检索结果-内蒙古大学图书馆

中华器官移植杂志 2013年第11期34卷 666-670页

作者：贾俊君王丽张静耿磊周琳郑树森浙江大学医学院附属第一医院肝胆胰外科卫生部多器官联合移植研究重点实验室杭州310003

目的探讨肝移植后长期生存受者外周血淋巴细胞亚群及细胞因子的特征。方法用流式细胞术及酶联免疫吸附试验法检测肝移植受者（随访时间超过5年以上者为长期组，随访时间在1年以内者为短期组）及健康人（对照组）外周血T淋巴细胞、B淋巴... 详细信息

目的探讨肝移植后长期生存受者外周血淋巴细胞亚群及细胞因子的特征。方法用流式细胞术及酶联免疫吸附试验法检测肝移植受者（随访时间超过5年以上者为长期组，随访时间在1年以内者为短期组）及健康人（对照组）外周血T淋巴细胞、B淋巴细胞、自然杀伤细胞（NK细胞）、自然杀伤T淋巴细胞（NKT细胞）的变化，并测定细胞因子白细胞介素9（IL-9）、白细胞介素17（IL-17）及白细胞介素22（IL-22）的水平。结果短期组、长期组、对照组的CD3＋细胞、CD4＋细胞、CD8＋细胞百分率及CD8＋CD28＋细胞／CD8＋细胞值以及IL-9的水平呈逐渐上升趋势。其中，长期组与短期组CD3＋细胞百分率及IL-9水平均低于对照组（P〈0．05），短期组CD8＋细胞百分率低于对照组（P〈0．05），短期组CD8＋CD28＋细胞／CD8＋细胞值低于对照组和长期组（P〈0．05）。长期组NK细胞及B淋巴细胞百分率高于对照组（P〈o．05），长期组IL-22水平高于短期组及对照组（P〈0．05），2组NKT细胞及IL-17的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论外周血T淋巴细胞亚群比例及IL-9水平是评价肝移植后受者免疫状态的良好指标，NK细胞、B淋巴细胞及IL-22可能在肝移植术后受者长期生存中发挥着重要角色。

关键词：肝移植淋巴细胞细胞因子免疫耐受

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妊娠诱导的调节性T细胞对naiveT细胞抑制作用的体外研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2013年第7期33卷 495-500页

作者：周芹项世龙李琦蔡洁茹杨浩姜虹寿张飞陈江华浙江大学医学院附属第一医院肾病中心浙江省肾脏疾病防治技术研究重点实验室国家中医药管理局三级实验室“肾脏病免疫实验室”杭州310003 卫生部多器官联合移植研究重点实验室

目的研究调节性T细胞（Treg）及妊娠诱导的调节性T细胞（piTreg）对naiveT细胞增殖的体外抑制，评价其抑制率的差异。方法对孕12．5d（E12．5d）异基因交配孕鼠C57／B6（早）xBALB／c（6）的piTreg和未孕雌鼠C57／B6鼠的Treg进行流式细... 详细信息

目的研究调节性T细胞（Treg）及妊娠诱导的调节性T细胞（piTreg）对naiveT细胞增殖的体外抑制，评价其抑制率的差异。方法对孕12．5d（E12．5d）异基因交配孕鼠C57／B6（早）xBALB／c（6）的piTreg和未孕雌鼠C57／B6鼠的Treg进行流式细胞术检测，观察piTreg和Treg在CD4＋ T细胞中比例及其胞内Voxp3表达变化；采用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯（CFSE）标记的naiveT作为效应细胞和丝裂霉素C灭活的CD4-T细胞作为刺激细胞的单向混合淋巴细胞培养体系，比较piTreg和Treg对效应细胞的体外抑制强度。结果piTreg水平明显高于Treg（P〈0．001），且这些细胞均表达高水平的Foxp3；piTreg在体外实验中对naXveT细胞的抑制效应明显高于Treg（P〈0．006），并受其细胞数量的影响。结论妊娠诱导的调节性T细胞较来自于非孕鼠的Treg对naXveT细胞有更明显的抑制作用，这一现象很可能是由妊娠中父系抗原刺激诱导的CD4＋CD25＋ Treg活性差异造成。

关键词： piTreg 分选扩增抑制

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小鼠胰岛密度梯度离心方法的研究

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浙江医学 2013年第24期35卷 2152-2154页

作者：张金花邵益厉智威方程田阳严盛郑树森浙江大学医学院附属第一医院卫生部多器官联合移植重点实验室杭州310003

目的探索最优的密度梯度离心方案,提高胰岛的纯度和得率,为胰岛移植相关研究奠定基础。方法采用雄性Balb/c小鼠作为供体分离胰岛,以0.5mg/ml胶原酶XI灌注和消化胰腺,通过不同的密度梯度离心策略分离纯化胰岛,进行双硫腙(DTZ)特异染色法... 详细信息

目的探索最优的密度梯度离心方案,提高胰岛的纯度和得率,为胰岛移植相关研究奠定基础。方法采用雄性Balb/c小鼠作为供体分离胰岛,以0.5mg/ml胶原酶XI灌注和消化胰腺,通过不同的密度梯度离心策略分离纯化胰岛,进行双硫腙(DTZ)特异染色法染色,显微镜下观察胰岛的纯度和得率,并通过吖啶橙(AO)/碘化丙啶(PI)染色检查分离获得的胰岛活性,最终确定最佳的密度梯度离心方法。结果Balb/c小鼠在Ficoll-1 108(4ml)、1.096(2ml)、1.069(2ml)、HBSS(2ml),加速度1、减速度1、400r/min、4min中转1 800r/min、8min离心后胰岛得率为(125±39)IEQ、纯度为(79.6±10.5)%,经相同条件二次梯度后得率无明显降低但纯度明显提高,达(96.2±1.4)%。经AO/PI染色鉴定分离胰岛活性良好。结论本研究所采用的小鼠胰岛密度梯度离心方法很有效,能稳定地获得纯度较高且数量可观的胰岛。

关键词：胰岛分离纯化密度梯度离心

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肝移植临床可操作性耐受的研究现状及展望

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中华移植杂志（电子版） 2013年第2期7卷 35-39页

作者：俞栋栋周琳郑树森浙江大学医学院附属第一医院卫生部多器官联合移植重点实验室杭州310003

长期免疫抑制治疗可增加肝移植受者感染性疾病和癌症的发生率和病死率，且现今免疫抑制治疗无法完全阻止和延缓慢性移植物排斥反应的发生。临床可操作性耐受（COT）是指不接受免疫抑制治疗而移植物长期存活，无有害的免疫应答证据且对... 详细信息

长期免疫抑制治疗可增加肝移植受者感染性疾病和癌症的发生率和病死率，且现今免疫抑制治疗无法完全阻止和延缓慢性移植物排斥反应的发生。临床可操作性耐受（COT）是指不接受免疫抑制治疗而移植物长期存活，无有害的免疫应答证据且对肿瘤和感染有正常的免疫反应，被认为是避免移植物排斥反应发生的终极方案。20％～30％的肝移植受者在撤除免疫抑制剂后可产生自发性耐受，某些细胞和分子标志物被证实与肝移植受者免疫耐受状态有关。目前有研究表明嵌合体、诱导免疫调节细胞等方法可以诱导形成免疫耐受，但总体来说，肝移植COT的相关研究还处于起步阶段。本文就肝移植COT的临床证据、免疫监视、生物标志物和可能诱导耐受的策略等作一综述，以期为后续研究提供思路。

关键词：免疫耐受肝移植临床试验

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臭氧在IVC实验动物环境中的应用研究

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实验动物科学 2013年第3期30卷 35-37,I0004页

作者：姜骊李善诚鱼达浙江大学医学院附属第一医院卫生部多器官联合移植研究重点实验室杭州310003 浙江省器官移植研究重点实验室杭州310003

目的探讨独立通风系统(IVC)动物实验室内使用臭氧发生器消毒的可行性。方法使用臭氧检测管测定实验室内的和运行中的IVC内的臭氧浓度,观察大鼠的健康状况、生化指标、气管和肺的组织病理学状况。结果发现IVC笼盒的低、中、高3级过滤器,... 详细信息

目的探讨独立通风系统(IVC)动物实验室内使用臭氧发生器消毒的可行性。方法使用臭氧检测管测定实验室内的和运行中的IVC内的臭氧浓度,观察大鼠的健康状况、生化指标、气管和肺的组织病理学状况。结果发现IVC笼盒的低、中、高3级过滤器,对臭氧有一定的屏障作用,可以减少80%。大鼠在无特殊保护的情况下,对臭氧的耐受能力较高,在面积为35 m3的IVC动物实验室内,对采用臭氧发生量3 g/h的设备开启35 min,没有检测到大鼠生理和病理的变化。结论臭氧发生器能够用于IVC动物实验室的环境消毒。

关键词：臭氧实验动物独立通风系统

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长链非编码RNA HOTAIR在肿瘤中的研究进展

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中国医药科学 2013年第13期3卷 28-31,48页

作者：曹林平吴健郑树森浙江大学医学院附属第一医院肝胆外科卫生部多器官联合移植研究重点实验室浙江杭州310003

长链非编码RNA(lncRNAs)在人类基因组普遍被转录且起着重要的调控作用。这类多聚腺苷酸RNA长度大于200nt,不编码任何蛋白质,但与肿瘤的发生发展及转移预后密切相关。HOX转录反义RNA(HOX transcript antisenseRNA,HOTAIR)全长2158个碱基... 详细信息

长链非编码RNA(lncRNAs)在人类基因组普遍被转录且起着重要的调控作用。这类多聚腺苷酸RNA长度大于200nt,不编码任何蛋白质,但与肿瘤的发生发展及转移预后密切相关。HOX转录反义RNA(HOX transcript antisenseRNA,HOTAIR)全长2158个碱基,首次被发现以反式转录作用调控基因的表达。HOTAIR作为组蛋白修饰复合物的支架,5’端结构域结合多梳抑制复合体2(PRC2),3’端结构域结合组蛋白去甲基化酶复合体[赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶1(LSD1)/RE1-沉默转录因子(REST)共阻抑蛋白(CoREST)/REST],并介导这两种复合体至特定基因位点,分别使染色体组蛋白H3第27位赖氨酸三甲基化(H3K27me3)和组蛋白H3第4位赖氨酸去二甲基化(H3K4me2),从而使长达40kb的碱基发生表观遗传学沉默。最近临床研究表明:HOTAIR表达水平与多种肿瘤(如乳腺癌、结直肠癌、肝癌、胰腺癌、喉癌等)的发生发展及转移预后密切相关。高表达HOTAIR能抑制抑癌基因的表达,促进肿瘤复发转移,而下调HOTAIR表达则降低肿瘤细胞的转移侵袭能力。尽管众多研究表明HOTAIR与肿瘤的发生发展有密切关系,但其具体作用机制还有待进一步探究。

关键词：长链非编码RNA HOTAIR 肿瘤

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肝移植免疫微环境对移植肝内肿瘤生长的影响及作用机制

肝移植免疫微环境对移植肝内肿瘤生长的影响及作用机制

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2013年浙江省外科学学术年会

作者：丁元严盛王雁陈辉郑树森浙江大学医学院附属第一医院肝胆胰外科卫生部多器官联合移植重点实验室

背景临床肝移植后肿瘤复发是移植术后最严重的并发症之一。肝移植患者在术后将有更大的几率罹患各种肝内肿瘤。先前的研究大多将肿瘤发生几率的提高归咎于:长期免疫抑制治疗、术前病史等一些外在作用因素。但是,由于缺乏科学合理的动物... 详细信息

背景临床肝移植后肿瘤复发是移植术后最严重的并发症之一。肝移植患者在术后将有更大的几率罹患各种肝内肿瘤。先前的研究大多将肿瘤发生几率的提高归咎于:长期免疫抑制治疗、术前病史等一些外在作用因素。但是,由于缺乏科学合理的动物模型,目前我们对肝移植后肝内免疫微环境的改变对肝内肿瘤复发的确切影响还不甚清楚。在本研究中,我们利用小鼠肝移植后转移瘤肝内浸润模型首次在体内水平研究了移植后肝内免疫微环境的改变对肿瘤细胞在肝内转移和生长所产生的影响及其机理。方法选用6-8w的Blab/C及C57小鼠进行肝移植,术后使用CT-26肿瘤细胞系进行注射种植,比较异基因移植(C57到Balb/C移植)和同基因移植(Balb/c到Balb/c移植)后CT-26肿瘤在移植肝中的生长情况。通过组织病理和图像计算系统评价肿瘤在移植肝内的生长速度和生长模式;通过免疫组化及荧光检测移植肝内肿瘤的增殖水平(KI67和PCNA);肿瘤凋亡(CAS3);血管化水平(VEGF)以及肝内肿瘤灶中浸润的各种免疫相关细胞群(CD4+细胞、CD8+细胞、Treg细胞、中性粒细胞、B细胞);通过流式细胞仪检查Treg及CD4,CD8,NK细胞在移植肝中的表达水平和相关功能因子(CTLA4、GZMb、p35、EBI3、IFN-gamm等含量);流式细胞学检测了移植肝内肿瘤相关杀伤细胞的凋亡。结果异基因移植组2W时间点肿瘤生长明显快于同基因移植组;异基因组的移植肝中淋巴细胞数量均有所增加,在异基因组和同基因组的Treg细胞为14.5%和7.8%(P<0.05);异基因组移植肝CD4+,CD8+,中性粒细胞,B细胞浸润较同基因组增多,但是移植肝内肿瘤相关杀伤细胞CD4\CD8\NK细胞的凋亡较同基因组显著增加,分别为27%v.s.5%(P<0.01)、14%v.s.9%(p<0.05)、18%v.s.3%(p<0.01);流式细胞功能学检测结果Treg免疫负向调节相关因子CTLA-4、IL-10、GZM b均显著上升,CTL功能相关因子(Prf、INF-gamm、GZMb)均下调。结论异基因小鼠肝移植后Treg细胞增多并通过上调IL-10、TGB-b、IL-35、GZMb的分泌抑制细胞毒性T细胞和激活的CD4+细胞的功能并促进其凋亡增加,从而降低其对肿瘤的攻击效应,最终促进了肿瘤在移植肝中生长和浸润。

关键词：肝移植调节性T细胞 IL-10 CTL细胞 CT-26

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小鼠胰岛密度梯度离心方法的研究

小鼠胰岛密度梯度离心方法的研究

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中华医学会第十七届全国外科学学术会议

作者：张金花邵益厉智威方程田阳严盛郑树森浙江大学医学院附属第一医院卫生部多器官联合移植重点实验室浙江大学医学院附属第一医院肝胆胰中心

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比较肝脏淤血再灌注损伤和缺血再灌注损伤对肝再生影响的实验研究

比较肝脏淤血再灌注损伤和缺血再灌注损伤对肝再生影响的实验研究

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中华医学会第十七届全国外科学学术会议

作者：李辉张启逸帅明琪张宇严盛郑树森浙江大学医学院附属第一医院卫生部多器官联合移植重点实验室浙江大学医学院附属第一医院肝胆胰中心

目的通过肝脏部分淤血再灌注和缺血再灌注后行肝大部切除,比较两者对肝再生的影响.方法选取C57BL/6小鼠18只,随机分为3组,淤血组将肝脏右叶和三角叶肝静脉以无损伤显微夹阻断20min后开放,淤血再灌注后,切除剩余未淤血的肝叶;缺血组将...

目的通过肝脏部分淤血再灌注和缺血再灌注后行肝大部切除,比较两者对肝再生的影响.方法选取C57BL/6小鼠18只,随机分为3组,淤血组将肝脏右叶和三角叶肝静脉以无损伤显微夹阻断20min后开放,淤血再灌注后,切除剩余未淤血的肝叶;缺血组将同样肝叶入肝门静脉和肝动脉血流同时阻断20min后开放,对照组直接切除余肝.术后1d、3d、7d (n=6),取血清检测肝功能(ALT,AST),取肝脏组织计算肝组织再生率,HE染色肝组织炎症评分,MPO测粒细胞炎症反应,免疫组化BRDU测再生,TUNNEL法测凋亡.

关键词：

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微瘤灶供肝移植术后小鼠生存情况的研究

微瘤灶供肝移植术后小鼠生存情况的研究

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中华医学会第十七届全国外科学学术会议

作者：田阳苏蓉孙飞王靖程王雁严盛郑树森浙江大学医学院附属第一医院肝胆胰中心浙江大学医学院附属第一医院卫生部多器官联合移植重点实验室

目的研究携带供体来源肿瘤微灶的供肝在异基因移植术后小鼠存活的情况,为研究供体传播性肿瘤积累基础数据.方法以小鼠肝移植动物模型为平台,选取CBF1小鼠为供体(H2bd),C3H小鼠为受体(H2k),实验组N=12和对照组N=16.将培养的CT-26细胞(H...

目的研究携带供体来源肿瘤微灶的供肝在异基因移植术后小鼠存活的情况,为研究供体传播性肿瘤积累基础数据.方法以小鼠肝移植动物模型为平台,选取CBF1小鼠为供体(H2bd),C3H小鼠为受体(H2k),实验组N=12和对照组N=16.将培养的CT-26细胞(H2d)制备为单细胞悬液,5x106/10ul,实验组在肝移植术后用显微注射技术于肝左叶注射10ul CT-26细胞悬液,对照组用10ul生理盐水代替行显微注射.术后将小鼠置于IVC笼中饲养,观察其生存情况.

关键词：

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