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基于TLR4/NF-κB研究苗药黑骨藤对AGA大鼠Th17/Treg及相关细胞因子的影响

中国老年学杂志 2023年第18期43卷 4546-4549页

作者：党荣敏蒋催蓉谢洪书罗康华姚文琴黔南民族医学高等专科学校病原生物学教研室贵州都匀558000 黔南民族医学高等专科学校病理学教研室贵州都匀558000 黔南民族医学高等专科学校微生物学及免疫学检验教研室贵州都匀558000

目的探究基于Toll样受体(TLR)4/核转录因子(NF)-κB研究苗药黑骨藤对急性痛风性关节炎(AGA)大鼠辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞(Treg)及相关细胞因子的影响。方法在90只SPF级雄性健康大鼠中选取15只作为正常组,其余大鼠建立AGA模型,模... 详细信息

目的探究基于Toll样受体(TLR)4/核转录因子(NF)-κB研究苗药黑骨藤对急性痛风性关节炎(AGA)大鼠辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞(Treg)及相关细胞因子的影响。方法在90只SPF级雄性健康大鼠中选取15只作为正常组,其余大鼠建立AGA模型,模成功后将大鼠随机分为模型组、秋水仙碱组、低剂量组、中剂量组、高剂量组各15只。低剂量组、中剂量组、高剂量组分别给予25、50、100 mg/kg苗药黑骨藤灌胃,秋水仙碱组使用0.1 mg/kg的秋水仙碱灌胃,正常组、模型组给予相同体积的生理盐水灌胃,持续给药7 d。观察各组Th17/Treg及相关细胞因子水平及TLR4、NF-κB蛋白表达量。结果与秋水仙碱组、中剂量组、低剂量组相比,高剂量组Th17、Th17/Treg及相关细胞因子水平及TLR4、NF-κB蛋白表达量明显较低,Treg明显较高(P<0.05)。结论苗药黑骨藤可通过下调TLR4、NF-κB蛋白表达量,抑制TLR4/NF-κB信号通路,减轻AGA炎症反应,降低Th17/Treg及相关细胞因子水平,起到治疗作用。

关键词： Toll样受体4 核转录因子-κB 辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞(Treg) 苗药黑骨藤急性痛风性关节炎

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基于FRET构建A型肉毒毒素活性检测的高通量方法

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安徽医科大学学报 2023年第1期58卷 15-21页

作者：罗森郭丽娜李涛王琴王慧遵义医药高等专科学校细胞生物学与免疫学教研室遵义563006 军事医学科学院微生物流行病研究所、病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的利用荧光共振能量转移(FRET)构建针对A型肉毒毒素酶活性检测的高通量体外方法。方法构建只识别A型肉毒毒素的基于双荧光标记底物的重组表达质粒,将其构建的质粒转入大肠杆菌表达系统进行表达,对表达后的荧光标记底物重组蛋白进行纯... 详细信息

目的利用荧光共振能量转移(FRET)构建针对A型肉毒毒素酶活性检测的高通量体外方法。方法构建只识别A型肉毒毒素的基于双荧光标记底物的重组表达质粒,将其构建的质粒转入大肠杆菌表达系统进行表达,对表达后的荧光标记底物重组蛋白进行纯化和透析并保存备用;利用A型肉毒毒素轻链(ALc)对重组蛋白进行酶切检测活性;对本检测方法的条件进行优化;ALc切割荧光标记底物测定其酶动力学参数K_(m)与K_(cat)值。结果重组表达质粒构建成功,通过大肠杆菌表达系统表达后检测明显出现目的条带,对其纯化后获得的重组蛋白纯度在90%左右,命名重组蛋白为CYA。对CYA通过酶ALc、B型肉毒毒素轻链(BLc)进行酶切鉴定,结果显示CYA只能被ALc酶切产生与预期相符的两个蛋白片段,不能被BLc酶切。对基于FRET底物的条件优化得到:设定滤光片灵敏度在65~110之间;实时动态检测间隔为2 min/次,动态检测时间为30~120 min,底物CYA合适的浓度范围0.5~32μmol/L。CYA在ALc酶作用下随时时间的变化与荧光值528与485的比值作图最小在0.5左右,最大时约为0.9。酶动力学参数测定ALc切割CYA的值K_(cat)值为(5±0.4)s^(-1)和K_(m)为(2.33±0.21)μmol/L。结论成功构建了基于FRET技术的A型肉毒毒素活性检测的高通量体外分析方法。

关键词： FRET 肉毒毒素高通量检测

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miR-146a对人黑色素瘤A375细胞增殖和侵袭的影响及作用机制

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中国医科大学学报 2020年第10期49卷 907-910页

作者：王丽纳王红兰庄永灿王凯波陈文标福建医科大学附属泉州第一医院皮肤科福建泉州362000 沈阳市第七人民医院皮肤科沈阳110003 泉州医学高等专科学校病原微生物与免疫学教研室福建泉州362000

目的探讨微小RNA-146a(miR-146a)对人黑色素瘤A375细胞增殖与侵袭能力的影响及可能机制。方法利用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将miR-146a模拟物或抑制剂转染入黑色素瘤A375细胞,使miR-146a过表达或低表达,采用MTT检测细胞活力变化... 详细信息

目的探讨微小RNA-146a(miR-146a)对人黑色素瘤A375细胞增殖与侵袭能力的影响及可能机制。方法利用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将miR-146a模拟物或抑制剂转染入黑色素瘤A375细胞,使miR-146a过表达或低表达,采用MTT检测细胞活力变化,应用Transwell小室法检测A375细胞侵袭能力的变化。根据生物信息学软件预测FBXL10为miR-146a的下游靶基因,双荧光素酶报告分析进行验证。分别采用实时qPCR与Western blotting检测转染后各组A375细胞FBXL10 mRNA与蛋白的表达水平。结果与对照组比较,miR-146a模拟物能够显著抑制A375细胞增殖和侵袭能力(均P<0.05)。双荧光素酶报告分析结果显示,FBXL10为miR-146a的下游靶基因,miR-146a过表达可显著降低FBXL10蛋白与mRNA的表达水平;miR-146a抑制剂的作用则与之相反。结论miR-146a过表达能够抑制A375细胞增殖和侵袭能力,其作用机制可能与降低FBXL10表达相关。

关键词： miR-146a 人黑色素瘤 A375细胞增殖侵袭 FBXL10

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浅谈医学院校生物实验室现状及管理对策分析

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中文科技期刊数据库(文摘版)医药卫生 2019年第7期 00275-00276页

作者：张欢欢何辉张邵薇寇松旭许波河南医学高等专科学校病原微生物与免疫学教研室河南郑州 451191

当前,我国应用型职业教育已经进入高速发展的快车道,为适应快速的发展模式,高校的管理工作就变得尤为重要。高校中的实训教学大部分靠实验教学来完成,由于实验室本身存在的开放性,传统的管理模式,已经不能与高等教育的快速发展相适应。... 详细信息

当前,我国应用型职业教育已经进入高速发展的快车道,为适应快速的发展模式,高校的管理工作就变得尤为重要。高校中的实训教学大部分靠实验教学来完成,由于实验室本身存在的开放性,传统的管理模式,已经不能与高等教育的快速发展相适应。实验室管理中的部分问题也逐渐暴露出来,如实验室管理责任划分的不明确、制度建设不完善、部分实验工作人员岗位划分不清、待遇偏低等情况,如何保障实验室正常运行,最大发挥实验室教研功能成为高校管理工作中的重要部分。本文通过对以上问题的综合分析,希望能够改善实验室现状,提高实验室利用效率,促进高职院校生物实验室的管理水平。

关键词：职业教育管理工作实验教学管理水平

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贵阳市致倦库蚊成蚊对4种常用杀虫剂抗药性调查

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中华地方病学杂志 2019年第6期38卷 476-480页

作者：梁秋果王政艳杨茜程金芝吴家红贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室贵州医科大学现代病原生物学特色重点实验室贵阳550025 黔南民族医学高等专科学校基础医学部病原生物学与免疫学教研室贵州都匀558000 贵州医科大学微生物与生化药学工程中心贵阳550025 贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵阳550025

目的了解贵阳市致倦库蚊成蚊对4种常用杀虫剂的抗药性水平。方法2015年8 - 9月,用幼虫勺捕法采集贵阳市8个地区的野外致倦库蚊幼虫,在实验室饲养至成蚊。采用接触筒法测定成蚊对4种常用杀虫剂的抗药性,计算1 h击倒率和恢复24 h死亡率。... 详细信息

目的了解贵阳市致倦库蚊成蚊对4种常用杀虫剂的抗药性水平。方法2015年8 - 9月,用幼虫勺捕法采集贵阳市8个地区的野外致倦库蚊幼虫,在实验室饲养至成蚊。采用接触筒法测定成蚊对4种常用杀虫剂的抗药性,计算1 h击倒率和恢复24 h死亡率。根据死亡率判断抗药性水平:< 90%为抗性群体(R);90%~< 98%为可能抗性群体(M);≥98%为敏感群体(S)。结果将致倦库蚊成蚊分别暴露于7.70 g/L敌敌畏、3.30 g/L残杀威、0.25 g/L高效氯氰菊酯和0.20 g/L溴氰菊酯,1 h击倒率范围分别为57.78%(52/90)~91.11%(82/90)、86.67%(78/90)~100.00%(90/90)、23.33%(21/90)~77.78%(70/90)和27.78%(25/90)~88.89%(80/90);恢复24 h死亡率范围分别为61.11%(55/90)~94.44%(85/90)、90.00%(81/90)~97.78%(88/90)、23.33%(21/90)~73.33%(66/90)和21.11%(19/90)~72.22%(65/90)。结论贵阳市致倦库蚊成蚊对4种常用杀虫剂均产生了一定程度的抗药性,其中对高效氯氰菊酯、溴氰菊酯等拟除虫菊酯类杀虫剂的抗药性较高。

关键词：库蚊属杀虫药抗药性敌敌畏除虫菊酯类

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贝伐单抗辅助治疗肺癌的临床进展

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健康必读 2019年第13期 100-100页

作者：郑文黔南民族医学高等专科学校医学检验系病原微生物与免疫学教研室贵州黔南 558000

贝伐单抗对肿瘤血管具有抑制生成的作用,属重组人源化血管内皮生长因子受体单克隆抗体,其通过辅助铂类药物、自噬抑制剂及重组人血管内皮抑制素等化疗药物,能够对肺癌患者的治疗起到良好的临床效果.但其也存在出血、肝损害、胃穿孔、高... 详细信息

贝伐单抗对肿瘤血管具有抑制生成的作用,属重组人源化血管内皮生长因子受体单克隆抗体,其通过辅助铂类药物、自噬抑制剂及重组人血管内皮抑制素等化疗药物,能够对肺癌患者的治疗起到良好的临床效果.但其也存在出血、肝损害、胃穿孔、高血压等副作用,需要临床医护人员控制好其使用浓度.本文就贝伐单抗辅助治疗肺癌的临床进展作综述.

关键词：贝伐单抗辅助治疗肺癌进展

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布鲁菌Ⅳ型分泌系统效应蛋白BspA、BspF的原核表达及布鲁菌免疫逃逸分析

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中华地方病学杂志 2016年第4期35卷 238-243页

作者：李默王远志易德武徐立业刘康张俊波陈创夫郭飞新疆石河子大学医学院病原生物学与免疫学教研室石河子832002 新疆石河子大学医学院动物科技学院预防兽医学教研室石河子832002 河北省邢台市刑台医学高等专科学校第二附属医院病理科邢台054000 河北省保定市第二中心医院骨科保定072750 贵州省铜仁学院生物与农林工程学院动物微生物学教研室铜仁554300

目的克隆并表达布鲁菌Ⅳ型分泌系统效应蛋白BspA、BspF并推测其免疫逃逸机制。方法以羊种布鲁菌16M基因组为模板，利用PCR扩增布鲁菌分泌蛋白BspA（BAB1-0678）、BspF（BAB1-1948）基因，连接质粒pMD19-T后测序，将测序正确的基因片段... 详细信息

目的克隆并表达布鲁菌Ⅳ型分泌系统效应蛋白BspA、BspF并推测其免疫逃逸机制。方法以羊种布鲁菌16M基因组为模板，利用PCR扩增布鲁菌分泌蛋白BspA（BAB1-0678）、BspF（BAB1-1948）基因，连接质粒pMD19-T后测序，将测序正确的基因片段经双酶切后克隆至pET-30a（＋）载体中，转化大肠埃希菌BL21（DE3），经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷（IPTG）诱导表达，通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶（SDS—PAGE）和蛋白质免疫印迹（Western blot）分析鉴定表达产物；并与先天性免疫分子的蛋白序列进行比对分析。结果成功克隆了BspA、BspF基因，片段大小分别为576、1287bp；SDS—PAGE显示，BspA、BspF蛋白相对分子质量分别约为28×10^3、55×10^3；Western blot分析显示，BspA、BspF蛋白均可与布鲁菌阳性血清发生特异性反应，并且与先天性免疫分子白细胞介素1R（IL-1R）、髓样细胞分化因子88（MyD88）、Toll样受体2（TLR-2）、Toll样受体4（TLR-4）、单免疫球蛋白白介素1相关受体（SIGIRR）有同源性。结论成功获得了布鲁菌BspA、BspF蛋白，通过同源性分析，证明BspA、BspF蛋白在布鲁菌感染宿主过程中具有免疫逃逸的作用。研究结果为进一步研究布鲁菌的致病机制和揭示布鲁菌免疫逃逸机制提供了理论依据。

关键词：布鲁菌属蛋白质类 Ⅳ型分泌系统原核表达免疫逃逸

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以团队为基础学习教学方法与发展性教学评价相结合的教学模式探究

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中华医学教育杂志 2014年第4期34卷 578-581页

作者：胡玉华王玉孝于述伟陈素云王秀琴厦门医学高等专科学校基础医学部预防医学教研室 361008 厦门医学高等专科学校基础医学部 361008 厦门医学高等专科学校病理学教研室 361008 厦门医学高等专科学校病原微生物与免疫学教研室 361008

目的探索以团队为基础学习（team-based learning,TBL）教学方法与发展性教学评价（developing teaching evaluation）相结合的教学模式在促进医学高等职业院校学生素质教育中的实用性和意义。方法采用整群抽样方法,选择厦门医学高等专... 详细信息

目的探索以团队为基础学习（team-based learning,TBL）教学方法与发展性教学评价（developing teaching evaluation）相结合的教学模式在促进医学高等职业院校学生素质教育中的实用性和意义。方法采用整群抽样方法,选择厦门医学高等专科学校2011级护理专业3个班、助产专业1个班共277名学生为研究对象。将护理专业1班、2班设为实验组,护理专业3班和助产专业班设为对照组。在预防医学教学中,实验组采用 TBL 教学方法与发展性教学评价相结合教学模式,对照组采用以讲授为基础学习（ lecture-based learning,LBL）和常规考核评价的教学模式。教学结束后,对两组学生就教学效果进行问卷调查,并采用 SPSS 13.0软件包对收集到的数据进行比较分析。结果实验组学生对 TBL 教学方法与发展性教学评价相结合教学模式接受率为81.8%,实验组2个班学生对该教学模式接受情况具有一致性,经秩和检验,差异无统计学意义（Z=-0.596,P〉0.05）。两组学生的学习态度经χ^2检验,差异具有统计学意义（χ^2=5.399,P〈0.05）；两组学生对预防医学课程的认可度经秩和检验,差异具有统计学意义（ Z =-2.181,P〈0.05）。结论 TBL 教学方法与发展性教学评价相结合教学模式得到学生的普遍认可,对改善学生的学习态度和加强对知识的理解具有积极作用。但是,对 TBL 教学方法与发展性教学评价相结合教学模式的教学效果进行全面的评价以及形成系统的、规范的实施方案尚需进一步深入研究和探讨。

关键词：以团队为基础学习发展性教学评价素质教育效果评价

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小球藻兔防御素NP-1抗菌机制初探

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中华微生物学和免疫学杂志 2013年第10期33卷 756-760页

作者：田新利王新胡天驹白丽莉张浩陈宇红朱萌赵朕龙高萌徐超胡赞民彭宜红北京大学基础医学院病原生物学系 100191 邢台医学高等专科学校微生物学和免疫学教研室 054000 中国科学院遗传与发育生物学研究所分子农业研究中心

目的：初步探讨小球藻表达的兔防御素NP-1的抗菌机制。方法通过液体培养抑制测定法、阳离子中和试验和扫描电镜技术，分别测定小球藻表达的兔防御素NP-1对临床分离的1株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（ MRSA）和1株多重耐药铜绿假单胞菌（ M... 详细信息

目的：初步探讨小球藻表达的兔防御素NP-1的抗菌机制。方法通过液体培养抑制测定法、阳离子中和试验和扫描电镜技术，分别测定小球藻表达的兔防御素NP-1对临床分离的1株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（ MRSA）和1株多重耐药铜绿假单胞菌（ MDR-PA）的抑菌动力学作用、明确正电荷在NP-1抗菌作用中的重要性，以及NP-1对细菌形态结构的影响。结果小球藻表达的兔防御素NP-1对MRSA和MDR-PA的抑菌率在3 h达到80％以上，其中对MRSA的抗菌作用具有浓度依赖性；带有正电荷的精氨酸（0．25％～0．50％）能有效抑制NP-1的抗菌作用；此外，扫描电镜观察到NP-1可分别导致菌体出现孔洞（ MRSA）或变形塌陷（ MDR-PA）。结论小球藻兔防御素NP-1对耐药的革兰阳性菌和革兰阴性菌均有良好的抗菌作用；一定浓度的精氨酸能够竞争性抑制NP-1的抗菌作用；NP-1对MRSA的抗菌机制可能属于“孔洞”学说。

关键词： NP-1 抗菌机制 MRSA MDR—PA

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以团队为基础学习在病理学教学中的应用与效果评价

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中华医学教育杂志 2013年第6期33卷 897-899页

作者：陈健毕艳丽张琦刘丹丹沈健范兴丽仇容浙江医学高等专科学校病理学教研室杭州310053 杭州海勤疗养院检验科浙江医学高等专科学校药理学教研室浙江医学高等专科学校病原微生物与免疫学教研室

目的探讨和总结以团队为基础学习（team-based learning,TBL）教学方法在高等职业学校病理学教学中的应用.方法以浙江医学高等专科学校2012级卫生监督专业55名学生为研究对象,将学生分成8组,选择消化系统疾病及泌尿系统疾病两个单元... 详细信息

目的探讨和总结以团队为基础学习（team-based learning,TBL）教学方法在高等职业学校病理学教学中的应用.方法以浙江医学高等专科学校2012级卫生监督专业55名学生为研究对象,将学生分成8组,选择消化系统疾病及泌尿系统疾病两个单元理论课实施TBL教学,并在课程结束后对学生进行问卷调查,收集信息,分析教学效果.结果 TBL教学方法明显增加了学生的课堂参与度,学生普遍认为TBL能够提高自主学习能力、沟通与合作能力及应用知识能力.结论 TBL教学方法在病理学教学中具有明显的优势.

关键词：以团队为基础学习病理学应用效果评价

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