检索结果-内蒙古大学图书馆

现代预防医学 2008年第13期35卷 2474-2475页

作者：王建东丁杨谭卫东陈又南陆燕蓉卢晓风李宏霞王莉程惊秋四川大学华西医院卫生部移植工程与移植免疫重点实验室成都(国家)中药安全评价中心

[目的]探索恒河猴凝血因子VII的体外原核蛋白表达方法。[方法]利用已得到的恒河猴凝血因子VII cDNA序列,构建了带有6His表达标签的大肠杆菌原核表达重组质粒pET-DsbA-MCFVII,再转入大肠杆菌中进行诱导表达,并使用SDS-PAGE蛋白质电泳和We... 详细信息

[目的]探索恒河猴凝血因子VII的体外原核蛋白表达方法。[方法]利用已得到的恒河猴凝血因子VII cDNA序列,构建了带有6His表达标签的大肠杆菌原核表达重组质粒pET-DsbA-MCFVII,再转入大肠杆菌中进行诱导表达,并使用SDS-PAGE蛋白质电泳和Western Blot法检测蛋白表达情况。[结果]目的蛋白主要以包涵体形式表达,但是在菌液上清和菌体裂解液中也能检测到可溶形式的目的蛋白。[结论]恒河猴凝血因子VII在大肠杆菌中能够以可溶形式表达。

关键词：恒河猴凝血因子VII 原核表达

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壳聚糖与纤维的交互作用对手抄片性能的影响

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中国造纸学报 2006年第4期21卷 48-51页

作者：付丽红程惊秋山东轻工业学院皮革化学与工程省级重点学科山东济南250353 四川大学华西医院卫生部移植工程与移植免疫重点实验室四川成都610041

通过手抄片的物理性能测定、红外光谱(IR)和示差扫描量热法(DSC)分析,研究了手抄片中壳聚糖与纤维间的交互作用,并用X射线衍射法(XRD)测定纤维的结晶度。结果表明:壳聚糖与纤维间存在较强的交互作用,主要为大量的氢键、离子键和少量的... 详细信息

通过手抄片的物理性能测定、红外光谱(IR)和示差扫描量热法(DSC)分析,研究了手抄片中壳聚糖与纤维间的交互作用,并用X射线衍射法(XRD)测定纤维的结晶度。结果表明:壳聚糖与纤维间存在较强的交互作用,主要为大量的氢键、离子键和少量的共价键;随壳聚糖用量的增加,手抄片的物理性能指标出现不同的变化趋势;壳聚糖的加入使纤维的玻璃化转变温度(Tg)升高、结晶度和热变性能量降低;用Tg的变化反映壳聚糖与纤维间的结合、用结晶度和热变性能量的变化反映纤维本身的强度以便判断影响手抄片强度性能的内在因素;将湿强度与玻璃化转变温度相结合,可以推断离子键和氢键对分子间结合的影响。

关键词：壳聚糖纤维交互作用物理性能内在影响因素

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恒河猴外周血调节性T淋巴细胞的分离纯化及鉴定

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中国修复重建外科杂志 2012年第10期26卷 1237-1241页

作者：张爽金熙程汉佳何斯荣陈又南龙丹单娟曾力王成世程惊秋陆燕蓉四川大学华西医院卫生部移植科学与移植免疫重点实验室成都610041 四川大学生命科学学院

目的建立恒河猴外周血CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(regulatory T cells,Tregs)快速有效的分离纯化方法。方法 4～5岁健康恒河猴10只,雌性4只,雄性6只,体重5～8 kg;于大隐静脉抽取外周血,每只抽取8 mL。密度梯度离心法分离外周血单个核细胞... 详细信息

目的建立恒河猴外周血CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(regulatory T cells,Tregs)快速有效的分离纯化方法。方法 4～5岁健康恒河猴10只,雌性4只,雄性6只,体重5～8 kg;于大隐静脉抽取外周血,每只抽取8 mL。密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),分别采用非人灵长类Tregs分离试剂盒的生物素标记的混合抗体和磁珠标记的抗生物素抗体阴性分选,以及大鼠抗人CD4-活化蛋白C(activatedprotein C,APC)和抗APC多选试剂盒中的磁珠标记的抗APC抗体阳性分选出CD4+T淋巴细胞,比较两种方法获得细胞的得率、活性及纯度;选择得率、活性和纯度较高的分选方法获得的CD4+T淋巴细胞,用磁珠标记的抗人CD25抗体进行阳性分选,获得CD4+CD25+Tregs,流式细胞仪检测纯度、活性及FoxP3表达水平,以及Tregs对刀豆蛋白(concanavalinA,ConA)刺激的自体CD4+CD25-效应性T淋巴细胞(effective T cells,Teffs)增殖的抑制功能。结果 CD4+T淋巴细胞阳性分选和阴性分选后,细胞活性均达95%左右,差异无统计学意义(P>0.05),但阳性分选后CD4+T淋巴细胞得率和纯度均显著高于阴性分选(P<0.05)。后续CD4+CD25+Tregs分选采用阳性分选法获得的CD4+T淋巴细胞。经双阳性分选收集的目的细胞中CD4+CD25+Tregs占76.2%±8.6%,活细胞比例为93.3%±4.7%,FoxP3阳性细胞比例为74.2%±6.9%。混合培养后Tregs均对ConA刺激的Teffs的增殖有抑制作用。结论免疫磁珠双阳性分选法能有效分选出恒河猴外周血中有功能的CD4+CD25+Tregs。

关键词：调节性T淋巴细胞效应性T淋巴细胞免疫磁珠分选淋巴细胞分离恒河猴

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口腔癌相关成纤维细胞对舌癌细胞株侵袭特性的影响

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华西口腔医学杂志 2006年第2期24卷 101-103页

作者：林靖雯周红梅李胜富胡涛陈谦明四川大学口腔生物医学工程教育部重点实验室四川大学华西口腔医院黏膜科四川大学华西医院卫生部移植工程和移植免疫重点实验室

目的采用重建基底膜细胞侵袭实验,研究直接分离自舌癌组织旁的癌相关成纤维细胞(CAFs)对舌癌细胞株侵袭特性的影响,探讨CAFs在口腔鳞癌发展中的作用。方法以Matrigel模拟重建基底膜,采用Transwell小室建立口腔CAFs与舌癌细胞株Tca8113... 详细信息

目的采用重建基底膜细胞侵袭实验,研究直接分离自舌癌组织旁的癌相关成纤维细胞(CAFs)对舌癌细胞株侵袭特性的影响,探讨CAFs在口腔鳞癌发展中的作用。方法以Matrigel模拟重建基底膜,采用Transwell小室建立口腔CAFs与舌癌细胞株Tca8113的交互作用模型,观测CAFs对Tca8113侵袭特性的影响。结果与正常成纤维细胞(NFs)相比,CAFs能促使更多的Tca8113细胞穿透Matrigel(P<0．05)。结论口腔CAFs能促进舌癌细胞株Tca8113 的侵袭,在口腔鳞癌发展中起重要作用。

关键词：癌相关成纤维细胞口腔癌细胞株侵袭

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肝癌患者肝移植术后早期激素撤离对肿瘤复发的影响

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中华器官移植杂志 2006年第3期27卷 156-159页

作者：陈知水何凡曾凡军明长生蒋继贫杜敦峰刘斌张伟杰刘敦贵陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究院器官移植教育部重点实验室器官移植卫生部重点实验室武汉430030

目的探讨肝癌患者肝移植术后激素撤离对肿瘤复发的影响。方法对54例中、晚期原发性肝癌患者施行了肝移植,术后根据3个月内是否撤离激素分为激素撤离组(28例)和激素维持组(26例)。比较两组间排斥反应发生率、半年及1年的肿瘤复发率、1年... 详细信息

目的探讨肝癌患者肝移植术后激素撤离对肿瘤复发的影响。方法对54例中、晚期原发性肝癌患者施行了肝移植,术后根据3个月内是否撤离激素分为激素撤离组(28例)和激素维持组(26例)。比较两组间排斥反应发生率、半年及1年的肿瘤复发率、1年存活率、血他克莫司(FK506)浓度及生化指标的平均值,运用统计学方法分析两组间差异。结果激素撤离组和激素维持组排斥反应发生率、半年肿瘤复发率、1年存活率相比,差异无统计学意义;激素维持组1年肿瘤复发率明显高于激素撤离组,差异有统计学意义(P<0.05)。术后半年,两组FK506浓度的差异无统计学意义。术后1周及术后半年,两组丙氨酸转氨酶、胆红素总量及肌酐分别相比,差异均无统计学意义。术后半年,两组胆固醇总量、中餐前血糖水平相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论肝癌患者肝移植术后3个月内撤离激素是安全的,并不增加排斥反应的发生率,也不需要增加其它免疫抑制剂的用量,可明显降低肿瘤复发率,提高患者的长期存活率。

关键词：肝移植肿瘤复发,局部激素肝肿瘤

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酶组织化学方法在HA/TCP体内外生物相容性评价中的初步应用

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生物医学工程学杂志 2004年第4期21卷 631-635页

作者：卢冰卢晓风张真李胜富裴福兴李幼平程惊秋四川大学华西医院卫生部移植工程和移植免疫重点实验室成都610041 四川大学华西医院骨科成都610041

通过研究材料与细胞 /组织相互作用后胞内酶活性的变化与材料生物相容性之间的关系 ,探讨酶组织化学法应用于材料生物相容性评价的可行性。结果发现 ,与 HA/ TCP和钛合金复合培养的成骨细胞形态学上无明显差异。但 HA/ TCP与兔成骨细胞... 详细信息

通过研究材料与细胞 /组织相互作用后胞内酶活性的变化与材料生物相容性之间的关系 ,探讨酶组织化学法应用于材料生物相容性评价的可行性。结果发现 ,与 HA/ TCP和钛合金复合培养的成骨细胞形态学上无明显差异。但 HA/ TCP与兔成骨细胞复合培养初期可导致细胞 NADH、SDH、L DH和 CCO酶活性的一过性下降 ,而钛合金对复合培养细胞的酶活性没有明显影响 ,提示 HA/ TCP材料溶出物对细胞有轻微的损伤。两种材料体内植入后引起的组织学变化过程相似 ,主要表现为损伤引起的急性炎症过程。酶组织化学检测发现 ,术后 10 d内植入体周围组织四种酶活性均明显下降 ,15 - 30 d内逐渐恢复正常。但 HA/ TCP组酶活性的恢复略滞后于钛合金组 ,也表明材料溶出物对细胞有一定损伤。体内外实验均发现酶学指标能更灵敏地反映材料对细胞的作用 ,酶组织化学法可望应用于材料生物相容性评价。

关键词：酶组织化学 HA/TCP 生物相容性生物材料

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西罗莫司对T淋巴细胞分化发育的影响

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中华器官移植杂志 2011年第6期32卷 381-382页

作者：武传星吕凌张峰医科大学第一附属医院肝移植中心卫生部活体肝移植重点实验室南京210029

西罗莫司（SRI。）最初作为低毒性的抗真菌药物，于1977年被发现具有免疫抑制作用，1989年开始将SRL用于预防器官移植后排斥反应。由于SRL在预防排斥反应中的疗效显著，不良反应较少，现在已广泛应用于各种器官移植。SRL不仅能抑制T淋... 详细信息

西罗莫司（SRI。）最初作为低毒性的抗真菌药物，于1977年被发现具有免疫抑制作用，1989年开始将SRL用于预防器官移植后排斥反应。由于SRL在预防排斥反应中的疗效显著，不良反应较少，现在已广泛应用于各种器官移植。SRL不仅能抑制T淋巴细胞的分化发育，而且能够诱导效应性T淋巴细胞转化为调节性T淋巴细胞（Treg细胞），在体内外能明显扩增CD46＋CD25^＋Treg细胞。由于体内CD4^＋CD25^＋Treg细胞含量较少，体外扩增困难，限制了对其特征与功能的进一步研究。因此，如何在体内外有效扩增CD4^＋CD25^＋Treg细胞，并保持其表型与抑制功能，

关键词：调节性T淋巴细胞细胞分化发育 CD4^+CD25^+Treg细胞西罗莫司 T淋巴细胞转化免疫抑制作用体外扩增排斥反应

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IL-17参与小鼠心脏移植排斥反应的实验研究

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华中科技大学学报（医学版） 2009年第5期38卷 581-584,589页

作者：雷钧何凡吴敏郑翔李舒媛陈知水华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室器官移植卫生部重点实验室武汉430030

目的研究Th17细胞相关因子白细胞介素17(IL-17)在小鼠心脏移植排斥反应中的表达及意义。方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型,实验动物随机分为同系移植组和急性排斥反应组。观察2组供心存活时间,应用RT-PCR检测移植心脏IL-17、核孤独受体... 详细信息

目的研究Th17细胞相关因子白细胞介素17(IL-17)在小鼠心脏移植排斥反应中的表达及意义。方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型,实验动物随机分为同系移植组和急性排斥反应组。观察2组供心存活时间,应用RT-PCR检测移植心脏IL-17、核孤独受体γt(RORγt)、干扰素-γ(IFN-γ)mRNA在移植术后1、2、3、4、5、6、7、8 d的动态表达水平。免疫荧光法观察移植术后第4天移植心脏内CD4+、CD8+T细胞中IL-17的表达情况。结果RT-PCR检测显示,在急性排斥反应组中,IL-17和RORγt mRNA的表达都早于IFN-γ,在移植术后第2天即可于移植心脏中检测到,其表达量在术后第4天均达到高峰,随后逐渐下降,并分别在术后第6天和第7天无表达。免疫荧光结果显示,急性排斥组移植心脏内有大量CD4+、CD8+T细胞浸润,细胞因子IL-17主要由CD4+T细胞分泌。结论Th17细胞在移植排斥反应的发生发展中可能起着非常重要的作用,对移植脏器中细胞因子IL-17的检测可作为急性排斥反应早期诊断的预见性和特异性指标。

关键词：移植排斥反应 Th17细胞白细胞介素17 核孤独受体γt 干扰素-γ

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基质金属蛋白酶-2及其组织抑制因子在移植肝慢性排斥反应中的表达

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中华器官移植杂志 2006年第7期27卷 441-442页

作者：聂明张伟杰张成德徐崇松华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室器官移植卫生部重点实验室武汉430030

基质金属蛋白酶是一种可降解细胞外基质(ECM)的酶,它在组织纤维化、肿瘤侵袭、缺血-再灌注损伤及器官移植后慢性移植物功能丧失中的作用,近年日益引起人们的重视,成为新的研究热点.迄今有关基质金属蛋白酶对肾移植后慢性排斥反应的影响... 详细信息

基质金属蛋白酶是一种可降解细胞外基质(ECM)的酶,它在组织纤维化、肿瘤侵袭、缺血-再灌注损伤及器官移植后慢性移植物功能丧失中的作用,近年日益引起人们的重视,成为新的研究热点.迄今有关基质金属蛋白酶对肾移植后慢性排斥反应的影响以及在肝纤维化中的作用的报道较多,但它在肝移植后慢性排斥反应中的作用尚不明了.为此,我们以正常肝组织、发生肝硬化的肝组织、移植后发生慢性排斥反应的肝组织为观察对象,应用免疫组化的方法,观察基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其组织抑制因子(TIMP-2)在肝组织中的表达,以期探讨其在肝移植慢性排斥反应中可能起到的作用。

关键词：基质金属蛋白酶-2 慢性排斥反应组织抑制因子移植肝细胞外基质(ECM) 正常肝组织缺血-再灌注损伤组织纤维化慢性移植物移植后

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分化生长因子-8对大鼠移植腹主动脉肌纤维化的作用及其机制

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中华实验外科杂志 2006年第4期23卷 529-531页

作者：高成金熊玮李幼平复旦大学附属金山医院烧伤整形科上海200540 四川大学华西医院泌尿外科卫生部移植工程与移植免疫重点实验室

目的探讨分化生长因子(GDF)-8对移植大鼠腹主动脉肌纤维化的抑制作用。方法建立雄性Wistar大鼠至雄性SD大鼠腹主动脉原位移植模型,实验动物随机分为两组:延长冷缺血组(PCI)和对照组,测定术后7、14、21、28 d血管内膜厚度,逆转录-聚合酶... 详细信息

目的探讨分化生长因子(GDF)-8对移植大鼠腹主动脉肌纤维化的抑制作用。方法建立雄性Wistar大鼠至雄性SD大鼠腹主动脉原位移植模型,实验动物随机分为两组:延长冷缺血组(PCI)和对照组,测定术后7、14、21、28 d血管内膜厚度,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测移植血管GDF-8的表达,免疫组织化学(IHC)检测Smad4的表达。结果 PCI组内膜14 d开始增厚,28 d至(381．952±44．334)μm,对照组为(56．898±17．543)μm,差异有统计学意义(P<0．05), 术后PCI组GDF-8 mRNA为对照组的3．6％-33.8％,Smad4蛋白表达高于对照组。结论 GDF-8 在移植动脉肌纤维化过程中发挥重要作用,延长冷缺血时间可下调GDF-8的表达而加速肌纤维化进程。

关键词：生长因子-8 腹主动脉移植纤维化

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