检索结果-内蒙古大学图书馆

生物工程学报 2008年第7期24卷 1133-1139页

作者：赫卫清刘玉瑛孙桂芝王以光中国医学科学院/中国协和医科大学医药生物技术研究所卫生部抗生素生物工程重点实验室北京100050

格尔德霉素(Geldanamycin,Gdm)作为热休克蛋白90的特异性抑制剂,是非常有前景的抗肿瘤和抗病毒的药物,我们已从吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus17997)的基因文库中获得了Gdm大部分生物合成基因。为了研究主要基因的功能,选... 详细信息

格尔德霉素(Geldanamycin,Gdm)作为热休克蛋白90的特异性抑制剂,是非常有前景的抗肿瘤和抗病毒的药物,我们已从吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus17997)的基因文库中获得了Gdm大部分生物合成基因。为了研究主要基因的功能,选择了聚酮合酶基因(Polyketide synthase gene,pks)的第六模块、单加氧酶基因(Mono-oxygenase gene,gdmM)和氨甲酰基转移酶基因(Carbamoyltransferase gene,gdmN)3个基因作为靶点分别进行基因阻断,获得了基因同源双交换的阻断变株△pks、△gdmM和△gdmN。经HPLC检测证实这些基因的阻断变株均不产生Gdm,基因回复实验排除了基因阻断所可能造成的极性效应对其它基因表达的影响,说明所克隆的pks、gdmM和gdmN基因确实是Gdm生物合成所必需的基因。

关键词：吸水链霉菌17997 格尔德霉素(Gdm) 基因阻断基因回复

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麦迪霉素3-O-酰基转移酶在螺旋霉素链霉菌F21中的酰化特性

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生物工程学报 2008年第12期24卷 2086-2092页

作者：马春燕武临专戴剑漉周红霞李京艳孙晓春张侃夏焕章王以光中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所卫生部抗生素生物工程重点实验室北京100050 沈阳药科大学制药工程学院沈阳110015 中国药科大学南京210038

螺旋霉素(SP)与麦迪霉素(MD)均为16元大环内酯类抗生素,并且结构非常相似。螺旋霉素含有3个组分,其结构差异表现在16元内酯环C3上的一个取代基的差异,SPI组分为羟基、SPII组分羟基乙酰化、SPIII组分羟基丙酰化;麦迪霉素是以麦迪霉素A1... 详细信息

螺旋霉素(SP)与麦迪霉素(MD)均为16元大环内酯类抗生素,并且结构非常相似。螺旋霉素含有3个组分,其结构差异表现在16元内酯环C3上的一个取代基的差异,SPI组分为羟基、SPII组分羟基乙酰化、SPIII组分羟基丙酰化;麦迪霉素是以麦迪霉素A1为主要组分的多组分抗生素,麦迪霉素16元内酯环C3上连接的均为丙酰化羟基。已知这类抗生素16元内酯环C3羟基酰化是由一种称为3-O-酰基转移酶的蛋白催化完成。本研究将螺旋霉素产生菌—Streptomyces spiramyceticus F21中的螺旋霉素3-O-酰基转移酶基因用Streptomyces mycarofaciens ATCC 21454中的麦迪霉素3-O-酰基转移酶基因原位替换后,发现所产生的螺旋霉素仍然含有3个组分,并且螺旋霉素III组分也不是主要组分,说明麦迪霉素3-O-酰基转移酶在螺旋霉素产生菌—*** F21中不具有16元内酯环C3羟基丙酰化特异性以及酰化高效性,也提示其在麦迪霉素产生菌中的丙酰化特异性和高效性可能与该菌株(种)的特性有关。

关键词：螺旋霉素链霉菌螺旋霉素 3-O-酰基转移酶麦迪霉素 mdmB 酰化

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大鼠α-酰胺化酶在大肠杆菌中的表达、纯化及活性研究

引用

中国生物工程杂志 2007年第11期27卷 6-10页

作者：郭连宏齐小强姜蓉姚晨李元中国医学科学院/中国协和医科大学医药生物技术研究所卫生部抗生素生物工程重点实验室北京100050

α-酰胺化是神经和内分泌系统中许多生物活性肽重要的翻译后加工过程,C末端α酰胺基团的存在对于许多生物活性肽的生物活性极为重要。通过PCR扩增获得了编码大鼠α-酰胺化酶的基因,以pET-30a为载体,重组质粒pET-A转化至*** BL21成功表... 详细信息

α-酰胺化是神经和内分泌系统中许多生物活性肽重要的翻译后加工过程,C末端α酰胺基团的存在对于许多生物活性肽的生物活性极为重要。通过PCR扩增获得了编码大鼠α-酰胺化酶的基因,以pET-30a为载体,重组质粒pET-A转化至*** BL21成功表达了α-酰胺化酶。采用Ni2+-NTA亲和层析纯化重组蛋白,纯度为86%。该蛋白具有催化三肽底物((Dns-Tyr-Val-Gly)成为酰胺化二肽(Dns-Tyr-Val-NH2)的酶活性,这表明重组蛋白是α-酰胺化酶,有可能用于生物活性肽的酰胺化研究。

关键词：酰胺化酶克隆表达 His-tag亲合层析酰胺化生物活性肽

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