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单倍型造血干细胞移植治疗26例复发难治侵袭性非霍奇金淋巴瘤疗效和安全性研究

中华血液学杂志 2016年第8期37卷 656-660页

作者：徐婷陈佳金正明苗瞄傅琤琤仇惠英唐晓文韩悦孙爱宁吴德沛苏州大学附属第一医院血液科、江苏省血液研究所 215006 卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心

目的探讨单倍型造血干细胞移植（Haplo—HSCT）治疗复发难治侵袭性非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者的疗效和安全性。方法回颐性分析2004年1月至2015年3月采用亲缘Haplo—HSCT治疗的26例复发难治侵袭性NHL患者临床资料。结果26例患者中弥漫大... 详细信息

目的探讨单倍型造血干细胞移植（Haplo—HSCT）治疗复发难治侵袭性非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者的疗效和安全性。方法回颐性分析2004年1月至2015年3月采用亲缘Haplo—HSCT治疗的26例复发难治侵袭性NHL患者临床资料。结果26例患者中弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）4例，滤泡性淋巴瘤1例，B淋巴母细胞淋巴瘤／白血病5例，T淋巴母细胞淋巴瘤／白血病9例，间变性大细胞淋巴瘤（ALK阴性）1例，外周T细胞淋巴瘤（非特指型）5例，NK／T细胞淋巴瘤1例。Ann Arbor分期：Ⅲ期6例，Ⅳ期20例。26例患者移植前状态：第1次完全缓解（CR1）7例，第2次完全缓解（CR2）4例，部分缓解（PR）7例，疾病稳定（SD）1例，疾病进展（PD）7例。其中复发难治性病例19例。移植后26例患者均获粒系造血重建，粒细胞中位植入时间为12（11-17）d。25例患者获巨核系造血重建，血小板中位植入时间为14（11-31）d。所有患者在＋30d经植入鉴定证实为完全供者嵌合体。中位随访时间14（4-136）个月，26例患者中20例（76．92％）存活，15例（57．69％）无病存活，7例（26．92％）复发（其中2例死亡，5例存活）。预处理相关不良反应经对症处理后症状均消失。Haplo—HSCT后2年累积复发卒为42．20％；2年总生存（OS）率为71．60％；2年无病生存（DFS）率为48．90％。移植前CR患者移植后2年OS与DFS率均明显高于移植前未达CR的患者（OS：100．0％对52.4％，P=0．023；DFS：88．9％对27．0％，P=0．013）。结论对于不适合行自体造血干细胞移植且无完全相合供者的复发难治侵袭性NHL患者，尝试进行Haplo—HSCT有效、安全。

关键词：淋巴瘤非霍奇金造血干细胞移植复发难治单倍型

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低氧诱导因子1-α介导的免疫性血小板减少性紫癜患者巨核成熟障碍相关机制研究

低氧诱导因子1-α介导的免疫性血小板减少性紫癜患者巨核成熟障碍...

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江苏省第二十一次血液学学术会议

作者：戚嘉乾尤涛潘婷婷王琦朱力阮长耿吴德沛韩悦苏州大学附属第一医院 215006 江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心血液学协同创新中心

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Tim-3在急性白血病患者原代细胞中的表达及其与临床特征的相关性

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中华血液学杂志 2016年第6期37卷 517-519页

作者：徐良静徐金格李晓莉刘彬姚遥刘红王蓉娴朱明清沈文红陈苏宁吴小津吴德沛苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心钱宝华

T细胞免疫球蛋白黏蛋白结构域分子3（Tim-3）是近年来备受关注的一个重要的负性共刺激分子，是Tim基因家族成员之一，基因定位于人类染色体5q33．2，编码I型膜蛋白。以往认为Tim-3仅表达于T细胞，调控Th1细胞功能。近年的研究显示，Tim-... 详细信息

T细胞免疫球蛋白黏蛋白结构域分子3（Tim-3）是近年来备受关注的一个重要的负性共刺激分子，是Tim基因家族成员之一，基因定位于人类染色体5q33．2，编码I型膜蛋白。以往认为Tim-3仅表达于T细胞，调控Th1细胞功能。近年的研究显示，Tim-3也表达于肿瘤细胞，可能成为肿瘤的标志物。Kikushige等报道大多数急性髓系白血病（AML）患者的白血病干细胞表面高表达Tim．3，在白血病小鼠移植模型中，鼠抗人Tim．3单抗可发挥细胞毒作用清除AML干细胞。

关键词：急性白血病患者 Tim-3 临床特征原代细胞负性共刺激分子相关性细胞免疫球蛋白急性髓系白血病

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伴stat5b—RAR仅阳性的急性早幼粒细胞白血病一例报告并文献复习

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中华血液学杂志 2016年第1期37卷 68-69页

作者：刘利蓉陈苏宁谭俊峰施鹏飞陈况高大泉黄细莲谢亚萍徐颖杨帆钱申贤杭州市第一人民医院血液科 310006 苏州大学附属第一医院血液科江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室

95％以上的急性早幼粒细胞白血病（APL）患者可检出PML—RARa融合基因，少数患者为其他异常基因。目前已发现7种PML-RARct融合基因变异型，RARer的伴侣基因包括PLZF、NPM1、NUMA1、stat5b、PRKAR1A、FIPlLl及BCOR。其中stat5b—RARc少... 详细信息

95％以上的急性早幼粒细胞白血病（APL）患者可检出PML—RARa融合基因，少数患者为其他异常基因。目前已发现7种PML-RARct融合基因变异型，RARer的伴侣基因包括PLZF、NPM1、NUMA1、stat5b、PRKAR1A、FIPlLl及BCOR。其中stat5b—RARc少见，目前国内外仅报道8例。我们收治1例stat5b-RARa阳性的APL患者，报告如下并进行文献复习。

关键词：急性早幼粒细胞白血病 RARa融合基因 stat5b 文献复习阳性异常基因 PLZF 伴侣基因

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血管性血友病因子裂解酶(ADAMTS13)单克隆抗体的鉴定以及生物学功能的研究

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中国实验血液学杂志 2016年第4期24卷 1104-1109页

作者：马珍妮凌婧沈飞谢丽倩殷杰苏健阮长耿苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心江苏苏州215000 苏州大学附属儿童医院血液科江苏苏州215000

目的:构建并鉴定血管血友病因子裂解酶(ADAMTS13)单克隆抗体,并研究其生物学功能。方法:利用真核表达的重组血浆金属蛋白酶ADAMTS13截断型蛋白(ADAMTS13-T7)纯品免疫BALB/c小鼠,经标准单克隆抗体技术制备单克隆抗体。用ELISA方法鉴定单... 详细信息

目的:构建并鉴定血管血友病因子裂解酶(ADAMTS13)单克隆抗体,并研究其生物学功能。方法:利用真核表达的重组血浆金属蛋白酶ADAMTS13截断型蛋白(ADAMTS13-T7)纯品免疫BALB/c小鼠,经标准单克隆抗体技术制备单克隆抗体。用ELISA方法鉴定单克隆抗体的特异性;应用免疫印迹技术确定单克隆抗体与全长ADAMTS13的识别能力;观察单克隆抗体对ADAMTS13水解v WF的影响。结果:最终获得6株抗ADAMTS13的单克隆抗体,克隆号分别为1G11、2F11、6G3、9E1、10A8、10B4。经ELISA鉴定,纯化后的单克隆抗体1G11和2F11的效价最高,与截断型ADAMTS13-T7蛋白结合能力比较,明显高于全长ADAMTS13蛋白。Western blotting结果显示,6个单克隆抗体都能与全长ADAMTS13结合,其中1G11和2F11条带最亮。功能实验表明,在变性条件下1G11和2F11能够明显抑制ADAMTS13水解v WF,并随着单克隆抗体浓度的增加而抑制作用增强。结论:成功获得针对ADAMTS13的单克隆抗体,其中两株为抑制性功能抗体。

关键词：血管性血友病因子裂解蛋白酶血管性血友病因子单克隆抗体

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PCSK6对可溶性corin的活化作用研究

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中国生物工程杂志 2016年第7期36卷 15-20页

作者：李枫周田甜刘萌董宁征苏州大学附属第一医院苏州215006 江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室苏州215006 苏州大学唐仲英血液学研究中心苏州215123

目的:研究前蛋白转化酶枯草溶菌素6(proprotein convertase subtilisin/kextin type 6,PCSK6)对可溶性corin的活化作用,以及PCSK6作用后的可溶性corin是否具有生物学活性。方法:以野生型corin质粒为模板,通过PCR扩增出不含跨膜区的cori... 详细信息

目的:研究前蛋白转化酶枯草溶菌素6(proprotein convertase subtilisin/kextin type 6,PCSK6)对可溶性corin的活化作用,以及PCSK6作用后的可溶性corin是否具有生物学活性。方法:以野生型corin质粒为模板,通过PCR扩增出不含跨膜区的corin基因片段,并将目的基因克隆至真核表达载体p SEC得到重组质粒p SECsol Corin,测序验证。分别将可溶性corin、PCSK6及心钠肽前体(pro-atrial natriuretic peptide,pro-ANP)的表达载体转染人胚胎肾(human embryonic kidney,HEK)293细胞,收取上清液。然后将可溶性corin上清液与不同体积的PCSK6上清液共同孵育,免疫印迹(Western blot)方法检测corin蛋白的活化情况。再将PCSK6作用后的可溶性corin与pro-ANP上清液共孵育,检测可溶性corin的生物学活性。结果:构建了可溶性corin的表达质粒,并在HEK293细胞成功表达可溶性corin蛋白。可溶性corin的上清液与pcsk6上清液共同孵育后可检测到活化条带,并可使pro-ANP活化为ANP。结论:PCSK6同样可以剪切活化可溶性corin蛋白,活化后的corin具有生物学活性。为可溶性corin用于心衰的临床治疗提供了重要基础。

关键词：可溶性corin PCSK6 pro-ANP 心力衰竭

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伴MyD88 L265P突变淋巴浆细胞疾病患者的临床特征分析

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中华血液学杂志 2016年第12期37卷 1054-1059页

作者：任远周必琪徐杨傅琤琤沈宏杰丁子轩吴德沛苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心苏州大学造血干细胞移植研究所 215006

目的研究伴髓样分化因子88 （MyD88） L265P突变淋巴浆细胞疾病患者的临床特征.方法采用突变扩增系统PCR-毛细管电泳（ARMS PCR-CE）法检测81例淋巴浆细胞疾病患者中MyD88 L265P突变的分布,结合患者的临床特征进行分析.结果 81例患者... 详细信息

目的研究伴髓样分化因子88 （MyD88） L265P突变淋巴浆细胞疾病患者的临床特征.方法采用突变扩增系统PCR-毛细管电泳（ARMS PCR-CE）法检测81例淋巴浆细胞疾病患者中MyD88 L265P突变的分布,结合患者的临床特征进行分析.结果 81例患者中MyD88 L265P突变阳性者25例（30.9％）,其中以华氏巨球蛋白血症（WM）多见（77.8％,14/18）,后依次为淋巴浆细胞淋巴瘤（66.7％,2/3）、急性淋巴细胞白血病（50.0％,1/2）、多发性骨髓瘤（30.0％,3/10）、意义未明的单克隆丙种球蛋白病（25.0％,1/4）、慢性淋巴细胞白血病（13.0％,3/23）、淋巴瘤（4.8％,1/21）.25例突变患者中20例（80.0％）为IgM型.与未突变组患者比较,突变组患者年龄较大（67对55岁,P＜0.001）、WBC较低（5.23×10^9/L对10.80×10^9/L,P=0.001）、HGB较低（85对119 g/L,P＜0.001）.结论 MyD88 L265P突变多见于IgM型淋巴浆细胞疾病,以WM多见,与未突变者比较,伴此突变者年龄较大,WBC、HGB较低.其预后意义尚需进一步研究予以明确.

关键词：髓样分化因子88 DNA突变分析淋巴组织增殖性疾病临床特征

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蛇毒血凝酶治疗异基因造血干细胞移植后重度出血性膀胱炎效果观察

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白血病．淋巴瘤 2016年第2期25卷 106-110,115页

作者：杜丰薛胜利龚蔚陶涛谭以顺徐静叶春梅陈峰吴德沛苏州大学附属第一医院星海分院血液科 215000 苏州大学附属第一医院血液科江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室 215006

目的：探讨蛇毒血凝酶治疗异基因造血干细胞移植（HSCT）后重度出血性膀胱炎（HC）的临床效果。方法20例接受异基因HSCT的患者在移植后14～70 d发生重度HC，接受蛇毒血凝酶（静脉滴注1 U／次，1次／12 h，＆#215;5 d）治疗。蛇毒血凝酶... 详细信息

目的：探讨蛇毒血凝酶治疗异基因造血干细胞移植（HSCT）后重度出血性膀胱炎（HC）的临床效果。方法20例接受异基因HSCT的患者在移植后14～70 d发生重度HC，接受蛇毒血凝酶（静脉滴注1 U／次，1次／12 h，＆#215;5 d）治疗。蛇毒血凝酶治疗前、后分别留取尿液标本，通过肉眼观察和显微镜检查评定疗效。结果20例重度HC患者接受蛇毒血凝酶治疗后，18例达到治愈，肉眼血尿消失中位时间为应用蛇毒血凝酶后28 d（4～127 d），1例有效，1例无效。20例患者均未出现严重并发症。结论蛇毒血凝酶治疗HSCT后重度HC安全、有效。

关键词：出血性膀胱炎造血干细胞移植蛇毒血凝酶

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地西他滨联合HAAG方案治疗进展期急性髓系白血病疗效分析

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第三军医大学学报 2016年第12期38卷 1379-1384页

作者：崔巍金正明曹晶朱霞明孙爱宁仇惠英苗瞄郭丹丹吴德沛唐晓文苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心江苏苏州215006

目的探讨采用地西他滨（decitabine/dacogen,DAC）联合HAAG[三尖杉酯碱（HHT）、阿糖胞苷（Ara-C）、柔比星（Acla）与重组人粒细胞集落刺激因子（G-CSF）]治疗进展期急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）患者,观察其有效率及... 详细信息

目的探讨采用地西他滨（decitabine/dacogen,DAC）联合HAAG[三尖杉酯碱（HHT）、阿糖胞苷（Ara-C）、柔比星（Acla）与重组人粒细胞集落刺激因子（G-CSF）]治疗进展期急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）患者,观察其有效率及治疗相关毒性。方法分析我中心2012年12月至2015年8月收治的36例进展期AML患者,其中18例患者为标准难治复发患者,另外18例为一疗程标准诱导未缓解患者。36例患者均给予DAC联合HAAG方案再诱导化疗,观察其一疗程缓解率、化疗毒性及长期生存情况。结果 36例患者一疗程完全缓解（complete remission,CR）率为58.3%（21/36）,部分缓解（partial remission,PR）率为22.2%（8/36）,总体有效率（overall response rate,ORR）为80.6%（29/36）。18例难治复发患者CR率为61.0%（11/18）,PR率为22.2%（4/18）,ORR为83.3%（15/18）;18例一疗程标准诱导未缓解患者CR率为55.6%（10/18）,PR率为22.2%（4/18）,ORR为77.8%（14/18）。化疗相关血液学毒性均为4级,感染发生率为72.2%,大多数患者不良反应轻微可控。所有患者中位随访时间为7.5（0.5~33.3）个月,全部患者1年总生存（overall survival,OS）率为43.3%,难治复发患者1年OS率为24.2%,一疗程未缓解患者1年OS率为61.6%（P=0.01）。结论对于进展期AML患者,DAC＋HAAG方案一疗程再诱导治疗反应率高,不良反应少。

关键词：预激方案地西他滨 HAAG 急性髓系白血病

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遗传性血小板无力症的发病机制及产前诊断

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临床儿科杂志 2016年第2期34卷 132-135页

作者：李建琴王兆钺胡绍燕赵小娟曹丽娟苏州大学附属儿童医院血液科江苏苏州215003 苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215003

目的探讨血小板无力症（GT）的基因测序与产前诊断。方法采集1例表型GT患儿、父母及1例正常对照者的静脉血,患儿母亲腹中孕23周胎儿的脐带血和羊水,及其出生2 d时的静脉血。检测患儿、患儿父母、胎儿脐血及正常对照者的血凝常规和血小... 详细信息

目的探讨血小板无力症（GT）的基因测序与产前诊断。方法采集1例表型GT患儿、父母及1例正常对照者的静脉血,患儿母亲腹中孕23周胎儿的脐带血和羊水,及其出生2 d时的静脉血。检测患儿、患儿父母、胎儿脐血及正常对照者的血凝常规和血小板聚集试验;流式细胞仪检测血小板膜糖蛋白（GP）Ⅱb和GPⅢa的表达;微卫星技术确定胎儿脐血是否被母体细胞污染;PCR技术扩增患儿及其父母,以及胎儿及出生2 d静脉血GPⅡb、GPⅢa所有外显子以及外显子和内含子交界区,扩增产物直接测序。结果二磷酸腺苷（ADP）不能诱导患儿的血小板发生聚集,胎儿脐血中ADP诱导的血小板最大聚集率约为正常人一半,患儿父母和胎儿出生2 d的ADP诱导的血小板最大聚集率与正常血小板聚集率相当。患儿血小板膜表面GPⅡb、GPⅢa的的平均荧光强度（Mn X）分别约为正常对照的10%及0,而患儿父母、胎儿脐血和胎儿出生2 d的Mn X分别为正常对照的90%以上和30%-50%。羊水胎儿脱落细胞和脐血DNA微卫星分析证实胎儿羊水、脐血未被母体细胞污染;基因分析结果显示,患儿GPⅢa 6号外显子A38293→C和9号外显子G42186→A的杂合突变,导致GPⅢa His281→Tyr和Cys400→Pro氨基酸的杂合改变。这两个突变分别来源于父亲和母亲。羊水胎儿脱落细胞、脐血或出生2 d静脉血中只有1个GPⅢa9号外显子G42186→A的杂合突变。结论 GT患儿GPⅢa的基因为双重杂合突变;胎儿出生后确证为GPⅢa基因杂合突变。

关键词：血小板无力症微卫星分析糖蛋白Ⅱb/Ⅲa基因产前诊断

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