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中华医学会第五次全国重症医学大会

作者：吴玉霞吴大玮彭苗苗陈晨卢海宁赵乐康山东大学齐鲁医院加强医疗科山东大学齐鲁医院心血管重构研究卫生部和教育部重点实验室

目的目前关于给予外源糖皮质激素对脓毒症导致的急性肾损伤(sepsisinduced AKI)的病理学变化以及糖皮质激素受体-α(GR-α)表达的影响知之甚少,本研究采用盲肠结扎穿刺(CLP)复制大鼠脓毒症ALI模型,观察小剂量氢化可的松对肾脏GR-α和核... 详细信息

目的目前关于给予外源糖皮质激素对脓毒症导致的急性肾损伤(sepsisinduced AKI)的病理学变化以及糖皮质激素受体-α(GR-α)表达的影响知之甚少,本研究采用盲肠结扎穿刺(CLP)复制大鼠脓毒症ALI模型,观察小剂量氢化可的松对肾脏GR-α和核转录因子NF-κB表达的影响,探讨小剂量GC对脓毒症导致的AKI保护作用的机制。方法盲肠结扎贯穿法制作严重脓毒血症Wistar大鼠急性肾损伤模型。Wistar大鼠随机分为3组:假手术组(正常对照组,n=10)、急性肾损伤组(安慰剂组,n=20),急性肾损伤治疗组(氢化可的松组,n=20)。术后24小时取血浆和肾脏,ELISA法测定血清TNF-α、IL-10的含量,免疫组化法测定肾皮质GR-α、NF-κB的表达,HE染色观察肾脏结构。结果 (1)免疫组化:与对照组相比,氢考组GR-α表达降低,差别有统计学意义(p<0.05),NF-κB表达增多,差别具有统计学意义(p<0.01);与安慰剂组相比,氢考组GR-α表达增多,差别有统计学意义(p<0.01),NF-κB表达降低,差别有统计学意义(p<0.01);安慰剂组与对照组相比,GR-α表达显著降低(p<0.01),NF-κB表达显著升高(p<0.01)。(2)血清内细胞因子:与对照组相比,氢考组TNF-α、IL-10含量增高,差别有统计学意义(p<0.01);与安慰剂组相比,氢考组TNF-α含量降低(p<0.01),IL-10含量升高(p<0.01);安慰剂组和对照组相比,TNF-α、IL-10含量增高,差异有统计学意义(p<0.01,p<0.05)。(3)HE染色光镜下发现小剂量氢化可的松明显减轻肾脏结构的损伤。结论小剂量氢化可的松能有效的抑制严重脓毒血症的炎症反应,对肾损伤有保护作用,其作用可能与上调GR-α表达有关。

关键词：氢化可的松小剂量保护作用严重脓毒血症肾损伤大鼠肾脏

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脓毒症大鼠肺组织糖皮质激素受体-α的表达及乌司他丁的干预作用

脓毒症大鼠肺组织糖皮质激素受体-α的表达及乌司他丁的干预作用

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中华医学会第五次全国重症医学大会

作者：陈晨吴大玮吴玉霞彭苗苗卢海宁赵乐康山东大学齐鲁医院加强医疗科山东大学齐鲁医院心血管重构研究卫生部和教育部重点实验室

目的研究脓毒症急性肺损伤肺组织糖皮质激素受体(GR)的变化情况,以及乌司他丁(UTI)治疗对GR的影响。方法将Wistar大鼠随机分为三组,对照组(假手术组,n=6)、模型组、UTI治疗组,后两组按观察时间点又分为6h、12h和24h亚组(n=6)。利用盲肠... 详细信息

目的研究脓毒症急性肺损伤肺组织糖皮质激素受体(GR)的变化情况,以及乌司他丁(UTI)治疗对GR的影响。方法将Wistar大鼠随机分为三组,对照组(假手术组,n=6)、模型组、UTI治疗组,后两组按观察时间点又分为6h、12h和24h亚组(n=6)。利用盲肠结扎穿刺(CLP)法制造脓毒症模型,术后0h、12h静脉注射UTI 5万u/kg(UTI组)或等量生理盐水(模型组)。各个时间点处死大鼠,留取血浆和肺组织,利用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆细胞因子TNF-α、IL-6含量,苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理改变,化学比色法测定肺组织MDA的含量,免疫组织化学法检测肺组织中GR-α蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测肺组织GRmRNA的含量。结果①ELISA结占果示UTI组和模型组血浆TNF-α、IL-6含量均较对照组呈不同程度升高(P<0.05或P<0.01);而UTI组均明显低于模型组(P<0.05)。②HE染色显示各个时间点UTI组肺组织病理改变均较模型组减轻,12h、24h亚组肺损伤评分显著降低(P<0.05)。③模型组、UTI组MDA含量均高于对照组(P<0.01、P<0.05);UTI组MDA含量与6h出现下降趋势,12h和24h亚组较模型组明显降低(P<0.05)。④GR-α在对照组肺组织中表达最多(P<0.01);脓毒症组GR-α的表达随术后时间变化呈下降趋势;UTI治台疗12h后GR-α开始出现上升趋势,24h组表达最多,各亚组GR-α表达均较脓毒症组高,但无统计学差异。⑤脓毒症、UTI各组肺组织中GR-αmRNA的表达均较对照组显著降低(P<0.01);UTI治疗24h组GR-αmRNA的含量高于ALI组,存在统计学差异(P<0.05)。结论糖皮质激素受体参与了脓毒症所的发生发展过程;乌司他丁可能可以通过抑制氧化应激、减轻炎症反应的环节来调节糖皮质激素受体的表达,降低肺组织的损伤。

关键词：肺组织 UTI 糖皮质激素受体乌司他丁模型组干预作用

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医院获得性肺炎患者分离耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌OprD的表达

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中华医院感染学杂志 2011年第23期21卷 4871-4874页

作者：耿治英吴大玮韩进冯进波山东大学齐鲁医院呼吸科山东济南250012 东营市人民医院呼吸科山东东营257901 山东大学齐鲁医院ICU 山东济南250012 山东大学齐鲁医院心血管重构和功能研究卫生部和教育部重点实验室山东济南250012 烟台市烟台山医院呼吸科山东烟台264001

目的研究耐碳青霉烯类抗菌药物铜绿假单胞菌(PAE)OprD的表达水平,探讨济南地区PAE耐碳青霉烯类抗菌药物的机制。方法收集从医院获得性肺炎患者痰液中分离的PAE,提取13株耐碳青霉烯类抗菌药物菌株的RNA,应用荧光实时定量PCR分析PAE外膜蛋... 详细信息

目的研究耐碳青霉烯类抗菌药物铜绿假单胞菌(PAE)OprD的表达水平,探讨济南地区PAE耐碳青霉烯类抗菌药物的机制。方法收集从医院获得性肺炎患者痰液中分离的PAE,提取13株耐碳青霉烯类抗菌药物菌株的RNA,应用荧光实时定量PCR分析PAE外膜蛋白oprD的基因表达水平;采用超声破碎法制备外膜蛋白,超速离心收集外膜蛋白,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离外膜蛋白,观察OprD的表达。结果荧光实时定量RT-PCR检测PAEoprD基因表达的结果表明,实验室标准株Ct值oprD/rpsL为1.42;13株碳青霉烯类耐药株Ct值oprD/rpsL平均值为1.17,与实验室标准株相比,差异有统计学意义(t=3.0716,P<0.01),2株碳青霉烯类敏感株Ct值的oprD/rpsL平均值为1.58,与实验室标准株相比,差异无统计学意义;外膜蛋白电泳图谱表明,碳青霉烯类耐药株在45kDa处表达明显下降,此处外膜蛋白为OprD。结论济南地区PAE耐碳青霉烯类抗菌药物与OprD表达水平下降有关。

关键词：铜绿假单胞菌耐药机制碳青霉烯类外膜蛋白

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利用黄樟素氧化物研究内皮向间充质转分化的信号通路

利用黄樟素氧化物研究内皮向间充质转分化的信号通路

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第七届全国化学生物学学术会议

作者：葛迪苏乐张尚立张运苗俊英赵宝祥赵静山东大学生命科学学院济南250100 教育部和卫生部心血管重构与功能研究重点实验室山东大学齐鲁医院济南250100 山东大学生命科学学院济南250100 教育部和卫生部心血管重构与功能研究重点实验室山东大学齐鲁医院济南250100 山东大学化学与化工学院济南250100

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鞘鞍醇激酶1对肝癌细胞凋亡特性的影响

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中国现代普通外科进展 2011年第1期14卷 6-8,16页

作者：陈海英高艳景刘慧亚陈雨信姜大磊袁勇山东大学齐鲁医院消化内科山东济南250012 教育部和卫生部心血管重构和功能研究重点实验室山东济南250012 山东大学齐鲁医院肝胆外科山东济南250012 青岛市立医院消化内科山东青岛260000 青岛大学医学院附属医院医政部山东青岛266000

目的:研究鞘鞍醇激酶1(SPK1)对人肝癌耐药细胞株BEL-FU凋亡特性的影响。方法:扩增并纯化携带野生型(Ad-SPK1WT)和SiRNASPK1(Ad-H1-SPK1)的重组腺病毒,以TCID50方法(I-U/ml)和快速CPE法测定病毒感染滴度;以腺病毒为载体将SPK1基因导入肝... 详细信息

目的:研究鞘鞍醇激酶1(SPK1)对人肝癌耐药细胞株BEL-FU凋亡特性的影响。方法:扩增并纯化携带野生型(Ad-SPK1WT)和SiRNASPK1(Ad-H1-SPK1)的重组腺病毒,以TCID50方法(I-U/ml)和快速CPE法测定病毒感染滴度;以腺病毒为载体将SPK1基因导入肝癌细胞BEL-FU;分别以酶活性检测试剂盒、MTT法检测SPK酶活性及SPK1对肝癌细胞凋亡特性的影响。结果:获得高滴度的Ad-SPK1WT腺病毒和Ad-H1-SPK1腺病毒;携带Ad-SPK1WT基因的BEL-FU细胞中SPK1酶活性增强并抑制DMS(N,N,-二甲基鞘氨醇)对BEL-FU的细胞毒作用,抑制肿瘤细胞凋亡;携带Ad-H1-SPK1基因的BEL-FU细胞中SPK1酶活性降低并增强DMS(N,N,-二甲基鞘氨醇)对BEL-FU的细胞毒作用,促进肿瘤细胞凋亡。结论:阻断SPK1作用可能成为肝癌治疗的新途径。

关键词：鞘鞍醇激酶肝肿瘤细胞凋亡

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从医院获得性肺炎患者呼吸道分离的耐碳青霉稀铜绿假单胞菌OprD的表达

从医院获得性肺炎患者呼吸道分离的耐碳青霉稀铜绿假单胞菌OprD的...

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中华医学会第五次全国重症医学大会

作者：吴大玮耿治英韩进冯进波山东大学齐鲁医院加强医疗科东营市人民医院呼吸科山东大学齐鲁医院心血管重构研究卫生部和教育部重点实验室烟台市烟台山医院呼吸科

目的研究耐碳青霉烯类抗生素铜绿假单孢菌OprD的表达水平,探讨济南地区铜绿假单孢菌耐碳青霉烯类抗生素的机制。方法收集从医院获得性肺炎患者痰液中分离的铜绿假单孢菌,提取13株对碳青霉烯类抗生素耐药菌株的RNA,应用荧光实时定量PCR... 详细信息

目的研究耐碳青霉烯类抗生素铜绿假单孢菌OprD的表达水平,探讨济南地区铜绿假单孢菌耐碳青霉烯类抗生素的机制。方法收集从医院获得性肺炎患者痰液中分离的铜绿假单孢菌,提取13株对碳青霉烯类抗生素耐药菌株的RNA,应用荧光实时定量PCR分析铜绿假单孢菌oprD(外膜蛋白OprD的基因)表达水平。采用超声破碎法制备外膜蛋白,超速离心收集外膜蛋白,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离外膜蛋白,观察OprD的表达。结果荧光实时定量RT-PCR检测铜绿假单孢菌oprD表达的结果表明,实验室标准株Ct值的oprD/rpsL为1.42。13株碳青霉烯耐药株Ct值的oprD/rpsL为1.17,s为0.0293,t=3.0716,p<0.005,与实验室标准株相比有显著性差异。2株碳青霉烯敏感株Ct值的oprD/rpsL为1.58,s为0.31,t=0.516,p〉0.25,与实验室标准株相比没有显著性差异。外膜蛋白电泳图谱表明,碳青霉烯耐药株在45 kDa处表达明显下降,此处外膜蛋白为OprD。结论济南地区铜绿假单孢菌耐碳青霉烯类抗生素与OprD的表达水平下降有关。

关键词：医院获得性肺炎碳青霉烯类抗生素呼吸道铜绿假单胞菌

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二维应变显像评价缺血心肌节段运动达峰时间的改变

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中华超声影像学杂志 2010年第9期19卷 745-748页

作者：杨晶晶张梅张运刘晓玲陈玉国李继福蒋桂花教育部和卫生部心血管重构和功能研究重点实验室山东大学齐鲁医院心内科济南250012

目的采用超声二维应变显像评价不同狭窄程度冠状动脉供血心肌节段在不同方向上运动达峰时间的改变.方法 140例冠心病患者,经胸采集左室心尖四腔、两腔和长轴观及二尖瓣、乳头肌、心尖短轴观二维图像.根据冠脉造影结果将所有心肌节段分... 详细信息

目的采用超声二维应变显像评价不同狭窄程度冠状动脉供血心肌节段在不同方向上运动达峰时间的改变.方法 140例冠心病患者,经胸采集左室心尖四腔、两腔和长轴观及二尖瓣、乳头肌、心尖短轴观二维图像.根据冠脉造影结果将所有心肌节段分为5组：0级组,供血冠状动脉正常;1级组,冠脉狭窄25%～49%;2级组,冠脉狭窄50%～74%;3级组,冠脉狭窄75%～99%;4级组,冠脉完全闭塞.分析各组心肌节段在纵向运动、径向运动、周向运动到达收缩期峰值应变、收缩末期应变、收缩期峰值应变率、舒张早期峰值应变率、舒张晚期峰值应变率的时间值以及各组心肌节段到达收缩峰扭转角度、收缩峰扭转率、舒张早期峰扭转率和舒张晚期峰扭转率的时间值.采用心率对所有的时间值进行校正.结果纵向运动：3级组到达舒张早期峰值应变率的时间较0级组明显延迟,4级组到达舒张早期峰值应变率和收缩期峰值应变率的时间较0级1级、2级、3级组均明显延迟.径向运动、周向运动：1级组到达收缩峰值应变的时间、收缩期峰值应变率的时间、舒张早期峰值应变率的时间和舒张晚期峰值应变率的时间早于0级组,而2级组、3级组、4级组上述指标的达峰时间较0级组延迟,3级组较2级组好转,4级组较其他各组均延迟.扭转运动：1级组到达收缩峰扭转角度的时间、收缩期峰扭转率的时间和舒张早期峰扭转率的时间较0级组提前;3级组到达收缩峰扭转角度的时间和舒张早期峰扭转率的时间较2级组明显好转.结论心肌节段在冠状动脉轻度缺血（25%～49%）时出现短轴方向上运动达峰时间的改变;冠状动脉狭窄≥75%心肌节段在各个方向的运动达峰时间均明显延迟.当冠状动脉狭窄75%～99%时,相应供血心肌节段运动达峰时间的延迟较冠状动脉狭窄50%～74%供血的相应心肌节段显著好转.

关键词：超声心动描记术心肌缺血心室功能,左二维应变

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负荷剂量阿托伐他汀对非ST段抬高急性冠状动脉综合征经皮冠状动脉介入治疗预后影响的研究

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中国实用内科杂志 2010年第9期30卷 820-822页

作者：于兴隆耿静吴婷婷刘光辉郭雪原陈文强季晓平张运葛志明山东大学齐鲁医院心内科教育部和卫生部心血管重构和功能研究重点实验室济南250012

目的探讨负荷剂量阿托伐他汀对非ST段抬高急性冠状动脉综合征(NSTE-ACS)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后的影响。方法将2009年6—10月山东大学齐鲁医院收集的81例NSTE-ACS患者随机分为负荷组和对照组,负荷组PCI前12h顿服阿托伐他汀80mg... 详细信息

目的探讨负荷剂量阿托伐他汀对非ST段抬高急性冠状动脉综合征(NSTE-ACS)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后的影响。方法将2009年6—10月山东大学齐鲁医院收集的81例NSTE-ACS患者随机分为负荷组和对照组,负荷组PCI前12h顿服阿托伐他汀80mg,术前2h追加阿托伐他汀40mg。所有患者于术前和术后8h、24h抽取肘静脉血检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)、血浆肌钙蛋白(cTNI)和超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肌酸激酶(CK)、转氨酶(ALT/AST)。结果 PCI术后2组心肌损伤及炎性反应标志物均有不同程度升高,但负荷组CK-MB、cTNI和hs-CRP水平显著低于对照治疗组(均P<0.01)。负荷组主要不良心脏事件发生率(2.4%)小于对照组(22.5%)(P=0.0161),主要由心肌梗死发生率下降(2.4%对20.0%,P=0.0307)构成。2组患者药物副反应轻微。结论 PCI前阿托伐他汀负荷剂量能减少PCI对NSTE-ACS患者造成的心肌损伤及炎症反应。降低PCI后不良心脏事件的发生,且安全有效。

关键词：经皮冠状动脉介入治疗心肌损伤炎症反应阿托伐他汀

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大鼠膜联蛋白A_2真核表达载体的构建及表达

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中国康复医学杂志 2010年第10期25卷 937-941,952页

作者：刘庆梅怀娟张杨姜虹岳寿伟山东大学齐鲁医院康复科济南250012 山东大学齐鲁医院教育部和卫生部心血管重构和功能研究重点实验室

目的:克隆大鼠背根神经节膜联蛋白A2(annexin Ⅱ)的基因,构建真核表达载体并检测其表达。方法:以RT-PCR法扩增大鼠背根神经节(DRG)细胞中膜联蛋白A2(annexin Ⅱ)的基因,构建pGMT-Anxa2克隆载体,以此为模板插入flag标签扩增Anxa2-flag序... 详细信息

目的:克隆大鼠背根神经节膜联蛋白A2(annexin Ⅱ)的基因,构建真核表达载体并检测其表达。方法:以RT-PCR法扩增大鼠背根神经节(DRG)细胞中膜联蛋白A2(annexin Ⅱ)的基因,构建pGMT-Anxa2克隆载体,以此为模板插入flag标签扩增Anxa2-flag序列,将其定向插入真核表达载体pcDNA3.1(+),获得表达载体pcDNA3.1(+)-Anxa2-flag。以PCR、双酶切及序列测定法鉴定该质粒。以脂质体法将表达载体转染到HEK293细胞中,Western印迹和细胞免疫荧光检测annexin Ⅱ蛋白表达及细胞内定位。结果:PCR扩增Anxa2-flag片段大小与预期相同。通过PCR、HindⅢ和NotⅠ双酶切及测序鉴定,证明构建出了含大鼠annexin Ⅱ基因的真核表达载体。Western印迹和细胞免疫荧光的检测表明大鼠annexin Ⅱ基因稳定表达,并可在胞膜和胞质中广泛表达。结论:成功构建pcDNA3.1(+)-Anxa2-flag真核表达载体,并稳定表达蛋白,为研究annexin Ⅱ调控DRG伤害性感受传导的分子机制奠定基础。

关键词：背根神经节膜联蛋白A2 真核表达载体 Western印迹免疫荧光

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复方中药提取物（通心络）对游离脂肪酸诱导内皮损伤的保护作用:抗氧化系统的意义

复方中药提取物（通心络）对游离脂肪酸诱导内皮损伤的保护作用:...

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第七届国际络病学大会

作者：张琳吴以岭贾振华张运沈湖英王兴利美国德克萨斯州休斯敦贝勒医学院/休斯敦心脏病研究所迈克尔E主动脉夹层动脉瘤外科室河北中西医结合医药研究院山东大学齐鲁医院心血管功能与重构研究实验室卫生部、教育部三级重点实验室

目的通心络是一种复方中药提取物,是对冠心病患者确切疗效的中药。方法为了验证通心络提取物对内皮细胞的保护作用,用软脂酸（PA）损伤内皮细胞,通常软脂酸浓度在代谢综合症时升高,并且与心血管并发症相关。用通心络提取物预先处理人主... 详细信息

目的通心络是一种复方中药提取物,是对冠心病患者确切疗效的中药。方法为了验证通心络提取物对内皮细胞的保护作用,用软脂酸（PA）损伤内皮细胞,通常软脂酸浓度在代谢综合症时升高,并且与心血管并发症相关。用通心络提取物预先处理人主动脉内皮细胞（HAECs）,然后用软脂酸处理24小时。结果我们发现软脂酸（0.5mM）诱导73%内皮细胞的凋亡。然而用通心络乙醇提取液（100μg/ml）预处理的内皮细胞,软脂酸仅仅诱导了7%的内皮细胞凋亡。使用抗体蛋白芯片,我们发现通心络抑制了软脂酸诱导的p38-MAPK应激途径的活化。为了研究通心络保护作用的机制,我们观察通心络对软脂酸诱导的内皮氧化应激反应的作用。结果发现,通心络通过AMPK途径修复了内皮细胞中被软脂酸抑制的抗氧化系统,使硫氧还蛋白的表达增加而和硫氧还蛋白相互作用蛋白的表达减少。结论通心络可以保护内皮细胞免受软脂酸诱导的损伤,其机制可能通过AMPK途径增加了内皮细胞的抗氧化能力。这可能是通心络对心血管具有保护作用的原因。

关键词：游离脂肪酸抗氧化内皮损伤复方中药

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