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扩张型心肌病活检心肌中肠道病毒RNA和穿孔素、颗粒酶B的表达及其与心肌病变的相关性

中华心血管病杂志 2001年第4期29卷 235-238页

作者：田静杨英珍封启明廖崇先上海复旦大学附属中山医院上海市心血管病研究所卫生部病毒性心脏病重点实验室 200032 福建医科大学协和医院

目的　探讨肠道病毒 (EVs)持续感染、穿孔素及颗粒酶B在扩张型心肌病 (DCM)发病机理中的作用。方法　用原位杂交和免疫组化方法检测了 19例DCM患者 (DCM组 )和 10例正常对照者 (对照组 )心肌中的EVsRNA及心肌浸润细胞中穿孔素和颗粒酶B... 详细信息

目的　探讨肠道病毒 (EVs)持续感染、穿孔素及颗粒酶B在扩张型心肌病 (DCM)发病机理中的作用。方法　用原位杂交和免疫组化方法检测了 19例DCM患者 (DCM组 )和 10例正常对照者 (对照组 )心肌中的EVsRNA及心肌浸润细胞中穿孔素和颗粒酶B的表达。结果　DCM组中 9例的心肌检测到了EVsRNA ,15例心肌浸润细胞中检测到穿孔素mRNA和颗粒酶B的表达 ,阳性细胞数分别为 ( 1.95± 0 .70 )、( 1.79± 0 .64)个 /高倍视野。对照组心肌中未检测到EVsRNA和穿孔素、颗粒酶B的表达。结论　心肌EVs持续感染、心肌浸润细胞中穿孔素和颗粒酶B的表达可能在DCM的发病中起了一定作用。

关键词：扩张型心肌病活组织检查肠道病毒 RN 穿孔素颗粒酶

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病毒性心脏病诊治新进展

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当代医学 2001年第6期7卷 38-40,37页

作者：杨英珍陈瑞珍卫生部病毒性心脏病重点实验室复旦大学附属中山医院上海市心血管病研究所

本文通过国家“九五” 攻关课题病毒性心肌炎(VMC)与扩张型心肌病的相关研究结果,对病毒性心肌炎与扩张型心肌病的诊断和治疗的最新研究进展做一综述,旨在对二者的诊疗有进一步的认识、提高。

关键词：病毒性心肌炎扩张型心肌病诊断治疗

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克山病患者心肌中肠道病毒抗原VP1及其基因检测

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上海医科大学学报 2000年第2期27卷 91-93页

作者：李延文杨英珍牛存龙 JFMosnier TBourlet BPozzetto ZhangHongyi 上海市心血管病研究所卫生部病毒性心脏病重点实验室上海200032 云南省楚雄克山病防治研究中心楚雄675000 Facultede Medecine Jacques Lisfranc Universite Jean MonnetSaint EtienneFrance Division of Biomedical Science Imperial College School of MedicineBMS Building SouthKensington

目的　进一步探讨肠道病毒感染与克山病发病的关系。方法　应用免疫组织化学等方法对克山病患者心肌组织标本进行肠道病毒检测并与其他疾病进行对比。结果　在 11例克山病患者中发现 9例病毒结构蛋白VP1阳性 ,其中 8例同时检测到病毒RN... 详细信息

目的　进一步探讨肠道病毒感染与克山病发病的关系。方法　应用免疫组织化学等方法对克山病患者心肌组织标本进行肠道病毒检测并与其他疾病进行对比。结果　在 11例克山病患者中发现 9例病毒结构蛋白VP1阳性 ,其中 8例同时检测到病毒RNA ;而 8例缺血性心肌病仅 3例VP1阳性 ,其中 2例RNA也阳性。 3例死于其他疾病患者未发现肠道病毒。结论　克山病患者心肌组织中不仅存在肠道病毒基因RNA ,而且也有其表达的结构蛋白VP1,提示肠道病毒感染可能为克山病发病的主要原因之一。

关键词：肠病毒克山病 VP1 聚合酶链反应

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穿孔素介导的细胞毒效应在病毒性心肌炎小鼠发病中的作用

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上海医科大学学报 1999年第2期26卷 128-130页

作者：熊丁丁杨英珍胡英陈灏珠上海市心血管病研究所-卫生部病毒性心脏病重点实验室

目的探讨穿孔素（ＰＦＰ）介导的细胞毒效应在病毒性心肌炎（ＶＭＣ）发病中的作用。方法４０只小鼠等分为ＣＶＢ３感染组及非感染组；所有小鼠于感染后第１０天处死并取其心脏；采用免疫组化技术检测心肌浸润细胞中ＰＦＰ的表达，原位... 详细信息

目的探讨穿孔素（ＰＦＰ）介导的细胞毒效应在病毒性心肌炎（ＶＭＣ）发病中的作用。方法４０只小鼠等分为ＣＶＢ３感染组及非感染组；所有小鼠于感染后第１０天处死并取其心脏；采用免疫组化技术检测心肌浸润细胞中ＰＦＰ的表达，原位杂交方法检测心肌中ＣＶＢ３ＲＮＡ；半定量分析ＰＦＰ抗原及ＣＶＢ３ＲＮＡ水平，并分析ＰＦＰ抗原水平与ＣＶＢ３复制及心肌病变程度的关系。结果ＰＦＰ抗原阳性信号指数与ＣＶＢ３ＲＮＡ杂交阳性信号指数呈显著负相关（ｒ＝－０．８２，Ｐ＜０．０５），与心肌病变积分呈显著正相关（ｒ＝０．９１，Ｐ＜０．０５）。结论ＰＦＰ介导的细胞毒效应在ＶＭＣ发病中可能具有抗病毒及致心肌损害双重作用。

关键词：病毒性心肌炎细胞免疫穿孔素细胞毒效应

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定量PCR比较病毒性心肌炎血和心肌肠道病毒RNA含量及其与心肌病变的关系

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上海医学 1999年第7期22卷 399-401页

作者：封启明杨英珍陈灏珠上海医科大学中山医院上海市心血管病研究所卫生部病毒性心脏病重点实验室

目的研究小鼠柯萨奇病毒性心肌炎模型血、心肌柯萨奇病毒ＲＮＡ含量的关系；外周血中肠道病毒ＲＮＡ含量与心肌病理积分的关系。方法利用定量ＰＣＲ方法检测病毒性心肌炎小鼠模型急性期外周血、心肌肠道病毒ＲＮＡ含量。结果ＣＶＢ３感... 详细信息

目的研究小鼠柯萨奇病毒性心肌炎模型血、心肌柯萨奇病毒ＲＮＡ含量的关系；外周血中肠道病毒ＲＮＡ含量与心肌病理积分的关系。方法利用定量ＰＣＲ方法检测病毒性心肌炎小鼠模型急性期外周血、心肌肠道病毒ＲＮＡ含量。结果ＣＶＢ３感染所致心肌炎小鼠外周血、心肌中肠道病毒ＲＮＡ含量显著正相关（ｒ＝０．９４，Ｐ＜０．０１）。外周血及心肌中肠道病毒ＲＮＡ含量与心肌病理积分显著正相关（ｒ＝０．８０，Ｐ＜０．０１，ｒ＝０．８５，Ｐ＜０．０１）。结论病毒性心肌炎急性期外周血中肠道病毒ＲＮＡ含量可以反映心肌中的病毒ＲＮＡ含量水平，且两者与心肌病理损害均有一致性改变。

关键词：定量PCR 柯萨奇B3病毒病毒性心肌炎 RNA

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实验性病毒性心肌炎小鼠心肌细胞钾通道mRNA的表达

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复旦学报（医学版） 1999年第S1期27卷 18-20页

作者：鲍伟胜王春雷杨英珍卫生部病毒性心脏病重点实验室上海市心血管病研究所上海市光华医院内科

探讨病毒感染对心肌细胞钾通道表达的影响。方法用原位杂交技术检测实验性病毒性心肌炎ＢＡＬＢ／ｃ小鼠左心室Ｋｖ１．２、Ｋｖ２．１、Ｋｖ４．２３种电压调控性钾通道ｍＲＮＡ的表达。结果正常小鼠心肌细胞均存在这３种钾通道ｍＲＮ... 详细信息

探讨病毒感染对心肌细胞钾通道表达的影响。方法用原位杂交技术检测实验性病毒性心肌炎ＢＡＬＢ／ｃ小鼠左心室Ｋｖ１．２、Ｋｖ２．１、Ｋｖ４．２３种电压调控性钾通道ｍＲＮＡ的表达。结果正常小鼠心肌细胞均存在这３种钾通道ｍＲＮＡ的表达，ＣｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓＢ３（ＣＶＢ３）感染的小鼠心肌细胞３种钾通道ｍＲＮＡ的表达水平明显增强。结论ＣＶＢ３对钾通道的作用可能是在转录水平的调节。

关键词：原位杂交电压调控性钾通道病毒性心肌炎

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黄芪对感染病毒大鼠心肌细胞钙通道及钠钙交换载体的效应

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中国病理生理杂志 1999年第7期15卷 591-593页

作者：刘恭鑫杨英珍顾全保郭棋虞勇卫生部病毒性心脏病重点实验室上海医科大学中山医院上海市心血管病研究所中国科学院上海细胞生物学研究所

目的与方法：以柯萨奇Ｂ３病毒感染急性分离的成年大鼠心肌细胞，利用膜片钳记录技术了解黄芪对感染柯萨奇病毒后心肌细胞Ｌ型钙通道及钠钙交换载体的影响，以探讨黄芪用于心肌炎治疗的作用机制。结果：黄芪不影响正常心肌细胞Ｌ型钙通... 详细信息

目的与方法：以柯萨奇Ｂ３病毒感染急性分离的成年大鼠心肌细胞，利用膜片钳记录技术了解黄芪对感染柯萨奇病毒后心肌细胞Ｌ型钙通道及钠钙交换载体的影响，以探讨黄芪用于心肌炎治疗的作用机制。结果：黄芪不影响正常心肌细胞Ｌ型钙通道电流的幅度，但可减缓Ｌ型钙通道电流的衰减。黄芪也不影响内向ＮＣＥ电流，但使外向ＮＣＥ电流增加，从而使动作电位期间由ＮＣＥ转运入细胞内的钙离子增加。病毒感染增加心肌细胞Ｌ型钙通道电流的幅度，抑制内向钠钙交换电流，并使钠钙交换电流的逆转电位负移。黄芪可抑制病毒感染细胞Ｌ型钙通道电流的增加，减轻ＣＶＢ３对内向ＮＣＥ电流的抑制作用和使负移的逆转电位正常化。结论：黄芪通过拮抗ＣＶＢ３感染对Ｌ型钙通道和钠钙交换电流的影响，可防止病毒感染可能导致的细胞内钙超载和异常电活动，从而对感染细胞起到保护作用。

关键词：黄芪柯萨奇病毒钙通道心肌大鼠中医药疗法

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氯沙坦干预病毒性心肌炎恢复期、慢性期心脏胶原表达及心功能的实验研究

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中华心血管病杂志 1999年第2期27卷 140-143页

作者：荆志成程显声杨英珍中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院心脏肺循环研究室上海医科大学中山医院卫生部病毒性心脏病重点实验室

目的观察病毒性心肌炎恢复期、慢性期心脏间质胶原表达及其对心功能的影响，并初步探讨药物干预的效果，为临床干预心肌纤维化提供实验依据。方法建立恢复期、慢性期病毒性心肌炎小鼠模型，通过阻抗微分法观察心排血量，Ｈ．Ｅ染色及... 详细信息

目的观察病毒性心肌炎恢复期、慢性期心脏间质胶原表达及其对心功能的影响，并初步探讨药物干预的效果，为临床干预心肌纤维化提供实验依据。方法建立恢复期、慢性期病毒性心肌炎小鼠模型，通过阻抗微分法观察心排血量，Ｈ．Ｅ染色及苦味酸天狼猩红胶原特异染色偏振光显像进行心脏间质胶原的组织化学观察，ＲＴＰＣＲ观察心脏Ｉ型胶原ｍＲＮＡ表达的变化，并与氯沙坦（ｌｏｓａｒｔａｎ）干预后比较。结果病毒性心肌炎恢复期心脏胶原增生，心排血量降低，氯沙坦干预后胶原表达无论从蛋白水平还是从ｍＲＮＡ水平均明显降低，但心排血量未见明显改善；病毒性心肌炎慢性期心脏胶原大量增生，心排血量降低，氯沙坦干预后胶原表达无论从蛋白水平还是从ｍＲＮＡ水平均明显降低，心排血量改善，与正常对照组比较差异无显著性。结论病毒性心肌炎恢复期可能存在修复性纤维化和反应性纤维化两种胶原增生状态，二者对心功能的影响不同，这可能是氯沙坦消除增生的胶原后心脏功能不见明显改善的原因。病毒性心肌炎慢性期胶原蛋白增生为单纯性反应性纤维化，使心排血量下降，氯沙坦部分阻逆反应性增生胶原，可提高心排血量，改善心脏功能。

关键词：病毒性心肌炎氯沙坦干预心脏胶原心功能

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牛磺酸对柯萨奇B3病毒感染新生大鼠心肌细胞外向钾电流的影响

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上海医科大学学报 1999年第1期26卷 8-10页

作者：鲍伟胜杨英珍顾全保赵剑星虞勇郭棋卫生部病毒性心脏病重点实验室-上海心血管病研究所上海医科大学中山医院中国科学院上海细胞生物学研究所

观察牛磺酸对柯萨奇Ｂ３病毒（ＣｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓＢ３，ＣＶＢ３）感染新生大鼠心肌细胞外向钾电流（ｏｕｔｗａｒｄｃｕｒｒｅｎｔ，Ｉｏｕｔ）的影响。方法运用全细胞膜片钳技术记录了分离的大鼠心肌细胞外向钾电流，并... 详细信息

观察牛磺酸对柯萨奇Ｂ３病毒（ＣｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓＢ３，ＣＶＢ３）感染新生大鼠心肌细胞外向钾电流（ｏｕｔｗａｒｄｃｕｒｒｅｎｔ，Ｉｏｕｔ）的影响。方法运用全细胞膜片钳技术记录了分离的大鼠心肌细胞外向钾电流，并观察牛磺酸的作用。结果ＣＶＢ３感染可使正常大鼠心肌细胞Ｉｏｕｔ明显增加，牛磺酸对正常大鼠心肌细胞Ｉｏｕｔ无明显影响，但可使ＣＶＢ３感染的Ｉｏｕｔ趋于正常。结论牛磺酸对ＣＶＢ３感染心肌细胞Ｋ＋通道电流的作用可能是其发挥抗心肌损伤作用的机制之一。

关键词：牛磺酸外向钾电流心肌细胞柯萨奇B3病毒

来源：评论

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应用合成肽检测病毒性心肌炎患者血清中柯萨奇B组病毒抗体

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上海医科大学学报 1999年第2期26卷 125-127,134页

作者：杨昌生杨英珍陈颖虞勇施溥涛陈灏珠上海医科大学中山医院心内科-上海市心血管病研究所-卫生部病毒性心脏病重点实验室中国科学院上海生物化学研究所

目的研究应用合成肽代替完整病毒检测柯萨奇Ｂ组病毒（ＣＶＢ）抗体及其在病毒性心肌炎（ＶＭＣ）病因诊断中的作用。方法从ＣＶＢ衣壳蛋白ＶＰ１及ＶＰ３的保守区及ＣＶＢ３衣壳蛋白ＶＰ２的非保守区各选出一段多肽（分别称为ＶＰ１－... 详细信息

目的研究应用合成肽代替完整病毒检测柯萨奇Ｂ组病毒（ＣＶＢ）抗体及其在病毒性心肌炎（ＶＭＣ）病因诊断中的作用。方法从ＣＶＢ衣壳蛋白ＶＰ１及ＶＰ３的保守区及ＣＶＢ３衣壳蛋白ＶＰ２的非保守区各选出一段多肽（分别称为ＶＰ１－１肽、ＶＰ３－１肽、ＶＰ２－１肽）进行化学合成，应用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测这几条多肽与型特异性ＣＶＢ１～６抗体的结合反应。以ＶＰ１－１肽、ＶＰ３－１肽作包被抗原，用间接ＥＬＩＳＡ检测患者血清中ＣＶＢＩｇＧ及ＶＣＢＩｇＭ抗体。结果ＶＰ１－１肽和ＶＰ３－１肽与型特异性ＣＶＢ１～６抗体均有良好的结合反应。８５例健康人、６７例急性ＶＭＣ、３９例慢性ＶＭＣ患者血清ＣＶＢＩｇＧ阳性率分别为２３．５％、５３．７％、３８．５％，ＣＶＢＩｇＭ阳性率分别为７．１％、４９．３％、２８．２％。ＣＶＢＩｇＭ抗体与中和抗体检测结果之间有良好的相关性（Ｐ＜０．００１），阳性率无明显差别（Ｐ＞０．０５）。结论应用合成肽抗原检测ＣＶＢＩｇＭ抗体有较好的敏感性和特异性。

关键词：合成肽病毒性心肌炎柯萨奇病毒 CVB

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