检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实验血液学杂志 2013年第5期21卷 1326-1330页

作者：田竑陈广华徐杨乔曼刘慧文吴德沛苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室苏州215006

尽管化疗能诱导恶性血液病缓解,但是缓解后存在复发风险且化疗毒性无法避免。研究人员一直致力于通过免疫手段清除肿瘤细胞。近年来,人们发现了许多白血病相关抗原(LAA)能被细胞毒性T细胞(CTL)所识别,同时具有HLA-I限制性。这些LAA包括... 详细信息

尽管化疗能诱导恶性血液病缓解,但是缓解后存在复发风险且化疗毒性无法避免。研究人员一直致力于通过免疫手段清除肿瘤细胞。近年来,人们发现了许多白血病相关抗原(LAA)能被细胞毒性T细胞(CTL)所识别,同时具有HLA-I限制性。这些LAA包括WT1、PR-3、RHAMM、BCR-ABL和Aur-A等。在实验室研究基础上,目前开展的恶性血液病免疫治疗手段包括有肿瘤多肽疫苗、获得性T细胞治疗、NK细胞及DC-CIK治疗等。本文就细胞免疫治疗白血病研究进展作一综述。

关键词：白血病细胞毒T细胞肿瘤相关抗原疫苗免疫治疗

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骨髓增殖性肿瘤患者骨髓间充质干细胞生物学特性及其JAK2突变的研究

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中华血液学杂志 2012年第9期33卷 701-704页

作者：田竑陈广华徐杨王蓉娴乔曼刘慧文吴德沛苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006

目的研究骨髓增殖性肿瘤（MPN）患者骨髓间充质干细胞（BMSC）的生物学特性，检测其BMSC是否存在JAK2基因突变。方法体外分离培养健康志愿者和初诊MPN患者BMSC，光学显微镜下行细胞形态学观察；流式细胞术鉴定BMSC表面标志；检测BMSC成... 详细信息

目的研究骨髓增殖性肿瘤（MPN）患者骨髓间充质干细胞（BMSC）的生物学特性，检测其BMSC是否存在JAK2基因突变。方法体外分离培养健康志愿者和初诊MPN患者BMSC，光学显微镜下行细胞形态学观察；流式细胞术鉴定BMSC表面标志；检测BMSC成脂、成骨、成软骨分化能力；检测MPN患者BMSC以及外周血或骨髓单个核细胞是否存在JAK2V617F、JAK2基因12号外显子（JAK2exon12）突变。结果MPN患者的BMsc细胞形态、表面标志、分化能力与正常对照相比无明显差异。检测到21例真性红细胞增多症（PV）、17例原发性血小板增多症（ET）及1例原发性骨髓纤维化（PMF）患者外周血（或骨髓）标本存在JAK2V617F突变，但未发现其BMSC存在该突变。检测到2例PV和1例ET患者外周血（或骨髓）标本存在JAK2exon12突变，但未发现其BMSC存在该突变。结论MPN患者BMSC与健康志愿者BMSC的生物学特性无明显差异；在外周血或骨髓单个核细胞JAK2基因突变阳性及阴性的MPN患者中，均未检测到其BMSC存在该突变。

关键词：骨髓增殖性肿瘤间充质干细胞基因,JAK2 DNA突变分析

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六例非肌性肌球蛋白重链9基因相关疾病患者的临床特征与基因分析

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中华血液学杂志 2012年第7期33卷 552-555页

作者：孙雄华王兆钺曹丽娟苏健江明华王改锋余自强白霞阮长耿苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所；卫生部血栓与止血重点实验室 215006

目的分析6例非肌性肌球蛋白重链9（MYH9）基因相关疾病患者临床特征和基因。方法取患者外周血，光镜下计数血小板数目、涂片并瑞氏染色后观察血小板形态以及有无中性粒细胞包涵体；抽提患者外周血基因组DNA，PCR扩增MYH9基因的40个外显... 详细信息

目的分析6例非肌性肌球蛋白重链9（MYH9）基因相关疾病患者临床特征和基因。方法取患者外周血，光镜下计数血小板数目、涂片并瑞氏染色后观察血小板形态以及有无中性粒细胞包涵体；抽提患者外周血基因组DNA，PCR扩增MYH9基因的40个外显子及两端侧翼序列，DNA测序并与基因库序列进行比对以确定基因异常，用限制性核酸内切酶和聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析排除多态性。结果6例患者血小板计数下降、体积增大，中性粒细胞内可见淡蓝色包涵体。基因分析发现在1号、30号和40号外显子中存在T97C（W33R）、4335InsCAGAAGAAG（1445InsQKK）、G4269A（D1424N）和G5833T（E1945Stop）4种基因突变，其中前2种突变为首次发现，并排除基因多态性的可能。结论6例MYH9相关疾病患者的基因突变中T97C（W33R）和4335InsCAGAAGAAG（1445InsQKK）是国际上首次发现的新突变。病史较长且治疗反应不佳的原发免疫性血小板减少症患者应考虑MYH9基因相关疾病的可能性。

关键词： MYH9相关疾病血小板减少包涵体肌球蛋白重链序列分析,DNA

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血管性血友病因子裂解蛋白酶的稳定表达及其活性检测

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生物工程学报 2010年第2期26卷 244-248页

作者：马珍妮董宁征张敬宇苏健汪安友阮长耿苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室苏州215006

本研究旨在得到重组的血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13),进一步研究其在血栓止血中的作用。利用脂质体将编码ADAMTS13全长序列的重组质粒pSecTag-ADAMTS13转染Hela细胞,用潮霉素(Hygromycin-B)筛选得到阳性克隆细胞株,并扩大培养,... 详细信息

本研究旨在得到重组的血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13),进一步研究其在血栓止血中的作用。利用脂质体将编码ADAMTS13全长序列的重组质粒pSecTag-ADAMTS13转染Hela细胞,用潮霉素(Hygromycin-B)筛选得到阳性克隆细胞株,并扩大培养,收集上清。利用Ni-NTA琼脂糖柱、梯度咪唑淋洗法纯化蛋白,SDS-PAGE和Westernblotting鉴定纯化产品纯度和免疫学活性,采用GST-His双抗夹心法测定蛋白剪切活性。结果显示,成功获得一株能恒定分泌重组ADAMTS13蛋白的细胞株ADAMTS2-4,每1L培养上清可纯化得到5.8mg重组蛋白。Western blotting结果显示,ADAMTS13多抗能与重组蛋白在190kDa处显单一条带,并且蛋白具有6.4U/mL的剪切活性(每毫升正常人混合血浆中ADAMTS13活性为1U)。重组蛋白具有较好的免疫原活性和酶活性,为进一步研究ADAMTS13作用机理和运用奠定了良好的基础。

关键词：血管性血友病因子裂解蛋白酶真核表达重组蛋白

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135例骨髓增殖性肿瘤患者JAK2基因突变的定量研究

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中华血液学杂志 2009年第5期30卷 321-325页

作者：晁红颖沈益民张日冯宇峰岑建农姚利沈宏杰朱子玲薛永权苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006

目的研究JAK2基因突变在骨髓增殖性肿瘤（MPN）中的发生率和突变类型，并对突变转录本水平进行定量分析，初步探讨其临床意义。方法采用突变序列扩增系统PCR（ARMS—PCR）法检测JAK2突变的发生率及其突变类型；采用毛细管电泳法定量分析... 详细信息

目的研究JAK2基因突变在骨髓增殖性肿瘤（MPN）中的发生率和突变类型，并对突变转录本水平进行定量分析，初步探讨其临床意义。方法采用突变序列扩增系统PCR（ARMS—PCR）法检测JAK2突变的发生率及其突变类型；采用毛细管电泳法定量分析JAK2突变转录本水平。结果135例MPN患者共检出95例JAK2V617F阳性，总阳性率为70．4％；真性红细胞增多症（PV）患者JAK2V617F突变发生率为97．4％，原发性血小板增多症（ET）为59．6％，3例特发性骨髓纤维化（IMF）中2例阳性；95例突变患者中纯合突变36例，杂合突变59例，其中PV患者纯合突变发生率为47．3％，高于ET患者的18．1％（P〈0．05）。纯合突变者其JAK2V617F突变转录本水平高于杂合突变者（P〈0．05），杂合型PV患者的JAK2V617F突变转录本水平高于杂合型ET患者（P〈0．05）；JAK2V617F突变高表达组（转录本水平为70％～100％）的平均年龄高于低表达组（转录本水平为47．3％～70．0％），且两者年龄均较JAK2V617F阴性组为高（P〈0．05）；年龄〈60岁者其JAK2V617F转录本水平低于≥60岁者（P〈0．001）；PV患者中，JAK2V617F高表达组其白细胞计数高于低表达组（P〈0．001），ET患者中，JAK2V617F高表达组其白细胞计数高于低表达组（P〈0．05），且二者均较阴性组为高（P〈0．05），血红蛋白水平在高表达组与低表达组间差异无统计学意义（P〉0．05），但二者均较阴性组为高（P〈0．05）。101例患者进行了染色体检查，未发现核型异常与JAK2V617F突变之间存在相关性。结论ARMS—PCR可作为检测JAK2V617F突变较灵敏的方法，结合毛细管电泳可用于此突变的定量分析以及临床MPN的诊断和微量残留病的检测。

关键词：骨髓增殖性疾病 DNA突变分析突变序列扩增系统PCR 电泳毛细管

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急性早幼粒细胞白血病患者纤溶活性的临床研究

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中华血液学杂志 2009年第3期30卷 145-149页

作者：刘艳慧王兆钺张威戴兰沈文红阮长耿苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室 215006

目的研究急性早幼粒细胞白血病（APL）患者纤溶活性在诱导治疗缓解前后的改变及其机制，观察全反式维甲酸（ATRA）或ATRA＋三氧化二砷（ATO）诱导治疗对APL患者纤溶活性的影响。方法选择初治APL患者26例，在诱导治疗过程中分别用发色底... 详细信息

目的研究急性早幼粒细胞白血病（APL）患者纤溶活性在诱导治疗缓解前后的改变及其机制，观察全反式维甲酸（ATRA）或ATRA＋三氧化二砷（ATO）诱导治疗对APL患者纤溶活性的影响。方法选择初治APL患者26例，在诱导治疗过程中分别用发色底物法和ELISA法检测患者血浆纤溶酶原和纤维蛋白（原）降解产物（FDP），用全自动血凝仪检测纤维蛋白原和D-二聚体，在治疗前和完全缓解后用流式细胞术检测细胞表面膜联蛋白Ⅱ（AnnexinⅡ）和尿激酶型纤溶酶原激活剂受体（u-PAR）的表达，实时定量PCR检测AnnexinⅡ和u—PAR的mRNA表达水平。结果APL患者存在原发性纤溶亢进，APL细胞表面AnnexinⅡ和u-PAR蛋白的表达率和mRNA水平均高于正常对照，经以ATRA或ATRA＋ATO为基础的诱导缓解方案治疗达到完全缓解后血浆纤维蛋白原、纤溶酶原、FDP及D-二聚体恢复正常，AnnexinⅡ和u—PAR表达水平相应下降，但仍高于正常对照水平。结论APL细胞表面AnnexinII和u—PAR高表达可促使APL纤溶酶生成增多，导致APL患者纤溶亢进。ATRA或ATRA＋ATO可通过下调APL细胞Annexin1I和u—PAR表达纠正APL纤溶异常，这可能是减少APL出血的机制之一。

关键词：白血病早幼粒细胞急性纤维蛋白溶解膜联蛋白Ⅱ 受体尿激酶全反式维甲酸

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纤维蛋白原α链Arg16His突变导致遗传性异常纤维蛋白原血症

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中华血液学杂志 2010年第3期31卷 154-156页

作者：赵小娟王兆钺江明华张威曹丽娟马珍妮董宁征白霞余自强阮长耿苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006

目的对1例遗传性异常纤维蛋白原血症家系进行表型和基因型分析。方法用血凝仪检测先证者家系3代6人外周血活化部分凝血酶时间（APTY）、凝血酶原时间（胛）和凝血酶时间（TT）。纤维蛋白原活性和抗原分别用Clauss法和免疫比浊法检测，We... 详细信息

目的对1例遗传性异常纤维蛋白原血症家系进行表型和基因型分析。方法用血凝仪检测先证者家系3代6人外周血活化部分凝血酶时间（APTY）、凝血酶原时间（胛）和凝血酶时间（TT）。纤维蛋白原活性和抗原分别用Clauss法和免疫比浊法检测，Western blot检测血浆纤维蛋白原及其片段分布。PCR扩增纤维蛋白原基因FGA、FGB和FGG所有外显子及其侧翼序列，PCR产物纯化后直接测序进行基因分析。结果先证者APTT、PT正常，而TT明显延长；纤维蛋白原抗原正常，而纤维蛋白原活性降低，先证者母亲和胞姐表型与之相似。基因分析显示先证者纤维蛋白原FGA基因2号外显子g1233→a杂合碱基改变（密码子CGT→CAT），导致Argl6His错义突变，该突变来源于母系。结论纤维蛋白原α链Argl6His杂合错义突变是遗传性异常纤维蛋白原血症的分子基础之一。

关键词：遗传性异常纤维蛋白原血症凝血酶时间纤维蛋白原基因突变

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阻断血管性血友病因子与胶原结合的抗人vWF—A3单抗的鉴定和功能研究

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中华血液学杂志 2008年第3期29卷 171-174页

作者：赵益明董宁征沈飞谢丽倩阮长耿苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所 215006 卫生部血栓与止血重点实验室

目的制备阻断血管性血友病因子（von Willebrand因子）A3区（vWF-A3）与胶原结合的抗vWF-A3单抗，并对其进行生化鉴定和功能研究。方法用重组vWF-A3蛋白免疫BALB／c小鼠，经标准的方法制备单抗。用ELISA法鉴定单抗特异性，经vWF胶原结... 详细信息

目的制备阻断血管性血友病因子（von Willebrand因子）A3区（vWF-A3）与胶原结合的抗vWF-A3单抗，并对其进行生化鉴定和功能研究。方法用重组vWF-A3蛋白免疫BALB／c小鼠，经标准的方法制备单抗。用ELISA法鉴定单抗特异性，经vWF胶原结合抑制试验筛选获得抑制性单抗，用免疫印迹技术确定单抗与重组（r）vWF-A3和还原性人vWF识别的抗原分子。经胶原结合试验确定单抗对vWF与胶原结合的影响。结果获得一组共30株抗vWF-A3单抗，其中两株确定为抑制vWF与胶原结合的单抗，分别命名为SZ-123和SZ-125，两株单抗分别与rvWF-A3和vWF强反应，而不与rvWF-A1、A2反应。免疫印迹分析显示SZ-123和SZ-125分别识别相对分子质量为27×10^3的rvWF-A3、250×10^3还原性人vWF单体和170×10^3的vWF酶切片段。单抗SZ-123和SZ-125不仅剂量依赖性地抑制纯化的人血浆vWF与人胎盘和牛皮肤Ⅲ型胶原结合，而且分别抑制人、猕猴或Beagle犬血浆vWF与人胎盘和牛皮肤Ⅲ型胶原结合。结论抗vWF-A3单抗SZ-123和SZ-125是两株抑制性单抗，有望成为具有治疗潜力的抗血栓药物。

关键词： von Willebrand因子胶原单克隆抗体

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白血病患者异基因造血干细胞移植后复发的高危因素分析

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中华血液学杂志 2011年第11期32卷 729-733页

作者：陈佳陈峰孙爱宁仇惠英韩悦唐晓文傅铮铮苗瞄何广胜金正明吴德沛苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所；卫生部血栓与止血重点实验室215006

目的分别统计分析急性淋巴细胞白血病（ALL）、急性髓系白血病（AML）和慢性髓系白血病（CML）患者行异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后复发的高危因素，比较各高危因素的影响并初步分析其影响机制。方法单中心回顾性研究，以近8年... 详细信息

目的分别统计分析急性淋巴细胞白血病（ALL）、急性髓系白血病（AML）和慢性髓系白血病（CML）患者行异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后复发的高危因素，比较各高危因素的影响并初步分析其影响机制。方法单中心回顾性研究，以近8年来接受allo—HSCT的262例可评价的白血病患者为研究对象，其中ALL69例，AML（除外急性早幼粒细胞白血病）90例，CML103例，采用COX比例风险模型对移植前多项指标进行单因素及多元分析，筛选移植后复发的高危因素。结果显著影响移植后复发风险的因素因疾病类型不同有所差异。ALL：染色体危险度分层、初始诱导疗程；AML：染色体危险度分层、移植前微量残留病灶水平、白细胞重建时间和移植物中CD4＋／CD8＋细胞比值；CML：移植前病期。结论ALL患者移植后复发风险主要取决于本病的危险度，而AML患者移植后复发与移植过程中的多项指标也密切相关，CML患者在移植前保持病情稳定有利于避免移植后复发。染色体危险度分层是影响移植后复发的主要危险因素。

关键词：白血病造血干细胞移植复发

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抗HLA抗体对异基因造血干细胞移植预后的影响

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中华血液学杂志 2013年第9期34卷 812-815页

作者：潘芝娟何军苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006

近期有研究表明异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）患者体内存在抗供者特异性抗体（donor-specific antibodies，DSA），尤其是抗人类白细胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）抗体。HLA是影响造血干细胞移植物植入、造血重建时间... 详细信息

近期有研究表明异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）患者体内存在抗供者特异性抗体（donor-specific antibodies，DSA），尤其是抗人类白细胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）抗体。HLA是影响造血干细胞移植物植入、造血重建时间延缓和存活最重要因素之一，特别是抗供者特异性HLA抗体（DSHA）与供受者HLA错配allo—HSCT失败密切相关，

关键词：异基因造血干细胞移植抗HLA抗体人类白细胞抗原供者特异性预后干细胞移植物特异性抗体 HLA错配

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