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食品科学 2021年第7期42卷 142-148页

作者：詹慧宋田源余刚姜泽东杜希萍朱艳冰倪辉李清彪集美大学食品与生物工程学院福建厦门361021 福建省食品微生物与酶工程重点实验室福建厦门361021 厦门南方海洋研究中心经济海藻资源化利用与深加工重点实验室福建厦门361021 厦门市食品生物工程技术研究中心福建厦门361021

目的:对红毛藻(Bangia fusco-purpurea)中多糖组分进行分离纯化,分析多糖组分的体外降血脂活性,阐明红毛藻的降血脂活性功效机理,为红毛藻的精深加工和高值化应用提供科学依据。方法:采用热水提取-乙醇沉淀法从红毛藻中提取粗多糖;除去... 详细信息

目的:对红毛藻(Bangia fusco-purpurea)中多糖组分进行分离纯化,分析多糖组分的体外降血脂活性,阐明红毛藻的降血脂活性功效机理,为红毛藻的精深加工和高值化应用提供科学依据。方法:采用热水提取-乙醇沉淀法从红毛藻中提取粗多糖;除去蛋白质后,通过Sephadex G75葡聚糖凝胶柱层析纯化后得到红毛藻多糖(B. fusco-purpurea polysaccharide,BFP);采用DEAE-cellulose 52柱层析对BFP进一步分级纯化得到3个多糖组分F1、F2和F3;通过酶动力学分析各组分对胰脂肪酶活性的影响;采用噻唑蓝法测定BFP组分F1、F2和F3对HepG2细胞和Caco-2细胞活力的影响;通过高血脂/高胆固醇HepG2细胞模型、油酸诱导Caco-2细胞模型分析BFP组分F1、F2和F3的体外降血脂活性。结果:酶动力学分析结果表明,BFP组分F3显著抑制了胰脂肪酶活性,且为可逆竞争性抑制;细胞模型结果表明,F1、F2和F3在质量浓度0~500 mg/mL范围内对所试细胞均无显著毒性作用;F1显著抑制Caco-2细胞对游离脂肪酸的吸收;F3对高血脂HepG2细胞模型中甘油三酯的合成和高胆固醇HepG2细胞模型中脂类的合成均有显著抑制作用。结论:BFP组分可有效抑制胰脂肪酶活性和细胞对游离脂肪酸的吸收、降低胆固醇和甘油三酯的合成,具有潜在的降血脂活性。

关键词：红毛藻多糖胰脂肪酶抑制作用降血脂活性

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红毛藻多糖对H_(2)O_(2)诱导的Caco-2细胞氧化损伤的保护作用

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食品科学 2021年第17期42卷 113-120页

作者：何萍萍郑雅君郑明静姜泽东杜希萍朱艳冰倪辉李清彪集美大学海洋食品与生物工程学院福建厦门361021 福建省食品微生物与酶工程重点实验室福建厦门361021 厦门南方海洋研究中心经济海藻资源化利用与深加工重点实验室福建厦门361021 厦门市食品生物工程技术研究中心福建厦门361021

目的:研究红毛藻多糖(Bangia fusco-purpurea polysaccharide,BFP)对H_(2)O_(2)诱导的人结肠腺癌(Caco-2)细胞氧化应激损伤的保护作用。方法:构建过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的Caco-2细胞氧化损伤模型,通过形态学观察和测定细胞裂解液中... 详细信息

目的:研究红毛藻多糖(Bangia fusco-purpurea polysaccharide,BFP)对H_(2)O_(2)诱导的人结肠腺癌(Caco-2)细胞氧化应激损伤的保护作用。方法:构建过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的Caco-2细胞氧化损伤模型,通过形态学观察和测定细胞裂解液中的抗氧化物水平及相关酶活力,评价BFP对Caco-2细胞氧化损伤的保护作用。结果:BFP可明显提高H_(2)O_(2)诱导氧化损伤的Caco-2细胞活力,降低细胞内活性氧生成水平,提高细胞内超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力以及还原型谷胱甘肽水平,减少丙二醛生成,并通过抑制Caspase-3和Caspase-9活性来改善氧化应激损伤引起的细胞凋亡。结论:BFP对H2O2诱导氧化应激损伤的Caco-2细胞具有保护作用,可通过增强细胞内源性抗氧化酶活力、提高非酶类抗氧化物水平和抑制细胞凋亡明显缓解H_(2)O_(2)诱导的Caco-2细胞氧化应激损伤。

关键词：红毛藻多糖人结肠腺癌细胞氧化应激损伤细胞凋亡保护作用

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红毛藻多糖对H;O;诱导的Caco-2细胞氧化损伤的保护作用

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食品科学 2021年

作者：何萍萍郑雅君郑明静姜泽东杜希萍朱艳冰倪辉李清彪集美大学食品与生物工程学院福建省食品微生物与酶工程重点实验室厦门南方海洋研究中心经济海藻资源化利用与深加工重点实验室厦门市食品生物工程技术研究中心

目的：研究红毛藻多糖（Bangia fusco-purpurea polysaccharide，BFP）对H;O;诱导的人结肠腺癌细胞（Caco-2）氧化应激损伤的保护作用。方法：构建过氧化氢(Hydrogen peroxide，H;O;)诱导的Caco-2氧化损伤模型，通过形态学观察和测定细... 详细信息

目的：研究红毛藻多糖（Bangia fusco-purpurea polysaccharide，BFP）对H;O;诱导的人结肠腺癌细胞（Caco-2）氧化应激损伤的保护作用。方法：构建过氧化氢(Hydrogen peroxide，H;O;)诱导的Caco-2氧化损伤模型，通过形态学观察和测定细胞裂解液中的抗氧化物等相关物质及酶活，评价BFP对Caco-2细胞氧化损伤的保护作用。结果：多糖BFP显著提高H;O;诱导氧化损伤的Caco-2细胞活力，降低细胞内活性氧生成水平，提高细胞内超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的活性以及还原型谷胱甘肽的水平，减少丙二醛生成，并通过抑制Caspase-3和Caspase-9的酶活性来改善氧化应激损伤引起的细胞凋亡。结论：红毛藻多糖BFP对H;O;诱导氧化应激损伤的Caco-2细胞具有保护作用，可通过增强细胞内源性抗氧化酶的活力、提高非酶类抗氧化物的水平和抑制细胞凋亡显著缓解H;O;诱导的Caco-2细胞氧化应激损伤。

关键词：红毛藻多糖人结肠腺癌细胞氧化应激损伤细胞凋亡保护作用

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微泡菌ALW1昆布多糖酶的酶学性质及其酶解产物的抗氧化活性

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中国食品学报 2020年第9期20卷 47-52页

作者：银小倩梁梅芳李鹤宾姜泽东倪辉朱艳冰集美大学食品与生物工程学院福建厦门361021 福建省食品微生物与酶工程重点实验室福建厦门361021 厦门南方海洋研究中心经济海藻资源化利用与深加工重点实验室福建厦门361021 厦门医学院福建厦门361023

本文研究微泡菌ALW1胞外昆布多糖酶的酶学性质及其酶解产物的抗氧化活性。研究结果显示,以昆布多糖为底物,菌株ALW1胞外昆布多糖酶的最适反应温度为45℃,在35℃下酶活性较稳定;酶的最适反应pH 5.5,在pH 6.0~8.0范围内酶活性较为稳定;Na... 详细信息

本文研究微泡菌ALW1胞外昆布多糖酶的酶学性质及其酶解产物的抗氧化活性。研究结果显示,以昆布多糖为底物,菌株ALW1胞外昆布多糖酶的最适反应温度为45℃,在35℃下酶活性较稳定;酶的最适反应pH 5.5,在pH 6.0~8.0范围内酶活性较为稳定;Na+对酶活力起促进作用,而K+,Fe^2+,Cu^2+,Co^2+,Mn^2+,Ba^2+,Cd^2+和Zn^2+对昆布多糖酶具有不同程度的抑制作用。昆布多糖酶的酶解产物具有还原能力和清除2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)自由基和·OH自由基的能力,对ABTS自由基和·OH自由基的半抑制剂量IC50分别为15.2 mg/mL和1.7 mg/mL,表明酶解产物有一定的抗氧化能力。

关键词：微泡菌昆布多糖酶酶学性质抗氧化活性

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突变芳香基硫酸酯酶改性琼脂的工艺优化及其性能表征

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食品工业科技 2021年第5期42卷 39-44页

作者：张成昊姜泽东李鹤宾倪辉朱艳冰李清彪集美大学食品与生物工程学院福建厦门361021 福建省食品微生物与酶工程重点实验室福建厦门361021 厦门市食品生物工程技术研究中心福建厦门361021 厦门市南方海洋研究中心经济海藻资源化利用与深加工重点实验室福建厦门361021 厦门医学院福建厦门361023

目的:明确食鹿角菜交替假单胞菌突变芳香基硫酸酯酶K253Q改性琼脂的制备工艺,表征酶法改性琼脂的性能特征。方法:以硫酸根脱除率为评价指标,考察反应时间、加酶量、温度、pH对突变芳香基硫酸酯酶K253Q处理琼脂的影响,并对理化性质和结... 详细信息

目的:明确食鹿角菜交替假单胞菌突变芳香基硫酸酯酶K253Q改性琼脂的制备工艺,表征酶法改性琼脂的性能特征。方法:以硫酸根脱除率为评价指标,考察反应时间、加酶量、温度、pH对突变芳香基硫酸酯酶K253Q处理琼脂的影响,并对理化性质和结构进行表征。结果:以4 g琼脂为原料,确定最佳工艺条件为:反应时间6 h,加酶量80 U,反应温度50℃,初始pH7.0。另外,以100 g琼脂为原料进行放大实验,在最佳工艺条件下,硫酸根脱除率达到50.1%。在此条件下,K253Q处理后琼脂的凝胶强度、3,6-内醚半乳糖含量、白度和透明度均有显著提高,而灰分和粘度值显著降低(P<0.05)。扫描电镜分析显示,K253Q处理琼脂的微观结构表面突起之间连接更加紧密,表面更光滑。结论:K253Q处理琼脂后提高了琼脂的品质,琼脂硫酸根含量降低,凝胶强度、3,6-内醚半乳糖含量、白度和透明度提高,灰分降低。

关键词：琼脂突变芳香基硫酸酯酶改性琼脂制备性能表征

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高压均质加工对红毛藻膳食纤维性质和营养功能的影响

高压均质加工对红毛藻膳食纤维性质和营养功能的影响

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中国食品科学技术学会第十九届年会

作者：黄庆芝郑明静洪涛杨远帆李志朋朱艳冰倪辉姜泽东集美大学海洋食品与生物工程学院福建省食品微生物与酶工程重点实验室厦门南方海洋研究中心经济海藻资源化利用与深加工重点实验室厦门市食品生物工程技术研究中心

目的:本研究采用高压均质加工对红毛藻原料进行预处理,研究高压均质加工对红毛藻膳食纤维理化性质的影响,进一步结合体外模拟吸附和肠壁细胞单层模型,探究高压均质加工对红毛藻膳食纤维抑制晚期糖基化终端产物(AGEs)形成活性以及抑制AGE... 详细信息

目的:本研究采用高压均质加工对红毛藻原料进行预处理,研究高压均质加工对红毛藻膳食纤维理化性质的影响,进一步结合体外模拟吸附和肠壁细胞单层模型,探究高压均质加工对红毛藻膳食纤维抑制晚期糖基化终端产物(AGEs)形成活性以及抑制AGEs损伤肠壁细胞功效影响,丰富红毛藻膳食纤维的营养学理论基础,为红毛藻资源的深度综合利用提供科学依据。方法:以可溶性膳食纤维含量和全膳食纤维的持水力为主要指标,利用响应面法得到最优高压均质加工条件;利用α-淀粉酶、蛋白酶和糖化酶对加工后的红毛藻进行酶解制备得到红毛藻全膳食纤维;并对全膳食纤维的理化性质及结构特性进行分析;通过体外模拟吸附和AGEs诱导Caco-2细胞模型分析红毛藻膳食纤维对AGEs生成的抑制作用以及抑制AGEs对肠壁细胞造成损伤的作用。结果表明:高压均质加工显著提升红毛藻膳食纤维中水溶性膳食纤维的含量和全膳食纤维的持水力,其中水溶性膳食纤维含量较未经高压均质加工(22.67%±1.15%)显著提高至(42.67%±1.15%),全膳食纤维持水力(5.16±0.02 g/g)经高压均质加工后显著提高至(6.59±0.18 g/g)。海藻原料经高压均质加工后,全膳食纤维的持水力、持油力、葡萄糖延迟透析指数及胆固醇吸附力显著增强。这与高压均质加工促进红毛藻膳食纤维羟基基团暴露,使纤维在微观结构上呈现疏松的蜂窝式结构密切相关。特别是,高压均质加工显著提高了红毛藻膳食纤维抑制AGEs形成以及抑制AGEs对肠壁细胞造成损伤的活性。结论:高压均质加工有助于提高红毛藻膳食纤维中可溶性膳食纤维含量,改善其理化结构特性,提高其营养功效。

关键词：红毛藻膳食纤维高压均质理化性质结构特征晚期糖基化终端产物细胞毒性

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响应面法优化海洋细菌NTa产琼胶酶的发酵条件

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集美大学学报（自然科学版） 2021年第3期26卷 206-213页

作者：陈艳红王海琪马芮萍姜泽东倪辉朱艳冰集美大学海洋食品与生物工程学院福建厦门361021 福建省食品微生物与酶工程重点实验室福建厦门361021 厦门市食品生物工程技术研究中心福建厦门361021 厦门市南方海洋研究中心经济海藻资源化利用与深加工重点实验室福建厦门361021

利用Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验和响应面法,对培养基组成、培养条件对Stenotrophomonas ***发酵产琼胶酶的影响进行分析并优化,研究该菌株发酵产酶的动态规律,并利用薄层色谱和MALDI-TOF MS进行酶解产物的鉴定。结果显示,在琼... 详细信息

利用Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验和响应面法,对培养基组成、培养条件对Stenotrophomonas ***发酵产琼胶酶的影响进行分析并优化,研究该菌株发酵产酶的动态规律,并利用薄层色谱和MALDI-TOF MS进行酶解产物的鉴定。结果显示,在琼脂、酵母浸膏、CaCl_(2)、MgSO_(4)·7H_(2)O、培养基的初始pH值、装液量、接种量几个因素中,酵母浸膏和培养基初始pH值对菌株NTa产琼胶酶具有显著影响,在含有1.03%酵母浸膏、初始pH=8.0的基础发酵培养基(NaCl、KNO_(3)、MgSO_(4)·7H_(2)O、CaCl_(2)、K_(2)HPO_(4)、FeSO_(4)·7H_(2)O、琼脂的质量浓度分别为50,5.0,5.0,0.2,0.1,0.02,2.0 g/L)中可获得最高的琼脂酶活力。菌株在28℃、180 r/min条件下发酵时,对数生长中后期快速合成琼胶酶。发酵48 h,琼胶酶活力高达2.688 U/mL。酶解72 h的产物分析结果显示,菌株NTa琼胶酶水解琼脂主要产生四糖。

关键词： Stenotrophomonas sp. 响应面法琼胶酶优化四糖

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Fe3O4磁性纳米粒子固定化微泡菌褐藻胶裂解酶Alg L17的研究

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食品工业科技 2020年第6期41卷 23-27页

作者：张曦文宋昕祺李鹤宾姜泽东倪辉朱艳冰集美大学食品与生物工程学院福建厦门361021 厦门医学院药学系福建厦门361023 福建省食品微生物与酶工程重点实验室福建厦门361021 厦门市食品生物工程技术研究中心福建厦门361021 厦门南方海洋研究中心经济海藻资源化利用与深加工重点实验室福建厦门361021

本论文旨在优化微泡菌褐藻胶裂解酶AlgL17固定化条件,以期探索出高效的固定化条件。以单宁酸功能化的四氧化三铁磁性纳米粒子作为载体,对褐藻胶裂解酶AlgL17进行固定化条件优化。测定固定化酶的最适反应温度和最适反应pH,并对固定化酶... 详细信息

本论文旨在优化微泡菌褐藻胶裂解酶AlgL17固定化条件,以期探索出高效的固定化条件。以单宁酸功能化的四氧化三铁磁性纳米粒子作为载体,对褐藻胶裂解酶AlgL17进行固定化条件优化。测定固定化酶的最适反应温度和最适反应pH,并对固定化酶进行傅里叶变换红外光谱(FTIR)和扫描电镜(SEM)检测。结果表明,褐藻胶裂解酶AlgL17最佳固定化条件为:加酶量2.7 U、载体量25 mg、固定时间5 h,固定化酶的最适反应条件为:温度35℃、pH8.5。FTIR和SEM结果显示,褐藻胶裂解酶AlgL17固定在载体表面。四氧化三铁磁性纳米粒子可以成功固定褐藻胶裂解酶AlgL17,固定化后的褐藻胶裂解酶具有工业应用的前景。

关键词：磁性纳米粒子褐藻胶裂解酶固定化酶条件优化

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基于理性设计提高产微球茎菌AG1琼胶酶的热稳定性

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中国食品学报 2019年第12期19卷 83-88页

作者：郭玉淅高贺倪辉姜泽东肖安风朱艳冰集美大学食品与生物工程学院福建厦门361021 福建省食品微生物与酶工程重点实验室福建厦门361021 厦门市食品与生物工程技术研究中心福建厦门361021 厦门市南方海洋研究中心经济海藻资源化利用与深加工重点实验室福建厦门361021

目的:对产微球茎菌AG1的琼胶酶基因进行理性化设计,获得酶热稳定性高的突变酶。方法:利用PoP鄄MuSiC在线分析工具对AG1的琼胶酶序列进行分析,选择提高酶热稳定性的突变位点,利用重叠延伸PCR技术获得突变体基因,并对突变酶进行诱导表达... 详细信息

目的:对产微球茎菌AG1的琼胶酶基因进行理性化设计,获得酶热稳定性高的突变酶。方法:利用PoP鄄MuSiC在线分析工具对AG1的琼胶酶序列进行分析,选择提高酶热稳定性的突变位点,利用重叠延伸PCR技术获得突变体基因,并对突变酶进行诱导表达、纯化及性质鉴定。结果:通过筛选获得琼胶酶热稳定性高的突变体D136N。在60℃下处理1 h,该突变酶保持87%的残余活力,而野生型为19%的残余活力,说明突变体D136N具有较好的热稳定性。酶的三维结构模拟显示,野生型Asp136与Asn255形成两个氢键,与Tyr282形成一个氢键;突变后的Asn136和Asn255形成3个氢键,与Tyr282形成一个氢键,还与Ala134形成了一个氢键,突变酶的136位氨基酸与周围氨基酸形成更多的氢键。结论:通过理性化设计获得产微球茎菌AG1琼胶酶热稳定性高的突变体D136N,对改善酶的性质,扩大琼胶酶的应用范围,以及研究琼胶酶结构与功能关系具有重要意义。

关键词：琼胶酶热稳定性理性设计

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丁香假单孢菌重组褐藻胶裂解酶的酶学性质及酶解产物的抗氧化活性

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中国食品学报 2019年第11期19卷 38-45页

作者：吴丽云朱艳冰银小倩李鹤宾倪辉肖安风集美大学食品与生物工程学院福建厦门361021 福建省食品微生物与酶工程重点实验室福建厦门361021 厦门市食品与生物工程技术研究中心福建厦门361021 厦门市南方海洋研究中心经济海藻资源化利用与深加工重点实验室福建厦门361021 厦门医学院福建厦门361008

目的:将丁香假单孢菌的褐藻胶裂解酶进行克隆表达和纯化,研究重组酶的酶学性质及酶解产物的抗氧化活性,为进一步研究该酶的结构与功能奠定良好的基础。方法:利用PCR扩增褐藻胶裂解酶基因,将它克隆至表达载体pET-28a;表达产物用亲和层析... 详细信息

目的:将丁香假单孢菌的褐藻胶裂解酶进行克隆表达和纯化,研究重组酶的酶学性质及酶解产物的抗氧化活性,为进一步研究该酶的结构与功能奠定良好的基础。方法:利用PCR扩增褐藻胶裂解酶基因,将它克隆至表达载体pET-28a;表达产物用亲和层析纯化,研究重组酶的酶学性质;通过测定酶解产物的还原能力和清除ABTS·+和·OH自由基的能力,分析酶解产物的抗氧化活性。结果:来自丁香假单孢菌的重组褐藻胶裂解酶的分子质量为40.8 ku。该重组酶专一性降解聚甘露糖醛酸,酶的最适反应温度和pH分别为30℃和7.5,温度低于50℃时稳定。除了SDS和DTT,重组酶对其它抑制剂和去垢剂具有较好的抗性。酶解产物对ABTS·+和·OH自由基的半数抑制剂量IC50分别为1.56 mg/mL和0.56 mg/mL,还原能力较强。结论:该重组褐藻胶裂解酶的酶解产物有一定的抗氧化活性,具有应用潜力。

关键词：丁香假单孢菌褐藻胶裂解酶酶学性质抗氧化活性

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