＰＣＲ和免疫组化法测定ｐ２１ｍＲＮＡ及蛋白表达水平；蛋白质印迹法观察Ｒｂ蛋白的磷酸化；流式细胞术分析细胞周期，并以细胞形态观察和β半乳糖苷酶染色检测细胞衰老。结果发现，外源性Ｒｂ基因导入人脐动脉血管平滑肌细胞后，诱导ｐ２１基因表达，使Ｒｂ主要处于非磷酸化状态，引起约７０％的细胞生长停滞在Ｇ０／Ｇ１期，平滑肌细胞发生衰老。结果提示，Ｒｂ基因通过诱导ｐ２１基因表达以调节细胞周期和促进细胞衰老。

关键词： Rb基因 p21基因平滑肌细胞

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银杏内酯B对内皮细胞连接蛋白的影响及其分子机制研究

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中国药理学通报 2014年第5期30卷 646-651页

作者：刘雪青陈北冬鲍利吴伟孙文佳齐若梅卫生部北京医院/老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室北京100730

目的探讨银杏内酯B对人脐静脉内皮细胞连接蛋白以及血管渗透性的影响。方法用银杏内酯B(0.2、0.4、0.6 g·L-1)孵育人脐静脉内皮细胞1 h,再用ox-LDL刺激细胞4 h,用Western blot及免疫荧光法检测JAM-A、Cx43的表达。用白细胞迁移实... 详细信息

目的探讨银杏内酯B对人脐静脉内皮细胞连接蛋白以及血管渗透性的影响。方法用银杏内酯B(0.2、0.4、0.6 g·L-1)孵育人脐静脉内皮细胞1 h,再用ox-LDL刺激细胞4 h,用Western blot及免疫荧光法检测JAM-A、Cx43的表达。用白细胞迁移实验观察ox-LDL损伤内皮细胞以及银杏内酯B对单核细胞向内皮细胞下迁移的影响。结果①ox-LDL刺激内皮细胞4 h,JAM-A表达增加了22%,Cx43表达增加了24%,银杏内酯B处理的细胞JAM-A、Cx43表达明显降低。免疫荧光检测获得了同样的结果。②PI3K特异性抑制剂LY294002同样抑制了ox-LDL刺激的JAM-A、Cx43表达,表明银杏内酯B降低JAM-A、Cx43表达与抑制Akt磷酸化相关。③白细胞迁移实验表明,银杏内酯B明显减少ox-LDL诱导的单核细胞向内皮细胞下迁移。结论银杏内酯B能抑制ox-LDL刺激的内皮细胞连接蛋白JAM-A、Cx43表达,从而改善血管渗透性,减少白细胞迁移,分子机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路活化有关。

关键词：银杏内酯B 人脐静脉内皮细胞 JAM-A Cx43 血管渗透性炎症

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银杏内酯B对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

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中国药理学通报 2011年第1期27卷 81-84页

作者：刘熹昀赵革新鲍利陈北冬吴伟齐若梅卫生部北京医院老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室北京100730

目的探讨银杏内酯B(ginkgolide B,GB)对ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化的影响。方法 12只8周龄C57BL/6J小鼠为正常组,24只8周龄♂ApoE-/-小鼠为阳性模型组以及药物组;药物组每天给予GB 0.6 mg灌胃。8周后处死小鼠,用病理学方法... 详细信息

目的探讨银杏内酯B(ginkgolide B,GB)对ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化的影响。方法 12只8周龄C57BL/6J小鼠为正常组,24只8周龄♂ApoE-/-小鼠为阳性模型组以及药物组;药物组每天给予GB 0.6 mg灌胃。8周后处死小鼠,用病理学方法观察小鼠动脉斑块、脂质沉积以及巨噬细胞表达。用ELISA方法测定血浆RAN-TES含量。结果电镜结果显示模型组动脉斑块较大,血管内膜损伤明显,而GB组小鼠动脉内表面损伤明显减轻,斑块较小。HE染色显示了同样的结果,模型组斑块较大,GB组斑块较小。血浆RANTES测定正常组为123.81 ng.L-1,模型组为359.16 ng.L-1,GB组为193.36 ng.L-1,各组之间差异存在统计学意义(P<0.01)。结论 GB能有效地减轻ApoE-/-小鼠的动脉粥样硬化损伤,并降低血浆RANTES含量,其药理学机制可能与抑制血小板功能相关。

关键词：银杏内酯B ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化 RANTES PAF受体拮抗剂血小板释放

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银杏内酯B抑制高糖诱导内皮细胞TLR4及炎症蛋白表达

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中国药理学通报 2015年第5期31卷 636-640页

作者：孙文佳孙杰陈北冬赵艳阳齐若梅卫生部北京医院/老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室北京100730

目的评价银杏内酯B对高糖诱导内皮细胞TLR4表达的影响以及分子机制。方法使用人原代脐静脉内皮细胞,用高糖刺激内皮细胞,用Western blot分析TLR4、炎症蛋白表达以及Akt磷酸化。免疫荧光检测NF-κB核转位。结果高糖(30 mmol·L-1)刺... 详细信息

目的评价银杏内酯B对高糖诱导内皮细胞TLR4表达的影响以及分子机制。方法使用人原代脐静脉内皮细胞,用高糖刺激内皮细胞,用Western blot分析TLR4、炎症蛋白表达以及Akt磷酸化。免疫荧光检测NF-κB核转位。结果高糖(30 mmol·L-1)刺激内皮细胞TLR4和PAF受体表达明显增加,PAF受体抑制剂银杏内酯B(0.6 g·L-1)和CV3988(30μmol·L-1)分别抑制了TLR4及PAF受体表达。银杏内酯B有效地抑制了高糖刺激内皮细胞ICAM-1、VCAM-1表达。分子机制的研究表明,银杏内酯B明显抑制了高糖诱导的Akt磷酸化,以及NF-κB p65的核转位。结论高糖刺激内皮细胞TLR4和PAF受体表达增高,银杏内酯B能够抑制高糖刺激TLR4、PAF受体和炎症蛋白表达,分子机制与抑制Akt磷酸化以及NF-κB活化相关。

关键词：银杏内酯B TLR4 PAF 受体内皮细胞高糖 Akt NF-κB

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分选高纯度肾小球内皮细胞基础上应用小干扰RNA技术分析5-脂氧合酶激活蛋白的作用

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第2期12卷 283-288页

作者：欧阳涛黎健卫生部北京医院/老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室北京市100730

目的:采用多个内皮细胞特异性表达或吸收的蛋白分选高纯度的肾小球内皮细胞,观察5-脂氧合酶激活蛋白在细胞因子诱导的肾小球内皮细胞蛋白通透性中的可能作用。方法:实验于2005-12/2007-03在卫生部北京老年医学研究所完成。①实验材料:雌... 详细信息

目的:采用多个内皮细胞特异性表达或吸收的蛋白分选高纯度的肾小球内皮细胞,观察5-脂氧合酶激活蛋白在细胞因子诱导的肾小球内皮细胞蛋白通透性中的可能作用。方法:实验于2005-12/2007-03在卫生部北京老年医学研究所完成。①实验材料:雌性Wistar大鼠2只,100～120g。②实验过程:用胶原酶消化大鼠肾小球细胞,先后用抗CD31和抗acetylated-LDL抗体标记细胞,通过流式细胞仪纯化肾小球内皮细胞,用抗CD54、CD106和CD62E鉴定分离的细胞。③评估:通过小干扰RNA技术抑制肾小球血管内皮细胞表达5-脂氧合酶;用干扰素-γ刺激细胞,通过免疫印迹杂交和免疫荧光组织化学检测5-脂氧合酶蛋白的表达;用FITC标记的BSA作为指示剂来测量体外培养的肾小球血管内皮细胞的蛋白通透性。结果:①分选高纯度肾小球内皮细胞:CD31磁珠分选得到83.3%CD31阳性细胞,其中12.5%为同时CD31+和高吸收acetylated-LDL。分离该双阳性细胞后得到纯度大于99.2%的肾小球内皮细胞。流式细胞仪检测显示这些细胞的CD54、CD106和CD6也均为阳性。在相差显微镜下观察,细胞形态呈鹅卵石状。②细胞膜上5-脂氧合酶定位:用干扰素-γ处理细胞后,5-脂氧合酶蛋白表达水平升高并呈时间和剂量依赖性。③细胞转染5-脂氧合酶小干扰RNA后结果:用干扰素-γ处理,干扰素-γ不能诱导5-脂氧合酶的高表达;用干扰素-γ处理细胞后转染5-脂氧合酶小干扰RNA,干扰素-γ诱导5-脂氧合酶蛋白表达水平被明显抑制。④在5-脂氧合酶小干扰RNA转染细胞中干扰素-γ处理和未处理细胞白蛋白的通透率:分别为(0.37±0.09)%和(0.31±0.06)%,差异没有显著性(P>0.05)。结论:干扰素-γ能够诱导肾小球内皮细胞表达5-脂氧合酶蛋白并导致细胞通透性增高。5-脂氧合酶蛋白介导了干扰素-γ诱导细胞通透性增高的过程。

关键词： 5-脂氧合酶激活蛋白内皮/细胞学肾小球组织构建

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钙离子和钙网织蛋白对心肌细胞的作用(英文)

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第3期11卷 592-595,600页

作者：原慧萍黎健卫生部北京老年医学研究所/卫生部北京医院卫生部老年医学重点实验室北京市100730

目的:阐述钙离子与钙网织蛋白对心肌细胞的作用。资料来源:检索PubMed 1994-01/2005-12与钙离子和钙网织蛋白对心肌细胞作用的相关文章,检索词为“Ca2+,calreticulin,cardiomy-ocytes/cardiac myocyte,differentiation”,并限定语言种类为英语。资料选择:对所检索到的文献进行初筛,选择与钙离子和钙网织蛋白对心肌细胞作用的相关文章,筛除明显不符合原文的文章和重复性研究。资料提炼:共收集相关文章200篇,纳入42篇,排除158篇。资料综合:通过对内质网和肌质网上细胞内Ca2+释放通道(RyR和IP3R)的分子结构以及crt基因结构的研究表明:通道分子和钙网织蛋白共同参与调控体内Ca2+稳态,从而在心脏发育分化过程中发挥重要作用。结论:在心脏中细胞内游离Ca2+是一种关键的第二信使,细胞内Ca2+稳态的改变会显著影响许多心脏功能包括收缩舒张和心脏发育。细胞内Ca2+稳态的维持主要依赖内质网。在内质网中,钙离子主要与钙网织蛋白结合。crt基因敲除可损伤心脏发育而导致胚胎死亡。

关键词：钙通道钙网蛋白心肌细胞分化

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载脂蛋白A-I对内皮细胞粘附分子表达的影响

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中华医学杂志 2000年第6期80卷 468-469页

作者：梁利波王抒黎健卫生部北京医院卫生部北京老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室 100730

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血清脂蛋白亚类和高密度脂蛋白胆固醇酯化速率的生物学变异

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中华检验医学杂志 2011年第12期34卷 1135-1138页

作者：国汉邦李红霞满永王抒董军陈文祥卫生部北京医院卫生部北京老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室 100730

目的研究血清HDL亚类（HDL2-C、HDL3-C）、LDL亚类（LDLa-C、LDLb-C）、FERHDL和MERHDL的个体内和个体间的生物学变异（CVI、CVG）.方法选取2010年9-10月卫生部北京医院20名健康成年志愿者,男女各10名.每隔2周采集空腹静脉血1次,共采... 详细信息

目的研究血清HDL亚类（HDL2-C、HDL3-C）、LDL亚类（LDLa-C、LDLb-C）、FERHDL和MERHDL的个体内和个体间的生物学变异（CVI、CVG）.方法选取2010年9-10月卫生部北京医院20名健康成年志愿者,男女各10名.每隔2周采集空腹静脉血1次,共采集4次,用超速离心-高效液相色谱（HPLC）法测定各脂蛋白亚类水平及FERHDL和MERHDL,计算其CVI和CVG,并给出各项指标的分析质量要求.结果不同血脂指标的生物学变异不同,HDL3-C和HDL2-C的平均CVI分别为5.5％和7.2％,但两者的CVG差别较大,分别为8.7％和45.5％；LDLa-C和LDLb-C平均CVI分别为11.2％和18.7％；FERHDL和MERHDL的CVI分别为11.9％和12.3％,其中FERHDL的CVG （49.5％）大于MERHDL的CVG（30.6％）.CVI存在较大个体差异.结论本研究考察了血清脂蛋白亚类和HDL胆固醇酯化速率的生物学变异,可为这些血脂类危险因素的分析质量控制及心血管病危险分析奠定基础.

关键词：脂蛋白类,HDL 脂蛋白类,LDL 胆固醇,HDL 酯化变异(遗传学)

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美国CDC胆固醇参考方法和高密度脂蛋白胆固醇指定比对方法的运行和应用

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中华检验医学杂志 2009年第5期32卷 504-508页

作者：李红霞国汉邦满永董军陈文祥王抒卫生部北京医院卫生部北京老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室 100730

目的运行美国CDC胆固醇（TC）参考方法和高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）指定比对方法，用于我国血脂分析系统标准化。方法运行CDCTC参考方法和HDLC指定比对方法，加入CDC胆固醇参考方法实验室网络（CRMLN），每年6次参加CRMLN分析质量考核... 详细信息

目的运行美国CDC胆固醇（TC）参考方法和高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）指定比对方法，用于我国血脂分析系统标准化。方法运行CDCTC参考方法和HDLC指定比对方法，加入CDC胆固醇参考方法实验室网络（CRMLN），每年6次参加CRMLN分析质量考核，按规定程序对我国21种TC或HDLC分析系统进行认证实验。结果TC分析在18次考核中本室平均变异系数（CV）为0．29％，相对于CDC靶值的平均偏倚小于0．1％；HDLC分析在17次考核中本室平均标准差为0．010mmol／L（0．39mg／dl），相对于CDC靶值的平均偏倚-0．019mmool／L（-0．72mg／dl），相对于组均值的平均偏倚-0．006mmol／L（-0．25mg／dl）；本室绝大多数（〉90％）TC和HDLC分析事件符合CRMLN精密度和准确度要求；21种分析系统中的18种满足CRMLN性能要求，通过CDC溯源认证。结论与国际参考实验室网络相联系的TC参考方法和HDLC指定比对方法以及以此为基础的血脂分析系统认证计划已经建立，可望在我国血脂分析标准化中发挥重要作用。

关键词：胆固醇胆固醇,HDL 参考标准美国疾病控制中心临床实验室信息系统

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